HIV抗體檢測(cè)與質(zhì)量控制培訓(xùn)課件(共58頁(yè)).ppt

1、HIV抗體檢測(cè)與質(zhì)量控制抗體檢測(cè)與質(zhì)量控制滋病毒（人類免疫缺陷病毒）n艾滋病毒（即人類免疫缺陷病毒）是一種逆轉(zhuǎn)錄病毒，它具有極強(qiáng)的迅速變異能力，這一特征不僅使人體的免疫系統(tǒng)難以抵御其侵害，而且給特效治療藥物和預(yù)防用疫苗的研制帶來(lái)困難。艾滋病毒直接侵犯人體的免疫系統(tǒng)，破壞人體的細(xì)胞免疫和體液免疫。它主要存在于感染者和病人的體液（如血液、精液、陰道分泌物、乳汁等）及多種器官中，它可通過(guò)含HIV的體液交換或器官移植而傳播。 病毒現(xiàn)狀病毒現(xiàn)狀 n在世界范圍內(nèi)導(dǎo)致了近1200萬(wàn)人的死亡，超過(guò)3000萬(wàn)人受到感染。在感染后會(huì)整合入宿主細(xì)胞的基因組中，而抗病毒治療并不能把病毒根除。在2004年底，全球有約四

2、千萬(wàn)被感染并與人類免疫缺陷病毒共同生存的人，流行狀況最為嚴(yán)重的仍是撒哈拉以南非洲。n1986年7月25日，世界衛(wèi)生組織（WHO）發(fā)布公報(bào)，國(guó)際病毒分類委員會(huì)會(huì)議決定，把艾滋病病毒改稱為人類免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus）簡(jiǎn)稱HIV。病毒特點(diǎn)病毒特點(diǎn) nHIV病毒主要攻擊人體的輔助T淋巴細(xì)胞系統(tǒng)；一旦侵入機(jī)體細(xì)胞，病毒會(huì)和細(xì)胞整合在一起終生難以消除；病毒基因變化多樣；廣泛存在于感染者的血液、精液、陰道分泌物、唾液、尿液、乳汁、腦脊液、有神經(jīng)癥狀的腦組織液，其中以血液、精液、陰道分泌物中濃度最高；對(duì)外界環(huán)境的抵抗力較弱，對(duì)乙肝病毒有效的消毒方法對(duì)艾滋病病毒消

3、毒也有效；感染者潛伏期長(zhǎng)、死亡率高；艾滋病病毒的基因組比已知任何一種病毒基因都復(fù)雜。體外生存體外生存 n人類免疫缺陷病毒在人體外生存能力極差，不耐高溫，抵抗力較低，離開人體不易生存，常溫下只可生存數(shù)小時(shí)至數(shù)天。nHIV對(duì)熱敏感。在56條件下30分鐘即失去活性，但在室溫保存7天，仍保持活性。滅活方法滅活方法 n國(guó)際衛(wèi)生組織推薦對(duì)艾滋病病毒滅活加熱100持續(xù)20分鐘，效果較理想。 病毒形態(tài)n人類免疫缺陷病毒直徑約120納米，大致呈球形。 致病機(jī)制nHIV選擇性的侵犯帶有CD4分子，主要有T淋巴細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞等。 傳播途徑傳播途徑 nHIV感染者是傳染源，曾從血液、精液、唾液、尿液、

4、陰道分泌液、眼淚、乳汁等分離得HIV。n性接觸傳播 n血液傳播 n母嬰傳播 疾病診斷HIVHIV抗體篩查試驗(yàn)抗體篩查試驗(yàn)nELISAELISA試驗(yàn)試驗(yàn)n化學(xué)發(fā)光法化學(xué)發(fā)光法n快速檢測(cè)快速檢測(cè)補(bǔ)充試驗(yàn)補(bǔ)充試驗(yàn)n抗體確證試驗(yàn)：抗體確證試驗(yàn)：免疫印跡試劑（免疫印跡試劑（WBWB）和條和條帶免疫試驗(yàn)（帶免疫試驗(yàn)（RIBARIBA）n核酸試驗(yàn)：核酸定性和核酸定量試驗(yàn)核酸試驗(yàn)：核酸定性和核酸定量試驗(yàn) HIVHIV抗體檢測(cè)目的抗體檢測(cè)目的nHIV抗體檢測(cè)可用于診斷、血液篩查、監(jiān)測(cè)等?？贵w檢測(cè)可用于診斷、血液篩查、監(jiān)測(cè)等。n以以診斷診斷為目的的檢測(cè)是為了確定個(gè)體為目的的檢測(cè)是為了確定個(gè)體HIV感染狀況，包括感

