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文檔簡介
1、專題10.2克隆技術(shù)1如今,很多現(xiàn)代生物科學(xué)技術(shù)應(yīng)用于我們的生活中,請回答下列有關(guān)問題采用細(xì)胞工程育種的方法如下:甲細(xì)胞、乙細(xì)胞處理j甲原生質(zhì)體誘導(dǎo):乙原生質(zhì)體、丄雜種細(xì)胞一愈傷組織L胚狀體L目的植株甲、乙原生質(zhì)體經(jīng)誘導(dǎo)融合完成的標(biāo)志是。人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的化學(xué)方法一般用作為誘導(dǎo)劑。屠呦呦研制的抗瘧藥青蒿素挽救了數(shù)百萬人的生命??茖W(xué)家在培育能產(chǎn)生青蒿素的酵母細(xì)胞過程中,構(gòu)建的基因表達(dá)載體應(yīng)該含有酶識別和結(jié)合的部位,以驅(qū)動目的基因的轉(zhuǎn)錄,該部位稱為體外受精是對體內(nèi)受精的模擬操作。首先對實驗動物用激素處理,使其排出更多的卵子,待精子獲能后,可以在或者專用受精溶液中完成受精。我國西北一些地區(qū)年降雨
2、量少,適宜種植灌木和草,卻被硬性規(guī)定種植屬于喬木的楊樹,致使許多地方的楊樹長成半死不活狀,結(jié)果防護(hù)林稱為殘敗的“灰色長城”。其失敗的原因主要是違背了生態(tài)工程的基本原理。如今,人們對轉(zhuǎn)基因生物的安全性提出了質(zhì)疑,主要體現(xiàn)在生物安全、和食物安全等方面。2下圖為動物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過程示意圖。ABCD請回答:容器A中放置的一般是幼齡動物的器官或組織,原因是其細(xì),易于培養(yǎng)。培養(yǎng)時先要剪碎,然后用分散細(xì)胞,制成B瓶中的細(xì)胞懸液。將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)入C瓶中進(jìn)行的初次培養(yǎng)稱為。細(xì)胞正常培養(yǎng)了一段時間后,發(fā)現(xiàn)細(xì)胞絕大部分死亡,只有極少數(shù)細(xì)胞存活,這是因為存活的細(xì)胞發(fā)生了,可無限增殖。目前使用的或冷凍保存的正常細(xì)胞通常
3、為代以內(nèi)的細(xì)胞,以保持細(xì)胞正常的核型。(3)C、D瓶中的培養(yǎng)液為保證無菌、無毒的環(huán)境,需要添加一定量的。培養(yǎng)過程中還需要提供02和co2等氣體環(huán)境,co2的作用主要是。(4)動物細(xì)胞體外培養(yǎng)時,通常要在培養(yǎng)基中補充一定濃度的某些物質(zhì)。如圖是血清對正常細(xì)胞和癌細(xì)胞培養(yǎng)影響的實驗結(jié)果。據(jù)圖可知,培養(yǎng)細(xì)胞一定需要添加血清。正常細(xì)胞(有血清)o培養(yǎng)時間癌細(xì)胞(有血清)癌細(xì)胞(無血清)正常細(xì)胞(無血清)研究人員利用小鼠(2N=40)的單倍體ES細(xì)胞(只含一個染色體組),成功培育出轉(zhuǎn)基因小鼠。其主要技術(shù)流程如下圖所示:第一極體細(xì)胞甲第二極體桑棋胚質(zhì)粒細(xì)胞乙小鼠單倍體ES細(xì)胞注射到小鼠的,次級卵母細(xì)胞4培養(yǎng)
4、、篩選轉(zhuǎn)化重組質(zhì)粒取活細(xì)胞的核(1)重組質(zhì)粒上的抗生素抗性基因可作為,其作用是有利于篩選出含有目的基因的細(xì)胞。氨芐青霉素不能有效殺死小鼠細(xì)胞,而一定濃度的G418能有效殺死不具有Neor的小鼠細(xì)胞,結(jié)合上圖推測,過程選用的2種限制酶是(選填圖中的編號),圖中處的培養(yǎng)液應(yīng)添加(填“氨芐青霉素”或“G418”)。CGiATCGAGTiACT(2)若圖中過程選用的2種限制酶識別序列和切割位置分別是和GCTAGC,則經(jīng)這兩種限制TCATGAf酶切割后所產(chǎn)生的黏性末端是。此時,圖中過程應(yīng)選用(填“EoliDNA連接酶”或“TDNA4連接酶”)。(3)據(jù)圖分析,細(xì)胞乙內(nèi)除線粒體DNA外,還有個DNA分子;
