小柴胡湯抗腫瘤作用的實驗研究進展

1、小柴胡湯抗腫瘤作用的實驗研究進展【摘要】經(jīng)過對相關文獻的回憶分析，旨在對經(jīng)典方劑挖掘發(fā)揮，研究小柴胡湯的抗癌效果，并討論其作用機制，從而為臨床應用提供科學的理論根據(jù)。【關鍵詞】小柴胡湯；腫瘤；實驗研究；綜述小柴胡湯出自東漢張仲景的?傷寒雜病論?，是中醫(yī)和解少陽的著名代表方。近十多年來，該方的臨床應用范圍不斷擴大，尤其在治療腫瘤方面，有報道1-2該方治療肝癌、乳腺癌、宮頸癌、胰腺癌、胃癌等獲得了很好的療效。國內(nèi)外學者對該方的抗腫瘤作用也進展了大量的實驗研究,筆者就近年來的研究進展綜述如下。1小柴胡湯的免疫調(diào)節(jié)作用機體的免疫功能狀態(tài)與腫瘤的發(fā)生、開展及預后有親密關系。一旦腫瘤發(fā)生，只有不斷地調(diào)節(jié)免

2、疫，充分發(fā)揮機體自身抗腫瘤的才能，控制轉(zhuǎn)移和復發(fā)，使癌細胞逐漸向正常細胞發(fā)生逆轉(zhuǎn)，腫瘤患者才能逐漸走向康復3。1.1對自然殺傷細胞的影響自然殺傷(NK)細胞是一種重要的免疫細胞，它作為一類獨立的淋巴細胞群，無需抗原預先致敏即可直接殺傷靶細胞，因此被視為機體免疫防御系統(tǒng)的第一道防線4。黎雅婷等5用不同濃度的復方小柴胡湯對艾氏腹水癌EA荷瘤小鼠灌胃10d，結(jié)果檢測各濃度組NK細胞的活性與空白對照組比擬顯著升高(P0.05)。孫艷等6實驗證明小柴胡湯組的NK細胞活性顯著高于荷瘤對照組(P0.05)。陶金成等7研究發(fā)現(xiàn)小柴胡湯提取物抑制S180瘤細胞生長的機理與其誘導腸管黏膜免疫系統(tǒng)T細胞及NK細胞有

3、關。另有試驗說明小柴胡湯可能是通過增強NK細胞活性、進步TNF|和IL|2程度來發(fā)揮抑瘤作用的8。惡性腫瘤患者常有免疫力低下現(xiàn)象,而放射治療由于通過抑制干擾素,降低了NK細胞活性,影響其療效。有實驗證明小柴胡湯有增加放療后NK細胞活性的作用，同時也具有解除或緩解荷瘤小鼠的免疫抑制和放療對機體的免疫抑制作用,增強抗腫瘤效果9。1.2對腫瘤壞死因子的影響研究說明，腫瘤壞死因子-(TNF|)是迄今為止所發(fā)現(xiàn)的直接抑制和殺傷腫瘤細胞作用最強的細胞因子，且有不損傷正常細胞的功能10。屢次實驗證實小柴胡湯在體外的作用可能和脂多糖LPS的作用一樣,即為激活單核-巨噬細胞,穩(wěn)定地誘導TNF|產(chǎn)生。某體外實驗采

4、用LPS作為對照藥,結(jié)果顯示小柴胡湯和LPS具有同樣的誘導外周血單核細胞產(chǎn)生TNF|的作用，而且TNF|的產(chǎn)生量呈濃度依賴性增加11。周真12認為小柴胡湯的抗肝癌作用與其可以誘導TNF|的產(chǎn)生可能有著親密關系。其實驗得出不同濃度的小柴胡湯對安康成人單核細胞的TNF|產(chǎn)生量均有促進作用,且與濃度呈正相關關系。但對于小柴胡湯的濃度與TNF|產(chǎn)生量的關系的看法也有不一致的報道。茅敏等13-14認為小柴胡湯孝中劑量組誘導Sl80荷瘤鼠單核細胞產(chǎn)生TNF|的作用較大劑量組明顯，說明在量效關系上，呈現(xiàn)負相關趨勢。他們認為負相關趨勢的產(chǎn)生可能是因為隨著小柴胡湯劑量的增大，除治療的有效成分外，其他非治療目的的

