實驗室操作安全

1、實驗室操作安全 微生物安全等級 實驗室工作區(qū)域 人員防護 實驗操作 廢棄物 儀器 污染清除 緊急事件及處理 化學(xué)品 其它內(nèi)容來源于實驗室安全手冊等，特此注明。微生物安全等級White list請至DSMZ查詢歷史證據(jù)表明，在一級生物安全水平操作的微生物不太可能引起人類疾病或獸醫(yī)學(xué)意義的動物疾病。但理想的做法是，所有實驗室工作人員應(yīng)進(jìn)行上崗前的體檢，并記錄其病史。疾病和實驗室意外事故應(yīng)迅速報告，所有工作人員都應(yīng)意識到應(yīng)用規(guī)范的實驗室操作技術(shù)的重要性。實驗室工作區(qū)域進(jìn)入規(guī)定1、只有經(jīng)批準(zhǔn)的人員方可進(jìn)入實驗室工作區(qū)域。2、實驗室的門應(yīng)保持關(guān)閉。3、兒童不應(yīng)被批準(zhǔn)或允許進(jìn)入實驗室工作區(qū)域。4、與實驗室

2、工作無關(guān)的動物不得帶入實驗室。工作區(qū)1、實驗室應(yīng)保持清潔整齊，嚴(yán)禁擺放和實驗無關(guān)的物品。2、發(fā)生具有潛在危害性的材料溢出以及在每天工作結(jié)束之后，都必須清除工作臺面的污染。3、所有受到污染的材料、標(biāo)本和培養(yǎng)物在廢棄或清潔再利用之前，必須清除污染。4、在進(jìn)行包裝和運輸時必須遵循國家和或國際的相關(guān)規(guī)定。5、如果窗戶可以打開，則應(yīng)安裝防止節(jié)肢動物進(jìn)入的紗窗。人員防護1、在實驗室工作時，任何時候都必須穿著實驗服。2、在進(jìn)行可能直接或意外接觸到血液、體液以及其他具有潛在感染性的材料或感染性動物的操作時，應(yīng)戴上合適的手套。手套用完后，應(yīng)先消毒再摘除，隨后必須洗手。3、在處理完感染性實驗材料和動物后，以及在離

3、開實驗室工作區(qū)域前，都必須洗手。4、為了防止眼睛或面部受到潑濺物、碰撞物或人工紫外線輻射的傷害，必須戴安全眼鏡、面罩（面具）或其他防護設(shè)備。5、嚴(yán)禁穿著實驗室防護服離開實驗室，（如去餐廳、咖啡廳、辦公室、圖書館、員工休息室和衛(wèi)生間）。6、不得在實驗室內(nèi)穿露腳趾的鞋子。7、禁止在實驗室工作區(qū)域進(jìn)食、飲水、吸煙、化妝和處理隱形眼鏡。8、禁止在實驗室工作區(qū)域儲存食品和飲料。9、在實驗室內(nèi)用過的防護服不得和日常服裝放在同一柜子內(nèi)。實驗操作操作規(guī)范1、嚴(yán)禁用口吸移液管。2、嚴(yán)禁將實驗材料置于口內(nèi)。嚴(yán)禁舔標(biāo)簽。3、應(yīng)限制使用皮下注射針頭和注射器。皮下注射針頭和注射器不能用于替代移液管或用作其他用途。4、出

4、現(xiàn)溢出、事故以及明顯或可能暴露于感染性物質(zhì)時，必須向?qū)嶒炇抑鞴軋蟾?。實驗室?yīng)保存這些事件或事故的書面報告。5、必須制訂關(guān)于如何處理溢出物的書面操作程序，并予以遵守執(zhí)行。6、污染的液體在排放到生活污水管道以前必須清除污染（采用化學(xué)或物理學(xué)方法）。7、需要帶出實驗室的手寫文件必須保證在實驗室內(nèi)沒有受到污染。溴化乙錠：1、每次實驗操作后，手要勤沖洗，但不可用洗手液等，以免再次操作時更容易危害人體，直到實驗全部結(jié)束后方可用洗手液等來清洗。2、要注意通風(fēng)，因為EB遇熱易分解、揮發(fā)，應(yīng)避免吸入，3、冰箱、微波爐的外部、雙控電泳儀、水池的擰手，電泳圖像分析系統(tǒng)外部和電腦為無污染區(qū)，請勿帶手套操作。4、非污染

