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文檔簡(jiǎn)介
1、中南大學(xué)考試試卷2005-2006學(xué)年下學(xué)期醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)課程時(shí)間110分鐘線封密卷評(píng)專業(yè)班級(jí)理處分0按績(jī)成試考者違,息信生考寫填準(zhǔn)不外線封密,題答要不內(nèi)線封密得分評(píng)卷人一、填空題:每空1分,共20分)線封密卷評(píng)分子生物學(xué)是從研究生命現(xiàn)象、生命的本質(zhì)。生命活動(dòng)及其規(guī)律的科學(xué)。人類基因組包括兩個(gè)部分DNA即染色體DNA(或單倍體DNA)(核內(nèi)DNA0.5分)和。主要的DNA修復(fù)方式:重組修復(fù)、切除修復(fù)和S0S修復(fù)。真核生物轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控主要是通過順式作用元件、反式作用因子和RNA聚合酶的相互作用來完成。可用于分析基因轉(zhuǎn)錄水平變化的技術(shù)有Northernblot(DNA芯片)(核酸分子雜交0.5分
2、)和口RT-PCR。反義RNA是指能與mRNA互補(bǔ)配對(duì)的RNA分子?;蛲蛔冎饕荄NA一級(jí)結(jié)構(gòu)的改變,其分子機(jī)制可以是替換、插入或缺失等。&基因治療的策略:基因添加(增補(bǔ))、基因干預(yù)、基因置換、導(dǎo)入自殺基因、基因修飾。在特定環(huán)境信號(hào)刺激下,有些基因的表達(dá)表現(xiàn)為開放或增強(qiáng),這種表達(dá)方式稱為誘導(dǎo)表達(dá),相反,有些基因的表達(dá)表現(xiàn)為關(guān)閉或下降,這種表達(dá)方式稱為阻遏表達(dá)。寫出三種真核細(xì)胞轉(zhuǎn)染的方法磷酸鈣共沉淀法、電穿孔法、DEAE葡聚糖法、顯微注射法、脂質(zhì)體介導(dǎo)法。、單項(xiàng)選擇題:(每題1分,共10分)B)增強(qiáng)子的作用是A.增強(qiáng)DNA復(fù)制B.增強(qiáng)基因轉(zhuǎn)錄C.增強(qiáng)基因穩(wěn)定性D.增強(qiáng)RNA的穩(wěn)定性TOC o
3、1-5 h z反式作用因子的激活方式不包括(D)A.表達(dá)式調(diào)節(jié)B.共價(jià)修飾C.蛋白質(zhì)相互作用D.DNA成環(huán)以下哪項(xiàng)不是目前使用的研究轉(zhuǎn)錄子組的主要方法(D)A.基因芯片技術(shù)B.表達(dá)系列分析C.差異顯示PCRD.Westernblot無義突變是(B)A.產(chǎn)生另一種氨基酸序列不同的蛋白質(zhì)B.突變后產(chǎn)生縮短的多肽鏈C.產(chǎn)生的一種氨基酸序列相同的蛋白質(zhì)D.突變毫無意義質(zhì)粒是(A)A.環(huán)狀雙鏈DNAB.線性雙鏈DNAC.環(huán)狀單鏈DNAD.線性單鏈DNA可檢測(cè)基因拷貝數(shù)變化的是(C)A.生物質(zhì)譜技術(shù)B.雙向電泳C.SouthernblotD.RNAi以下哪種因素不直接影響轉(zhuǎn)錄的是(D)A.啟動(dòng)子B.阻礙蛋
4、白C.基因激活蛋白D.SD序列限制性核酸內(nèi)切酶可對(duì)(A)A.雙鏈DNA的特異部位進(jìn)行切割B.單鏈DNA的特異部位進(jìn)行切割C.多肽鏈的特異部位進(jìn)行切割D.mRNA的特異部位進(jìn)行切割以下哪項(xiàng)是原核生物基因組的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)(C)A.由DNA或RNA組成B.有單鏈、雙鏈之分C.操縱子結(jié)構(gòu)D.與組蛋白結(jié)合以下哪項(xiàng)屬于啟動(dòng)子和上游啟動(dòng)子元件(C)A.內(nèi)含子B.外顯子C.TATA盒D.終止子三、簡(jiǎn)答題:(每題5分,共40分)簡(jiǎn)述基因組的概念一種生物(1分)的一整套(1分)遺傳信息(1分)的遺傳物質(zhì)(1分)的總和(1分)?;蛘咭惶祝?分)完整(1分)單倍體(1分)的遺傳物質(zhì)(1分)的總和(1分)。或者基因組泛指(