5、細(xì)胞乙發(fā)育成??芭叩倪^程中細(xì)胞分裂方式是,將細(xì)胞乙培養(yǎng)成桑椹胚的技術(shù)稱為技術(shù)。下圖為培育“三親嬰兒”的過程示意圖,回答下列問題:母親(甲)冬Q受精卵卵母細(xì)胞、里/捐獻(xiàn)者一圭聲(乙)卵母細(xì)胞表示技術(shù),捐獻(xiàn)卵母細(xì)胞時通常給捐獻(xiàn)者注射激素使其Mil期卵母細(xì)胞過程需在培養(yǎng)液中添加抗生素,目的是;進(jìn)行過程前需對精子進(jìn)行體外培養(yǎng),目的是過程表示:培育“三親嬰兒”的過程屬于(填“有性”或“無性”)生殖。已知母親(甲)患有線粒體肌病(一種線粒體基因缺陷造成的疾病),若母親(甲)自然受孕,其子女患該病的情況是,“三親嬰兒”技術(shù)能有效避免上述情況發(fā)生,原因是。癌胚抗原(CEA)是某些癌細(xì)胞表面產(chǎn)生的一種糖蛋白,臨
6、床上通過制備CEA的單克隆抗體來診斷癌癥,回答下列問題:制備CEA的單克隆抗體時,首選將注入小鼠體內(nèi),使小鼠產(chǎn)生免疫反應(yīng)。然后從產(chǎn)生免疫反應(yīng)小鼠脾臟中獲取細(xì)胞,將其與骨髓瘤細(xì)胞融合,該融合過程所利用的基本原理是,因為融合率不是100%,且融合過程具有性,所以要對融合后的細(xì)胞進(jìn)行篩選,篩選出的雜交瘤細(xì)胞還要經(jīng)過多次篩選,最終獲得(答兩個特點)的雜交瘤細(xì)胞。獲得雜交瘤細(xì)胞后,將其注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖或,之后從中提取大量CEA抗體。CEA單克隆抗體具有的三個主要優(yōu)點是。(3)CEA單克隆抗體與抗癌藥物偶聯(lián)后,可以使抗癌藥物定向作用于癌細(xì)胞,該過程所利用的免疫學(xué)原理為下圖表示胚胎發(fā)育某一時期示意圖和利
7、用高等動物細(xì)胞融合技術(shù)制備單克隆抗體的部分過程,請據(jù)圖回答下列問題:圖1圖2圖1為胚胎發(fā)育的期,其中為。若要通過胚胎移植獲得遺傳物質(zhì)完全相同的兩個新個體,可對圖1所示時期的胚胎進(jìn)行處理再移入受體內(nèi)。這一操作要求是均等分割,以免影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。若圖2表示動物細(xì)胞融合的過程,則有:過程a常用作為誘導(dǎo)劑(此誘導(dǎo)劑不能用于植物細(xì)胞融合)。由甲乙融合得到丙細(xì)胞的基本原理是;若甲細(xì)胞有m條染色體,乙細(xì)胞有n條染色體,篩選后的丁細(xì)胞有條染色體。7.下圖是單克隆抗體的制備過程示意圖,回答下列有關(guān)問題:、體外培養(yǎng)圖中A過程從小鼠的脾臟中取得的“小鼠細(xì)胞”是細(xì)胞。過程是細(xì)胞融合,該過程常用聚乙二
8、醇或電激等誘導(dǎo)。在動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中,當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到細(xì)胞表面相互接觸時,細(xì)胞會停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的在動物細(xì)胞體外培養(yǎng)過程中,在使用合成培養(yǎng)基時通常需加入等天然成分;氣體環(huán)境主要是提供細(xì)胞所需的o2和co2,其中02用于細(xì)胞有氧呼吸,CO2的作用是。與傳統(tǒng)的血清抗體相比,單克隆抗體具有、等優(yōu)點。8育種工作者利用不同的方法進(jìn)行了如下四組實驗。請據(jù)圖回答問題。番茄甸皮部細(xì)胞花粉OO花粉花粉番茄韌皮馬鈴薯韌部細(xì)胞皮部細(xì)胞組織培養(yǎng)組織培養(yǎng)胞裂細(xì)分胞化細(xì)分B曲W幼秋水仙素A胞細(xì)OB胞細(xì)O組織培養(yǎng)組織培養(yǎng)植物體A植物體B植物體C植物體Dinniiv圖I過程由番茄韌皮部細(xì)胞形成幼苗A的過程需
