革蘭氏陰性細菌抗生素耐藥檢測

1、會計學(xué)1革蘭氏陰性細菌抗生素耐藥檢測革蘭氏陰性細菌抗生素耐藥檢測第1頁/共118頁第2頁/共118頁第3頁/共118頁氨芐西林氨芐西林1965TEM-1大腸桿菌大腸桿菌副傷寒沙門菌副傷寒沙門菌1970sTEM-1在在28Gm(-)菌中報道菌中報道1983ESBL在歐洲出在歐洲出現(xiàn)現(xiàn)1988ESBL在美國出現(xiàn)在美國出現(xiàn)2000KPCs、其它、其它超廣譜頭孢菌素超廣譜頭孢菌素1963革蘭陰性菌中第4頁/共118頁第5頁/共118頁第6頁/共118頁MIC (g/ml)第7頁/共118頁第8頁/共118頁第9頁/共118頁第10頁/共118頁第11頁/共118頁第12頁/共118頁-內(nèi)酰胺酶誘導(dǎo)內(nèi)酰

2、胺酶誘導(dǎo)陰溝腸桿菌陰溝腸桿菌常規(guī)不必做此常規(guī)不必做此試驗試驗第13頁/共118頁第14頁/共118頁第15頁/共118頁治療前菌群治療前菌群治療后菌群治療后菌群 “耐藥”菌株繁殖第16頁/共118頁第17頁/共118頁第18頁/共118頁頭孢噻肟頭孢噻肟第19頁/共118頁頭孢噻肟頭孢噻肟CTX 30第20頁/共118頁頭孢噻肟頭孢噻肟第21頁/共118頁好好差差第22頁/共118頁第23頁/共118頁MIC (g/ml)對該株陰溝腸桿菌應(yīng)考慮聯(lián)合治療（如對該株陰溝腸桿菌應(yīng)考慮聯(lián)合治療（如 -內(nèi)酰胺類內(nèi)酰胺類+氨基糖苷類或氟喹諾酮類氨基糖苷類或氟喹諾酮類）第24頁/共118頁MIC (g/ml

3、)第25頁/共118頁第26頁/共118頁第27頁/共118頁第28頁/共118頁第29頁/共118頁第30頁/共118頁第31頁/共118頁第32頁/共118頁MIC (g/ml)第33頁/共118頁第34頁/共118頁第35頁/共118頁第36頁/共118頁第37頁/共118頁MIC (g/ml)“這株肺炎克雷伯菌可疑產(chǎn)超廣譜beta內(nèi)酰胺酶；確證試驗還未完成”初步報告初步報告 例例:第38頁/共118頁頭孢他啶頭孢他啶/克拉維酸克拉維酸頭孢噻肟頭孢噻肟/克拉維酸克拉維酸頭孢他啶頭孢他啶頭孢噻肟頭孢噻肟10 mm26 mm頭孢他啶頭孢他啶/克拉維酸克拉維酸頭孢他啶頭孢他啶頭孢噻肟頭孢噻肟頭

4、孢他啶頭孢他啶/克拉維酸克拉維酸頭孢他啶頭孢他啶頭孢噻肟頭孢噻肟/克拉維酸克拉維酸頭孢噻肟頭孢噻肟頭孢他啶頭孢他啶/克拉維酸克拉維酸頭孢他啶頭孢他啶第39頁/共118頁MIC (g/ml)“該菌株的確證試驗提示為少見的耐藥類型【產(chǎn)超廣譜beta內(nèi)酰胺酶（ESBL）】”第40頁/共118頁頭孢他啶頭孢他啶/克拉維酸克拉維酸頭孢他啶頭孢他啶確證試驗也可確證試驗也可以用以用Microscan，Phoenix，Sensititre, Vitek等儀器完等儀器完成成第41頁/共118頁第42頁/共118頁第43頁/共118頁第44頁/共118頁第45頁/共118頁第46頁/共118頁MIC (g/ml)

5、第47頁/共118頁第48頁/共118頁第49頁/共118頁MIC (g/ml)補充實驗提示這株陰溝腸桿菌產(chǎn)超廣譜beta內(nèi)酰胺酶：建議咨詢ID第50頁/共118頁第51頁/共118頁第52頁/共118頁第53頁/共118頁MIC (g/ml)“該肺炎克雷伯菌可疑產(chǎn)ESBL，確證試驗還未完成”第54頁/共118頁頭孢他啶頭孢他啶/克拉維酸克拉維酸頭孢噻肟頭孢噻肟/克拉維酸克拉維酸頭孢他啶頭孢他啶頭孢噻肟頭孢噻肟第55頁/共118頁MIC (g/ml)“對大腸桿菌的確證試驗提示不常見的耐藥（但不是由ESBL引起）”第56頁/共118頁第57頁/共118頁第58頁/共118頁第59頁/共118頁第