5、區(qū)里，請勿放置任何已被污染的器材，被污染的器材不得拿出污染區(qū)。5、 做完實驗，所有的東西放回原位，帶走自己的東西以免被污染或誤用6、 污染的手套放到指定的垃圾袋中，用過的槍頭放入專門的燒杯中，回收的凝膠放入指定的容器紫外燈：1、無菌操作臺開啟紫外燈后需將防紫外燈玻璃放下。2、紫外燈有異常情況應(yīng)及時反映給車間，必要時進(jìn)行更換?？股兀和寤义V廢棄物在實驗室內(nèi)，廢棄物最終的處理方式與其污染被清除的情況是緊密相關(guān)的。對于日常用品而言，很少有污染材料需要真正清除出實驗室或銷毀。大多數(shù)的玻璃器皿、儀器以及實驗服都可以重復(fù)或再使用。有害廢棄物品將按照南京農(nóng)業(yè)大學(xué)危化品處理辦法由南京農(nóng)業(yè)大學(xué)?；诽幚聿块T

6、集中送往有資質(zhì)的專門公司進(jìn)行處理。儀器離心機的使用1、在使用實驗室離心機時，儀器良好的機械性能是保障微生物安全的前提條件。2、應(yīng)按照操作手冊來操作離心機。3、離心機放置的高度應(yīng)當(dāng)使小個子工作人員也能夠看到離心機內(nèi)部，以正確放置十字軸和離心桶。4、離心管和盛放離心標(biāo)本的容器應(yīng)當(dāng)由厚壁玻璃制成，或最好為塑料制品，并且在使用前應(yīng)檢查是否破損。5、用于離心的試管和標(biāo)本容器應(yīng)當(dāng)始終牢固蓋緊（最好使用螺旋蓋）。6、離心桶的裝載、平衡、密封和打開必須在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。7、離心桶和十字軸應(yīng)按重量配對，并在裝載離心管后正確平衡。8、操作指南中應(yīng)給出液面距離心管管口需要留出的空間大小。9、空離心桶應(yīng)當(dāng)用蒸餾水或

7、乙醇（異丙醇，70）來平衡。鹽溶液或次氯酸鹽溶液對金屬具有腐蝕作用，因此不能使用。10、當(dāng)使用固定角離心轉(zhuǎn)子時，必須小心不能將離心管裝得過滿，否則會導(dǎo)致漏液。11、應(yīng)當(dāng)每天檢查離心機內(nèi)轉(zhuǎn)子部位的腔壁是否被污染或弄臟。如污染明顯，應(yīng)重新評估離心操作規(guī)范。12、應(yīng)當(dāng)每天檢查離心轉(zhuǎn)子和離心桶是否有腐蝕或細(xì)微裂痕。13、每次使用后，要清除離心桶、轉(zhuǎn)子和離心機腔的污染。14、使用后應(yīng)當(dāng)將離心桶倒置存放使平衡液流干。玻璃器皿和“銳器”1、盡可能用塑料制品代替玻璃制品。只能用實驗室級別（硼硅酸鹽）的玻璃，任何破碎或有裂痕的玻璃制品均應(yīng)丟棄。污染清除清除污染建議使用次氯酸鹽和高級別的消毒劑來清除污染。一般情況

