微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告__考試報(bào)告

1、.;實(shí)驗(yàn)溫度：18 濕度：32% 實(shí)驗(yàn)時(shí)間：2012年11月13日 實(shí)驗(yàn)考查：糞便和膿汁的細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)【主要材料與試劑】膿汁、糞便標(biāo)本各1份、SS平板、血平板、清潔載玻片、酒精燈、接種環(huán)、火柴、顯微鏡、擦鏡紙、結(jié)晶紫溶液、NaHCO3溶液、堿性碘液、丙酮酒精、稀釋堿性復(fù)紅、觸酶試劑、氧化酶試劑、Optochin紙片、無(wú)菌生理鹽水、KIA、MIU、志賀菌診斷血清等?！緳z驗(yàn)程序】（一）膿汁標(biāo)本（P54）1.肉眼觀察膿汁性狀、顏色、氣味2.直接涂片革蘭染色鏡檢3.接種血平板，1824h 35分離培養(yǎng)，觀察菌落形態(tài)，涂片、革蘭染色鏡檢：4.生化試驗(yàn)1）G+C觸酶：觸酶陽(yáng)性，葡萄C血漿凝固酶試驗(yàn)：陽(yáng)性為金

2、葡，陰性為表葡觸酶陰性，鏈COptochin敏感試驗(yàn)、膽汁溶菌試驗(yàn)：陽(yáng)性為肺鏈，陰性為甲鏈。2）G-b氧化酶氧化酶陽(yáng)性，為非發(fā)酵菌，O-F（O+）銅綠水溶性色素綠膿b氧化酶陰性，腸道桿菌KIA、MIU初步鑒定血清學(xué)試驗(yàn)最終鑒定（二）糞便標(biāo)本（S18）1.接種SS平板，1824h 35分離培養(yǎng)，觀察菌落形態(tài)2.取可疑菌落（無(wú)色、透明）涂片、革蘭染色鏡檢：3.G-b氧化酶氧化酶陽(yáng)性，為非發(fā)酵菌，O-F（O+）,銅綠水溶性色素綠膿b氧化酶陰性，腸道桿菌KIA、MIU初步鑒定血清學(xué)試驗(yàn)最終鑒定4.KIA、MIU試驗(yàn) 5.血清學(xué)試驗(yàn)：【實(shí)驗(yàn)記錄與結(jié)果】（一）膿汁標(biāo)本（P54）1、膿汁性狀、顏色、氣味：灰

3、白色、無(wú)味、粘稠液體。標(biāo)本號(hào)P54 趙富海 2009221792 2012.11.132、觀察菌落形態(tài)：血平板上形成直徑為0.51.5mm，灰白色、半透明、表面光滑草綠色溶血環(huán)的扁平菌落。3.涂片、革蘭染色鏡檢：直接G染色鏡檢，G+球菌圓形 血平板G染色鏡檢：G+球菌圓形 或卵圓形、成雙或鏈狀排列 或卵圓形、成雙或鏈狀排列 4.生化試驗(yàn)觸酶（-） Optochin敏感試驗(yàn)（-） 膽汁溶菌試驗(yàn)（-）（二）糞便標(biāo)本（S18） 1.觀察菌落形態(tài)：（SS平板）標(biāo)本號(hào)S18 趙富海 2009221792 2012.11.13形成有無(wú)色、半透明、圓形、濕潤(rùn)、光滑、突起、大小為12mm的菌落。2.取無(wú)色、半

4、透明菌落革蘭染色鏡檢： ZFH ZFH G染色鏡檢：G-桿菌、散在分布 3.生化試驗(yàn)：氧化酶陰性4.KIA、MIU試驗(yàn)結(jié)果： KIA MIU觀察項(xiàng)目斜面底層產(chǎn)氣H2S動(dòng)力吲哚脲酶結(jié)果 KA-5.血清學(xué)試驗(yàn)結(jié)果：【初步診斷】（一）膿汁標(biāo)本（P54）鑒定結(jié)果：P54號(hào)膿汁標(biāo)本直接涂片革蘭染色觀察，再經(jīng)過(guò)血平板分離培養(yǎng)，觀察菌落特征，革蘭染色，生化反應(yīng)，鑒定P54號(hào)膿汁標(biāo)本中的細(xì)菌為：甲型溶血性鏈球菌。（二）糞便標(biāo)本（S18）鑒定結(jié)果：S18號(hào)糞便標(biāo)本經(jīng)SS平板分離培養(yǎng)，觀察菌落特征，取可疑菌落（無(wú)色）、革蘭染色，生化鑒定、血清學(xué)試驗(yàn)，鑒定S18號(hào)糞便標(biāo)本中分離出 志賀菌【討論】1.糞便標(biāo)本的采集：