5、染狀況，包括臨床檢測(cè)、自愿咨詢檢測(cè)、根據(jù)特殊需要進(jìn)行的體檢等。臨床檢測(cè)、自愿咨詢檢測(cè)、根據(jù)特殊需要進(jìn)行的體檢等。n以以血液篩查血液篩查為目的的檢測(cè)是為了防止輸血傳播為目的的檢測(cè)是為了防止輸血傳播HIV，包括，包括獻(xiàn)血員篩查和原料血漿篩查。獻(xiàn)血員篩查和原料血漿篩查。n以以監(jiān)測(cè)監(jiān)測(cè)為目的的檢測(cè)是為了解不同人群為目的的檢測(cè)是為了解不同人群HIV感染率及其變感染率及其變化趨勢(shì)，包括各類高危人群、重點(diǎn)人群和一般人群?；厔?shì)，包括各類高危人群、重點(diǎn)人群和一般人群。HIVHIV抗體篩查樣品抗體篩查樣品n血清血清/ /血漿血漿/ /全血全血n濾紙干血斑濾紙干血斑n口腔黏膜滲出液口腔黏膜滲出液n尿液尿液篩查試劑

6、篩查試劑n國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局注冊(cè)批準(zhǔn)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局注冊(cè)批準(zhǔn)n有效期內(nèi)有效期內(nèi)n酶聯(lián)免疫試劑應(yīng)批批檢合格酶聯(lián)免疫試劑應(yīng)批批檢合格n選擇敏感性和特異性高的試劑選擇敏感性和特異性高的試劑篩查方法篩查方法n酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISAELISA）n化學(xué)發(fā)光或免疫熒光試驗(yàn)化學(xué)發(fā)光或免疫熒光試驗(yàn)（CIA/IFACIA/IFA） ：采用發(fā)光或熒光底物，采用發(fā)光或熒光底物，用發(fā)光或熒光儀測(cè)定結(jié)果用發(fā)光或熒光儀測(cè)定結(jié)果n快速檢測(cè)快速檢測(cè)（RTRT）及其它檢測(cè)試驗(yàn)及其它檢測(cè)試驗(yàn) 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISAELISA）nHIV抗體檢測(cè)試劑（第三代）：抗體檢測(cè)試劑（第三

7、代）：檢測(cè)檢測(cè)HIV-1/2抗抗體體nHIV抗原抗體聯(lián)合檢測(cè)試劑（第四代）：抗原抗體聯(lián)合檢測(cè)試劑（第四代）：可同時(shí)可同時(shí)檢測(cè)血液中檢測(cè)血液中HIV-1P24抗原和抗原和HIV-1/2抗體抗體n用用酶標(biāo)儀酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果測(cè)定結(jié)果n有效試驗(yàn)的陰性和陽(yáng)性對(duì)照必須符合試劑盒規(guī)定有效試驗(yàn)的陰性和陽(yáng)性對(duì)照必須符合試劑盒規(guī)定ELISAELISA試驗(yàn)中可能出現(xiàn)的問(wèn)題和原因分析試驗(yàn)中可能出現(xiàn)的問(wèn)題和原因分析問(wèn)題可能的原因（非試劑盒本身的原因）測(cè)定的重復(fù)性差1.加樣本及試劑量不準(zhǔn)2.加樣過(guò)快，孔間發(fā)生污染3.加錯(cuò)樣本4.加樣本和試劑時(shí)，加在孔壁上部非包被區(qū)5.溫育時(shí)間、洗板、顯色時(shí)間不一致6.酶標(biāo)儀濾光片問(wèn)題ELI

8、SAELISA試驗(yàn)中可能出現(xiàn)的問(wèn)題和原因分析試驗(yàn)中可能出現(xiàn)的問(wèn)題和原因分析問(wèn)題可能的原因（非試劑盒本身的原因）白板（陽(yáng)性對(duì)照不顯色）1.漏加酶結(jié)合物2.洗液配制問(wèn)題，量筒不干凈含酶抑制物3.漏加顯色劑A或B4.終止液當(dāng)顯色劑使用全部板孔都有顯色1.洗板不干凈2.加底物的吸頭被酶污染3.洗板液受酶污染4.由于儀器或加樣頭造成的交叉污染ELISAELISA測(cè)定中的干擾因素測(cè)定中的干擾因素n內(nèi)源性干擾因素n外源性干擾因素內(nèi)源性干擾因素內(nèi)源性干擾因素 n人血清標(biāo)本中含有非特異性干擾物質(zhì)，可人血清標(biāo)本中含有非特異性干擾物質(zhì)，可以不同程度影響檢測(cè)結(jié)果。常見(jiàn)的有：類以不同程度影響檢測(cè)結(jié)果。常見(jiàn)的有：類風(fēng)濕因