5、1分)一個(gè)細(xì)胞(1分)或病毒(1分)的全部(1分)遺傳信息(1分)。簡(jiǎn)述乳糖操縱子的結(jié)構(gòu)有三個(gè)結(jié)構(gòu)基因Z、Y、A,(1分),啟動(dòng)子(P)、(1分),操縱元件(0)、(1分)CAP結(jié)合位點(diǎn)、(1分),啟動(dòng)子、操縱元件和CAP結(jié)合位點(diǎn)一起構(gòu)成糖操縱子的調(diào)控區(qū)、(1分)(如果不寫調(diào)控區(qū),寫I基因是調(diào)節(jié)基因,編碼阻遏蛋白??山o1分)。什么是S0S修復(fù)?指DNA損傷嚴(yán)重時(shí),應(yīng)急而誘導(dǎo)產(chǎn)生的修復(fù)作用,稱為SOS修復(fù)。(1)當(dāng)DNA雙鏈發(fā)生高密度大片段損傷,原有的DNA聚合酶活性減低。(1)細(xì)胞緊急啟動(dòng)應(yīng)急修復(fù)系統(tǒng),誘導(dǎo)產(chǎn)生新的DNA聚合酶或修飾原有的DNA聚合酶。(1)這種新的DNA聚合酶或修飾的DNA聚
6、合酶活性低,識(shí)別堿基的精度差,無校對(duì)功能,(1)因此易造成DNA復(fù)制錯(cuò)誤,甚至引起基因突變。(1)什么是錯(cuò)義突變?由于DNA分子中堿基的取代(1),經(jīng)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生mRNA后,相應(yīng)的密碼子發(fā)生了變化1分,使決定某一氨基酸的密碼子變?yōu)榱硪环N氨基酸的密碼子,(1)能使它所編碼的蛋白質(zhì)的氨基酸組成和排列順序都發(fā)生了改變1分。這種基因突變叫錯(cuò)義突變。(1)WhatisRNAinterference(RNAi)?RNAi即RNA干擾(涉)。(1)是將一段短雙鏈的RNA1分序列導(dǎo)入機(jī)體或細(xì)胞中,(1)誘導(dǎo)機(jī)體或細(xì)胞中與之有同源的序列mRNA發(fā)生降解,(1)導(dǎo)致基因的表達(dá)受到抑制,甚至表達(dá)受到完全抑制的現(xiàn)象。(1
7、)簡(jiǎn)述PCR的應(yīng)用?進(jìn)行DNA1分體外擴(kuò)增1分,基因克隆1分,分析基因拷貝數(shù)1分,基因診斷1分。其他答案不計(jì)分。Whatisgenetherapy?基因治療(1分)是將目的基因1分導(dǎo)入靶細(xì)胞內(nèi)(1分),成為宿主細(xì)胞遺傳物質(zhì)的一部分(1分),目的基因表達(dá)產(chǎn)物對(duì)疾病起治療作用(1分)。簡(jiǎn)述人類基因組計(jì)劃的研究目標(biāo)及研究?jī)?nèi)容研究目標(biāo):闡明構(gòu)成人類的全部DNA的結(jié)構(gòu)(1分);闡明基因的編碼方式和分布特點(diǎn)(1分);理解基因及其調(diào)控序列之間的相互關(guān)系(1分);理解DNA全部序列所蘊(yùn)藏的意義(1分)。研究?jī)?nèi)容:完成遺傳圖譜、物理圖譜、序列圖譜、轉(zhuǎn)錄圖譜分析(1分)。四、論述題:(每題15分,共30分)1已知
8、一個(gè)基因的cDNA序列,現(xiàn)在要把該基因插入質(zhì)粒載體中,論述其基因克隆的過程。獲得目的基因(1分)根據(jù)該基因的cDNA序列從cDNA文庫中獲得(1分);人工合成(1分);提取mRNA,RT-PCR擴(kuò)增獲得目的基因(1分).選擇合適的載體(1分).DNA分子的體外連接(1分).粘性末端法;平端連接(1分);人工接頭法;同聚體尾法;(1分)將重組DNA導(dǎo)入宿主細(xì)胞(1分)用轉(zhuǎn)化法(1分);轉(zhuǎn)染法(1分).目的基因的篩選和鑒定(1分).遺傳學(xué)方法(或答抗生素法.或藍(lán)白篩選)(1分);免疫學(xué)方法;核酸雜交法;PCR技術(shù)(1分);酶切鑒定.回答問題清晰(1分).論述核酸分子雜交(Southernblot和
9、Northernblot)的基本原理及其在基因診斷中的應(yīng)用。核酸分子雜交是分子生物學(xué)研究的基礎(chǔ)技術(shù)之一,從整體上可分為Southernblot和Northernblot兩大類(1分)。Southernblot用于基因DNA分子的檢測(cè)(1分)。如果基因拷貝數(shù)發(fā)生變化(增多或減少),但基因序列沒有改變,就可以根據(jù)基因序列合成探針(1分);利用同源互補(bǔ)序列可以退火形成異源雙鏈(1分)的原理,探測(cè)染色體上能與探針結(jié)合的DNA序列(1分)。如果將兩部分綜合起來作答,需緊扣“探針”、“同源互補(bǔ)序列”、“異源雙鏈”等關(guān)鍵點(diǎn),如用“同源/互補(bǔ)序列”給1分;如答“不同來源的互補(bǔ)核酸序列”給1分)。Souther
