免疫學(xué)檢查的課件

1、免疫學(xué)檢查(Immunologic test)一、檢查內(nèi)容1. 評(píng)估機(jī)體的免疫功能狀態(tài)2. 檢測(cè)與自身免疫病相關(guān)的抗體或致敏T 細(xì)胞3. 檢測(cè)與過(guò)敏性疾病相關(guān)的變應(yīng)原或IgE抗體4. 檢測(cè)某些致病微生物的抗原或抗體5. 檢測(cè)某些腫瘤抗原、激素含量二、常用的免疫檢查方法1. 沉淀試驗(yàn)2. 凝集試驗(yàn)3. 補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)4. 中和試驗(yàn)5. 熒光免疫技術(shù)6. 酶免疫技術(shù)7. 放射免疫技術(shù)8.發(fā)光免疫技術(shù)9. 時(shí)間分辨熒光免疫技術(shù)10. 流式細(xì)胞儀分析技術(shù)11. 分子生物學(xué)分析技術(shù)三、機(jī)體免疫功能檢查(一)非特異性免疫功能測(cè)定1. 血清蛋白區(qū)帶電泳- + 白蛋白 1、2球蛋白 1、2球蛋白 -球蛋白 血清

2、蛋白區(qū)帶電泳示意圖譜2. 外周血中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)，趨化、吞噬、殺菌功能測(cè)定 趨化功能降低：易反復(fù)感染、齒齦炎、中耳炎、 Chediak-Higashi綜合征、遲鈍性白細(xì)胞綜合征、有肌蛋白功能不全、高于IgE綜合征等。 吞噬功能降低：中性粒功能異常綜合征、補(bǔ)體所致調(diào)理缺陷癥、膜糖蛋白缺陷癥、慢性肉芽腫、肌動(dòng)蛋白功能不全等。 殺菌功能降低：慢性肉芽腫、多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、慢性粒白血病、糖尿病等三、機(jī)體免疫功能檢查3. 血清總補(bǔ)體、C3、C4、B因子、溶菌酶測(cè)定補(bǔ)體降低：自身免疫病，易反復(fù)感染等補(bǔ)體增高：風(fēng)濕熱急性期、結(jié)節(jié)性多動(dòng)脈炎、皮肌炎、心梗、Reiter綜合征等B因子降低：表示補(bǔ)體旁路途

3、徑激活溶菌酶：見(jiàn)于白血病、腎臟疾??；見(jiàn)于腫瘤患者三、機(jī)體免疫功能檢查2. B淋巴細(xì)胞功能檢查血清IgG含量測(cè)定特異性抗體產(chǎn)生能力的體內(nèi)試驗(yàn)白喉類(lèi)毒素、破傷風(fēng)類(lèi)毒素、肺炎球菌多糖抗原、流感嗜血桿菌多糖抗原接種后57天能檢測(cè)到IgM型抗體，再次免疫后1周產(chǎn)生IgG型抗體。特異性抗體產(chǎn)生能力的體外試驗(yàn)洗滌+ +低倍鏡下計(jì)數(shù)酶點(diǎn)數(shù)(抗體生成細(xì)胞數(shù))Ag吸附醋纖膜外周血單個(gè)核細(xì)胞5%CO2376h生物素 溫育抗 體 洗滌酶復(fù)合物底物三、機(jī)體免疫功能檢查3. 淋巴結(jié)或組織活檢淺皮質(zhì)區(qū)B細(xì)胞的居住地深皮質(zhì)區(qū)T細(xì)胞的居住地髓 質(zhì)漿細(xì)胞(受抗原刺激)/髓索及髓竇(靜止淋巴結(jié))直腸粘膜固有層有豐富的漿細(xì)胞和IgA

4、抗體分泌細(xì)胞常見(jiàn)與體液免疫功能缺陷的疾病1. 性聯(lián)無(wú)丙種球蛋白血癥2. 普通變異型免疫缺陷病3. 高IgM綜合征4. 選擇性IgA缺陷病5. IgG亞類(lèi)缺陷癥三、機(jī)體免疫功能檢查(三)細(xì)胞免疫功能檢查1. T細(xì)胞數(shù)量檢查CD3+ 成熟T細(xì)胞(69.44.86%)CD4+ 輔助T細(xì)胞、誘導(dǎo)T細(xì)胞、殺傷T細(xì)胞、單核吞噬細(xì)胞(41.175.28%)CD8+ 抑制T細(xì)胞、毒性T細(xì)胞、反抑制T細(xì)胞 (24.58 4.02%)2. T細(xì)胞功能檢查T(mén)細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)(60%80%)抑制性T細(xì)胞功能檢測(cè)(40% 10%)T細(xì)胞介導(dǎo)細(xì)胞毒試驗(yàn)三、機(jī)體免疫功能檢查3.mIL-2R細(xì)胞檢測(cè)mIL-2R陽(yáng)性細(xì)胞是T細(xì)胞活