9、子、補(bǔ)體、嗜異性抗體、醫(yī)源性誘風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、嗜異性抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗體、自身抗體、溶菌酶、磷脂、藥導(dǎo)的抗體、自身抗體、溶菌酶、磷脂、藥物小分子等物小分子等外源性干擾因素外源性干擾因素n常常是由于血標(biāo)本的采集、貯存等不當(dāng)常常是由于血標(biāo)本的采集、貯存等不當(dāng)所致。如標(biāo)本溶血、細(xì)菌污染、標(biāo)本貯所致。如標(biāo)本溶血、細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、凝集不全、反復(fù)凍融等存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、凝集不全、反復(fù)凍融等分析ELISA測(cè)定中出現(xiàn)的假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果時(shí)，需綜合考慮試劑因素、操作因素和標(biāo)本因素等。ELISAELISA法結(jié)果判斷法結(jié)果判斷n臨界值概念臨界值概念: : 將檢測(cè)的陽(yáng)性和（或）陰性對(duì)照的將檢測(cè)的陽(yáng)性和（或）陰

10、性對(duì)照的ODOD值代入計(jì)算公式計(jì)算出來(lái)的判斷陽(yáng)性和陰性結(jié)值代入計(jì)算公式計(jì)算出來(lái)的判斷陽(yáng)性和陰性結(jié)果的界值果的界值n判斷標(biāo)準(zhǔn)判斷標(biāo)準(zhǔn): :標(biāo)本標(biāo)本ODOD值與臨界值的比值大于等于值與臨界值的比值大于等于1(S/CO1)1(S/CO1)為陽(yáng)性為陽(yáng)性n注意注意: :不同廠家、不同方法臨界值計(jì)算公式不同不同廠家、不同方法臨界值計(jì)算公式不同酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISAELISA）n優(yōu)點(diǎn)：準(zhǔn)確性高、價(jià)格低廉、判斷結(jié)果優(yōu)點(diǎn)：準(zhǔn)確性高、價(jià)格低廉、判斷結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)客觀、結(jié)果便于記錄和保存標(biāo)準(zhǔn)客觀、結(jié)果便于記錄和保存n用途：流行病學(xué)監(jiān)測(cè)及臨床大量標(biāo)本的用途：流行病學(xué)監(jiān)測(cè)及臨床大量標(biāo)本的檢測(cè)檢測(cè)化學(xué)發(fā)

11、光或免疫熒光試驗(yàn)化學(xué)發(fā)光或免疫熒光試驗(yàn)n采用采用發(fā)光或熒光底物發(fā)光或熒光底物n既可檢測(cè)抗體，也可聯(lián)合檢測(cè)抗原抗體既可檢測(cè)抗體，也可聯(lián)合檢測(cè)抗原抗體n酶或熒光標(biāo)記的酶或熒光標(biāo)記的HIVHIV抗原或抗體，加發(fā)光或熒抗原或抗體，加發(fā)光或熒光底物光底物n用用發(fā)光儀或熒光儀發(fā)光儀或熒光儀測(cè)定結(jié)果測(cè)定結(jié)果（1 1）免疫滲濾試驗(yàn)：斑點(diǎn)免疫膠體金（或膠體硒）快速試驗(yàn)）免疫滲濾試驗(yàn)：斑點(diǎn)免疫膠體金（或膠體硒）快速試驗(yàn)n以硝酸纖維膜為載體以硝酸纖維膜為載體nHIVHIV抗原點(diǎn)狀固定在膜上抗原點(diǎn)狀固定在膜上n加待檢樣品加待檢樣品n陽(yáng)性結(jié)果在膜上抗原部位顯示出有色斑點(diǎn)陽(yáng)性結(jié)果在膜上抗原部位顯示出有色斑點(diǎn)n有效試驗(yàn)的質(zhì)