10、nblot在基因診斷中多用于檢測(cè)特異性DNA的存在(1分),包括DNA片段的定位和測(cè)定分子量(1分);進(jìn)行限制性酶譜分析(1分)及基因突變分析(1分)。Northernblot則用于RNA分子的檢測(cè),其原理和操作基本過程與Southernblot相似(1分)。在基因診斷中用于RNA的定性及相對(duì)定量(1分;如答“分析RNA相對(duì)水平、在轉(zhuǎn)錄水平上分析RNA等,給1分)分析?;卮饐栴}清晰(1分)。專業(yè)班級(jí)中南大學(xué)考試試卷線封密卷評(píng)理處分0按績(jī)成試考者違,息信??紝懱顪?zhǔn)不外線封密,題答要不內(nèi)線封密線封密卷評(píng)2005-2006學(xué)年下學(xué)期醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)課程時(shí)間110分鐘56學(xué)時(shí)3學(xué)分考試形式:閉卷專業(yè)年級(jí)
11、:臨床醫(yī)學(xué)七年制口腔醫(yī)學(xué)七年制總分100分,占總評(píng)成績(jī)80%B卷得分評(píng)卷人11.主要的DNA修復(fù)方式:一、填空題:(每空1分,共20分)切除修復(fù)、重復(fù)修復(fù)和SOS修復(fù)(誘導(dǎo)修復(fù))12.真核牛物轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控主要是誦過順式作用元件(啟動(dòng)子)、反式作用因子(轉(zhuǎn)錄因子)和RNA聚合酶的相互作用來完成。13.反義RNA是指能與mRNA互補(bǔ)配對(duì)的RNA分子。14.基因突變主要是DNA一級(jí)結(jié)構(gòu)的改變,其分子機(jī)制可以是替換、插入或缺失(侄M立)等。5.Southernblot可用于檢測(cè)DNA,Northernblot可用于檢測(cè)RNA,Westernblot可用于檢測(cè)。人類基因組計(jì)劃要完成的圖譜有遺傳圖譜、物
12、理圖譜、序列圖譜和轉(zhuǎn)錄圖譜?;蚪M學(xué)是指闡明整個(gè)基因組(遺傳物質(zhì))的結(jié)構(gòu)、結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系以及基因之間相互作用的科學(xué)。在基因治療中常用的抑制基因表達(dá)的方法是反義RNA、RNAi(基因敲除)核酶或者三鏈DNA技術(shù)。基因診斷的主要技術(shù)有核酸分子雜交、PCR擴(kuò)增(RT-PCR)、DNA序列測(cè)定、DNA芯片技術(shù)。得分評(píng)卷人單項(xiàng)選擇題:每題1分,共10分)能導(dǎo)致蛋白質(zhì)翻譯提前終止的基因突變是BA錯(cuò)義突變;B.無義突變;C同義突變;D移碼突變;可檢測(cè)基因拷貝數(shù)變化的是SouthernblotB.雙向電泳C.酵母雙雜交D.RNAi生物質(zhì)譜技術(shù)常用于D的研究中。A.基因組學(xué)B.RNA組學(xué)C.轉(zhuǎn)錄子組學(xué)D.蛋白
13、質(zhì)組學(xué)限制性核酸內(nèi)切酶可對(duì)_AA雙鏈DNA的特異部位進(jìn)行切割B.單鏈DNA的特異部位進(jìn)行切割C.多肽鏈的特異部位進(jìn)行切割D.mRNA的特異部位進(jìn)行切割5遺傳病的間接基因診斷是檢測(cè)與致病基因連鎖的CA.基因突變B.多態(tài)性C.遺傳標(biāo)志D.基因重排以下哪項(xiàng)不是基因診斷的特點(diǎn)A.高靈敏度B.結(jié)果穩(wěn)定C.早期診斷D.依賴表型改變7將特定的目的基因?qū)胩囟ǖ募?xì)胞,通過定位重組,矯正原有的缺陷基因的基因治療策略是A.基因置換B.基因添加C.基因干預(yù)D.基因修飾&在基因治療中基因轉(zhuǎn)移的生物學(xué)方法是以B作為基因轉(zhuǎn)移系統(tǒng),A.質(zhì)粒載體B.病毒載體C.脂質(zhì)體D.粘粒適合制備單鏈DNA的載體是A.粘性質(zhì)粒B.M13噬
14、菌體C.逆轉(zhuǎn)錄病毒D.腺病毒10分子生物學(xué)是從D研究生命現(xiàn)象、生命的本質(zhì)、生命活動(dòng)及其規(guī)律的科學(xué)。A.細(xì)胞水平B.轉(zhuǎn)錄水平C.翻譯水平D.分子水平得分評(píng)卷人簡(jiǎn)答題:(每題5分,共40分)Whatisgenediagnosis?基因診斷(1分)是利用分子生物學(xué)技術(shù),從DNA或RNA水平(1分)檢測(cè)基因的存在(1分)、分析結(jié)構(gòu)的變異和表達(dá)狀態(tài)(1分),應(yīng)用基因重組、PCR、核酸雜交、基因芯片的各種分子生物學(xué)技術(shù)對(duì)疾病或癥狀進(jìn)行診斷(1分)。基因突變(1分)指遺傳物質(zhì)發(fā)生的可遺傳的變異(1分)。基因的核苷酸序列組成及數(shù)目發(fā)生改變(1分)。常涉及DNA的一級(jí)結(jié)構(gòu)(1分);其分子機(jī)制可以是替換,插入,缺