5、腹瀉患者用抗生素前采集膿血粘液或稀便2-3或1-2ml或肛拭無(wú)菌試管甘油鹽水保存液增菌培養(yǎng)基。食物中毒者采集可疑食物、嘔吐物、胃液、糞便等。消化道潰瘍?nèi)∥父]和胃體粘膜活檢標(biāo)本各一塊置無(wú)菌NS立即送檢，或?qū)?biāo)本放于運(yùn)送培養(yǎng)基，4保存，24h內(nèi)送檢.2.常見(jiàn)腸道感染的病原體：以腸毒素為主的病原菌：志賀菌（福氏、宋氏）、大腸埃希菌（ETEC、EHEC、EAggEC）、金葡、艱難梭菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、霍亂弧菌。侵襲性為主的病原菌：沙門(mén)菌、大腸埃希菌（EPEC、EIEC）、志賀菌（鮑氏志賀）、彎曲菌、副溶血弧菌、小腸結(jié)腸炎耶爾森菌、結(jié)核分枝b、白假絲酵母。病毒：輪狀V、ECHOV、Norwo1KV、HAV

6、、HEV、AdenoV3.膿汁標(biāo)本的采集：封閉性膿腫：消毒皮膚粘膜注射器無(wú)菌抽取膿液滅菌試管 一般細(xì)菌培養(yǎng)厭氧送檢 供厭氧菌培養(yǎng)開(kāi)放性膿腫或膿性分泌物：用NS沖洗表面兩支無(wú)菌棉拭取膿液或分泌物直接涂片染色鏡檢分離培養(yǎng)（疑為淋病奈瑟菌和腦膜炎奈瑟菌的標(biāo)本應(yīng)注意保暖，最好床旁接種）疑為放線菌感染標(biāo)本：應(yīng)選取膿汁中的“硫磺樣顆?！敝脽o(wú)菌試管送檢。也可用無(wú)菌紗布條塞入瘺管，次日拔出送檢。大面積燒傷感染：無(wú)菌棉拭取多部位創(chuàng)面膿汁分泌物無(wú)菌試管送檢。胸腔、腹腔、心包腔和滑膜腔感染標(biāo)本：應(yīng)在臨床醫(yī)生指導(dǎo)下，嚴(yán)格無(wú)菌操作，用注射器抽吸膿液或分泌物。4.常見(jiàn)引起化膿性感染的病原體：外傷性創(chuàng)傷感染葡萄C、鏈C多見(jiàn)

7、，放線菌、Tb、大腸b、綠膿b常見(jiàn)，且易發(fā)生混合感染。深部創(chuàng)傷極易由破傷風(fēng)梭菌和產(chǎn)氣莢膜梭菌引起厭氧感染。燒傷感染以綠膿b等G-b為主，其次為GC，也可混合感染。急性化膿性骨關(guān)節(jié)炎、慢性骨髓炎Tb、葡萄C、鏈C。皮下軟組織化膿性炎癥（放線菌?。┓啪€菌5.膿汁標(biāo)本先觀察性狀、顏色、氣味，再直接涂片革蘭染色觀察：G+球菌圓形或卵圓形、成雙或鏈狀排列，經(jīng)血平板分離培養(yǎng)形成直徑為0.51.5mm，灰白色、半透明、表面光滑扁平菌落，革蘭染色（G+球菌圓形或卵圓形、成雙或鏈狀排列），生化鑒定（觸酶-、Optochin敏感試驗(yàn)-、膽汁溶菌試驗(yàn)-），鑒定P54膿汁標(biāo)本中細(xì)菌為甲型溶血性鏈球菌。6.糞便標(biāo)本經(jīng)SS平板分離培養(yǎng)形成無(wú)色、半透明、圓形、濕潤(rùn)、光滑、突起、大小為12mm菌落，取可疑菌落（無(wú)色）、革蘭染色