膿汁和糞便標(biāo)本中病原菌檢測(cè)_第1頁
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文檔簡(jiǎn)介

1、關(guān)于膿汁和糞便標(biāo)本中病原菌的檢測(cè)第一張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月空氣細(xì)菌檢查結(jié)果分析 細(xì)菌菌落直徑13mm,有光滑型、粗糙型、粘液型。霉菌菌落比較大,呈棉絮狀、絨毛狀。計(jì)數(shù)菌落形成單位(CFU),報(bào)告結(jié)果。37培養(yǎng)24小時(shí)培養(yǎng)72小時(shí)培養(yǎng)48小時(shí)第二張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月第三張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月第四張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月第五張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月1 3 2 4 1 3 2 4 手指皮膚的細(xì)菌學(xué)檢查甲和乙、丙和丁共用1個(gè)平板上:甲、丙常規(guī)洗手下:乙、丁標(biāo)準(zhǔn)洗手甲(丙)乙(丁)丙丁第1格為洗手前,第2格

2、為洗手后,第3格為消毒后,第4格空白對(duì)照。 第六張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月手指皮膚細(xì)菌檢查結(jié)果分析 比較洗手前后細(xì)菌的種類。洗前細(xì)菌種類多。洗后細(xì)菌種類少。洗手能洗掉大多數(shù)暫住菌。 比較常規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)洗手的細(xì)菌數(shù)量。常規(guī)(簡(jiǎn)單)洗手,平板上細(xì)菌數(shù)量少。標(biāo)準(zhǔn)洗手,平板上細(xì)菌數(shù)量多。常住菌數(shù)量大,牢固附著在皮膚上,常洗不掉, 可洗松動(dòng),經(jīng)摩擦接種、脫落到培養(yǎng)基上,顯示細(xì)菌更多?外科手術(shù)人員洗手? 碘酒和酒精棉球消毒以后,有沒有細(xì)菌生長(zhǎng)?空白對(duì)照有沒有細(xì)菌生長(zhǎng)?第七張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)綜合性實(shí)驗(yàn)一膿汁和糞便標(biāo)本中病原菌的檢測(cè)(三)菌落特征觀察P11細(xì)

3、菌純培養(yǎng)P10油鏡使用方法(講解)膿汁和糞便標(biāo)本檢驗(yàn)(錄像)第八張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月菌落特征 Colony Characteristics大?。捍?直徑約3mm以上),中(直徑約13mm),小(直徑約1mm以下)。形狀:圓形,卵圓形、假根形、絲狀、不規(guī)則等。邊緣:整齊,鋸齒狀,波浪狀,羽毛狀。表面:隆起、平坦、中心凸起、臍形凹陷;光滑或粗糙、濕潤(rùn)或干燥。色素:一般為無色或灰白色,特殊色素有兩類:脂溶性色素(菌落本身著色,培養(yǎng)基不著色)和水溶性色素(菌落及培養(yǎng)基均著色)。溶血性:不溶血,不完全溶血(菌落周圍呈草綠色、不透明),溶血(菌落周圍出現(xiàn)透明環(huán))。第九張,PPT共四十

4、二頁,創(chuàng)作于2022年6月金黃色葡萄球菌菌落特征X-SA瓊脂培養(yǎng)基添加了顯色酶基質(zhì),金黃色葡萄球菌形成淡藍(lán)色菌落 。血瓊脂菌落直徑約2mm、圓形、隆起、表面光滑、濕潤(rùn)、邊緣整齊,菌落周圍有透明的溶血環(huán),溶血菌株大多有致病性。 Baird-Parker瓊脂菌落黑色,奶油狀,表面光滑,濕潤(rùn),圓形,凸起,有光澤,邊緣整齊,不透明,外層有一透明圈 。第十張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月傷寒沙門菌菌落特征HE瓊脂Hektoen Enteric Agar沙門菌產(chǎn)生藍(lán)綠色、黑色中心菌落 XLD瓊脂木糖賴氨酸脫氧膽鹽瓊脂Xylose Lysine Desoxycholate Agar沙門菌產(chǎn)生較小黑

5、色菌落SS瓊脂Salmonella Shigella Agar沙門菌產(chǎn)生較小黑色菌落埃希菌產(chǎn)生較大紅色菌落 第十一張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月鏈球菌菌落特征血瓊脂甲型溶血性鏈球菌,菌落周圍有12mm寬的草綠色溶血環(huán),稱甲型溶血或溶血。血瓊脂乙型溶血性鏈球菌,菌落周圍有24mm寬、紅細(xì)胞完全溶解、透明的溶血環(huán),稱乙型溶血或溶血。血瓊脂丙型鏈球菌,不產(chǎn)生溶血素,菌落周圍無溶血環(huán),稱不溶血性鏈球菌或溶血。甲型乙型丙型第十二張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月志賀菌菌落特征HE瓊脂Hektoen Enteric Agar形成不發(fā)酵乳糖的深綠色菌落。麥康凱瓊脂MacConkey Ag

