[醫(yī)學微生物學]球菌課件

1、醫(yī)學微生物學Medical microbiology 第 九 章球 菌coccus指個體形狀呈球形或橢圓形的一大類細菌。對人類有致病性的球菌。包括四個屬：葡萄球菌屬：G球菌鏈 球 菌屬：G球菌 腸 球 菌屬：G球菌奈 瑟 菌屬：G球菌 腦膜炎,淋病奈瑟菌?；撔郧蚓╬yogenic coccus）第一節(jié) 葡萄球菌屬（staphylococcus）圓形 葡萄樣排列 AB廣泛分布,人體正常菌群,皮膚,鼻咽部。醫(yī)務人員帶菌率70%,交叉感染。分類：色素,凝固酶金黃色葡萄球菌;凝固酶陽性葡萄球菌 （S. aureus）致病菌。凝固酶陰性葡萄球菌（CNS）白色,檸檬色。表皮葡萄球菌;腐生葡萄球菌。三種

2、葡萄球菌鑒別的主要性狀主要性狀金黃色葡萄球菌表皮/腐生性葡色素金黃色白色/檸檬色血漿凝固酶甘露醇發(fā)酵溶血性耐熱核酸酶活性磷壁酸核糖醇型磷壁酸甘油型蛋白A（SPA）致病性強無或弱一、金黃色葡萄球菌（S. aureus）（一）生物學性狀1.形態(tài)與染色球形,無鞭毛,無芽胞,1um。葡萄串狀,革蘭染色陽性（G）。AB2.培養(yǎng)特性易培養(yǎng):兼性厭氧,肉湯或普通平板?；鞚?菌落圓形,光滑,不透明凸起。產(chǎn)色素:金黃色 血平板產(chǎn)生溶血環(huán)。金葡菌落:金黃色透明溶血。3.生化反應多數(shù)菌分解葡萄糖,麥芽糖和蔗糖。產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。致病性球菌分解甘露醇。過氧化氫酶陽性（與鏈球菌鑒別）。含青霉素或溶菌酶培養(yǎng)基形成L型。4.抗原

3、構造(1)葡萄球菌A蛋白： 細胞壁表面蛋白質(zhì)，完全抗原。 (2)莢膜多糖： 有利于細菌粘附 (3)多糖抗原： 存在于細胞壁，有群特異性。 SPAcapsuleteichoic acidpeptidoglycan(1)staphylococcal protein A SPA ： 細胞壁表面蛋白質(zhì),完全抗原。(2)莢膜多糖： 利于細菌粘附。 (3)多糖抗原:群特異性。 5.SPA的生物活性：SPA與IgG的FC端結合,形成免疫復合物：抗吞噬；促進細胞分裂；引起超敏反應；損傷血小板。SPA的用途：多種微生物抗原檢測,腫瘤試驗治療。6.抵抗力 無芽胞菌最強。耐干燥;濃汁中存活2-3個月；耐熱;加熱60

4、1hr或8030；耐鹽;15%Nacl;對青,慶,紅,金霉素敏感;龍膽紫超敏感。易產(chǎn)生耐藥性,耐青率達90%。耐甲氧西林金葡菌,院內(nèi)感染常見菌。耐藥機制:細胞壁成分改變;質(zhì)粒傳播。（二）致病性與免疫性金黃色葡萄球菌毒力強,侵入機體后,在宿主體內(nèi)增殖,擴散;產(chǎn)生侵襲性酶和毒素,引起宿主疾病。 金黃色葡萄球菌的致病物質(zhì):酶；毒素；細菌的表面結構蛋白。 凝固酶（coagulase）概念:含抗凝劑的血漿發(fā)生凝固的酶。游離凝固酶（free coagulas）結合凝固酶（bound coagulase）意義:葡萄球菌致病性的重要指標。致病機理:抵抗細胞吞噬;保護病菌不受殺菌物質(zhì)破壞;使感染局限化;形成血栓

5、。纖維蛋白溶酶:葡激酶,纖維蛋白原成為蛋白酶,溶解纖維蛋白。耐熱核酸酶:降解DNA和RNA,致病性指標。透明質(zhì)酸酶:擴散因子,溶解細胞間質(zhì),促進致病菌擴散。脂酶:分解血漿和機體各部位表面的脂肪。觸酶:分解H2O2。毒素 葡萄球菌溶素 毒性休克綜合征毒素-1 殺白細胞素 腸毒素 表皮剝脫毒素表面結構或蛋白 如粘附素,莢膜,胞壁肽聚糖和SPA等。1.葡萄球菌溶素（staphylolysin）外毒素,細胞毒性,多種哺乳動物紅細胞溶血;殺傷WBC,PC,肝細胞,皮膚細胞,嵌入細胞膜疏水區(qū)導致細胞溶解。2.殺白細胞素（leukocidin）靶細胞是中性粒細胞和巨噬細胞,與細胞膜受體結合,膜通透性增高,胞