15、失,重排等(1分)。簡(jiǎn)述切除修復(fù)的大致過程。切除修復(fù)是修復(fù)DNA損傷最為普遍的方式。修復(fù)過程需要多種酶的一系列作用(1分),基本步驟如下:首先由核酸酶識(shí)別(1分)DNA的損傷位點(diǎn),在損傷部位的5側(cè)切開磷酸二酯鍵。不同的DNA損傷需要不同的特殊核酸內(nèi)切酶來識(shí)別和切割;由5-3核酸外切酶將有損傷的DNA片段切除(1分);在DNA聚合酶的催化下,以完整的互補(bǔ)鏈為模板,按5-3方向DNA鏈,填補(bǔ)已切除的空隙(1分);由DNA連接酶將新合成的DNA片段與原來的DNA斷鏈連接起來。這樣完成的修復(fù)能使DNA恢復(fù)原來的結(jié)構(gòu)(1分)。PCR在基因分析和基因診斷中有哪些應(yīng)用?進(jìn)行DNA體外擴(kuò)增1分、基因克隆1分(
16、或PCR原理2分),分析基因拷貝數(shù)1分(定性定量分析)(PCR-SSCP或DNA序列分析或甲基化分析)1分,基因突變的診斷1分。RNAi技術(shù)的原理是什么?長(zhǎng)雙鏈RNA被細(xì)胞內(nèi)的雙鏈RNA(1分)特異性核酸酶切成21-23個(gè)堿基對(duì)的短雙鏈RNA,稱為小干擾性RNA(1分),siRNA與細(xì)胞內(nèi)的某些酶和蛋白質(zhì)形成復(fù)合體(1分),該復(fù)合體可識(shí)別與siRNA有同源序列的mRNA(1分),并在特異的位點(diǎn)將該mRNA切斷(1分)。(或基本意思一致也給分)。葡萄糖不存在和乳糖存在時(shí)乳糖操縱子如何進(jìn)行復(fù)合調(diào)控?葡萄糖不存在CAP1分發(fā)揮正調(diào)控作用1分,乳糖存在,阻遏蛋白由于誘導(dǎo)劑的存在1分而失去負(fù)調(diào)控作用1分
17、,基因被打開,啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄1分(或基本意思一致也給分)。什么是誘導(dǎo)表達(dá)和阻遏表達(dá)?在特定環(huán)境信號(hào)刺激下1,有些基因的表達(dá)表現(xiàn)為開放或增強(qiáng)1,這種表達(dá)方式稱為誘導(dǎo)表達(dá)1,相反,有些基因的表達(dá)表現(xiàn)為關(guān)閉或下降1,這種表達(dá)方式稱為阻遏表達(dá)1。(或基本意思一致也給分)基因治療的基本策略有哪些?基因置換(1分):指將特定的目的基因?qū)胩囟?xì)胞,通過定位重組,以導(dǎo)入的正常基因置換基因組內(nèi)原有的缺陷基因?;蛱砑樱?分):通過導(dǎo)入外源基因使靶細(xì)胞表達(dá)其本身不表達(dá)的基因?;蚋深A(yù)(1分):采用特定的方式抑制某個(gè)基因的表達(dá),或者通過破壞某個(gè)基因的結(jié)構(gòu)而使之不能表達(dá),以達(dá)到治療疾病的目的。自殺基因治療(1分):將“自
18、殺”基因?qū)胨拗骷?xì)胞中,這種基因編碼的酶能使無毒性的藥物前體轉(zhuǎn)化為細(xì)胞毒性代謝物,誘導(dǎo)靶細(xì)胞產(chǎn)生“自殺”效應(yīng)1分。(或答基因修飾,基因抑制也給分)得分評(píng)卷人四、論述題:(每題15分,共30分)1.在基因克隆過程中,重組DNA導(dǎo)入大腸桿菌后如何篩選和鑒定陽性克隆?i.傳學(xué)方法1分抗生素篩選法:(單抗生素篩選、雙抗生素篩選1分藍(lán)-白篩選(a互補(bǔ))1分)ii.iii.iv.v.免疫學(xué)方法(westernblot)1分:標(biāo)記抗體1分,表達(dá)蛋白1分核酸雜交法1分:探針互補(bǔ)(雜交)1分,變性1分PCR技術(shù)(DNA序列分析)1分:設(shè)計(jì)特異性引物1分,鑒定擴(kuò)增產(chǎn)物1分酶切鑒定1分,內(nèi)切酶選擇,電泳檢測(cè)圖譜1分
19、總分15分,論述得當(dāng)加1分分別以大腸桿菌和人類為例,比較原核生物與真核生物基因、基因組的各自特點(diǎn)。原核生物真核生物結(jié)構(gòu)基因連續(xù)(無內(nèi)含子)RNA合成無剪接1分有操縱子結(jié)構(gòu),1分結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄為多順反子(多基因同時(shí)轉(zhuǎn)錄)1分雙鏈環(huán)狀DNA分子,單復(fù)制起點(diǎn)1分可有質(zhì)?;蚪M小,基因密度高,1分重復(fù)序列少非編碼區(qū)主要是調(diào)控序列1分有可轉(zhuǎn)移的DNA片段(轉(zhuǎn)座因子)1分有編碼同式酶的同基因1分?jǐn)嗔鸦颍ㄓ袃?nèi)含子),RNA合成需剪接1分一般無操縱子結(jié)構(gòu)1分結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄為單順反子1分(各基因分別轉(zhuǎn)錄)染色體DNA,多復(fù)制起點(diǎn)1分線粒體DNA基因組大,基因密度低,重復(fù)序列多1分非編碼序列多于編碼序列1分有多基因