6、ar 形成較小的,無色半透明不發(fā)酵乳糖的菌落。SS瓊脂Salmonella Shigella Agar 菌落圓形、液滴狀、邊緣整齊,濕潤(rùn),無色半透明。第十三張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月大腸埃希菌菌落特征麥康凱瓊脂MacConkey Agar伊紅美藍(lán)瓊脂eosin methylene blue Agar 科瑪嘉顯色瓊脂CHROMagar 第十四張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月細(xì)菌的純培養(yǎng) Pure Cultures膿汁標(biāo)本在普通平板上有黃色、白色兩種菌落,菌落的色素是脂溶性的,是細(xì)菌本身的顏色。菌落直徑2mm左右、圓形、隆起、表面光滑、濕潤(rùn)、邊緣整齊、不透明。37培養(yǎng)24

7、小時(shí) 第十五張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月糞便標(biāo)本在伊紅美藍(lán)平板上,有紫黑色、淡粉紅色兩種菌落,菌落色素是水溶性的,不是細(xì)菌本身的顏色,顏色的產(chǎn)生是因?yàn)榇竽c埃希菌分解乳糖產(chǎn)酸,酸使伊紅與美藍(lán)結(jié)合,形成紫黑色具有金屬光澤、大而隆起、不透明的菌落,菌落直徑23mm。致病菌不分解乳糖,菌落呈伊紅的顏色,淡粉紅色,半透明,直徑12mm。37培養(yǎng)24小時(shí) 第十六張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月若培養(yǎng)、放置時(shí)間過長(zhǎng)或者平板上某個(gè)部位細(xì)菌比較多、菌落比較密集,大腸桿菌菌落顏色可能會(huì)發(fā)生改變。因?yàn)榇竽c桿菌利用完乳糖以后,就要利用蛋白質(zhì),蛋白質(zhì)分解大多產(chǎn)生堿性物質(zhì),中和了乳糖分解時(shí)產(chǎn)生的酸

8、。大腸桿菌菌落可能會(huì)由原來的紫黑色變成粉紅色,或者菌落中心黑色,邊緣粉紅色。由紫黑色變成粉紅色菌落中心黑色,邊緣粉紅色。大腸埃希菌菌落特征改變第十七張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月若劃線分離不成功,菌落數(shù)量少的,或者菌落分布密集的,獲得菌落形成單位的可能性比較大。劃線分離成功的,菌落分布越往后越稀疏的,獲得單菌落可能性越大。第十八張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月斜面接種分工甲普通平板黃色菌落1支斜面 乙普通平板白色菌落1支斜面 丙 EMB平板紫黑菌落1支斜面 丁 EMB平板粉紅菌落1支斜面 斜面正面上2/3作標(biāo)記:組號(hào)、黃色、白色、紫黑、粉紅。選擇平板上相同的菌落數(shù)多的、典

9、型的、容易挑取的單菌落。在平皿底部玻璃上,畫個(gè)大圈選取菌落,得到同組同學(xué)認(rèn)可,才能挑取。第十九張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月畫圈選菌落第二十張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月畫圈選菌落第二十一張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月甲黃色丙紫黑乙白色丁粉紅接種環(huán)套住菌落輕刮取菌第二十二張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月斜面接種法 Streak Slant Method甲黃色, 乙白色。丙紫黑, 丁粉紅。標(biāo)記:組號(hào),顏色接種環(huán)取菌后,伸入斜面底部,自下向上先拉一條細(xì)菌接種線。再伸入底部,自下向上,作蜿蜒劃線。細(xì)菌涂布接種在斜面培養(yǎng)基的表面。第二十三張,PPT共四十二

10、頁,創(chuàng)作于2022年6月生物安全警告接種環(huán)接種斜面一次,可產(chǎn)生幾十個(gè)微生物氣溶膠顆粒。氣溶膠粒徑100um沉降很快,50um在0.4s內(nèi)擴(kuò)散開,5um通過呼吸道直接到達(dá)肺泡。Pike博士對(duì)實(shí)驗(yàn)室感染統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果發(fā)現(xiàn),不明原因的感染高達(dá)82%,大多數(shù)是氣溶膠在空氣中擴(kuò)散引起的。實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)坐著,在火焰周圍1020厘米內(nèi)操作,保持安靜、有序,盡量少說話、少走動(dòng),以免感染病原菌。第二十四張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月滅菌 收集平板 滅菌桶內(nèi)(平板底部朝下,蓋朝上放置) 速送滅菌室 高壓蒸汽滅菌 洗刷。第二十五張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月第二十六張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于202

