抗血清制備(實驗)

1、關于抗血清的制備(實驗)第一張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月選擇合適的抗原分離純化抗原選擇免疫動物確定免疫方案和程序免疫動物采血分離血清抗血清的純化與鑒定抗血清制備的基本流程第二張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月設計實驗方案的設計1.設計本實驗的理由（實驗目的）。2.實驗方案設計。3. 可行性（理論、人員、實驗條件等）。4.創(chuàng)新性。5.本實驗要解決的主要問題。6.預期目標。每個組交一份實驗方案（3-4個同學一組）第三張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月論文式實驗報告一、題目的選擇1、準確、具體、簡潔、醒目，使人一目了然，引起重視 2、作者與單位(班級)，并注明所在班級和

2、指導教師姓名。3、摘要和關鍵詞 摘要是對論文主要內容和觀點的概括 第四張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月論文式實驗報告二、關鍵詞又稱主題詞或索引詞，一篇論著(論文)一般選用25個關鍵詞 第五張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月論文式實驗報告三、引言(前言)引言是論文正文的開場白 1、引起讀者對本論文的興趣。2、為讀者提供理解本論文所需的背景資料 。第六張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月論文式實驗報告四、材料與方法材料1、實驗對象2、實驗材料3、實驗分組4、實驗過程和方法6、數據處理等內容。第七張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月論文式實驗報告五、結果：結果是實驗研究

3、成果的結晶 第八張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月論文式實驗報告六、討論 1.11.21.3對實驗結果解釋和評價 第九張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月論文式實驗報告七、參考文獻 期刊：著者文章名刊物名稱，卷或年(期)：文章的起訖頁碼書籍：編著者書名版本出版地：出版者，年份 第十張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月一、顆粒性抗原的制備 （2%5%RBC的制備）（1）靜脈采血2-3ml，注入抗凝管中，輕輕混勻。（2）洗滌RBC 將上述抗凝血移至10ml試管中，加入NS 6-7ml，混勻， 2500r/min離心5min,去上清。重復上述操作三次，最后一次去上清后，將紅細胞配

4、制成2%5%的RBC懸液。第十一張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月2、取上述RBC懸液1ml免疫家兔。免疫部位：靜脈、皮內、皮下等。每只兔子免疫810點，每點0.1ml左右。每隔24天免疫一次。第十二張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月1班免疫時間表每隔2天免疫一次第十三張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月2班免疫時間表每隔3天免疫一次第十四張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月3班免疫時間表每隔4天免疫一次第十五張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月3、心臟采血10ml，凝固后，分離血清（2000轉/min,5分鐘)。4、取兩支小試管并以A、B標記之，將上述血清一

5、半加入A管，另一半加入B管。將A管置于56水浴箱30分鐘（滅活補體）。第十六張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月5、抗血清效價的鑒定。凝集試驗和溶血反應第十七張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 凝 集 反 應第十八張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月實驗原理指顆粒性抗原(RBC)與相應抗體特異結合，在適當電解質存在下，形成肉眼可見的凝集現象。第十九張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月試管凝集試驗過程1.取潔凈小試管8支，排列于試管架上，依次編號。2.向各管中加入生理鹽水200ul。第二十張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月3.向第一支試管中加入A管血清200ul

6、，充分混勻，吸出200ul放入第二管，混勻后取出200ul加入第三管中，如此類推直至第七管，混勻后取出200ul棄去。第八管不加血清，為生理鹽水對照管。至此，第17管的血清稀釋度分別為：1：2，1：4，1：81：128。這種稀釋方法稱為連續(xù)倍比稀釋法，為免疫試驗中常用的稀釋方法。第二十一張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月4.向每管加入200ul 2%RBC懸液，此時每管的液體總量為400ul ，血清稀釋度又增加1倍。5.搖勻，置37 30min。(取出試管1500r/s 30秒)觀察結果。 第二十二張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月試管凝集操作程序(倍比稀釋法)管號 12345

7、678對照生理鹽水 200200200200200200200200血清 200200200200200200200RBC 200200200200200200200200終稀釋度 1/41/81/161/321/641/1281/256-棄去單位：uL第二十三張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月結果判斷選擇適當的光暗對比背景，先不要振搖，觀察管底凝集物的范圍和上清液的濁度。然后輕輕搖動試管，注意觀察凝集顆粒的大小、均勻度等。每一試管的觀察，都應與對照管進行比較。鹽水對照管誚無凝集現象，輕輕搖動試管則RBC分散成均勻混濁；而凝集塊則沉于管底，輕搖時不易散開，凝集程度通常以“+”表示：第二

8、十四張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月“4+”很強，全部RBC凝集，凝集塊全部沉于管底，液體澄清。“3+”強，RBC大部分凝集并沉于管底，液體稍混濁?！?+”中等強度，RBC大約一半凝集，液體較混濁?！?”弱，僅少量RBC凝集，液體明顯混濁?！?”不凝集，液體混濁與對照管相同。只要待測血清管出現“2+”以上的凝集現象，即可判斷為反應陽性；以出現“2+”凝集的最大稀釋度為待測血清的抗體效價。第二十五張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月 溶 血 試 驗第二十六張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月實驗原理溶血反應是指補體參與的抗體致紅細胞的溶解反應.參與反應的成分有紅細胞、抗紅細

9、胞抗體，也稱溶血素、補體。第二十七張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月溶血反應實驗過程1.取潔凈小試管8支，排列于試管架上，依次編號。2.向各管中加入生理鹽水200ul。第二十八張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月3.向第一支試管中加入血清200ul，充分混勻，吸出200ul放入第二管，混勻后取出200ul加入第三管中，如此類推直至第七管，混勻后取出200ul棄去。第八管不加血清，為生理鹽水對照管。至此，第17管的血清稀釋度分別為：1：2，1：4，1：81：128。這種稀釋方法稱為連續(xù)倍比稀釋法，為免疫試驗中常用的稀釋方法。第二十九張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月4.向每管加入200ul 2%RBC懸液，此時每管的液體總量為400ul ，血清稀釋度又增加1倍。5.搖勻，置37 30min。觀察結果。 第三十張，PPT共三十三頁，創(chuàng)作于2022年6月溶血反應操作程序(倍比稀釋法)管號 12345678對照生理鹽水 200200200200200200200200血清 200200200200200200200RBC 200200200200200200200200終稀釋度 1/41/81/161/321/641/1281/256-棄