qbx_微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng) 修改版

1、特點(diǎn)：小特點(diǎn)：小; ; 簡(jiǎn)單簡(jiǎn)單; ; 低等低等; ; 代謝速度快。代謝速度快。微生微生物物真菌真菌原生生物原生生物 是一切肉眼看不見(jiàn)或看不清楚的微小生是一切肉眼看不見(jiàn)或看不清楚的微小生物的總稱物的總稱原核生物原核生物非細(xì)胞結(jié)構(gòu)非細(xì)胞結(jié)構(gòu)真核生物真核生物微生物基礎(chǔ)知識(shí)1.1.何為培養(yǎng)基？何為培養(yǎng)基？閱讀教材閱讀教材P141P1416 6相關(guān)內(nèi)容，回答相關(guān)內(nèi)容，回答以下問(wèn)題：以下問(wèn)題： 2.2.按照不同的劃分標(biāo)準(zhǔn)，培養(yǎng)基有哪按照不同的劃分標(biāo)準(zhǔn)，培養(yǎng)基有哪些種類、配制特點(diǎn)及其應(yīng)用？些種類、配制特點(diǎn)及其應(yīng)用？3.3.常用的消毒和滅菌方法有哪些？常用的消毒和滅菌方法有哪些？一一. .培養(yǎng)基：培養(yǎng)基：人

2、工提供微生物人工提供微生物生存的環(huán)境生存的環(huán)境和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)1.1.基本成分：基本成分：思考：微生物“吃”什么？碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽碳源、氮源、水、無(wú)機(jī)鹽碳源碳源無(wú)機(jī)：無(wú)機(jī)：有機(jī)：有機(jī)：COCO2 2、COCO3 32 2- -、HCOHCO3 3- -牛肉膏、蛋白胨等牛肉膏、蛋白胨等自養(yǎng)型自養(yǎng)型異養(yǎng)型異養(yǎng)型氮源氮源無(wú)機(jī)：無(wú)機(jī)：有機(jī)：有機(jī)：NHNH4 4、NONO3 3- -牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等劃分劃分標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基培養(yǎng)基種類種類特點(diǎn)特點(diǎn)用途用途物理物理性質(zhì)性質(zhì)培養(yǎng)基的種類培養(yǎng)基的種類不加不加凝固劑凝固劑加凝固劑加凝固劑（瓊脂、（瓊脂、明膠）明膠

3、）工業(yè)生產(chǎn)工業(yè)生產(chǎn)觀察微生物觀察微生物的的運(yùn)動(dòng)、分運(yùn)動(dòng)、分類鑒定類鑒定微生物分離、微生物分離、鑒定、鑒定、活菌計(jì)活菌計(jì)數(shù)數(shù)、保藏菌種保藏菌種液體液體半固體半固體固體固體耐高溫需保持干燥的耐高溫需保持干燥的 物品，物品，160170 12小時(shí)小時(shí)接種環(huán)、接種針等接種環(huán)、接種針等 金屬用具金屬用具7075、30min 80、15min100、56min消毒消毒滅菌滅菌定定義義方方法法較為較為溫和溫和理化方法，理化方法，殺死殺死部分有害菌體部分有害菌體（不不包括芽孢、孢子）包括芽孢、孢子）強(qiáng)烈強(qiáng)烈的理化方法，的理化方法，殺死殺死所有微生物所有微生物（包括（包括芽孢、孢子芽孢、孢子）煮沸消毒法煮沸消毒

4、法巴氏消毒法巴氏消毒法化學(xué)藥劑化學(xué)藥劑紫外線紫外線灼燒滅菌灼燒滅菌干熱滅菌干熱滅菌酒精、氯氣、石炭酸等酒精、氯氣、石炭酸等高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌培養(yǎng)基，培養(yǎng)基，100KPa、121、1530min二二. .無(wú)菌技術(shù)：無(wú)菌技術(shù)： 防止外來(lái)雜菌的污染防止外來(lái)雜菌的污染1.1.消毒與滅菌：消毒與滅菌：1.1.無(wú)菌技術(shù)除了用來(lái)防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物無(wú)菌技術(shù)除了用來(lái)防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來(lái)微生物污染外，還有什么目的？被其他外來(lái)微生物污染外，還有什么目的？2.2.請(qǐng)你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅請(qǐng)你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌。如果需要，請(qǐng)選擇合適的方法。菌。如果需要，請(qǐng)選擇合適的方法。（