5、成分亦顯示出作用，從而削弱了治療有效成分的作用。因此對于小柴胡湯劑量的應用問題，我們還需要在今后的臨床與實驗中繼續(xù)探究。1.3對白細胞介素-2的影響國內(nèi)外研究說明：白細胞介素-2(IL|2)對腫瘤細胞無直接的細胞毒性作用，主要通過調(diào)節(jié)機體的免疫系統(tǒng)發(fā)揮抗腫瘤效應10。方樂堃等15實驗顯示不同濃度的復方小柴胡湯均可顯著進步EA荷瘤小鼠脾細胞IL|2的程度和血D+4/D+8比值(P0.05)。環(huán)磷酰胺是細胞毒性化療藥物，在殺傷瘤細胞的同時也會損害機體免疫細胞，造成機體免疫功能低下16。小柴胡湯有對化療藥物的減毒增效作用，它能改善環(huán)磷酰胺所抑制的小鼠免疫功能，促進淋巴細胞轉(zhuǎn)化，明顯進步環(huán)磷酰胺造成的

6、吞噬率及吞噬指數(shù)，進步D+4/D+8比值及IL|2的程度17。2小柴胡湯的直接抑制腫瘤作用2.1對抑瘤率的影響張豐華等18通過體內(nèi)實驗得出小柴胡湯中、小劑量有明顯的抑瘤作用(P0.05),且在量效關系上呈負相關。用小柴胡湯結(jié)合20Gy照射Leis荷瘤小鼠，抑瘤率高達67%；光鏡下觀察該組腫瘤壞死、出血、癌細胞退變、毛細血管增生、炎性細胞浸潤及不完全壞死的程度顯著優(yōu)于其他各組19。另有實驗結(jié)果顯示小柴胡湯中、小劑量組抑瘤作用明顯,且各劑量組均無引起荷瘤鼠體質(zhì)量下降的趨勢,提示小柴胡湯可能是一種低毒的抗癌中藥方劑20。體外實驗中張巍等21應用以小柴胡湯為底方的肺積寧方治療肺癌，隨著該方藥物濃度的增

7、大，對人肺腺癌A549細胞生長的抑制率也逐漸增加。國外一些體內(nèi)動物實驗也證明小柴胡湯具有劑量依賴性抑制癌變的作用。神代正道實驗結(jié)果說明，正常的肝細胞在小柴胡湯濃度很高時也不會完全死亡，而肝癌和膽管細胞癌培養(yǎng)細胞那么隨小柴胡湯濃度增高不斷死亡，癌細胞的存活率明顯降低22。LiuL等23證明長期口服小柴胡湯可抑制乳頭狀瘤的發(fā)病與生長。2.2去除活性氧的作用日本學者汐田剛史24通過測定8-羥基-脫氧鳥苷(8|HdG)來推算出癌變的可能性，報道了小柴胡湯有劑量依賴性去除H作用。實驗給予大鼠小柴胡湯后，檢測到8|HdG產(chǎn)生減少，由此可說明小柴胡湯抑制癌變作用的新機理。2.3對細胞凋亡、細胞周期的影響細胞

8、凋亡受阻是腫瘤發(fā)病的重要機制之一,故誘導腫瘤細胞的凋亡成為腫瘤治療研究中的主要目的與手段25。此外，細胞周期調(diào)控異常與細胞癌變也親密相關。茅敏等20通過體內(nèi)實驗得出小柴胡湯抗腫瘤的作用機制可能與其誘導腫瘤細胞凋亡有關；另一重要作用機制是影響腫瘤細胞周期,使癌細胞阻滯于細胞周期的G0/G1期,從而進入S期，即DNA合成期的細胞數(shù)減少,造成其增殖指數(shù)降低,從而在一定程度上控制了腫瘤的增殖。體外實驗觀察結(jié)果說明，4個濃度的肺積寧劑量組的細胞凋亡率均高于正常對照組，相比有統(tǒng)計意義(P0.05)21。劉應柯等26證明加味小柴胡湯大劑量可增強順鉑誘導的肝癌細胞凋亡,凋亡率為58%，而小劑量那么不甚明顯，凋

9、亡率為53%，而且還通過實驗證明小柴胡湯大、小劑量組的抑癌基因Rb、aspase|3、Bax、p53掃描值均升高,抑凋亡基因Bl|2、p53值均降低。2.4對血管生成的影響實體瘤在未有新生血管長入時,其直徑大小不超過12，一旦腫瘤內(nèi)出現(xiàn)新生毛細血管并獲得進一步生長的才能，腫瘤即迅速生長并發(fā)生轉(zhuǎn)移。血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)在血管生成中的作用是最重要的，它在幾乎所有的人體腫瘤和腫瘤細胞株中皆有過度表達27。張豐華等18檢測瘤細胞懸液微血管密度(VD)和VEGF，得出小柴胡湯3個劑量組對于VEGF都有顯著抑制作用(P0.05)，且在量效關系上呈負相關趨勢，有較明顯的劑量依賴性。體外實驗中，張

