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文檔簡介

1、專題10.2克隆技術1如今,很多現(xiàn)代生物科學技術應用于我們的生活中,請回答下列有關問題采用細胞工程育種的方法如下:甲細胞、乙細胞處理j甲原生質(zhì)體誘導:乙原生質(zhì)體、丄雜種細胞一愈傷組織L胚狀體L目的植株甲、乙原生質(zhì)體經(jīng)誘導融合完成的標志是。人工誘導原生質(zhì)體融合的化學方法一般用作為誘導劑。屠呦呦研制的抗瘧藥青蒿素挽救了數(shù)百萬人的生命??茖W家在培育能產(chǎn)生青蒿素的酵母細胞過程中,構(gòu)建的基因表達載體應該含有酶識別和結(jié)合的部位,以驅(qū)動目的基因的轉(zhuǎn)錄,該部位稱為體外受精是對體內(nèi)受精的模擬操作。首先對實驗動物用激素處理,使其排出更多的卵子,待精子獲能后,可以在或者專用受精溶液中完成受精。我國西北一些地區(qū)年降雨

2、量少,適宜種植灌木和草,卻被硬性規(guī)定種植屬于喬木的楊樹,致使許多地方的楊樹長成半死不活狀,結(jié)果防護林稱為殘敗的“灰色長城”。其失敗的原因主要是違背了生態(tài)工程的基本原理。如今,人們對轉(zhuǎn)基因生物的安全性提出了質(zhì)疑,主要體現(xiàn)在生物安全、和食物安全等方面。2下圖為動物細胞培養(yǎng)的基本過程示意圖。ABCD請回答:容器A中放置的一般是幼齡動物的器官或組織,原因是其細,易于培養(yǎng)。培養(yǎng)時先要剪碎,然后用分散細胞,制成B瓶中的細胞懸液。將細胞懸液轉(zhuǎn)入C瓶中進行的初次培養(yǎng)稱為。細胞正常培養(yǎng)了一段時間后,發(fā)現(xiàn)細胞絕大部分死亡,只有極少數(shù)細胞存活,這是因為存活的細胞發(fā)生了,可無限增殖。目前使用的或冷凍保存的正常細胞通常

3、為代以內(nèi)的細胞,以保持細胞正常的核型。(3)C、D瓶中的培養(yǎng)液為保證無菌、無毒的環(huán)境,需要添加一定量的。培養(yǎng)過程中還需要提供02和co2等氣體環(huán)境,co2的作用主要是。(4)動物細胞體外培養(yǎng)時,通常要在培養(yǎng)基中補充一定濃度的某些物質(zhì)。如圖是血清對正常細胞和癌細胞培養(yǎng)影響的實驗結(jié)果。據(jù)圖可知,培養(yǎng)細胞一定需要添加血清。正常細胞(有血清)o培養(yǎng)時間癌細胞(有血清)癌細胞(無血清)正常細胞(無血清)研究人員利用小鼠(2N=40)的單倍體ES細胞(只含一個染色體組),成功培育出轉(zhuǎn)基因小鼠。其主要技術流程如下圖所示:第一極體細胞甲第二極體桑棋胚質(zhì)粒細胞乙小鼠單倍體ES細胞注射到小鼠的,次級卵母細胞4培養(yǎng)

4、、篩選轉(zhuǎn)化重組質(zhì)粒取活細胞的核(1)重組質(zhì)粒上的抗生素抗性基因可作為,其作用是有利于篩選出含有目的基因的細胞。氨芐青霉素不能有效殺死小鼠細胞,而一定濃度的G418能有效殺死不具有Neor的小鼠細胞,結(jié)合上圖推測,過程選用的2種限制酶是(選填圖中的編號),圖中處的培養(yǎng)液應添加(填“氨芐青霉素”或“G418”)。CGiATCGAGTiACT(2)若圖中過程選用的2種限制酶識別序列和切割位置分別是和GCTAGC,則經(jīng)這兩種限制TCATGAf酶切割后所產(chǎn)生的黏性末端是。此時,圖中過程應選用(填“EoliDNA連接酶”或“TDNA4連接酶”)。(3)據(jù)圖分析,細胞乙內(nèi)除線粒體DNA外,還有個DNA分子;

5、細胞乙發(fā)育成??芭叩倪^程中細胞分裂方式是,將細胞乙培養(yǎng)成桑椹胚的技術稱為技術。下圖為培育“三親嬰兒”的過程示意圖,回答下列問題:母親(甲)冬Q受精卵卵母細胞、里/捐獻者一圭聲(乙)卵母細胞表示技術,捐獻卵母細胞時通常給捐獻者注射激素使其Mil期卵母細胞過程需在培養(yǎng)液中添加抗生素,目的是;進行過程前需對精子進行體外培養(yǎng),目的是過程表示:培育“三親嬰兒”的過程屬于(填“有性”或“無性”)生殖。已知母親(甲)患有線粒體肌病(一種線粒體基因缺陷造成的疾病),若母親(甲)自然受孕,其子女患該病的情況是,“三親嬰兒”技術能有效避免上述情況發(fā)生,原因是。癌胚抗原(CEA)是某些癌細胞表面產(chǎn)生的一種糖蛋白,臨