8、可使用新鮮配制的含有效氯1g/L的次氯酸鹽溶液。戊二醛可以用于清除表面污染。實驗室材料的清潔清潔方法包括刷、吸、干擦、洗滌或用浸泡肥皂水或清潔劑的濕墩布拖擦。塵土、污物以及有機物是微生物的棲身之所，并可能影響除污染劑（抗菌劑、化學(xué)殺菌劑以及消毒劑）的殺菌作用。必須通過預(yù)清潔才能實現(xiàn)消毒和滅菌的目的。預(yù)清潔時必須小心，以避免暴露于感染性物質(zhì)。預(yù)清潔時必須使用與以后使用的殺菌劑化學(xué)上相容的物質(zhì)。非常普遍的是采用相同的化學(xué)殺菌劑進(jìn)行預(yù)清潔和消毒。乙醇（C2H5OH）和異丙醇（CH3）2CHOH具有相似的滅菌特性。它們對于繁殖的細(xì)菌、真菌和含脂病毒具有活性。其水溶液最有效的使用濃度約為70（v/v）；

9、更高或更低的濃度均不適宜殺菌。醇類溶液的主要優(yōu)點是處理后物品不會留下任何殘留物。將乙醇與其他試劑混合使用比單獨使用更有效，如70（v/v）乙醇和100 g/L 的甲醛混合使用，以及使用含有2 g/L 有效氯的乙醇。70%（v/v）乙醇溶液可以用于消毒皮膚、實驗臺和生物安全柜的工作臺面，以及浸泡小的外科手術(shù)器械。由于乙醇可以使皮膚干燥，所以經(jīng)常與潤滑劑混合使用。在不便于或不可能進(jìn)行徹底洗手的情況下，推薦使用含乙醇的擦手液對輕度污染的手進(jìn)行消毒。但是必須記住，乙醇對孢子無效，而且不能殺死所有類型的非含脂類病毒。乙醇是易揮發(fā)和易燃的，不能在明火附近使用。其工作液應(yīng)儲存在適當(dāng)?shù)娜萜鲀?nèi)以避免醇類揮發(fā)。乙

10、醇可以硬化橡膠并溶解某些膠質(zhì)。為了避免乙醇用于其他非滅菌目的，在實驗室里對乙醇進(jìn)行專門的清點和儲存是非常重要的。含有乙醇溶液的瓶子必須清楚標(biāo)記。緊急事件及處理刺傷、切割傷或擦傷受傷人員應(yīng)當(dāng)脫下防護服，清洗雙手和受傷部位，使用適當(dāng)?shù)钠つw消毒劑，必要時進(jìn)行醫(yī)學(xué)處理。要記錄受傷原因和相關(guān)的微生物，并應(yīng)保留完整適當(dāng)?shù)尼t(yī)療記錄。潛在感染性物質(zhì)的食入應(yīng)脫下受害人的防護服并進(jìn)行醫(yī)學(xué)處理。要報告食入材料的鑒定和事故發(fā)生的細(xì)節(jié)，并保留完整適當(dāng)?shù)尼t(yī)療記錄。容器破碎及感染性物質(zhì)的溢出應(yīng)當(dāng)立即用布或紙巾覆蓋受感染性物質(zhì)污染或受感染性物質(zhì)溢灑的破碎物品。然后在上面倒上消毒劑，并使其作用適當(dāng)時間。然后將布、紙巾以及破碎物

11、品清理掉；玻璃碎片應(yīng)用鑷子清理。然后再用消毒劑擦拭污染區(qū)域。如果用簸箕清理破碎物，應(yīng)當(dāng)對他們進(jìn)行高壓滅菌或放在有效的消毒液內(nèi)浸泡。用于清理的布、紙巾和抹布等應(yīng)當(dāng)放在盛放污染性廢棄物的容器內(nèi)。在所有這些操作過程中都應(yīng)戴手套。如果實驗表格或其他打印或手寫材料被污染，應(yīng)將這些信息復(fù)制，并將原件置于盛放污染性廢棄物的容器內(nèi)?；馂?zāi)和自然災(zāi)害在制定的應(yīng)急預(yù)案中應(yīng)包括消防人員和其他服務(wù)人員。應(yīng)事先告知他們哪些房間有潛在的感染性物質(zhì)。要安排這些人員參觀實驗室，讓他們熟悉實驗室的布局和設(shè)備，這都是十分有益的。發(fā)生自然災(zāi)害時，應(yīng)就實驗室建筑內(nèi)和附近建筑物的潛在危險向當(dāng)?shù)鼗驀揖o急救助人員提出警告。只有在受過訓(xùn)練的