6、漿顆粒排出死亡。3.毒性休克綜合征毒素-1（TSST-1） 外毒素,引起發(fā)熱,休克;增加對內(nèi)毒素的敏感性；多器官系統(tǒng)功能紊亂;毒性休克綜合征（TSS）。4.表皮剝脫毒素（exfoliative toxin）表皮溶解毒素,質(zhì)粒編碼,皮膚彌漫性紅斑,水泡,表皮大面積脫落,燙傷樣綜合癥或剝脫性皮炎,。5.腸毒素（enterotoxin）耐熱蛋白質(zhì),耐蛋白酶。食物中毒,刺激嘔吐中樞,引起嘔吐;氣霧劑吸入可致多器官損傷,休克死亡,生物武器。腸毒素是超抗原（superantigen）,有絲分裂原作用,刺激淋巴細胞增殖,不經(jīng)過遞呈細胞處理;非特異激活T淋巴細胞,釋放過量淋巴因子引起疾病。所致疾病 化膿性感染

7、和毒素性疾病局部感染:皮膚軟組織:毛囊炎,癤,癰,傷口化膿。特點是病灶局限,濃汁粘稠,黃色。全身感染:細菌沿血流和淋巴擴散,引發(fā)敗血癥,膿毒血癥;肝,腎,肺,脾,腦膿腫。 臟器感染:肺炎,胸膜炎,中耳炎,腦膜炎,心包炎,心內(nèi)膜炎。毒素性疾病 外毒素引起的中毒性疾病食物中毒 1-6hr,惡心,嘔吐,腹瀉。假膜性腸炎,菌群失調(diào)。燙傷樣皮膚綜合征,紅斑,起皺,大庖,表皮脫落,病死率20%。毒性休克綜合征TSS,突發(fā)高熱,嘔吐,腹瀉,低血壓,休克,心腎衰竭,病死率高。與艱難梭菌引起假膜性腸炎,持續(xù)腹瀉。免疫性皮膚黏膜有效阻擋金葡菌感染,天然免疫力,皮膚黏膜受傷,傷口?；加新韵男约膊?結核病,腫瘤,

8、糖尿病患者易發(fā)生感染。感染后能獲得一定的免疫力,不強,不持久。幼貓試驗標本膿汁,血液,剩余食物,嘔吐物分離培養(yǎng)血漿凝固酶發(fā)酵甘露醇耐熱核酸酶直接涂片鏡檢革蘭陽性葡萄球菌生長現(xiàn)象色素,溶血生化反應毒素檢查藥敏實驗動物實驗：對食物中毒患者（三）微生物學檢查法防 注意消毒隔離注意個人衛(wèi)生 防止醫(yī)源性感染 防止耐藥性產(chǎn)生治 抗菌素藥敏試驗自身菌苗療法四、防治原則二、凝固酶陰性葡萄球菌 Coagulase negative staphylococcus, CNSCNS已成為醫(yī)源性感染常見重要病原菌,耐藥菌株日益增多;當機體免疫功能低下或細菌進入非正常寄居部位,引發(fā)感染,各類感染中僅次于大腸埃希菌,居病原

9、菌的第2位。泌尿系感染細菌性心內(nèi)膜炎敗血癥術后及植入醫(yī)用器械引起的感染第二節(jié) 鏈球菌屬（Streptococcus）概述1.概念 G,排列呈雙或鏈狀排列的球菌。2.分類 1)溶血現(xiàn)象分類 接種血瓊脂培養(yǎng)基,按溶血現(xiàn)象分3類:甲()型溶血； 乙()型溶血； 丙()型溶血。三種溶血現(xiàn)象溶血環(huán)現(xiàn)象名稱類別致病性草綠色溶血環(huán)溶血甲型溶血性鏈球菌條件致病菌透明溶血環(huán)溶血乙型溶血性鏈球菌致病力強不產(chǎn)生溶血環(huán)溶血丙型鏈球菌不溶血無致病性乙型（）溶血性鏈球菌2）抗原結構分類據(jù)鏈球菌細胞壁C多糖抗原結構不同,分為20個血清群。對人致病的菌株,90%屬A群。A群根據(jù)其M抗原不同,分成100多個型。3）生化反應分類