6、床上通過制備CEA的單克隆抗體來診斷癌癥,回答下列問題:制備CEA的單克隆抗體時,首選將注入小鼠體內(nèi),使小鼠產(chǎn)生免疫反應。然后從產(chǎn)生免疫反應小鼠脾臟中獲取細胞,將其與骨髓瘤細胞融合,該融合過程所利用的基本原理是,因為融合率不是100%,且融合過程具有性,所以要對融合后的細胞進行篩選,篩選出的雜交瘤細胞還要經(jīng)過多次篩選,最終獲得(答兩個特點)的雜交瘤細胞。獲得雜交瘤細胞后,將其注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖或,之后從中提取大量CEA抗體。CEA單克隆抗體具有的三個主要優(yōu)點是。(3)CEA單克隆抗體與抗癌藥物偶聯(lián)后,可以使抗癌藥物定向作用于癌細胞,該過程所利用的免疫學原理為下圖表示胚胎發(fā)育某一時期示意圖和利

7、用高等動物細胞融合技術制備單克隆抗體的部分過程,請據(jù)圖回答下列問題:圖1圖2圖1為胚胎發(fā)育的期,其中為。若要通過胚胎移植獲得遺傳物質(zhì)完全相同的兩個新個體,可對圖1所示時期的胚胎進行處理再移入受體內(nèi)。這一操作要求是均等分割,以免影響分割后胚胎的恢復和進一步發(fā)育。若圖2表示動物細胞融合的過程,則有:過程a常用作為誘導劑(此誘導劑不能用于植物細胞融合)。由甲乙融合得到丙細胞的基本原理是;若甲細胞有m條染色體,乙細胞有n條染色體,篩選后的丁細胞有條染色體。7.下圖是單克隆抗體的制備過程示意圖,回答下列有關問題:、體外培養(yǎng)圖中A過程從小鼠的脾臟中取得的“小鼠細胞”是細胞。過程是細胞融合,該過程常用聚乙二

8、醇或電激等誘導。在動物細胞培養(yǎng)過程中,當貼壁細胞分裂生長到細胞表面相互接觸時,細胞會停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為細胞的在動物細胞體外培養(yǎng)過程中,在使用合成培養(yǎng)基時通常需加入等天然成分;氣體環(huán)境主要是提供細胞所需的o2和co2,其中02用于細胞有氧呼吸,CO2的作用是。與傳統(tǒng)的血清抗體相比,單克隆抗體具有、等優(yōu)點。8育種工作者利用不同的方法進行了如下四組實驗。請據(jù)圖回答問題。番茄甸皮部細胞花粉OO花粉花粉番茄韌皮馬鈴薯韌部細胞皮部細胞組織培養(yǎng)組織培養(yǎng)胞裂細分胞化細分B曲W幼秋水仙素A胞細OB胞細O組織培養(yǎng)組織培養(yǎng)植物體A植物體B植物體C植物體Dinniiv圖I過程由番茄韌皮部細胞形成幼苗A的過程需

9、要經(jīng)過兩個關鍵步驟,該過程依據(jù)的原理是。植物組織培養(yǎng)除了需要提供一定的營養(yǎng)、溫度和光照外,還必須在的條件下進行。已知番茄的紅果(Y)對黃果(y)為顯性,少室(M)對多室(m)為顯性,控制兩對相對性狀的基因分別位于兩對同源染色體上。用紅果多室(Yymm)番茄植株的花粉進行II、III有關實驗,則II過程中,從花粉形成幼苗B所進行的細胞分裂方式是。111過程中植物體C的基因型為。(細胞A為兩兩融合細胞)圖III、W過程中需要去除細胞壁,獲得具有活力的在圖中W過程中,經(jīng)過鑒別和篩選后,通常植物體D能表現(xiàn)出兩個親本的遺傳性狀,根本原因是9下圖是運用現(xiàn)代生物技術對某種經(jīng)濟作物進行品種改良的過程,據(jù)圖回答

10、有關問題:圖中涉及的現(xiàn)代生物技術有轉(zhuǎn)基因技術、技術和技術。要獲取抗蟲基因,首先是建立相應的文庫,從中選出所需的抗蟲基因。構(gòu)建基因表達載體時,TOC o 1-5 h z可以用兩種不同的限制酶分別切割目的基因和運載體,而對兩種限制酶的要求是。為獲取雜種細胞,先除去細胞壁以獲得,再用PEG誘導其融合;融合成功的標志是雜種細胞出現(xiàn)。為鑒定新品系D的抗蟲性,需要從個體水平進行實驗。在推廣引種時,要注意轉(zhuǎn)基因作物的種群數(shù)量不得超過環(huán)境承載力的限度,這主要體現(xiàn)了生態(tài)工程的原理。10現(xiàn)有兩種不同屬的農(nóng)作物,甲植物高產(chǎn)不耐鹽,乙植物低產(chǎn)但耐鹽;欲培育出既高產(chǎn)又耐鹽的植株,以適應鹽堿地栽培。請回答:采用(雜交,嫁