10、巍21用ELISA法檢測人肺腺癌A549細胞上清液中VEGF含量變化，顯示隨著肺積寧方濃度的增大，VEGF的表達均下降，與對照組相比，有高度統(tǒng)計意義(P0.01)。3小柴胡湯預防腫瘤的作用沖田極氏28給大鼠投予化學致癌劑后發(fā)現(xiàn),小柴胡湯治療組大鼠肝細胞未發(fā)現(xiàn)癌變,癌前病變增生性結(jié)節(jié)的形成也受到抑制。岡博子氏22通過動物實驗也證明了小柴胡湯可以抑制肝硬化向癌變轉(zhuǎn)化。綜上所述，國內(nèi)外學者采用不同的方法，從不同的角度在小柴胡湯抗腫瘤作用方面做了大量的實驗研究工作，并獲得了可喜的成績。但是在小柴胡湯的量效關系問題上，還有很多分歧意見，考慮這與小柴胡湯的用量未統(tǒng)一標準、設定上下濃度組用量的個性化有關。另

11、外，在小柴胡湯抗腫瘤作用的實驗中，基因表達方面的報道較少。因此,對小柴胡湯用量標準化的討論以及更深化的抗腫瘤機制研究將是今后工作的一個重點，有待進一步深化研究，以便更好地為臨床效勞。相信隨著中醫(yī)藥現(xiàn)代化進程的開展，對小柴胡湯抗腫瘤作用的實驗研究會獲得本質(zhì)性的進展。【參考文獻】1邢向榮,殷東風.運用柴胡劑從肝論治進步惡性腫瘤患者生存質(zhì)量的臨床分析.第十屆全國中西醫(yī)結(jié)合腫瘤學術大會，2022:320-325.2胡淑全.用小柴胡湯加味治療胰腺癌的體會J.四川中醫(yī),2022,25(7):44-45.3HayakaaY，SythJ.Innateiuneregnitinandsuppressinfturs

12、J.AdvanerRes，2022,95:293-322.4龔非力.醫(yī)學免疫學.第2版.北京:科學出版社,2000:270-2725黎雅婷,方樂堃,潘凌霄,等.復方小柴胡湯對荷瘤小鼠NK細胞功能的影響J.廣東醫(yī)學,2022,28(6):858-859.6孫艷,胡芳,王琪.小柴胡湯對化療荷瘤小鼠免疫功能的影響J.醫(yī)學研究雜志，2022,35(10):47-48.7陶金成,陳振德.小柴胡湯對荷瘤小鼠腸粘膜T細胞及NK細胞的誘導J.中藥藥理與臨床,2022,20(2):3-4.8胡芳,劉伯陽,姚淑娟.小柴胡湯對荷瘤小鼠免疫功能的影響J.藥物研究,2022,12(4):42-43.9白雅珍,吳榮,張銀

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14、,張豐華,茅敏,等.小柴胡湯對S180荷瘤小鼠紅細胞免疫功能的實驗研究J成都中醫(yī)藥大學學報,2022,26(3):9.15方樂堃,潘凌霄,黎雅婷,等.復方小柴胡湯對荷EA鼠IL|2程度和D+4/D+8比值的影響J.中國病理生理雜志,2022,23(9):1720-1723.16劉彥平.枸杞多糖對小鼠NK細胞和白細胞活性的免疫調(diào)節(jié)作用J.青海醫(yī)學院學報,2001,1(1):2.17連志勇.小柴胡湯對環(huán)磷酰胺免疫功能低下小鼠細胞免疫調(diào)節(jié)作用的實驗研究D.沈陽：遼寧中醫(yī)學院，2002.18張豐華,黃秀深,牛朝陽,等.小柴胡湯對S180荷瘤小鼠腫瘤血管生成的影響J.中醫(yī)藥學刊,2022,22(2):2

15、69-270.19白雅珍,吳榮,張銀娟,等.小柴胡湯合并放療對57BL荷瘤小鼠的實驗研究J.實用腫瘤學雜志,2001,15(3):177-178.20茅敏,付虹,黃秀深,等.小柴胡湯誘導荷瘤小鼠S180細胞凋亡及對細胞周期的影響J.現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2022,14(20):2646-2648.21張巍,殷東風.肺積寧方誘導人肺腺癌A549細胞凋亡及下調(diào)VEGF表達的實驗研究J.實用腫瘤學雜志,2022,21(4):330-335.22金航.小柴胡湯預防肝癌的研究J.國外醫(yī)學中醫(yī)中藥分冊,1999,21(1):21-22.23LiuL,SakatS,NakayaaT.Suppressinbykapediine,sh|saik|t,npapillasinduedby7,12|diethylbenz(a)anthraeneinieJ.AerianJurnalfhineseediine，1994,22(3-4):267-274.24汐田剛史.小柴胡湯抑制癌變作