動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體(6)

1、關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體 (6)第一張，PPT共三十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月(1)(1)(2)(3)(4)(5)回顧：植物體細(xì)胞雜交過程示意圖第二張，PPT共三十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月A細(xì)胞B細(xì)胞人工誘導(dǎo)雜交細(xì)胞 動(dòng)物細(xì)胞融合（也稱細(xì)胞雜交）：是指兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞融合形成一個(gè)單核細(xì)胞的過程。一、動(dòng)物細(xì)胞融合概念第三張，PPT共三十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月細(xì)胞膜的流動(dòng)性滅活的病毒、PEG、電激等融合后的細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂，形成完整的雜交細(xì)胞2、誘導(dǎo)的手段？3、融合后細(xì)胞的類型？4、AB雜種細(xì)胞遺傳物質(zhì)有什么特點(diǎn)？三種AA、AB、BB含兩種生物的遺傳物質(zhì)動(dòng)物細(xì)胞融合過程1、原理？第四張，PPT共

2、三十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的意義和應(yīng)用第五張，PPT共三十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月比較動(dòng)、植物細(xì)胞雜交技術(shù)第六張，PPT共三十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月【例1】能使動(dòng)物細(xì)胞融合的特有的誘導(dǎo)因子是 （ ）A.離心 B.滅活的病毒 C.電刺激 D.振動(dòng)【例2】融合后的雜交細(xì)胞的遺傳物質(zhì)有何特點(diǎn)（ ）具有原來兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞的遺傳信息 B.能無限增殖 C.可形成新個(gè)體 D.培養(yǎng)過程會(huì)貼壁【例3】動(dòng)物細(xì)胞融合的作用中最重要的是（ ）A.克服遠(yuǎn)源雜交不親和 B.制備單克隆抗體 C.培育新物種 D.生產(chǎn)雜種細(xì)胞 BB初試牛刀A第七張，PPT共三十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月抗體：能夠與抗原發(fā)生特

3、異性結(jié)合的免疫球蛋白。能產(chǎn)生抗體的細(xì)胞是漿細(xì)胞（即效應(yīng)B細(xì)胞）。溫故知新二、單克隆抗體強(qiáng)調(diào)：效應(yīng)B淋巴細(xì)胞是能夠產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞，下文將其簡(jiǎn)稱為B淋巴細(xì)胞第八張，PPT共三十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月抗體的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法抗原 反復(fù)注射動(dòng)物從動(dòng)物的血清中分離抗體該法制備抗體的缺點(diǎn)：產(chǎn)量低、純度低，且抗體的特異性差、靈敏度低。如何解決這個(gè)問題呢？單克隆抗體！第九張，PPT共三十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月讀下面一段資料，找出單克隆抗體的概念 人們發(fā)現(xiàn)，在動(dòng)物發(fā)生免疫反應(yīng)的過程中，體內(nèi)的B細(xì)胞可以產(chǎn)生多達(dá)百萬種以上的特異性抗體，但是每個(gè)B細(xì)胞只分泌一種化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體。要想獲得大量的單一抗體

4、，必須用單個(gè)B細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖，即克隆。單克隆抗體的概念單克隆抗體：?jiǎn)蝹€(gè)B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的單一、特異性強(qiáng)的抗體問題：如何大量生產(chǎn)單克隆抗體？請(qǐng)嘗試設(shè)計(jì)一個(gè)方案。第十張，PPT共三十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體 骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖雜交瘤細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)設(shè)計(jì)方案：動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)單克隆抗體 既能產(chǎn)生特異性抗體， 又能大量增殖的細(xì)胞1975年英國(guó)科學(xué)家米爾斯坦和柯勒的實(shí)驗(yàn)第十一張，PPT共三十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月BB 、B瘤 、瘤瘤 （一選）選擇性培養(yǎng)基：只有雜交瘤細(xì)胞才能存活獲得產(chǎn)生相應(yīng)抗體的B細(xì)胞（二選）：選能產(chǎn)生所需專一抗體的雜交瘤細(xì)胞體外培養(yǎng)小鼠腹腔內(nèi)培

5、養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞特點(diǎn)：既能產(chǎn)生特異性抗體，又能大量增殖。第十二張，PPT共三十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月雜交 細(xì)胞滅活的病毒等手段培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞B淋巴細(xì)胞經(jīng)免疫的小鼠雜交瘤細(xì)胞第一次篩選用特定的選擇性培養(yǎng)基第二次篩選能產(chǎn)生特定抗體、培養(yǎng)條件下能無限增殖的雜交瘤細(xì)胞體外培養(yǎng)注射到小鼠腹腔提取單克隆抗體第十三張，PPT共三十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月單克隆抗體的應(yīng)用：1、診斷試劑最廣泛應(yīng)用準(zhǔn)確、高效、簡(jiǎn)易、快速單克隆抗體最主要的優(yōu)點(diǎn)： 特異性強(qiáng)，靈敏度高，并能大量制備。第十四張，PPT共三十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月“生物導(dǎo)彈” 單克隆抗體藥物 單抗導(dǎo)向，藥物為彈頭2、治療疾病和運(yùn)載藥物 主要用于治療癌癥治

6、療，單克隆抗體作為載體，運(yùn)載抗癌藥物，形成“生物導(dǎo)彈”，準(zhǔn)確殺傷癌變細(xì)胞。第十五張，PPT共三十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月兩個(gè)過程動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程單克隆抗體制備過程三個(gè)“一”一個(gè)誘導(dǎo)細(xì)胞融合的新方法 滅活病毒一個(gè)新細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞一個(gè)優(yōu)勢(shì)單克隆抗體特異性 強(qiáng)、靈敏度高的優(yōu)勢(shì)本節(jié)小結(jié)重點(diǎn)第十六張，PPT共三十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月【例4】科學(xué)家用小鼠骨髓瘤細(xì)胞與某種細(xì)胞融合，得到雜交細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細(xì)胞融合的是（ ）A.經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞 C.經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞B.不經(jīng)過免疫的T淋巴細(xì)胞 D.不經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞【例5】單克隆抗體是由下列哪種細(xì)胞產(chǎn)生的 （ ）B淋