10、 對一些不具有群特異性的鏈球菌（如肺炎鏈球菌和草綠色鏈球菌等）,需用生化反應,藥物敏感和對氧的需要分類。對氧的需要分類分為：需氧、厭氧微需氧鏈球菌醫(yī)學常見鏈球菌鏈球菌 血清群 溶 血 診斷要點 引起常見疾病化膿性鏈球菌 A群溶血;桿菌肽敏感皮膚感染,咽炎,風濕熱,腎炎無乳鏈球菌 B群溶血;桿菌肽不敏感;水解馬尿酸鹽新生兒敗血癥,腦膜炎牛鏈球菌 D群不溶血;不耐6.5% NaCl敗血癥,心內(nèi)膜炎肺炎鏈球菌 - 溶血:膽鹽敏感肺炎,腦膜,心內(nèi)膜炎草綠色鏈球菌 -或不溶血:膽鹽不敏感齲齒,心內(nèi)膜炎一、A群（化膿性）鏈球菌 鏈球菌的代表種,致病性強,對人致病的鏈球菌90%屬A群。 1.形態(tài)與染色 球形

11、或橢圓形,鏈狀排列,G+,無芽胞,無鞭毛,有透明質(zhì)酸莢膜。(一)生物學性狀2.培養(yǎng)特性營養(yǎng)要求高:血平板或含血清培養(yǎng)基；液體培養(yǎng):沉淀生長；血平板 小菌落,灰白色,表面光滑,不同菌株溶血不一,多數(shù)產(chǎn)透明溶血環(huán)（溶血現(xiàn)象）。 3.生化反應分解葡萄糖,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。不分解菊糖,不被膽汁溶解（用于鑒別甲型溶血性鏈球菌與肺炎鏈球菌）。鏈球菌不產(chǎn)過氧化氫酶,與葡萄球菌鑒別。 4.抗原結構分20個群,A群致病菌（溶血性鏈球菌或化膿性鏈球菌）根據(jù)蛋白抗原進一步分類M抗原莢膜細胞壁蛋白質(zhì)多糖肽聚糖細胞膜細胞質(zhì)1）多糖抗原（C抗原）群特異性抗原，細胞壁的多糖組分。 2）表面抗原或稱蛋白質(zhì)抗原:壁外的菌毛樣結構含M

12、蛋白,位于C抗原外層,具型特異性,有近100種血清型。M抗原與致病性有關。 3）P抗原或稱核蛋白抗原:無特異性。 5.抵抗力 不耐熱:60滅活； 干燥塵埃中生存數(shù)月；常用消毒劑敏感;乙型鏈球菌對青霉素,紅霉素,四環(huán)素,桿菌肽和磺胺藥敏感,不產(chǎn)生耐藥。 A群鏈球菌有較強的侵襲力,產(chǎn)生多種外毒素和胞外酶。 1.致病物質(zhì) 細胞壁成分,粘附素; 外毒素; 侵襲酶。（二）致病性與免疫性1)細胞壁成分 (1)粘附素,包括： 脂磷壁酸 LTA 與細胞膜有高度親和力,與M蛋白構成菌毛樣結構,在呼吸道黏膜細胞膜黏定植。 F蛋白 細胞壁成分,結合區(qū)暴露在菌體表面,是纖維粘連蛋白的受體。利于細菌定植和繁殖。脂磷壁酸

13、(2)M蛋白（M protein） A群鏈球菌主要致病因子,抗吞噬和抗細胞內(nèi)殺菌作用;與心肌和腎小球基底膜共同抗原。(3)肽聚糖 A群鏈球菌肽聚糖有致熱,溶解血小板,提高血管通透性和誘發(fā)實驗性關節(jié)炎等作用。 2）外毒素類 (1)致熱外毒素（pyrogenic exotoxin） 猩紅熱的主要毒性物質(zhì)。致熱外毒素抗原性強,有超抗原作用;家兔注射致熱致死。 (2)鏈球菌溶素（streptolysin） 鏈球菌溶素O:含SH基蛋白,氧化失活,殺傷白細胞,PC,神經(jīng)細胞,巨噬細胞心肌細胞,抗原性強,產(chǎn)SLO抗體,400。 鏈球菌溶素S:小分子糖肽,無抗原性。3）侵襲性酶（invasive enzyme