5、1 1） 培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿（2 2） 玻棒、試管、燒瓶和吸管玻棒、試管、燒瓶和吸管（3 3） 實(shí)驗(yàn)操作者的雙手實(shí)驗(yàn)操作者的雙手 答：無(wú)菌技術(shù)還能有效避免操作者自答：無(wú)菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。身被微生物感染。答：（答：（1）、（）、（2）需要滅菌；（）需要滅菌；（3）需要消毒）需要消毒。下列哪些事物適用于消毒處理下列哪些事物適用于消毒處理()皮膚皮膚飲用水飲用水牛奶牛奶注射器注射器培養(yǎng)皿培養(yǎng)皿接種環(huán)接種環(huán)培養(yǎng)基培養(yǎng)基果汁果汁醬油醬油手術(shù)刀手術(shù)刀AB C D以上全部以上全部A1 1、器具的滅菌、器具的滅菌2 2、培養(yǎng)基的配制、培養(yǎng)基的配制3 3

6、、培養(yǎng)基的滅菌、培養(yǎng)基的滅菌4 4、倒平板、倒平板5 5、微生物接種、微生物接種6 6、恒溫箱中培養(yǎng)、恒溫箱中培養(yǎng)7 7、菌種的保存、菌種的保存閱讀P16-20三、實(shí)驗(yàn)操作三、實(shí)驗(yàn)操作 （ 一）一）制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（用于培制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（用于培養(yǎng)細(xì)菌）養(yǎng)細(xì)菌）1. 1. 計(jì)算計(jì)算2 2稱量稱量3 3溶化溶化4 4培養(yǎng)基滅菌培養(yǎng)基滅菌5 5倒平板倒平板留意：稱量紙留意：稱量紙加瓊脂加瓊脂方法？方法？1.1.培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50 50 左右時(shí)，才能左右時(shí)，才能用來(lái)倒平板。你用什么辦法來(lái)估計(jì)培養(yǎng)基的溫度？用來(lái)倒平板。你用什么辦法來(lái)估計(jì)培養(yǎng)基的溫度？ 答：

7、答：可以用手觸摸錐形瓶，感覺(jué)剛剛不可以用手觸摸錐形瓶，感覺(jué)剛剛不燙手燙手2.2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰？為什么需要使錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰？答：通過(guò)灼燒滅菌，防止瓶口的微生物答：通過(guò)灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。污染培養(yǎng)基。3.3.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？平板冷凝后，為什么要將平板倒置？4.4.在倒平板的過(guò)程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在在倒平板的過(guò)程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個(gè)平板還能用來(lái)培養(yǎng)皿蓋與皿底之間的部位，這個(gè)平板還能用來(lái)培養(yǎng)微生物嗎？為什么？微生物嗎？為什么？答：平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，答：平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，可以防止皿蓋

8、上的水珠落入培養(yǎng)基，可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。造成污染。答：雜菌滋生，最好不要用答：雜菌滋生，最好不要用接種方法：接種方法： 平板劃線法平板劃線法: :（二）、純化大腸桿菌（二）、純化大腸桿菌平板劃線法平板劃線法和和稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法在數(shù)次畫(huà)線后在數(shù)次畫(huà)線后, ,可以分離到可以分離到由一個(gè)細(xì)胞繁殖由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的肉眼可見(jiàn)的子細(xì)胞群體而來(lái)的肉眼可見(jiàn)的子細(xì)胞群體, ,這就是這就是菌落菌落. .菌落是鑒菌落是鑒定菌種的定菌種的重要依據(jù)。重要依據(jù)。一個(gè)一個(gè)菌落菌落就是就是一個(gè)一個(gè)種群種群?jiǎn)蝹€(gè)或少數(shù)細(xì)菌單個(gè)或少數(shù)細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上大量繁殖形在固體培養(yǎng)基上大量繁殖形成一個(gè)肉眼

