病理生理學(xué)ppt課件-第二十八章--其他病毒

1、第二十八章 其他病毒病原生物學(xué)學(xué)習(xí)目標(biāo)掌握：狂犬病毒的致病特點(diǎn)、感染途徑及防治原則；人乳頭瘤病毒致病性。熟悉：人乳頭瘤病毒與宮頸癌的關(guān)系、朊粒的概念、朊粒的生物學(xué)特性和致病性。了解：人乳頭瘤病毒的主要生物學(xué)特性、朊粒微生物學(xué)檢查法及防治原則。第一節(jié) 狂犬病病毒狂犬病病毒(rabies virus)主要侵犯中樞神經(jīng)系統(tǒng)，引起人和動(dòng)物狂犬病(rabies )，又稱(chēng)恐水癥，在世界上大部分地區(qū)流行。一旦發(fā)病，死亡率幾乎達(dá)100%，是我國(guó)目前死亡率最高的傳染病。第一節(jié) 狂犬病病毒一、 生物學(xué)特性狂犬病病毒形如子彈狀，直徑5090nm，長(zhǎng)100430nm，有包膜，包膜表面有糖蛋白刺突。核衣殼呈螺旋對(duì)稱(chēng)，由

2、單負(fù)鏈RNA、核蛋白、多聚酶蛋白和基質(zhì)蛋白組成（圖281）。第一節(jié) 狂犬病病毒圖28-1 狂犬病病毒的形態(tài)結(jié)構(gòu)模式圖第一節(jié) 狂犬病病毒狂犬病病毒的動(dòng)物感染范圍較廣，所有溫血?jiǎng)游锞鶎?duì)該病毒易感。在家畜中，狗、貓和牛最易感。小鼠和地鼠是實(shí)驗(yàn)室中常用的敏感動(dòng)物。病毒在易感動(dòng)物或人的中樞神經(jīng)細(xì)胞（主要是大腦海馬回的錐體細(xì)胞）中增殖時(shí)，可在胞質(zhì)內(nèi)形成圓形或橢圓性的嗜酸性包涵體，稱(chēng)內(nèi)基小體(Negri body)(圖28-2)。病毒可在多種培養(yǎng)細(xì)胞上增殖，但通常不出現(xiàn)細(xì)胞病變。第一節(jié) 狂犬病病毒圖28-2 狂犬病病毒內(nèi)基小體第一節(jié) 狂犬病病毒狂犬病病毒對(duì)理化因素抵抗力不強(qiáng)，易被日光、紫外線、季胺類(lèi)化合物、

3、脂溶劑和碘酊等所滅活。56 3060min或100 2min即可使之喪失活性。在-70能存活數(shù)年。但近年來(lái)發(fā)現(xiàn)，狂犬病病毒的包膜糖蛋白可以發(fā)生抗原性變異，出現(xiàn)抗原性不同的毒株。第一節(jié) 狂犬病病毒二、 致病性在自然界中，野生動(dòng)物（如狼、狐貍、蝙蝠等）為其儲(chǔ)存宿主和傳播媒介，通過(guò)野生動(dòng)物間的抓咬而傳播。家畜中的狂犬病由野生動(dòng)物傳播而來(lái)。病犬是人狂犬病的主要傳染源，其次是貓、豬、牛、馬等。第一節(jié) 狂犬病病毒二、 致病性患病動(dòng)物的唾液中含有大量的病毒。唾液中的病毒通過(guò)咬傷、抓傷等各種傷口侵入人體?？袢』颊叩耐僖褐须m含有少量病毒，但人傳人的病例極為罕見(jiàn)。在動(dòng)物發(fā)病前5天，其唾液中即含有病毒。病毒進(jìn)入人