6、60頁/共118頁第61頁/共118頁第62頁/共118頁第63頁/共118頁第64頁/共118頁附錄附錄G.腸桿菌科中碳青霉烯酶檢測的篩選和確證試驗（腸桿菌科中碳青霉烯酶檢測的篩選和確證試驗（2）第65頁/共118頁第66頁/共118頁第67頁/共118頁 和/或抑菌圈直徑為19-21mm 和/或抑菌圈直徑為16-21mm 和和/或或第68頁/共118頁 1.制備大腸桿菌制備大腸桿菌ATCC25922的的0.5麥氏濁度菌懸液，再麥氏濁度菌懸液，再10倍稀釋倍稀釋2.用棉簽蘸取菌液涂布用棉簽蘸取菌液涂布MH平皿如紙平皿如紙片擴散法試驗；將厄他培南或美片擴散法試驗；將厄他培南或美羅培南（最好）紙

7、片貼于平皿上羅培南（最好）紙片貼于平皿上3.將待測菌株將待測菌株(#1 - #3)從紙片邊緣從紙片邊緣向外劃線（使用向外劃線（使用1微升接種環(huán)）微升接種環(huán)）4.孵育過夜孵育過夜5.觀察劃線菌株周圍大腸桿菌的生觀察劃線菌株周圍大腸桿菌的生長長-提示碳青霉烯水解酶提示碳青霉烯水解酶 第69頁/共118頁第70頁/共118頁第71頁/共118頁第72頁/共118頁第73頁/共118頁第74頁/共118頁n報告碳青霉烯藥物的MIC，不解釋結(jié)果（CLSI推薦）或第75頁/共118頁第76頁/共118頁報告MIC，不解釋結(jié)果第77頁/共118頁第78頁/共118頁“敏感敏感”但抑但抑菌圈為菌圈為20mm-

8、可疑產(chǎn)碳青霉可疑產(chǎn)碳青霉烯酶；進行改烯酶；進行改良良Hodge試驗試驗第79頁/共118頁改良改良Hodge試驗陽試驗陽性性敏感”但抑菌圈為20mm-可疑產(chǎn)碳青霉烯酶第80頁/共118頁第81頁/共118頁第82頁/共118頁第83頁/共118頁第84頁/共118頁第85頁/共118頁第86頁/共118頁第87頁/共118頁第88頁/共118頁The Sanford Guide to Antimicrobial Therapy. 39th ed. 2009.第89頁/共118頁第90頁/共118頁第91頁/共118頁第92頁/共118頁“嚴重銅綠假單胞菌感染需考慮聯(lián)合治療嚴重銅綠假單胞菌感染需

9、考慮聯(lián)合治療”第93頁/共118頁The Sanford Guide to Antimicrobial Therapy. 39th ed. 2009.第94頁/共118頁第95頁/共118頁第96頁/共118頁第97頁/共118頁第98頁/共118頁第99頁/共118頁The Sanford Guide to Antimicrobial Therapy. 39th ed. 2009.第100頁/共118頁第101頁/共118頁第102頁/共118頁第103頁/共118頁第104頁/共118頁第105頁/共118頁第106頁/共118頁第107頁/共118頁第108頁/共118頁第109頁/共118頁第110頁/共118頁第111頁/共118頁MIC (g/ml)第112頁/共118頁第113頁/共118頁MIC (g/ml)“對大腸桿菌的確證試驗提示不常見的耐藥（但不是由ESBL引起）”第114頁/共118頁第115頁/共118頁 1.制備大腸桿菌制備大腸桿菌ATCC25922的的0.5麥氏濁度菌懸液，再麥氏濁度菌懸液，再10倍稀釋倍稀釋2.用棉簽蘸取菌液涂布用棉簽蘸取菌液涂布MH平皿如紙平皿如紙片擴散法試驗；將厄他培南或美片擴散法試驗；將厄他培南或美羅培南（最好）紙片貼于平皿上羅培南（最好）紙片貼于平