9、可見(jiàn)、具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)成一個(gè)肉眼可見(jiàn)、具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體，叫做胞群體，叫做菌落菌落。接種方法：接種方法： 平板劃線法平板劃線法: :（二）、純化大腸桿菌（二）、純化大腸桿菌平板劃線法平板劃線法和和稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法在數(shù)次畫(huà)線后在數(shù)次畫(huà)線后, ,可以分離到可以分離到由一個(gè)細(xì)胞繁殖由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的肉眼可見(jiàn)的子細(xì)胞群體而來(lái)的肉眼可見(jiàn)的子細(xì)胞群體, ,這就是這就是菌落菌落. .如何操作？如何操作？ 劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)：劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)：及時(shí)殺死殘留的及時(shí)殺死殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。操作的第一步灼燒接種環(huán)：操作的第

10、一步灼燒接種環(huán)：避免接種環(huán)上可避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；能存在的微生物污染培養(yǎng)物；討論討論p18 討論討論1.1.每次劃線前灼燒接種環(huán)：殺死上次劃線結(jié)束后殘留在接種環(huán)上的菌種，使下一次劃線時(shí)，菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端，從而通過(guò)劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。討論討論2.2.答：以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。答：以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。討論討論3.3.答：答：劃線后，線條劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目末端細(xì)菌的數(shù)目比線條比線條起始起始處要少，每次從上一次劃線的末端開(kāi)始，能使處要少，每次從上一次劃線的末端開(kāi)始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步

11、減少，細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落。最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落。 1 1、臨時(shí)保藏：接、臨時(shí)保藏：接種到種到固體斜面培養(yǎng)基固體斜面培養(yǎng)基，菌落長(zhǎng)成后置于，菌落長(zhǎng)成后置于44冰箱保存。冰箱保存。 2 2、長(zhǎng)期保存：、長(zhǎng)期保存：甘甘油油 冷凍冷凍 管藏法管藏法-20劃分劃分標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)種類種類特點(diǎn)特點(diǎn)用途用途化化學(xué)學(xué)成成分分天然天然合成合成含化學(xué)成分不明含化學(xué)成分不明確的天然物質(zhì)確的天然物質(zhì)工業(yè)生產(chǎn)工業(yè)生產(chǎn)培養(yǎng)基成分明確培養(yǎng)基成分明確分類、鑒定分類、鑒定加入某種化學(xué)物質(zhì)加入某種化學(xué)物質(zhì), ,以抑制以抑制不需要不需要的微生的微生物的生長(zhǎng)物的生長(zhǎng), ,

12、促進(jìn)促進(jìn)所需所需要要的微生物的生長(zhǎng)的微生物的生長(zhǎng)培養(yǎng)、分培養(yǎng)、分離出離出特定特定微生物微生物加入某種指示劑或化加入某種指示劑或化學(xué)藥品學(xué)藥品, ,用以鑒別用以鑒別不不同種類同種類的微生物的微生物鑒別不鑒別不同同種類種類微生微生物物用用途途選擇選擇鑒別鑒別選擇培養(yǎng)基：選擇培養(yǎng)基：在培養(yǎng)基中加入青霉素，以抑制細(xì)菌、放線菌的生長(zhǎng)，從而分離到酵母菌和霉菌。鑒別培養(yǎng)基：鑒別培養(yǎng)基：例如，在培養(yǎng)基中加入伊紅和美藍(lán)，可以用來(lái)鑒別飲用水和乳制品中是否存在大腸桿菌等細(xì)菌：如果有大腸桿菌，其代謝產(chǎn)物就與伊紅和美藍(lán)結(jié)合，使菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤。 涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行。結(jié)合平板劃