20、家族和假基因不同的原核生物GC含量變化大1分中南大學(xué)考試試卷專業(yè)班級(jí)線封密卷評(píng)理處分0按績(jī)成試考者違,息信生考寫填準(zhǔn)不外線封密,題答要不內(nèi)線封密線封密卷評(píng)2006-2007學(xué)年上學(xué)期醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)課程時(shí)間110分鐘得分評(píng)卷人一、判斷題:侮題1分,共10分;對(duì)的打“V”,錯(cuò)的打“X”)1.現(xiàn)代分子生物學(xué)的研究幾乎都是圍繞核酸和蛋白質(zhì)進(jìn)行)2原核生物翻譯效率受SD序列順序的影響,與SD序列的位置無關(guān)。(X)3.重組修復(fù)是先進(jìn)行復(fù)制再進(jìn)行切除修復(fù)。v)在同樣的環(huán)境條件下,具有不同遺傳背景的人發(fā)病的幾率或病情的進(jìn)展不同。(v)點(diǎn)突變是指一個(gè)嘌呤堿基被嘧啶堿基取代或一個(gè)嘧啶堿基被嘌呤堿基取代。(X基因診
21、斷可檢測(cè)基因突變引起的疾病,不能檢測(cè)外源性致病基因引起的疾病。(X7.基因置換是通過導(dǎo)入外源基因使靶細(xì)胞表達(dá)其本身不表達(dá)的基因。(v)&差異顯示PCR是目前使用的研究轉(zhuǎn)錄子組的主要方法之一。(V)9.Northernblot常用于檢測(cè)RNA,Westernblot常用于檢測(cè)DNA。(X)10.反義RNA可增強(qiáng)基因表達(dá),RNA干涉可沉默基因表達(dá)。X)得分評(píng)卷人二、單項(xiàng)選擇題:每題2分,共40分)以下哪項(xiàng)屬于真核生物基因的順式作用元件:(C)A.內(nèi)含子B.外顯子C.增強(qiáng)子D.操縱子以下哪種病毒的基因組是單股負(fù)鏈RNA:(B)A.SARS冠狀病毒B.H5N1禽流感病毒C.呼腸孤病毒D.人類免疫缺陷病
22、毒原核生物與真核生物基因組比較,以下哪項(xiàng)是原核生物的特點(diǎn):(A)4.以下不產(chǎn)生高度多態(tài)性的重復(fù)序列是:A)大衛(wèi)星DNAB.小衛(wèi)星DNAC.微衛(wèi)星DNAD.回文結(jié)構(gòu)TOC o 1-5 h z5當(dāng)DNA損傷嚴(yán)重時(shí),應(yīng)急而誘導(dǎo)產(chǎn)生的修復(fù)作用是以下哪項(xiàng):(D)A.直接修復(fù)B.切除修復(fù)C.重組修復(fù)D.SOS修復(fù)反式作用因子的激活方式不包括:(C)A.表達(dá)式調(diào)節(jié)B.共價(jià)修飾C.DNA成環(huán)D.蛋白質(zhì)相互作用真核生物的轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用主要是反式作用因子與順式作用元件結(jié)合后影響以下哪項(xiàng)的形成:(B)A.RNA聚合酶B.轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物C.啟動(dòng)子D.DNA結(jié)合域可檢測(cè)基因拷貝數(shù)變化的是:(C)A.生物質(zhì)譜技術(shù)B.雙向電
23、泳C.PCRD.RNAi可用于分析基因轉(zhuǎn)錄水平的變化的是(A)A.RT-PCRB.PCR-SSCPC.SouthernblotD.DNA測(cè)序10.Southern雜交的原理是根據(jù)基因序列合成探針,利用同源互補(bǔ)序列可以退火形成:(A)A.雜交雙鏈DNAB.雜交三鏈DNAC.雜交雙鏈DNA-RNAD.雜交雙鏈RNATOC o 1-5 h z11反義RNA是指能與以下哪項(xiàng)互補(bǔ)配對(duì)的RNA分子:(D)A.cDNAB.編碼鏈DNAC.反義鏈的DNAD.mRNARNA干涉是指由以下哪項(xiàng)誘導(dǎo)的同源mRNA降解過程:(A)A.雙鏈RNAB.單鏈RNAC.雙鏈DNAD.單鏈DNA以下哪項(xiàng)不是真核細(xì)胞轉(zhuǎn)染的方法:
24、(D)A.磷酸鈣沉淀法B.電穿孔法C.脂質(zhì)體介導(dǎo)法D.氯化鈣轉(zhuǎn)化法在大腸桿菌中表達(dá)真核細(xì)胞的目的基因時(shí),下列描述正確的是:(A)A.目的基因必須是cDNAB.目的基因必須是基因組DNAC.目的基因必須是mRNAD.必須保留目的基因5端非編碼區(qū)無義突變是:(B)產(chǎn)生另一種氨基酸排列順序不同的蛋白質(zhì)突變后產(chǎn)生縮短的多肽鏈產(chǎn)生的一種氨基酸序列相同的蛋白質(zhì)不產(chǎn)生異常蛋白質(zhì)TOC o 1-5 h z移碼突變由以下哪種原因造成:(B)A.點(diǎn)突變或替換B.缺失或插入C.倒位或易位D.轉(zhuǎn)換或顛換以下哪項(xiàng)不是基因診斷的特點(diǎn):(D)A.高靈敏度B.結(jié)果穩(wěn)定C.早期診斷D.依賴表型改變?cè)诨蛑委熤谢蜣D(zhuǎn)移的生物學(xué)方
25、法是以什么作為基因轉(zhuǎn)移系統(tǒng):(B)A.質(zhì)粒載體B.病毒載體C.脂質(zhì)體D.粘粒在基因治療中常用的抑制基因表達(dá)的技術(shù)不包括:(C)A.反義RNAB.RNAiC.雙鏈DNAD.核酶生物質(zhì)譜技術(shù)常用于以下哪項(xiàng)的研究中:(D)A.基因組學(xué)B.RNA組學(xué)C.轉(zhuǎn)錄子組學(xué)D.蛋白質(zhì)組學(xué)得分評(píng)卷人三、填空題:(每空1分,共20分)1分子生物學(xué)是從分子水平研究生命現(xiàn)象、生命的本質(zhì)、生命活動(dòng)及其規(guī)律的科學(xué)。真核生物的結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄為單順反子mRNA,并需要轉(zhuǎn)錄后加工。3原核生物轉(zhuǎn)座因子可以分為以下三類:插入序列、轉(zhuǎn)座子、Mu噬菌體。4切除修復(fù)是細(xì)胞內(nèi)最普遍的修復(fù)機(jī)制,其過程包括:識(shí)別、切除、合成、連接。根據(jù)切除部位的
26、大小,切除修復(fù)可分為兩類,其中核苷酸片段切除修復(fù)是細(xì)胞內(nèi)更為普遍的修復(fù)方式。色氨酸操縱子受R基因編碼的阻遏蛋白調(diào)控外,還受L基因編碼的衰減子調(diào)控。在特定環(huán)境信號(hào)刺激下,有些基因的表達(dá)表現(xiàn)為關(guān)閉或下降,這種表達(dá)方式稱為阻遏_表達(dá)。&RT-PCR是一種以mRNA為模板的體外擴(kuò)增cDNA的技術(shù)。RNA誘導(dǎo)的沉默復(fù)合物(RISC)是SiRNA(小干涉性RNA)或短雙鏈RNA與細(xì)胞內(nèi)某些酶和蛋白質(zhì)形成的復(fù)合體。轉(zhuǎn)基因技術(shù)是指將外源基因或目的基因或外源DNA導(dǎo)入受精卵細(xì)胞或胚胎干細(xì)胞中,通過隨機(jī)重組插入到染色體DNA中?;蚯贸侵竿ㄟ^同源重組定向地將外源基因插入宿主細(xì)胞染色體DNA,從而使特定基因在細(xì)胞
27、內(nèi)或生物活體內(nèi)失活的過程。限制性核酸內(nèi)切酶分為三種類型,其中II型限制性核酸內(nèi)切酶能在DNA分子內(nèi)部的特異位點(diǎn),識(shí)別和切割雙鏈DNA,其切割位點(diǎn)的序列可知、固定。在體外連接DNA的方法中,粘性末端最適合DNA片段的連接。基因一級(jí)結(jié)構(gòu)的某個(gè)位置增加一個(gè)核苷酸或一段核苷酸序列形成的基因結(jié)構(gòu)改變稱為插入突變。基因診斷的主要技術(shù)有:核酸分子雜交、PCR擴(kuò)增、DNA序列測(cè)定、DNA芯片技術(shù)。制備合適的探針是核酸分子雜交用于基因診斷的關(guān)鍵。遺傳病的間接基因診斷是檢測(cè)與致病基因連鎖的遺傳標(biāo)志(記)?;蛑委熓菍⒛康幕?qū)氚屑?xì)胞內(nèi),成為宿主細(xì)胞遺傳物質(zhì)的一部分,目的基因表達(dá)產(chǎn)物對(duì)疾病起治療作用。人類基因組計(jì)
28、劃要完成的圖譜有遺傳圖譜、物理圖譜、序列圖譜和轉(zhuǎn)錄圖譜?;蚪M學(xué)是指闡明整個(gè)基因組的結(jié)構(gòu)、結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系及基因之間相互作用的科學(xué)。得分評(píng)卷人四、簡(jiǎn)答題:(每題5分,共20分)Whatisgenediagnosis?基因診斷(1分)是利用分子生物學(xué)技術(shù),從DNA或RNA水平檢測(cè)基因的存在(1分)、分析結(jié)構(gòu)的變異和表達(dá)狀態(tài)(1分),應(yīng)用基因重組、PCR、核酸雜交(1分)、基因芯片等各種分子生物學(xué)技術(shù)對(duì)疾病或癥狀進(jìn)行診斷(1分)。Whatisgenemutation?基因突變(1分)指遺傳物質(zhì)發(fā)生的可遺傳的變異(1分)?;虻暮塑账嵝蛄薪M成及數(shù)目發(fā)生改變(1分),常涉及DNA的一級(jí)結(jié)構(gòu)(1分);其
