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文檔簡介
1、實(shí)驗(yàn)六幾種培養(yǎng)基的制備與滅菌一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?.什么是培養(yǎng)基2.了解培養(yǎng)基的配制原則目的明確、營養(yǎng)物質(zhì)比例(C/N)、合適的pH、成本3.學(xué)習(xí)幾種培養(yǎng)基制備的方法;1二、實(shí)驗(yàn)原理: 1.牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基 2.土豆固體培養(yǎng)基 3.高氏一號培養(yǎng)基2三、實(shí)驗(yàn)器材 高壓蒸汽滅菌鍋,電爐,天平,牛角匙,搪瓷缸,稱量紙,pH試紙,棉塞,牛皮紙,線繩,記號筆,pH試紙; 小燒杯,量筒,玻璃棒,培養(yǎng)基分裝裝置,試管,三角瓶,滴管;1N NaOH,1N HCl。 3四、實(shí)驗(yàn)步驟1. 稱量2. 溶化3. 調(diào)pH4. 分裝5. 加棉塞與包扎6. 滅菌7. 擺斜面8. 無菌檢查4牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的制備 配方:牛
2、肉膏 3.0g蛋白胨 10gNaCl 5.0g瓊脂 1520g 水 1000mlpH 7.07.2300ml/組,裝10支試管、2個(gè)三角瓶5馬鈴薯培養(yǎng)基(固體)的制備 馬鈴薯培養(yǎng)基配方:馬鈴薯(去皮) 200g葡萄糖(或蔗糖) 20g瓊脂 20g水 1 000mlpH 自然 1. 將馬鈴薯去皮,稱取200 g切成小塊,放入1000ml水中煮沸30分鐘,煮沸過程中不可攪動(dòng)。2. 用4層紗布過濾,補(bǔ)足因蒸發(fā)而減少的水量。3. 在濾液中加入稱好的瓊脂,不斷攪拌至瓊脂完全熔化。 4. 然后加入20g葡萄糖(或蔗糖),攪拌溶解,停止加熱。5. 補(bǔ)足水分至1 000ml。pH自然,無需調(diào)整。6. 分裝、包扎、滅菌。6高氏1號培養(yǎng)基的制備 高氏1號培養(yǎng)基配方:可溶性淀粉 20gNaCl 0.5gKNO3 1.0gK2HPO43H2O 0.5gMgSO47H2O 0.5gFeSO47H2O 0.01g瓊脂 1520g蒸餾水 1 000mlpH 7.47.6 1. 按配方先稱取可溶性淀粉,放入小燒杯中,并用少量冷水將淀粉調(diào)成糊狀,再加入少于所需水量的沸水中,繼續(xù)加熱,使可溶性淀粉完全溶化。再稱取其它各成分依次逐一加入溶化。2. 對微量成分FeSO47H2O可先配成高濃度的貯備液后加入。方法是先在1000ml培養(yǎng)基中加入1ml的0.01gml的貯備液即可。待
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