12、控點(diǎn)必須顯色有效試驗(yàn)的質(zhì)控點(diǎn)必須顯色快速檢測(cè)（快速檢測(cè)（RTRT）及其它檢測(cè)試驗(yàn)）及其它檢測(cè)試驗(yàn)斑點(diǎn)免疫膠體金快速診斷試驗(yàn)斑點(diǎn)免疫膠體金快速診斷試驗(yàn)（2 2）免疫層析試驗(yàn)：）免疫層析試驗(yàn)：n以硝酸纖維膜為載體以硝酸纖維膜為載體nHIVHIV抗原線狀固定在膜上抗原線狀固定在膜上n待檢樣品（血液、唾液或尿液）沿著固相載體遷移待檢樣品（血液、唾液或尿液）沿著固相載體遷移n陽(yáng)性結(jié)果在膜上抗原部位顯示出有色條帶陽(yáng)性結(jié)果在膜上抗原部位顯示出有色條帶n有效試驗(yàn)的質(zhì)控帶必須顯色有效試驗(yàn)的質(zhì)控帶必須顯色第四代快速試劑（第四代快速試劑（SDSD）：）：可區(qū)分抗原抗體的檢測(cè)可區(qū)分抗原抗體的檢測(cè)全血樣品加50ul樣品

13、于樣品墊中手指血方法靜脈血方法加一滴緩沖液15分鐘內(nèi)讀取結(jié)果快速檢測(cè)（快速檢測(cè)（RTRT）及其它檢測(cè)試驗(yàn)）及其它檢測(cè)試驗(yàn)病人條質(zhì)控條快速檢測(cè)（快速檢測(cè)（RTRT）及其它檢測(cè)試驗(yàn)）及其它檢測(cè)試驗(yàn)優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn): :n快速快速 n單份標(biāo)本檢測(cè)單份標(biāo)本檢測(cè) n不需額外試劑或設(shè)備不需額外試劑或設(shè)備 n操作簡(jiǎn)便操作簡(jiǎn)便缺點(diǎn)缺點(diǎn): :n肉眼判斷較主觀肉眼判斷較主觀n價(jià)格較貴價(jià)格較貴n結(jié)果不易保存（結(jié)果不易保存（建議拍照保存建議拍照保存）HIVHIV篩查試劑的選擇篩查試劑的選擇n檢測(cè)目的檢測(cè)目的n實(shí)驗(yàn)設(shè)施條件實(shí)驗(yàn)設(shè)施條件n價(jià)格價(jià)格n其他：檢測(cè)數(shù)量、標(biāo)本用量、復(fù)檢問(wèn)題、習(xí)慣等其他：檢測(cè)數(shù)量、標(biāo)本用量、復(fù)檢問(wèn)題、習(xí)慣

14、等等等試劑試劑-1有反應(yīng)有反應(yīng) 無(wú)反應(yīng)無(wú)反應(yīng) 試劑試劑1雙份或雙孔檢測(cè)或兩雙份或雙孔檢測(cè)或兩種試劑種試劑*均有反應(yīng)均有反應(yīng) 一有反應(yīng)一有反應(yīng) ,一無(wú)反應(yīng)一無(wú)反應(yīng) 均無(wú)反應(yīng)均無(wú)反應(yīng)補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)報(bào)告報(bào)告HIV抗體陰性抗體陰性 圖圖2 2 使用抗體檢測(cè)試劑的檢測(cè)流程使用抗體檢測(cè)試劑的檢測(cè)流程*兩種試劑可以是原有試劑加另一種試劑， 也可以是兩種不同試劑。臨床診斷相關(guān)的檢測(cè)策略臨床診斷相關(guān)的檢測(cè)策略使用抗體檢測(cè)試劑的篩查檢測(cè)流程使用抗體檢測(cè)試劑的篩查檢測(cè)流程HIVHIV抗體篩查結(jié)果的意義及處理抗體篩查結(jié)果的意義及處理n陰性：真陰性陰性：真陰性 未感染未感染HIV病毒病毒 假陰性假陰性 注意窗口期注意

15、窗口期n陽(yáng)性：真陽(yáng)性陽(yáng)性：真陽(yáng)性 感染感染HIV病毒病毒 假陽(yáng)性假陽(yáng)性 非特異性反應(yīng)非特異性反應(yīng) 操作失誤操作失誤n處理：篩查試驗(yàn)無(wú)反應(yīng)報(bào)告為處理：篩查試驗(yàn)無(wú)反應(yīng)報(bào)告為“HIV抗體陰性抗體陰性”；有；有反應(yīng)必須進(jìn)行復(fù)檢，復(fù)檢兩次檢測(cè)均無(wú)反應(yīng)報(bào)告為反應(yīng)必須進(jìn)行復(fù)檢，復(fù)檢兩次檢測(cè)均無(wú)反應(yīng)報(bào)告為“HIV抗體陰性抗體陰性”，復(fù)檢檢測(cè)均有反應(yīng)或一個(gè)有反應(yīng)，復(fù)檢檢測(cè)均有反應(yīng)或一個(gè)有反應(yīng)一個(gè)無(wú)反應(yīng)需進(jìn)行一個(gè)無(wú)反應(yīng)需進(jìn)行“補(bǔ)充試驗(yàn)補(bǔ)充試驗(yàn)”；報(bào)告為；報(bào)告為“HIV感染感染待確定待確定”，不能出具陽(yáng)性報(bào)告。，不能出具陽(yáng)性報(bào)告。補(bǔ)充試驗(yàn)補(bǔ)充試驗(yàn) 是通過(guò)檢測(cè)樣本中是否存在是通過(guò)檢測(cè)樣本中是否存在艾滋病病毒抗體艾滋病