4、體后，潛伏期一般為13個(gè)月，但也可能短至1周或長(zhǎng)至數(shù)年。第一節(jié) 狂犬病病毒病毒感染后，首先在感染局部的肌細(xì)胞中少量增殖，再進(jìn)入末梢神經(jīng)組織，亦可不經(jīng)增殖，直接侵入末梢神經(jīng)組織；隨后，病毒通過(guò)神經(jīng)末梢沿神經(jīng)軸索上行至中樞神經(jīng)系統(tǒng)，引起急性彌漫性腦脊髓炎；最后，病毒從中樞神經(jīng)下行，向周?chē)窠?jīng)擴(kuò)散，到達(dá)唾液腺和其他組織。第一節(jié) 狂犬病病毒典型的臨床表現(xiàn)是早期對(duì)刺激興奮性增高，表現(xiàn)為恐懼不安、對(duì)聲、光、風(fēng)刺激均高度敏感?？炙瞧涮赜械陌Y狀，患者在吞咽、飲水、聽(tīng)到水聲，甚至僅提及飲水時(shí)均引起嚴(yán)重的喉頭肌肉痙攣，故又稱(chēng)恐水病(hydrophobia)。經(jīng)35d后，患者轉(zhuǎn)入麻痹期，最后因昏迷、呼吸及循環(huán)衰竭

5、而死亡。病死率幾乎達(dá)100%第一節(jié) 狂犬病病毒病毒包膜糖蛋白和核蛋白均含有中和抗原表位和T細(xì)胞表位，可誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答。中和抗體對(duì)狂犬病病毒感染有免疫保護(hù)作用；補(bǔ)體結(jié)合抗體在補(bǔ)體存在時(shí)可溶解病毒感染的細(xì)胞。抗體依賴(lài)的細(xì)胞毒反應(yīng)( ADCC)能抑制病毒在細(xì)胞間的擴(kuò)散；CD8 T細(xì)胞可溶解狂犬病病毒和殺傷病毒感染細(xì)胞。第一節(jié) 狂犬病病毒三、 微生物學(xué)檢查人被犬或其他動(dòng)物咬傷后，檢查動(dòng)物是否患有狂犬病，對(duì)采取防治措施極為重要。一般不宜將動(dòng)物立即處死，應(yīng)將其捕獲，隔離觀察710天，若不發(fā)病，一般可認(rèn)為該動(dòng)物不是狂犬病或咬人時(shí)唾液中尚無(wú)狂犬病病毒。若在觀察期間發(fā)病，則將其處死，取大腦海馬回部位組織涂

6、片，用免疫熒光素標(biāo)記抗體法檢查病毒抗原，同時(shí)作組織切片檢查內(nèi)基小體。第一節(jié) 狂犬病病毒三、 微生物學(xué)檢查人狂犬病的實(shí)驗(yàn)室診斷方法包括檢測(cè)病毒抗原或抗體、檢測(cè)內(nèi)基小體或病毒的分離培養(yǎng)等。此外，也可用RT-PCR法檢測(cè)標(biāo)本中的狂犬病病毒RNA。第一節(jié) 狂犬病病毒四、防治原則捕殺野犬，加強(qiáng)家犬管理，注射犬用疫苗，是預(yù)防狂犬病的主要措施。人被動(dòng)物咬傷后，應(yīng)采取下列預(yù)防措施：1傷口處理 立即用20%肥皂水、0.1%新潔爾滅或清水反復(fù)沖洗傷口至少30分鐘，再用70%乙醇及碘酒反復(fù)涂擦。徹底清洗傷口可明顯降低發(fā)病率。第一節(jié) 狂犬病病毒四、防治原則2疫苗接種 狂犬病的潛伏期一般較長(zhǎng)，人被咬傷后如及早接種疫苗，

7、可以預(yù)防發(fā)病。一些有接觸病毒危險(xiǎn)的人員，如獸醫(yī)、動(dòng)物管理員和野外工作者等，亦應(yīng)用疫苗預(yù)防感染，并定期檢查血清抗體水平，及時(shí)進(jìn)行加強(qiáng)免疫，通常加強(qiáng)免疫是在第0、3天接種疫苗2次。第一節(jié) 狂犬病病毒四、防治原則3被動(dòng)免疫 用高效價(jià)抗狂犬癇病毒血清或狂犬病免疫球蛋白在傷口周?chē)c底部行浸潤(rùn)注射及肌注，劑量為401U/kg，如與狂犬病疫苗聯(lián)用效果更佳。第一節(jié) 狂犬病病毒四、防治原則目前我國(guó)使用的是滅活病毒疫苗，于第0、3、7、14、28天各肌注Iml，完成全程免疫后可獲得良好的免疫效果，免疫力可維持一年左右。第二節(jié) 人乳頭瘤病毒人乳頭瘤病毒(human papillomavirus，HPV)主要侵犯人的