14、）（1）透明質(zhì)酸酶:分解透明質(zhì)酸,利于病菌擴散。（2）鏈激酶SK:激活纖維蛋白酶原變成纖維蛋白酶,溶解血塊或阻止血漿凝固,使病菌擴散。（3）鏈道酶SD鏈球菌DNA酶,降解DNA,使膿液稀薄,促進病菌擴散。 2.所致疾病A群鏈球菌引起的疾病約占人類鏈球菌感染的90% 淋巴管炎,淋巴結炎,蜂窩組織炎,咽炎扁桃體炎。猩紅熱,毒素休克綜合癥(3)超敏反應性(1)化膿性感染(2)中毒性疾病風濕熱急性腎小球腎炎ABAB3.免疫性 產(chǎn)生多種抗體,對同型鏈球菌的再感染有免疫力,型間無交叉,易反復感染?？筂蛋白抗體有保護作用,不同型M蛋白均可誘生-干擾素,增強吞噬。猩紅熱患者可建立牢固的同型抗毒素免疫。標本:直

15、接涂片鏡檢革蘭陽性鏈球菌分離培養(yǎng)膿汁，血液，咽喉拭子與金葡菌的鑒別與肺炎鏈球菌的鑒別典型鏈球菌形態(tài)典型的鏈球菌菌落必要時做:生化反應或藥敏實驗等(三)微生物學檢查法血清學檢查 SLO檢測病人血清中ASO。1.病人血清1滴,SLO1滴; 2.加入SLO乳膠試劑;3.病人血清ASO剩余與乳膠SLO反應, 結果:效價400單位陽性意義:活動性風濕熱,腎小球腎炎輔助診斷。 飛沫傳播,呼吸道感染; 扁桃體炎,咽喉炎應及時徹底治療,防止發(fā)生急性腎炎和風濕熱。治療首選青霉素G；配合使用長效青霉素治療或預防。(四)防治原則二、其他鏈球菌（一）甲型溶血性鏈球菌:也稱草綠色鏈球菌。條件致病菌： 1.齲齒（dent

16、al caries）:常由變異鏈球菌引起,分解蔗糖產(chǎn)生葡聚糖,黏附菌群形成菌斑,發(fā)酵糖產(chǎn)酸,釉質(zhì)脫鈣。 2.亞急性細菌性心內(nèi)膜炎SBE 先心患者口腔手術。（二）B族鏈球菌 無乳鏈球菌寄居于陰道和直腸,鼻咽部,皮膚感染,心內(nèi)膜炎,產(chǎn)后感染,新生兒敗血癥和腦膜炎。（三）D族鏈球菌（條件致病菌）包括糞鏈球菌,牛鏈球菌和馬鏈球菌。正常寄居在皮膚,呼吸道,消化道和泌尿生殖道。偶可引起泌尿道感染,腹部化膿性感染,敗血癥和心內(nèi)膜炎。第三節(jié) 肺炎鏈球菌S. pneumoniae在自然界廣泛分布,常寄居于正常人的鼻咽腔中,形成帶菌狀態(tài);在機體抵抗力下降時引起疾病。引起大葉性肺炎,占細菌性肺炎的80%。 1.形態(tài)

17、與染色G,雙球菌,矛頭狀,平面相對,尖面背。有厚莢膜,無芽胞,無鞭毛。一、生物學性狀2.培養(yǎng)特性營養(yǎng)要求高:血瓊脂培養(yǎng)基,菌落與甲鏈相似,臍狀。自溶酶,液體培養(yǎng)基先渾濁后變清;生化反應：分解葡萄糖,乳糖和菊糖;膽汁可溶菌。抵抗力:較弱熱,紫外線,消毒劑,肥皂。3.抗原結構(1)莢膜多糖抗原 型特異性,肺炎鏈球菌分84個型。(2)菌體抗原 C多糖:細胞壁中,可與宿主血清中C反應蛋白反應,急性炎癥時,含量明顯增多。 M蛋白:型特異性,無致病性,抗體無保護。 致病物質(zhì) 莢膜:侵襲力,最重要的致病物質(zhì) ?？垢稍?2個月;抗吞噬,抗細胞內(nèi)殺菌。肺炎鏈球菌溶血素O:與細胞膜膽固醇結合穿孔,溶解紅細胞;發(fā)熱