11、2年6月奧林巴斯 CX21型 生物顯微鏡第二十七張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月使用須知顯微鏡是精密光學(xué)儀器,請(qǐng)不要讓其受到撞擊,請(qǐng)小心操作。在搬運(yùn)顯微鏡時(shí),請(qǐng)按右圖所示,以雙手抓住鏡臂孔的兩側(cè),小心搬運(yùn)。如果拿住載物臺(tái)和鏡筒等部位搬運(yùn)的話,有可能會(huì)造成損壞。第二十八張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月開關(guān)與調(diào)整光強(qiáng)開或關(guān)之前,必須將亮度調(diào)整旋鈕按箭頭相反方向轉(zhuǎn)動(dòng)到最小位置,以免損壞燈泡。電源開關(guān)撥到側(cè)為開,撥到側(cè)為關(guān)閉。按箭頭方向轉(zhuǎn)動(dòng)亮度調(diào)整旋鈕變亮,相反方向轉(zhuǎn)動(dòng)則變暗。第二十九張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月聚焦從顯微鏡的側(cè)面觀察,按箭頭方向轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)旋鈕,使物鏡盡

12、可能接近標(biāo)本。一邊看目鏡,一邊慢慢逆箭頭方向轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)旋鈕, 使載物臺(tái)下降。看到標(biāo)本以后,用微調(diào)旋鈕來正確對(duì)焦。10倍物鏡的工作距離(WD,從物鏡到標(biāo)本的 距離)為10.5mm。 油鏡的WD為0.13mm。第三十張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月調(diào)整聚光鏡位置和孔徑光闌用聚光鏡上下移動(dòng)旋鈕,將聚光鏡轉(zhuǎn)到最上面。在孔徑光闌環(huán)上刻有物鏡倍率(10倍,100倍等),觀察時(shí)將與使用物鏡相對(duì)應(yīng)的倍率放到正面。第三十一張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月轉(zhuǎn)換物鏡旋轉(zhuǎn)物鏡轉(zhuǎn)盤,將希望使用的物鏡(10倍、100倍)轉(zhuǎn)到標(biāo)本的上方。第三十二張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月100倍浸油物鏡使

13、用方法油鏡放入光路之前,一定要在標(biāo)本的觀察部位上加一滴浸油。旋轉(zhuǎn)物鏡轉(zhuǎn)盤,使油鏡進(jìn)入光路,用微調(diào)旋鈕對(duì)好焦距。如果浸油內(nèi)有氣泡,會(huì)影響觀察,可稍微旋轉(zhuǎn)物鏡轉(zhuǎn)盤,使油鏡來回通過12次浸油,排除油內(nèi)氣泡。第三十三張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月香柏油折射率n=1.515空氣的折射率n=1.000玻璃的折射率n=1.520油浸鏡的原理光線 滴加香柏油可使光線更多進(jìn)入物鏡,避免光線通過折射率低的空氣而散失,以提高物鏡的分辨率,使物象明亮清晰。 放大倍數(shù):目鏡10倍物鏡90或100倍。第三十四張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月奧林巴斯 CX21型 生物顯微鏡(實(shí)驗(yàn)柜內(nèi),每人一臺(tái))注意:

14、只能橫放,不得豎放。第三十五張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月顯微鏡油鏡的使用P1310物鏡看到標(biāo)本滴加香柏油100油鏡浸泡油中模糊物象細(xì)調(diào)節(jié)調(diào)焦,觀察物像記錄結(jié)果關(guān)閉電源。將聚光鏡調(diào)到最高處;孔徑光闌環(huán)上刻有的物鏡倍率(10,100)必須轉(zhuǎn)到正面,與使用的物鏡相對(duì)應(yīng)。油鏡處理:擦鏡紙拭去香柏油 擦鏡紙沾少許乙醇和乙醚(7:3)混合液擦拭擦鏡紙擦拭油鏡。顯微鏡罩上防塵罩 橫放在實(shí)驗(yàn)柜內(nèi)。(順德校區(qū))實(shí)驗(yàn)臺(tái)兩側(cè)的電源插座,只能插入一個(gè)插頭,請(qǐng)選擇離你最近的電源插座。(校本部)實(shí)驗(yàn)臺(tái)中間,三個(gè)位的插座,中間那位插孔沒有電,不能使用,只能用兩側(cè)的插座。第三十六張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于20

15、22年6月醫(yī)學(xué)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)綜合性實(shí)驗(yàn)三、一空氣、手指皮膚的細(xì)菌學(xué)檢查結(jié)果分析膿汁和糞便標(biāo)本中病原菌的檢測(cè)菌落特征觀察P11細(xì)菌純培養(yǎng)P10油鏡使用方法(講解)膿汁標(biāo)本檢驗(yàn) (錄像)腸道致病菌的分離鑒定(錄像)第三十七張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月試管用毛刷,上下刷洗內(nèi)壁和管底。字跡用濕紗布,粘去污粉擦拭。管口朝向相同,流水沖洗10次。洗干凈的試管,倒扣在筐內(nèi),晾干。平皿用紗布,旋轉(zhuǎn)擦拭內(nèi)外側(cè),字跡用紗布粘去污粉擦拭。流水沖洗10次。逐個(gè)倒扣在筐內(nèi),晾干。第三十八張,PPT共四十二頁,創(chuàng)作于2022年6月思考題在微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,怎樣才能避免雜菌的污染?空氣的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定如何?你的實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明了什么問題?怎樣從醫(yī)務(wù)人員手指上分離和

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