12、實驗室工作人員的陪同下，他們才能進(jìn)入這些地區(qū)。感染性物質(zhì)應(yīng)收集在防漏的盒子內(nèi)或結(jié)實的一次性袋子中。由生物安全人員依據(jù)當(dāng)?shù)氐囊?guī)定決定繼續(xù)利用或是最終丟棄。急救裝備必須配備以下緊急裝備：1、急救箱，包括常用的和特殊的解毒劑2、合適的滅火器和滅火毯 化學(xué)品化學(xué)品的儲存實驗室應(yīng)該只保存滿足日常使用量的化學(xué)品。大量的化學(xué)品應(yīng)儲存在專門指定的房間或建筑物內(nèi)?；瘜W(xué)品不應(yīng)按字母順序存放?；瘜W(xué)品溢出應(yīng)該將化學(xué)品溢出處理示意圖張貼在實驗室中顯著的位置，并應(yīng)配備下列物品1、化學(xué)品溢出處理工具盒（可在公司買到）2、防護服，例如耐用橡膠手套、套鞋或橡膠靴、防毒面具3、鏟子和簸箕4、用于夾取碎玻璃的鑷子5、拖把、擦拭用的

13、布和紙6、桶7、用于中和酸及腐蝕性化學(xué)品的蘇打（碳酸鈉，Na2CO3）或碳酸氫鈉（NaHCO3）8、沙子（用于覆蓋堿性溢出物）9、不可燃的清潔劑?；瘜W(xué)品使用所有未使用過的新化學(xué)品需經(jīng)老師或相關(guān)人員指導(dǎo)后使用其它火的危害實驗室安全官員與地方消防官員之間的緊密合作是極為必要的。除了化學(xué)危害以外，也必須考慮火對感染性物質(zhì)播散的可能影響。這將可能決定滅火或控制火災(zāi)何為最佳。最好由地方消防官員協(xié)助對實驗室成員進(jìn)行火災(zāi)發(fā)生時的應(yīng)急行動和如何使用消防器材等方面的消防培訓(xùn)。在每個房間、走廊以及過道中應(yīng)設(shè)置顯著的火警標(biāo)志、說明以及緊急通道標(biāo)志。在實驗室中引起火災(zāi)的通常原因包括：1、超負(fù)荷用電2、電器保養(yǎng)不良，例如電纜的絕緣層破舊或損壞3、供氣管或電線過長4、儀器設(shè)備在不使用時未關(guān)閉電源5、使用不是專為實驗室環(huán)境設(shè)計的儀器設(shè)備6、明火7、供氣管老化銹蝕 8、易燃、易爆品處理、保存不當(dāng)9、不相容化學(xué)品沒有正確隔離10、在易燃物品和蒸氣附近有能產(chǎn)生火花的設(shè)備11、通風(fēng)系統(tǒng)不當(dāng)或不充分。消防器材應(yīng)放置在靠近實驗室的門邊，以及走廊和過道的適當(dāng)位置。這些器材應(yīng)包括軟管、桶（用于裝水和沙子）以及滅火器。滅火器要定期進(jìn)行檢查和維護，使其維持在有效期內(nèi)電的危害對所有電器設(shè)備都必須定期進(jìn)行檢查和測試，包括接地系統(tǒng)。在實驗室電路中要配置斷路器和漏電保護器。斷路