18、,炎癥,組織損傷。脂磷壁酸:黏附肺上皮細胞或血管內(nèi)皮細胞。神經(jīng)氨酸酶:協(xié)助菌細胞在鼻咽部和支氣管黏膜細胞的定植,繁殖,擴散。二、致病性與免疫性所致疾病大葉性肺炎;急,高熱,咳嗽,鐵銹色痰液,呼吸急促,水泡音,X胸片陰影,可繼發(fā)胸膜炎,膿胸。急性或慢性支氣管炎,副鼻竇炎,中耳炎,兒童化膿性腦膜炎,敗血癥。 成人1.2.3型,兒童14型;3型毒力強,病死率高。A 左肺下葉 B 右肺中葉 側位片A 支氣管肺炎B 間質(zhì)性肺炎AB免疫性 產(chǎn)生莢膜多糖型特異性抗體,調(diào)理增強吞噬功能,建立同型牢固免疫 。1.直接涂片鏡檢：G有莢膜的雙球菌2.培養(yǎng)“臍形”菌落與甲鏈鑒別方法膽汁溶菌試驗,激活自溶酶。莢膜腫脹試

19、驗，Optochin敏感試驗:20mm以上,甲鏈12mm以下。小白鼠毒力試驗。三、微生物學檢查法1000多價肺炎球菌莢膜多糖菌苗預防治療首選青霉素四、防治原則兒童,老年人,預防肺炎,腦膜炎敗血癥14價或23價疫苗,包括1，2，3和14型第四節(jié) 奈瑟菌屬 Neisseria 腦膜炎奈瑟菌(N. gonorrhoeae) 淋病奈瑟菌（N. meningitidis） G雙球菌,無鞭毛,芽胞,有菌毛。 典型細胞內(nèi)寄生。人是唯一宿主。一、腦膜炎奈瑟菌N. meningitidis1.形態(tài)與染色 G雙球菌,腎形或豆形,無鞭毛,芽胞,有菌毛,中粒細胞內(nèi)。2.分離培養(yǎng)巧克力培養(yǎng)基 專性需氧菌；5%CO21m

20、m小菌落,露滴狀,48hr后自溶。 （一）生物學性狀3.抗原構造與分型莢膜多糖群特異性抗原 分群外膜蛋白型特異性抗原 分型脂寡糖抗原:外膜糖脂成分,主要致病物質(zhì)。4.抵抗力 四怕:熱,寒冷,干燥,消毒劑。1.致病物質(zhì) 主要是內(nèi)毒素莢膜:有抵抗吞噬的作用；菌毛:粘附于黏膜上皮細胞,利于定植；IgG1蛋白酶:水解IgG1,便于黏附。內(nèi)毒素:發(fā)熱,微循環(huán)障礙,嚴重者可致內(nèi)毒素休克,血栓,DIC等。（二）致病性與免疫性2.所致疾病傳染源:病人和帶菌者。途徑:呼吸道,飛沫或接觸。潛伏期2-3d,鼻咽部繁殖入血,大量繁殖,產(chǎn)生毒性代謝產(chǎn)物,引起全身中毒,敗血癥;少數(shù)患兒突破血腦屏障進入CNS生長繁殖, 引

21、發(fā)流行性腦脊髓膜炎。臨床分型:普通型;暴發(fā)型;慢性敗血癥型。典型癥狀:高熱;出血斑;劇烈頭痛;噴射性嘔吐;頸項強直。（三）免疫性隱性,顯性感染,接種疫苗后2周產(chǎn)生可抗體。調(diào)理作用,增強吞噬細胞功能；sIgA阻止腦膜炎奈瑟菌對呼吸道黏膜的粘附;母體IgG通過胎盤傳給胎兒,6個月內(nèi)嬰兒極少患流行性腦膜炎。（二）致病性與免疫性1.標本3.分離培養(yǎng)與鑒定腦脊液,血液,出血點滲出液,鼻咽拭子;保暖,保濕,立即送檢,培養(yǎng)基預溫。2.直接涂片鏡檢中性粒細胞內(nèi),外有革蘭陰性雙球菌,可作出初步診斷。巧克力培養(yǎng)基4.快速診斷對流免疫電泳,SPA協(xié)同凝集試驗（三）微生物學檢查法預防：兒童注射流腦莢膜多糖疫苗; 2價或4價混合多糖疫苗。治療：青霉素G,大劑量靜脈給藥。（四）防治原則二、淋病奈瑟菌N. gonorrhoeaeCABG雙球菌,似一對咖啡豆。有菌毛,有莢膜。專性需氧,巧克力血瓊脂平板2.培