16、病毒抗體或或者者核酸核酸確定艾滋病病毒感染的檢測(cè)方法。確定艾滋病病毒感染的檢測(cè)方法。 補(bǔ)充試驗(yàn)包括補(bǔ)充試驗(yàn)包括抗體確證試驗(yàn)抗體確證試驗(yàn) 免疫印跡試驗(yàn)、免疫印跡試驗(yàn)、條帶條帶/ /線性免疫試驗(yàn)線性免疫試驗(yàn)，特定條件下的特定條件下的替代檢測(cè)（替代檢測(cè)（三三種酶聯(lián)免疫、三種快速試驗(yàn)或酶聯(lián)加快速試驗(yàn)種酶聯(lián)免疫、三種快速試驗(yàn)或酶聯(lián)加快速試驗(yàn)），免疫層析和免疫層析和核酸檢測(cè)試驗(yàn)核酸檢測(cè)試驗(yàn)（核酸定性檢測(cè)和核酸定（核酸定性檢測(cè)和核酸定量檢測(cè)試驗(yàn)）量檢測(cè)試驗(yàn)）HIVHIV抗體確證試驗(yàn)抗體確證試驗(yàn)確證試驗(yàn)的試劑：確證試驗(yàn)的試劑： 必須是經(jīng)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局注冊(cè)批準(zhǔn)、在有效期內(nèi)的試劑。確證樣品：確證樣品： 可

17、采用血清、血漿、濾紙干血斑確證試驗(yàn)方法：確證試驗(yàn)方法： 免疫印跡試驗(yàn)、條帶/線性免疫試驗(yàn)，特定條件下的替代檢測(cè)（三種酶聯(lián)免疫、三種快速試驗(yàn)或酶聯(lián)加快速試驗(yàn)），免疫層析或免疫滲濾試驗(yàn)條帶免疫試驗(yàn)（RIBA）/重組免疫印跡法（萬(wàn)泰）陽(yáng)性陽(yáng)性免疫印跡試驗(yàn)免疫印跡試驗(yàn)（WB/RIBA）陰性陰性不確定不確定核酸試驗(yàn)核酸試驗(yàn)或或2-42-4周后周后隨訪隨訪出現(xiàn)出現(xiàn)HIV-2HIV-2指示帶指示帶根據(jù)情況根據(jù)情況進(jìn)一步進(jìn)一步檢測(cè)檢測(cè)HIV-2報(bào)告報(bào)告HIV-1抗體陰性抗體陰性報(bào)告報(bào)告HIV-1抗體陽(yáng)性抗體陽(yáng)性圖圖5 5 免疫印跡試劑（免疫印跡試劑（WB/RIBA）試驗(yàn)流程）試驗(yàn)流程抗體確證試驗(yàn)檢測(cè)流程抗體確

18、證試驗(yàn)檢測(cè)流程HIV抗體WB及 RIBA/LIA試驗(yàn)結(jié)果報(bào)告：（1）符合HIV-1抗體陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)，報(bào)告“HIV-1抗體陽(yáng)性”，并按規(guī)定做好檢測(cè)后咨詢和疫情報(bào)告。符合HIV-2抗體陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)，報(bào)告“HIV-2抗體陽(yáng)性”，并按規(guī)定做好檢測(cè)后咨詢和疫情報(bào)告。（2）符合HIV抗體陰性判斷標(biāo)準(zhǔn)，報(bào)告“HIV抗體陰性”。如疑似“窗口期”感染，建議2-4周后隨訪或進(jìn)一步做HIV核酸檢測(cè)，盡早明確診斷。（3）符合HIV抗體不確定判斷標(biāo)準(zhǔn)，報(bào)告“HIV抗體不確定”，在備注中應(yīng)注明“2-4周后復(fù)檢”或盡快做核酸檢測(cè)。 抗體確證試驗(yàn)檢測(cè)報(bào)告n原因：原因：HIVHIV感染早期感染早期 HIV HIV感染晚期感染晚