29、分子機(jī)制可以是替換,插入,缺失,重排等(1分)。基因治療的基本策略有哪些?基因置換(0.5分):矯正缺陷基因(或者指將特定的目的基因?qū)胩囟?xì)胞,通過定位重組,以導(dǎo)入的正常基因置換基因組內(nèi)原有的缺陷基因)(0.5分)?;蛱砑樱?.5分):使細(xì)胞表達(dá)原來不能表達(dá)的蛋白質(zhì)(或者通過導(dǎo)入外源基因使靶細(xì)胞表達(dá)其本身不表達(dá)的基因)0.5分)?;蚋深A(yù)(0.5分):采用特定的方式抑制某個(gè)基因的表達(dá)(或者通過破壞某個(gè)基因的結(jié)構(gòu)而使之不能表達(dá),以達(dá)到治療疾病的目的)(0.5分)。自殺基因治療(0.5分):(將“自殺”基因?qū)胨拗骷?xì)胞中,這種基因編碼的酶能使無毒性的藥物前體轉(zhuǎn)化為細(xì)胞毒性代謝物),誘導(dǎo)靶細(xì)胞產(chǎn)
30、生“自殺”效應(yīng)(0.5分)。基因修飾(0.5分):改變細(xì)胞的功能特性(0.5分)葡萄糖不存在和乳糖存在時(shí),乳糖操縱子如何進(jìn)行復(fù)合調(diào)控?得分評(píng)卷人葡萄糖不存在,cAMP濃度升高,與CAP結(jié)合形成cAMP-CAP復(fù)合物(0.5分),結(jié)合到啟動(dòng)子上游的CAP結(jié)合位點(diǎn)上(0.5分),促進(jìn)RNA聚合酶與啟動(dòng)子結(jié)合(0.5分),發(fā)揮正調(diào)控作用(0.5分),乳糖存在,可被分解為或轉(zhuǎn)變?yōu)榘肴樘牵?.5分),后者與阻遏蛋白結(jié)合(0.5分),使之構(gòu)象改變與操縱元件解離(0.5分),解除對(duì)結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄的抑制而失去負(fù)調(diào)控作用(0.5分),基因被打開(0.5分),啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄(0.5分)。五、論述題:(10分)基因克隆主要
31、包括哪幾個(gè)步驟?可采取哪些方法篩選和鑒定陽性克???獲得目的基因(1分)選擇合適的載體(1分).DNA分子的體外連接(1分).將重組DNA導(dǎo)入宿主細(xì)胞(1分)篩選和鑒定陽性克隆(1分)遺傳學(xué)方法0.5分抗生素篩選法或藍(lán)-白篩選(a互補(bǔ))0.5免疫學(xué)方法(Westernblot)0.5分:應(yīng)用抗體或抗血清鑒定0.5分。核酸雜交法0.5分:標(biāo)記的特異性探針篩選0.5分PCR技術(shù)(DNA序列分析)0.5分:設(shè)計(jì)特異性引物擴(kuò)增0.5分酶切鑒定0.5分:限制性酶切圖譜分析0.5分1.真核生物基因組與原核生物基因組比較,真核生物基因組具有:D)專業(yè)班級(jí)中南大學(xué)考試試卷線封密卷評(píng)理處分0按績(jī)成試考者違,息信生
32、考寫填準(zhǔn)不外線封密,題答要不內(nèi)線封密線封密卷評(píng)2006-2007學(xué)年上學(xué)期醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)課程時(shí)間110分鐘56學(xué)時(shí)彳學(xué)分考試形式:閉卷專業(yè)年級(jí):04級(jí)臨床醫(yī)學(xué)八年制總分100分,占總評(píng)成績(jī)80%B卷題號(hào)三四五合計(jì)得分評(píng)卷人復(fù)查人得分評(píng)卷人、判斷題:(每題1分,共10分;對(duì)的打“J”,錯(cuò)的打“X”)1.不對(duì)稱轉(zhuǎn)錄有兩方面的含義:一是DNA分子上一股可轉(zhuǎn)錄,另一股不可轉(zhuǎn)錄;二是模板永遠(yuǎn)在同一條單鏈上。X)2差異顯示PCR是目前使用的研究轉(zhuǎn)錄子組的主要方法之一。(J)3.反式作用因子是指能直接或間接地識(shí)別或結(jié)合在各順式作用元件核心序列上的一組DNA序列。(X)病毒基因可能是單鏈或雙鏈,閉合環(huán)狀或線性