8、黏膜和皮膚，引起皮膚黏膜的扁平疣、尋常疣和肛門(mén)生殖器尖銳濕疣等增生性病變，并與子宮癌的發(fā)生有密切關(guān)系。 第二節(jié) 人乳頭瘤病毒HPV呈球形，直徑52nm55nm，20面體立體對(duì)稱(chēng)，無(wú)包膜。病毒核酸為雙鏈環(huán)狀DNA?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)HPV有100多個(gè)基因型。第二節(jié) 人乳頭瘤病毒HPV的傳播途徑主要是直接接觸感染者的病損部位或間接接觸被病毒污染的物品。生殖器感染主要由性接觸傳播。新生兒可在通過(guò)產(chǎn)道時(shí)受感染。病毒感染僅停留于局部皮膚和黏膜中，不產(chǎn)生病毒血癥。HPV感染的基本特征是引起細(xì)胞增生。HPV在細(xì)胞內(nèi)復(fù)制能誘導(dǎo)表皮的基底細(xì)胞過(guò)度增生，使表皮變厚、角質(zhì)化。上皮增殖形成乳頭狀瘤，也稱(chēng)為疣。第二節(jié) 人乳頭瘤病

9、毒根據(jù)感染部位不同，HPV分為嗜皮膚性和嗜黏膜性兩大類(lèi):前者主要引起各種類(lèi)型的皮膚疣，如尋常疣、跖疣、扁平疣、屠夫?qū)こｐ嗪宛酄畋砥ぴ錾惓５?。后者主要感染生殖道和呼吸道的黏膜，引起生殖道尖銳濕疣、喉乳頭瘤及子宮頸癌等。第二節(jié) 人乳頭瘤病毒近午研究表明，宮頸癌主要與16、18、31和33等型別相關(guān)。這些型別的HPV感染細(xì)胞后，病毒的基因組可整合于宿主細(xì)胞基因組中，引起細(xì)胞轉(zhuǎn)化，與生殖道癌前病變和惡性腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)。HPV基因組E6和E7區(qū)具有癌基因的功能，其編碼的E6和E7蛋白可干擾P53等抑癌蛋白抑制細(xì)胞分裂和增長(zhǎng)的作用，使細(xì)胞從正常向惡性轉(zhuǎn)變。第二節(jié) 人乳頭瘤病毒微生物學(xué)檢測(cè)，用DNA雜

10、交、PCR 用于檢測(cè)HPV的DNA。血清學(xué)診斷以基因工程表達(dá)的病毒抗原檢測(cè)患者血清中的抗體。對(duì)尋常疣和尖銳濕疣可用局部藥物治療或冷凍、電灼、激光或手術(shù)等療法去除，但易復(fù)發(fā)。第三節(jié) 朊 粒朊粒(prion)又稱(chēng)傳染性蛋白粒子或朊病毒，是一種由正常宿主細(xì)胞基因編碼的構(gòu)象異常的蛋白質(zhì)，不含核酸，具有自我復(fù)制能力，目前認(rèn)為是人和動(dòng)物的傳染性海綿狀腦病(Transmissible Spongiform encephalopathy，TSE)的病原體。第三節(jié) 朊 粒一、生物學(xué)性狀Prion是一種不含脂類(lèi)的疏水性糖蛋白，稱(chēng)朊蛋白(PrP)。由于這種蛋白質(zhì)大量存在于TSE感染的人和動(dòng)物組織中，與致病和傳染有關(guān)