19、期 非特異性反應(yīng)非特異性反應(yīng) 污染污染n處理：核酸檢測(cè)處理：核酸檢測(cè) 2- 2-4 4周后隨訪周后隨訪 重采血重采血 HIV-1核酸檢測(cè)核酸檢測(cè)HIV-1核酸定性檢測(cè)核酸定性檢測(cè)HIV-1核酸定量試驗(yàn)核酸定量試驗(yàn)有反應(yīng)報(bào)有反應(yīng)報(bào)告告HIV-1核酸陽(yáng)性核酸陽(yáng)性無(wú)反應(yīng)報(bào)無(wú)反應(yīng)報(bào)告告HIV-1核酸陰性核酸陰性報(bào)告報(bào)告低于檢低于檢測(cè)限測(cè)限5000cps/ml,報(bào)告報(bào)告檢測(cè)值檢測(cè)值5000cps/ml重新采重新采樣樣 檢測(cè)檢測(cè)高于檢測(cè)限高于檢測(cè)限低于檢測(cè)限低于檢測(cè)限圖核酸試驗(yàn)流程圖核酸試驗(yàn)流程臨床診斷相關(guān)的檢測(cè)策略臨床診斷相關(guān)的檢測(cè)策略核酸補(bǔ)充試驗(yàn)報(bào)告核酸補(bǔ)充試驗(yàn)報(bào)告n定性檢測(cè)定性檢測(cè)結(jié)果有反應(yīng)，報(bào)告結(jié)

20、果有反應(yīng)，報(bào)告“HIV-1核酸陽(yáng)性核酸陽(yáng)性”；無(wú)反；無(wú)反應(yīng)，報(bào)告應(yīng)，報(bào)告“HIV核酸核酸陰陰性性”。n定量檢測(cè)定量檢測(cè)結(jié)果低于檢測(cè)限，報(bào)告低于檢測(cè)限；結(jié)果低于檢測(cè)限，報(bào)告低于檢測(cè)限；n檢測(cè)結(jié)果大于檢測(cè)結(jié)果大于5000CPs/ml，報(bào)告檢測(cè)值；，報(bào)告檢測(cè)值；n檢測(cè)結(jié)果低于等于檢測(cè)結(jié)果低于等于5000CPs/ml，盡快再次嚴(yán)格按核，盡快再次嚴(yán)格按核酸檢測(cè)的要求采樣檢測(cè)，報(bào)告檢測(cè)值酸檢測(cè)的要求采樣檢測(cè)，報(bào)告檢測(cè)值。n臨床醫(yī)生可臨床醫(yī)生可結(jié)合臨床及流行病史、結(jié)合臨床及流行病史、CD4+T淋巴細(xì)胞檢淋巴細(xì)胞檢測(cè)值或者測(cè)值或者HIV-1抗體隨訪檢測(cè)結(jié)果等進(jìn)行抗體隨訪檢測(cè)結(jié)果等進(jìn)行診斷或排除診診斷或排除診斷

21、斷。HIVHIV抗體抗體n母親母親 HIV HIV 抗體經(jīng)胎盤進(jìn)入胎兒，出生時(shí)新生抗體經(jīng)胎盤進(jìn)入胎兒，出生時(shí)新生兒和嬰兒早期抗體陽(yáng)性，不一定是感染兒和嬰兒早期抗體陽(yáng)性，不一定是感染n出生時(shí)母親的抗體，出生時(shí)母親的抗體，8090% 8090% 在生后在生后 912 912 個(gè)個(gè)月消失，出生后月消失，出生后 18 18 個(gè)月基本上全部消失個(gè)月基本上全部消失n18 18 個(gè)月后兒童個(gè)月后兒童 HIVHIV抗體仍然陽(yáng)性，視為自身抗體仍然陽(yáng)性，視為自身感染產(chǎn)生的抗體感染產(chǎn)生的抗體1818個(gè)月以下嬰幼兒的個(gè)月以下嬰幼兒的HIVHIV診斷診斷嬰幼兒嬰幼兒HIVHIV感染的抗體檢測(cè)感染的抗體檢測(cè)適用于：適用于