33、,DNA或RNA組成。(V)單基因病無論是由同源染色體的一條或兩條染色體上的基因突變引發(fā)都符合孟德爾遺傳規(guī)律。(V)6不同種類及不同狀態(tài)的細(xì)胞有不同的cDNA文庫。(V)7.復(fù)性并不是變性反應(yīng)的一個(gè)簡(jiǎn)單逆反應(yīng)過程。(V)&逆病毒載體是一種RNA病毒,其感染顆粒是由包裝蛋白包裝的兩條DNA鏈組成,兩條DNA鏈5端經(jīng)氫鍵連接。(X)9.目前檢測(cè)非限制酶切位點(diǎn)突變的方法有PCR-RFLP。(X)得分評(píng)卷人10.具有催化自我剪接活性的RNA,稱之為核酶,打破了“酶必定是蛋白質(zhì)”的傳統(tǒng)觀念。A.多順反子結(jié)構(gòu)B.衰減子C.基因是連續(xù)的D.大量的重復(fù)序列TaqDNA聚合酶不具有以下特性:(D)A.方向的聚合
34、活性B.方向的外切活性C.較弱的非模板依賴性D.方向的外切活性原核生物與真核生物基因組比較,以下哪項(xiàng)是原核生物的特點(diǎn):(A)A.基因密度高B.無操縱子結(jié)構(gòu)C.有多基因家族和假基因D.多復(fù)制起點(diǎn)4.在真核基因表達(dá)調(diào)控中,能促進(jìn)轉(zhuǎn)錄的速率。(B)A.操縱子B.增強(qiáng)子C.沉默子D.TATAboxTOC o 1-5 h z色氨酸操縱子的轉(zhuǎn)錄終止調(diào)控方式除阻遏蛋白的調(diào)控外,還包括以下哪項(xiàng)的調(diào)控。(B)A.I基因B.衰減子C.操縱基因D.RNA聚合酶真核轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用主要是反式作用因子與順式作用元件結(jié)合后影響以下哪項(xiàng)的形成:(B)A.RNA聚合酶B.轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物C.啟動(dòng)子D.DNA結(jié)合域可變數(shù)目串聯(lián)重復(fù)屬
35、于以下哪種類型:(B)A.反向重復(fù)序列B.衛(wèi)星DNAC.中度重復(fù)序列D.端粒DNA以下屬于功能基因組學(xué)研究?jī)?nèi)容的是:(A)A.基因表達(dá)譜B.基因組遺傳圖譜C.基因組物理圖譜D.基因組測(cè)序堿基置換使氨基酸密碼子轉(zhuǎn)變?yōu)榻K止密碼子的突變是:(B)A.同義突變B.無義突變C.插入突變D.終止密碼子突變基因編碼序列中中丟失7個(gè)核苷酸產(chǎn)生的突變屬于:(B)A.錯(cuò)義突變B.移碼突變C.無義突變D.融合突變紫外線引起DNA突變通常是產(chǎn)生:(D)A.AAB.GGC.UUD.TT適合制備單鏈DNA的載體是:(B)A.粘性質(zhì)粒B.M13噬菌體C.逆轉(zhuǎn)錄病毒D.腺病毒DNA變性是指:(C)A.DNA與RNA結(jié)合;BD
36、NA與蛋白質(zhì)解離C.兩股鏈分開;D.兩股鏈斷裂鑒別RNA的分子雜交稱為:(A)A.NorthernblotB.SouthernblotC.EasternbltotD.Westernblot使熱變性的DNA溶液迅速冷卻,則只能形成一些:(A)A.不規(guī)則的堿基對(duì)B.雙鏈DNAC.單鏈DNAD.三鏈DNA為減少雜交反應(yīng)中出現(xiàn)的非特異性反應(yīng),在雜交前常用的封閉物不包括:(C)A.鮭魚精子DNAB.小牛胸腺DNAC.葡萄糖D.脫脂奶粉將特定的目的基因?qū)胩囟ǖ募?xì)胞,通過定位重組,矯正原有的缺陷基因是:(A)A.基因置換B.基因添加C.基因干預(yù)D.基因修飾有關(guān)包裝細(xì)胞敘述不正確的是:(C)包裝細(xì)胞是通過基因工程技術(shù)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行修飾的產(chǎn)生病毒結(jié)構(gòu)基因gag、pol、env所編碼的蛋白為逆轉(zhuǎn)錄病毒載體包裝成為重組病毒提供全套病毒蛋白包裝細(xì)胞能轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生編碼完整病毒的基因組RNARNA干擾指:(A)A.是將一段短雙鏈的RNA序列導(dǎo)入機(jī)體或細(xì)胞中B.形成三鏈DNAC.同時(shí)誘導(dǎo)機(jī)體或細(xì)胞中任意的序列發(fā)生降解D.導(dǎo)致基因的表達(dá)增強(qiáng)逆轉(zhuǎn)錄病毒前病毒的結(jié)構(gòu)具有的特點(diǎn)不包括:(C)A.有長(zhǎng)末端重復(fù)序列LTRB.由U3、R和U5三部分組成C.病毒有四個(gè)結(jié)構(gòu)基因D.LTR中含有增強(qiáng)子、啟動(dòng)子及3加PolyA信號(hào)得分評(píng)卷人三、填空題:(每空1分,共20分)分子生物學(xué)是從分子水平研究
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