11、，因此又稱(chēng)為羊瘙癢病朊蛋白(PrPsc)。PrPsc分子量為2730KD，對(duì)蛋白酶K有抗性，不溶于去污劑。人類(lèi)和多種哺乳類(lèi)動(dòng)物的染色體中都存在編碼PrP的基因，其編碼的PrP前體蛋白分子量為3335KD，對(duì)蛋白酶敏感，可溶于非變性去污劑，沒(méi)有致病性，稱(chēng)為細(xì)胞朊蛋白(PrPc).第三節(jié) 朊 粒PrPc與PrPsc的一級(jí)結(jié)構(gòu)完全相同，但空間結(jié)構(gòu)存在著明顯的差異。對(duì)重組PrPc分子高級(jí)結(jié)構(gòu)的分析結(jié)果顯示，PrPc中有3個(gè)-螺旋結(jié)構(gòu)和2個(gè)-片層結(jié)構(gòu)，PrPsc中有2個(gè)-螺旋結(jié)構(gòu)和4個(gè)-片層結(jié)構(gòu)(圖28-3)。已證明人類(lèi)PrP基因位于第20號(hào)染色體的短臂上，PrP基因編碼產(chǎn)生的PrPc可轉(zhuǎn)變成PrPsc

12、，但其確切機(jī)制尚不清楚。第三節(jié) 朊 粒 圖28-3 PrPc與PrPsc的三維空間結(jié)構(gòu) 第三節(jié) 朊 粒Prion對(duì)理化因素有強(qiáng)大的抵抗力。能抵抗蛋白酶的消化作用；對(duì)核酸酶、紫外線等降解核酸的處理不敏感；對(duì)甲醛(18%)、戊二醛、一丙內(nèi)脂（1%)、甲醇、乙醇、丙醇、過(guò)錳酸鉀、碘、過(guò)氧乙烯、非離子型或弱離子型去污劑等化學(xué)消毒劑不敏感；標(biāo)準(zhǔn)的高壓蒸汽滅菌法和射線均不能使之滅活；對(duì)乙醚、丙酮和環(huán)氧乙烷等中度敏感。目前滅活Prion的方法有高壓蒸汽(1322h)、紫外線(220nm, 237nm)、5.25%次氯酸鈉、尿素(68molL)、過(guò)氧酸鉀(0.0lmolL)、氯仿、氫氧化鈉等。第三節(jié) 朊 粒二

13、、致病性與免疫性朊粒病是一種人和動(dòng)物的致死性中樞神經(jīng)系統(tǒng)慢性退行性疾病，潛伏期長(zhǎng)，可達(dá)數(shù)年至數(shù)十年之久，一旦發(fā)病即呈慢性進(jìn)行性發(fā)展，最終死亡。其病理特點(diǎn)是中樞神經(jīng)細(xì)胞空泡化、彌漫性神經(jīng)細(xì)胞缺失、膠質(zhì)細(xì)胞增生、淀粉樣斑塊形成、腦組織海綿狀改變等，所以又稱(chēng)為傳染性海綿狀腦病。臨床表現(xiàn)為癡呆、共濟(jì)失調(diào)、震顫等中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀。第三節(jié) 朊 粒二、致病性與免疫性目前已知的動(dòng)物的Prion病主要有羊瘙癢病、鹿慢性消瘦癥、水貂傳染性腦病、牛海綿狀腦病（俗稱(chēng)瘋牛?。┖拓埡＞d狀腦?。蝗祟?lèi)Prion病主要有庫(kù)魯病、克-雅病、致死性家族性失眠癥、格斯特曼綜合征和克-雅病變種。第三節(jié) 朊 粒三、 微生物學(xué)檢查法免疫組化技術(shù)是目前確診TSE的有效手段。取可疑患者的腦組織或非神經(jīng)組織切片，經(jīng)處理使其感染性消失并破壞PrPc后，用單克隆抗體或多克隆抗體檢測(cè)PrPsc。另一種簡(jiǎn)單而敏感的診斷方法蛋白印跡(Western blotting)檢測(cè)PrPsc。還可從患者外周血白細(xì)胞中提取DNA，對(duì)PrP基因進(jìn)行分子遺傳學(xué)分析，協(xié)助診斷家族遺傳性朊粒病。第三節(jié) 朊 粒四、 防治原則迄今對(duì)Prion病尚無(wú)疫苗可供預(yù)防，也缺乏有效的治療方法。目前主要是針對(duì)本病的可能傳播途徑采取預(yù)防措施。對(duì)患者的血