22、：nHIVHIV感染產(chǎn)婦所生嬰幼兒；感染產(chǎn)婦所生嬰幼兒；n母親母親HIVHIV感染狀態(tài)不詳，兒童出現(xiàn)感染狀態(tài)不詳，兒童出現(xiàn)HIVHIV相關(guān)臨床表現(xiàn)，相關(guān)臨床表現(xiàn)，臨床懷疑臨床懷疑HIVHIV感染的兒童。感染的兒童。n嬰兒嬰兒1212個(gè)月個(gè)月時(shí)進(jìn)行時(shí)進(jìn)行HIVHIV抗體檢測(cè)抗體檢測(cè) 陰性排除感染陰性排除感染，納入正常兒童保??；，納入正常兒童保??； 陽(yáng)性者繼續(xù)追蹤隨訪陽(yáng)性者繼續(xù)追蹤隨訪，至，至1818個(gè)月再次進(jìn)行個(gè)月再次進(jìn)行HIVHIV抗體檢抗體檢測(cè)，結(jié)果陰性排除感染。測(cè)，結(jié)果陰性排除感染。HIVHIV抗體檢測(cè)的要點(diǎn)抗體檢測(cè)的要點(diǎn)n根據(jù)目的選擇檢測(cè)方法及檢測(cè)策略。根據(jù)目的選擇檢測(cè)方法及檢測(cè)策略。n

23、嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作程序（嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOPSOP）。）。n結(jié)果判定以試劑盒說(shuō)明書為標(biāo)準(zhǔn)。結(jié)果判定以試劑盒說(shuō)明書為標(biāo)準(zhǔn)。n篩查試驗(yàn)有反應(yīng)，須作補(bǔ)充試驗(yàn)篩查試驗(yàn)有反應(yīng)，須作補(bǔ)充試驗(yàn)質(zhì)量控制質(zhì)量控制 質(zhì)量控制是指為確保實(shí)驗(yàn)工作正常質(zhì)量控制是指為確保實(shí)驗(yàn)工作正常進(jìn)行而在每一次實(shí)驗(yàn)過(guò)程中必須采取進(jìn)行而在每一次實(shí)驗(yàn)過(guò)程中必須采取的各種措施。以保證檢驗(yàn)結(jié)果達(dá)到允的各種措施。以保證檢驗(yàn)結(jié)果達(dá)到允許的準(zhǔn)確度。許的準(zhǔn)確度。n實(shí)驗(yàn)前質(zhì)量控制 正確的標(biāo)本采集和處理正確的標(biāo)本采集和處理 正確及時(shí)的運(yùn)送樣品正確及時(shí)的運(yùn)送樣品 實(shí)驗(yàn)前正確地處理和保存樣品實(shí)驗(yàn)前正確地處理和保存樣品n實(shí)驗(yàn)中質(zhì)量控制 儀器校

24、準(zhǔn)儀器校準(zhǔn) 選擇選擇合格試劑，采用合格試劑，采用正確的檢測(cè)方法正確的檢測(cè)方法 標(biāo)準(zhǔn)程序標(biāo)準(zhǔn)程序 質(zhì)控品的準(zhǔn)備質(zhì)控品的準(zhǔn)備 開展質(zhì)控圖質(zhì)控開展質(zhì)控圖質(zhì)控n實(shí)驗(yàn)后質(zhì)量控制 結(jié)果記錄結(jié)果記錄 記錄核對(duì)記錄核對(duì) 結(jié)果解釋結(jié)果解釋 記錄保存記錄保存 質(zhì)量控制質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)前質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)前質(zhì)量控制樣品的采集：實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)待測(cè)項(xiàng)目選用適當(dāng)?shù)姆綐悠返牟杉簩?shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)待測(cè)項(xiàng)目選用適當(dāng)?shù)姆椒ú杉瘶悠?。法采集樣品。n抗體檢測(cè)可采集血清、血漿和全血；抗體檢測(cè)可采集血清、血漿和全血；nCD4+TCD4+T淋巴細(xì)胞檢測(cè)可采集淋巴細(xì)胞檢測(cè)可采集K3EDTAK3EDTA或肝素或枸櫞酸或肝素或枸櫞酸鈉抗凝全血，并在鈉抗凝全血，

25、并在2424小時(shí)內(nèi)室溫送檢；小時(shí)內(nèi)室溫送檢；nHIV-1HIV-1病毒載量測(cè)定可采集病毒載量測(cè)定可采集EDTAEDTA或枸櫞酸鈉或枸櫞酸鈉(ACD)(ACD)抗凝全血，最好在抗凝全血，最好在6 6小時(shí)內(nèi)離心分離血漿和血細(xì)胞。小時(shí)內(nèi)離心分離血漿和血細(xì)胞。將分離的血漿分裝到將分離的血漿分裝到2-32-3支，冰凍保存，在凍存管支，冰凍保存，在凍存管上編號(hào)。做好樣品處理記錄并注明分裝時(shí)間。上編號(hào)。做好樣品處理記錄并注明分裝時(shí)間。實(shí)驗(yàn)前質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)前質(zhì)量控制樣品的保存：樣品的保存：n用于用于HIVHIV抗體檢測(cè)的血清和血漿樣品抗體檢測(cè)的血清和血漿樣品, ,應(yīng)存放于應(yīng)存放于- -2020以下，短期（以下，

