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文檔簡介

蒽銅的比色法1一、原理：糖與硫酸反應脫水生成羥甲基呋喃甲醛，生成物再與蒽銅縮合成藍綠色化合物，其顏色深淺與溶液中糖的濃度成正比，可比色定量。 本法在20-200 mg/L含量范圍內呈良好的先行關系。本法是微量法，適用于含微量的碳水化合物是樣品 。2二、試劑（1）0.2蒽銅試劑：溶解蒽銅0.2g于100ml95硫酸中，置棕色瓶中冷暗處保存（2） 0.1葡萄糖液：準確稱干燥葡萄糖0.1000g 定容100ml 再配成10、20、40、60、80、100mg/L的系列標準溶液。3三、操作方法（1）標準曲線繪制（2）100ml容量瓶編號 沸水浴加熱6分鐘，取出冷卻用1cm比色杯620nm測定吸光度作出以吸光度為橫坐標，糖液濃度為縱坐標的準曲線4（3）樣品測定 取1ml樣品、系列標準溶液和蒸餾水（作空白）各1ml，分別置于8根試管中，沿壁各加入5ml冷的蒽酮溶液，混勻后，在試管口蓋上玻璃球，在沸水浴上加熱10分鐘后，在流水中冷卻20分鐘，在620nm波長處以試劑空白作參比，測定吸光度。以標準系列數(shù)據做標準曲線，查出樣品含量5四 、計算總糖（以葡萄糖%計）=C稀釋倍數(shù)0.0001式中：C是從標準曲線查得的糖濃度，PPm0.0001是將PPm換算為%的系數(shù)6五、試驗注意1，樣液必須清澈透明，加熱后不應有蛋白質沉淀2，樣品顏色較深時，可用活性炭脫色后再進行測定3，此法與所用的硫酸濃度和加

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