7、巴細(xì)胞 BT淋巴細(xì)胞 C骨髓瘤細(xì)胞 D雜交瘤細(xì)胞A初試牛刀D第十七張，PPT共三十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月【例6】用動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)獲取單克隆抗體，下列實(shí)驗(yàn)步驟中錯(cuò)誤的是（ ）A將抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞B用纖維素酶處理B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞C用聚乙二醇作誘導(dǎo)劑，促使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合D篩選雜交細(xì)胞，并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞群，培養(yǎng)后提取單克隆抗體B初試牛刀第十八張，PPT共三十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月謝謝第十九張，PPT共三十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月 2002年12月30日， 兩場(chǎng)籌備了10年的“太空婚禮”首次在神舟四號(hào)飛船上舉行，植物細(xì)

8、胞“新人”黃花煙草和革新一號(hào)煙草葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體，動(dòng)物細(xì)胞“新人”是小鼠B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞，兩批新人同時(shí)在 “產(chǎn)房”電融合儀內(nèi)孕育新生命?！疤栈槎Y”這兩場(chǎng)“太空婚禮”實(shí)質(zhì)是哪兩項(xiàng)細(xì)胞工程技術(shù)植物體細(xì)胞雜交技術(shù)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)第二十張，PPT共三十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月閱讀課本P52及識(shí)圖2-23第二十一張，PPT共三十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月(1)若A細(xì)胞是小鼠骨髓瘤細(xì)胞，則B細(xì)胞是取自小鼠體內(nèi)的 細(xì)胞，從小鼠體內(nèi)提取分離該細(xì)胞之前，應(yīng)給小鼠注射_類物質(zhì)。（2）d過程是一個(gè)_過程，該過程的進(jìn)行常用_或_的誘導(dǎo)。(3)假設(shè)僅考慮某兩個(gè)細(xì)胞的融合，則可形成 種類型的C細(xì)胞，因此需用_培養(yǎng)基

9、篩選出D細(xì)胞用于培養(yǎng)，D細(xì)胞的名稱是 ，其特點(diǎn)是_。效應(yīng)B 抗原 細(xì)胞融合 聚乙二醇 滅活的病毒 選擇性 3既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體 雜交瘤細(xì)胞第二十二張，PPT共三十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月(4)在培養(yǎng)時(shí)通過_分裂方式大量繁殖。D細(xì)胞體外培養(yǎng)需要注意的條件是（要求答5項(xiàng)）_。（5）單克隆抗體在疾病的診斷、治療和預(yù)防方面，與常規(guī)抗體相比，其特點(diǎn)是_。特異性強(qiáng)、靈敏度高 有絲無菌、無毒的環(huán)境；充足的營(yíng)養(yǎng)；適宜的溫度和pH；適宜的氣體環(huán)境 第二十三張，PPT共三十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月15、（1）單克隆抗體是指 。（2）制備單克隆抗體的步驟：將_注入小鼠體內(nèi)，從小鼠脾臟中獲得淋巴細(xì)胞，其中

10、至少1個(gè)淋巴細(xì)胞帶有抗該抗原的抗體。將步驟獲得的B淋巴細(xì)胞與步驟培養(yǎng)的骨髓瘤細(xì)胞在_的誘導(dǎo)下融合。將誘導(dǎo)后產(chǎn)生的多種細(xì)胞，放在_培養(yǎng)基的多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)，篩選。這樣獲得的雜交瘤細(xì)胞既具有B淋巴細(xì)胞_的能力，又具有_的本領(lǐng)。檢測(cè)和分離帶有抗X抗體的陽性細(xì)胞，培養(yǎng)板中每孔放一個(gè)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。將陽性細(xì)胞進(jìn)行增殖，從而制備出大量抗該抗原的單克隆抗體。化學(xué)性質(zhì)單一，特異性強(qiáng)的抗體 抗原 聚乙二醇選擇性 無限增殖 產(chǎn)生專一抗體第二十四張，PPT共三十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月（3）大量制備單克隆抗體的方法主要有兩種：體外培養(yǎng)法，可獲得10g/mL的抗體；動(dòng)物體內(nèi)誘生法可獲得520mg/mL的抗體。你選擇的方法及原因是 。（4）用本法制備出的單克隆抗體仍具有局限性，因?yàn)樗怯眯∈蟮腳細(xì)胞制備的，其化學(xué)本質(zhì)是_，應(yīng)用于人體，會(huì)作為 產(chǎn)生 ，解決這個(gè)問題的方法是_。大量生產(chǎn)選，小規(guī)模生產(chǎn)選效應(yīng)B蛋白質(zhì)異物免疫反應(yīng)采用人的效應(yīng)B細(xì)胞制備第二十五張，PPT共三十頁(yè)，創(chuàng)作于2022年6月15、右圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌抗體的實(shí)驗(yàn)方案。據(jù)圖回答：（1）該方案能達(dá)到預(yù)期效果嗎？。原因是_。（2）圖中為 過程，常用 作為誘導(dǎo)劑。該細(xì)胞繼承了_ ，因此不僅能分泌_，還有 本領(lǐng)。不能 沒有將抗原注入小鼠體內(nèi)，無法獲得產(chǎn)生專一抗體的B淋巴細(xì)胞 細(xì)胞融合 滅活病毒 雙