26、短期（1 1周）內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)的樣品可存放周）內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)的樣品可存放于于2-82-8；n用于用于CD4+TCD4+T淋巴細(xì)胞檢測(cè)的樣品應(yīng)在室溫下淋巴細(xì)胞檢測(cè)的樣品應(yīng)在室溫下（1818 2323）保存，避免極端溫度（冷凍或過(guò)熱）保存，避免極端溫度（冷凍或過(guò)熱）, ,樣品采集時(shí)間超過(guò)樣品采集時(shí)間超過(guò)72h72h則不可檢測(cè)；則不可檢測(cè)；n用于病毒載量檢測(cè)的樣品的保存條件應(yīng)根據(jù)血漿用于病毒載量檢測(cè)的樣品的保存條件應(yīng)根據(jù)血漿檢測(cè)時(shí)間而定，檢測(cè)時(shí)間而定，4 4天內(nèi)可在天內(nèi)可在44暫時(shí)保存，暫時(shí)保存，3 3個(gè)月以個(gè)月以內(nèi)凍存于內(nèi)凍存于-20-20以下，以下，3 3個(gè)月以上應(yīng)置于個(gè)月以上應(yīng)置于-70-70以下以下

27、保存。血漿樣品凍融次數(shù)不可超過(guò)保存。血漿樣品凍融次數(shù)不可超過(guò)3 3次。每次凍融次。每次凍融在樣品上標(biāo)明。在樣品上標(biāo)明。 實(shí)驗(yàn)前質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)前質(zhì)量控制樣品的運(yùn)輸：樣品的運(yùn)輸：n1 1、樣品送檢時(shí)需與相應(yīng)送樣單同時(shí)送檢。、樣品送檢時(shí)需與相應(yīng)送樣單同時(shí)送檢。n2 2、血清和血漿樣品在、血清和血漿樣品在2-82-8條件下由專人低溫運(yùn)輸。條件下由專人低溫運(yùn)輸。n3 3、CD4+TCD4+T淋巴細(xì)胞檢測(cè)樣品需在在室溫下（淋巴細(xì)胞檢測(cè)樣品需在在室溫下（1818 2323）運(yùn)送，）運(yùn)送，避免極端溫度（冷凍或過(guò)熱）。超過(guò)避免極端溫度（冷凍或過(guò)熱）。超過(guò)3737的溫度會(huì)破壞細(xì)胞，的溫度會(huì)破壞細(xì)胞，對(duì)血液學(xué)和流式細(xì)

28、胞儀的檢測(cè)有影響。對(duì)血液學(xué)和流式細(xì)胞儀的檢測(cè)有影響。n4 4、病毒載量測(cè)定樣品的運(yùn)送：凍存的血漿樣品在運(yùn)輸過(guò)程中、病毒載量測(cè)定樣品的運(yùn)送：凍存的血漿樣品在運(yùn)輸過(guò)程中要保持樣品在冷凍狀態(tài)，防止樣品凍融。在要保持樣品在冷凍狀態(tài)，防止樣品凍融。在44暫時(shí)保存的樣暫時(shí)保存的樣品，在品，在2-82-8條件下低溫運(yùn)輸。抗凝全血樣品在條件下低溫運(yùn)輸?？鼓獦悠吩?424小時(shí)內(nèi)小時(shí)內(nèi)2-82-8條件下低溫運(yùn)輸。條件下低溫運(yùn)輸。實(shí)驗(yàn)前質(zhì)量控制實(shí)驗(yàn)前質(zhì)量控制運(yùn)輸采用運(yùn)輸采用WHOWHO提出的三級(jí)包裝系統(tǒng)提出的三級(jí)包裝系統(tǒng) n第一層容器：裝樣品，要求防滲漏第一層容器：裝樣品，要求防滲漏 n第二層容器：要求耐受性好、防滲漏、容納并第二層容器：要求耐受性好、防滲漏、容納并保護(hù)第一層容器，可以裝若干個(gè)第一層容器。保護(hù)第一層容器，可以裝若干個(gè)第一層容器。 n第三層容器：放在一個(gè)運(yùn)輸用外層包裝內(nèi)，應(yīng)第三層容器：放在