5、化的標(biāo)志(正常人的PBMC靜息狀態(tài)為2%6%，PHA誘導(dǎo)培養(yǎng)后為22%39%) 靜息時(shí)過(guò)度表達(dá)提示有免疫病理?yè)p害 誘導(dǎo)后表達(dá)率降低提示患者細(xì)胞免疫功能不全4.嬰幼兒側(cè)位胸片若不見(jiàn)胸腺陰影，提示有T細(xì)胞缺陷5.淋巴結(jié)活檢若皮質(zhì)區(qū)和副皮質(zhì)區(qū)界線不清，生發(fā)中心消失，提示有T細(xì)胞缺陷6.成人PPD 5u ,4872h后紅腫、硬結(jié)或直徑28%，CD4+/CD8+3.0，IgG、IgM、IgA2. 血清sIL-2R，SACE3. Kveim抗原試驗(yàn)(90%陽(yáng)性)支氣管哮喘1. 過(guò)敏原皮膚試驗(yàn)呈陽(yáng)性(bronchial asthma)2. 放射性過(guò)敏原吸附試驗(yàn)(RAST)或ELISA呈陽(yáng)性3. 嗜堿粒細(xì)胞脫

6、顆粒試驗(yàn)(HBDT)(70%陽(yáng)性)4. 血漿組胺(正常: 1.82.7mol/L) 尿組胺(正常：15%；(idiopathic pulmonary2. 血清r-球蛋白，IgA、IgM、 IgG、fibrosis, IPE) RF(+)、ANA(+)外源性變應(yīng)性肺泡炎1. 血清特異性抗原沉淀抗體(90% (+)(extrinsis allergic alreolitis, EAA)2. BALF中淋巴細(xì)胞，肥大細(xì)胞, CD4+/CD8+,s IL-2R ,透明質(zhì)酸酶 3. 血清sIL-2R、CRP、RF(+)、Ig3.常見(jiàn)的器官特異性自身免疫病及異常免疫指標(biāo)肺嗜酸粒細(xì)胞浸潤(rùn)癥1. 外周血及痰中

7、嗜酸粒細(xì)胞計(jì)數(shù)(pulmonary infiltration2. 血清及BALF中IgE，Igwith eosinophilia, PIE)3. 過(guò)敏原皮膚試驗(yàn)呈陽(yáng)性慢性淺表性胃炎(chronic surface 血及胃液中胃壁細(xì)胞抗體(PCA)gastritis, CSG) (23.6%67.5%(+)慢性萎縮性胃炎內(nèi)因子抗體(IFA)(53%(+)(chronic atrophic gastritis, CAG)潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis, UC)血清ANCA(+)(UC可達(dá)48%88%),克羅恩病(Crohn disease)Crohn病為7%25%)3.常見(jiàn)的器

8、官特異性自身免疫病及異常免疫指標(biāo)自身免疫性肝炎1. 血清ANA(74%(+)，SMA（86% 91% (autoimmune (+)），肝腎微粒體(LRM)-1抗體(+)，Ig hepatitis) 2. 抗細(xì)胞色素P450D6抗體(+)IgA腎病1. 血清IgA-FN聚合物，IgA，IgA(IgA nephropathy)型RF(30%以上(+) )，IgA-CIC (33%(+)2. 腎活檢組織冰凍切片有IgA沉積3. 尿Tamm-Horsfall(TH)蛋白包裹紅細(xì)胞60%新月體性腎小球腎炎1. 血清抗腎小球基底膜(GBM)抗體(+)，(crecentic glomeru-ANCA(+)

9、，CIClonephritis)2. 腎活檢顯示新月體內(nèi)有大量纖維蛋白沉積3.常見(jiàn)的器官特異性自身免疫病及異常免疫指標(biāo)膜性增生性腎小球腎炎1. 血清CIC，CH50, C3, C1q ，(membranopnoliferativeC4Glomerulonephritis, MPGN）2. 尿液免疫復(fù)合物(UIC)3. 腎活檢顯示腎小囊腔和腎小管基底膜有C3沉積腎小管間質(zhì)性腎炎1. 血清抗腎小管基底膜(TBM)抗體(+)，(tubwlointerstitial抗TH抗體(+)，抗集合管抗體(+)nephritis, TIN) 2. 尿TH蛋白1. 血NK細(xì)胞活力,CD3+ 、CD4+ 、心肌炎(

10、myocarditis) CD8+，C3 ，T細(xì)胞轉(zhuǎn)化率2. 血清ANA(+)、抗心肌抗體(+)、RF(+)心肌病(myocardial diseases)血清抗ADP/ATP載體(ANT)抗體(+)急性炎性脫髓鞘性多發(fā)性神經(jīng)病 (acute inflammatory demyelinatingCSF中抗病原體抗體(+)，糖脂抗體(+), 硫Polyneuropathy, AIDP or Guillain-脂抗體(+)，蛋白，細(xì)胞數(shù)正常。Barre syndrome, GBS)3.常見(jiàn)的器官特異性自身免疫病及異常免疫指標(biāo)重癥肌無(wú)力血清抗AchR抗體(+)，抗橫紋-銀環(huán)蛇(myasthenia gravis, MG)毒、川楝毒、-蝮毒素抗體(+)，IL-2, C3全植物神經(jīng)功能不全血清抗交感神經(jīng)組織抗體(+)(pandysautonomia)毒性彌漫性甲狀腺腫血清甲狀腺球蛋白抗體(TGA)(30%(+) )(Graves disease)甲狀腺微粒體抗體 (TMA)(1:80，d1:160，或1周后抗體有4倍增高，可診斷為傷寒感染。若O121:80，a/b/c1:80，或1周后抗體有4倍增高，可診斷甲/乙/丙型副傷寒感染。Vi抗原有陽(yáng)性反應(yīng)，提示病人為傷寒帶菌者。若O12 對(duì)照血清查30%為陽(yáng)性3、HLAA、B、C、PK、PQ抗原分型被檢淋巴