11、接,轉(zhuǎn)基因)方法可以達到上述目的,這種育種方法的優(yōu)點是如采用細胞工程育種,做法如下:甲細胞乙細胞A處甲原生質(zhì)體乙原生質(zhì)體,誘導BCD亠愈傷組織選-胚狀體擇廠目的植株甲、乙原生質(zhì)體經(jīng)誘導融合完成的標志是。以胚狀體為材料經(jīng)過人工薄膜包裝得到的人工種子,在適宜條件下,同樣得到萌發(fā)幼苗,與天然種子相比,人工種子具有哪些顯著的優(yōu)點?(列舉2條)。動物細胞工程應用較廣泛的是單克隆抗體的制備,單克隆抗體最主要的優(yōu)點是具有特異性強、靈敏度高的特點,原因是。11.下圖是利用現(xiàn)代生物工程技術治療遺傳性糖尿病(基因缺陷導致胰島B細胞不能正常合成胰島素)的過程設計圖解。請據(jù)圖回答:培養(yǎng)移植正常合成胰島素的胰島B細胞重

12、組細胞b(1)圖中、所示的結(jié)構(gòu)分別是圖中、所示的生物工程技術分別是過程通常用去核卵細胞作受體細胞的原因除了它體積大、易操作,營養(yǎng)物質(zhì)豐富外,還因為它TOC o 1-5 h z過程通常采用的方法是。過程的完成需要用到的非酶基因操作工具為,圖示方法與一般的異體移植相比最大的優(yōu)點是。12下圖為單克隆抗體制備流程示意圖。骨髓瘤細胞(不能在HAT培養(yǎng)基上生長)混合并進丁行細胞融某些淋巴細胞合,轉(zhuǎn)到HAT(產(chǎn)生特異抗體)培養(yǎng)基上培養(yǎng)雜交瘤細胞出未融合細胞死亡雜交瘤細胞生長圖中過程是。對動物細胞來說,過程獨有的方法是。過程的目的是TOC o 1-5 h z。過程的目的是獲得。在培養(yǎng)過程中為防止雜菌感染,應向

13、培養(yǎng)液中添力口;其體外培養(yǎng)需用CO2培養(yǎng)箱,其中CO2的主要作用是。若要大量制備抗該蛋白的單克隆抗體,可將該雜交瘤細胞注射到小鼠的中使其增殖。單克隆抗體與傳統(tǒng)抗體相比,其優(yōu)點是。13.現(xiàn)有甲、乙兩個番茄品種(染色體數(shù)2n=24),其基因型分別為AAbb和aaBB,這兩對基因位于非同源染色體上,且在光照強度大于500勒克斯時,都不能生長,這是由于它們中的一對隱性純合基因(aa或bb)作用的結(jié)果。取甲乙兩品種的花粉分別培養(yǎng)成植株,將它們的葉肉細胞制成原生質(zhì)體,并將兩者相混,使之融合,誘導產(chǎn)生細胞團。然后,放到大于500勒克斯光照下培養(yǎng),結(jié)果有的細胞團不能分化,有的能分化發(fā)育成植株。請回答下列問題:

14、(1)甲、乙兩番茄品種花粉經(jīng)過花藥離體培養(yǎng)技術而形成的植株是倍體。(2)將葉肉細胞制成原生質(zhì)體時,使用破除細胞壁。在細胞融合技術中,常用的化學試劑是。融合后形成的細胞類型有種(這里僅考慮2個原生質(zhì)體的相互融合)。TOC o 1-5 h z細胞融合成功的標志是。細胞融合后誘導產(chǎn)生的細胞團叫。在大于500勒克斯光照下培養(yǎng),能分化的細胞團的基因型是(這里只考慮2個原生質(zhì)體的相互融合)。由該細胞團分化發(fā)育成的植株,其染色體數(shù)是。14根據(jù)資料請回答下列問題:資料甲:某種細菌體內(nèi)有抗蟲基因,該基因能指導抗蟲毒蛋白的合成。我國科學家成功地將該抗蟲基因?qū)朊藁毎?,培育出了抗蟲效果好的棉花新品種。資料乙:研究表明,抗H蛋白單克隆抗體能抑制過量表達H蛋白的乳腺癌細胞的生長,科學家利用小鼠制備出了抗H蛋白的單克隆抗體。資料甲中,獲取抗蟲基因時可使用EcoRI,其原因是含抗蟲基因的DNA片段中含有。向棉花細胞導入抗蟲基因時,我國科學家采用了法??瓜x基因?qū)朊藁毎螅瑸榇_定棉花植株是否具有抗蟲特性以及抗性的程度如何,需要做實驗進行個體水平的鑒定。

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