9、要經(jīng)過兩個關(guān)鍵步驟,該過程依據(jù)的原理是。植物組織培養(yǎng)除了需要提供一定的營養(yǎng)、溫度和光照外,還必須在的條件下進(jìn)行。已知番茄的紅果(Y)對黃果(y)為顯性,少室(M)對多室(m)為顯性,控制兩對相對性狀的基因分別位于兩對同源染色體上。用紅果多室(Yymm)番茄植株的花粉進(jìn)行II、III有關(guān)實驗,則II過程中,從花粉形成幼苗B所進(jìn)行的細(xì)胞分裂方式是。111過程中植物體C的基因型為。(細(xì)胞A為兩兩融合細(xì)胞)圖III、W過程中需要去除細(xì)胞壁,獲得具有活力的在圖中W過程中,經(jīng)過鑒別和篩選后,通常植物體D能表現(xiàn)出兩個親本的遺傳性狀,根本原因是9下圖是運用現(xiàn)代生物技術(shù)對某種經(jīng)濟作物進(jìn)行品種改良的過程,據(jù)圖回答
10、有關(guān)問題:圖中涉及的現(xiàn)代生物技術(shù)有轉(zhuǎn)基因技術(shù)、技術(shù)和技術(shù)。要獲取抗蟲基因,首先是建立相應(yīng)的文庫,從中選出所需的抗蟲基因。構(gòu)建基因表達(dá)載體時,TOC o 1-5 h z可以用兩種不同的限制酶分別切割目的基因和運載體,而對兩種限制酶的要求是。為獲取雜種細(xì)胞,先除去細(xì)胞壁以獲得,再用PEG誘導(dǎo)其融合;融合成功的標(biāo)志是雜種細(xì)胞出現(xiàn)。為鑒定新品系D的抗蟲性,需要從個體水平進(jìn)行實驗。在推廣引種時,要注意轉(zhuǎn)基因作物的種群數(shù)量不得超過環(huán)境承載力的限度,這主要體現(xiàn)了生態(tài)工程的原理。10現(xiàn)有兩種不同屬的農(nóng)作物,甲植物高產(chǎn)不耐鹽,乙植物低產(chǎn)但耐鹽;欲培育出既高產(chǎn)又耐鹽的植株,以適應(yīng)鹽堿地栽培。請回答:采用(雜交,嫁
11、接,轉(zhuǎn)基因)方法可以達(dá)到上述目的,這種育種方法的優(yōu)點是如采用細(xì)胞工程育種,做法如下:甲細(xì)胞乙細(xì)胞A處甲原生質(zhì)體乙原生質(zhì)體,誘導(dǎo)BCD亠愈傷組織選-胚狀體擇廠目的植株甲、乙原生質(zhì)體經(jīng)誘導(dǎo)融合完成的標(biāo)志是。以胚狀體為材料經(jīng)過人工薄膜包裝得到的人工種子,在適宜條件下,同樣得到萌發(fā)幼苗,與天然種子相比,人工種子具有哪些顯著的優(yōu)點?(列舉2條)。動物細(xì)胞工程應(yīng)用較廣泛的是單克隆抗體的制備,單克隆抗體最主要的優(yōu)點是具有特異性強、靈敏度高的特點,原因是。11.下圖是利用現(xiàn)代生物工程技術(shù)治療遺傳性糖尿病(基因缺陷導(dǎo)致胰島B細(xì)胞不能正常合成胰島素)的過程設(shè)計圖解。請據(jù)圖回答:培養(yǎng)移植正常合成胰島素的胰島B細(xì)胞重
12、組細(xì)胞b(1)圖中、所示的結(jié)構(gòu)分別是圖中、所示的生物工程技術(shù)分別是過程通常用去核卵細(xì)胞作受體細(xì)胞的原因除了它體積大、易操作,營養(yǎng)物質(zhì)豐富外,還因為它TOC o 1-5 h z過程通常采用的方法是。過程的完成需要用到的非酶基因操作工具為,圖示方法與一般的異體移植相比最大的優(yōu)點是。12下圖為單克隆抗體制備流程示意圖。骨髓瘤細(xì)胞(不能在HAT培養(yǎng)基上生長)混合并進(jìn)丁行細(xì)胞融某些淋巴細(xì)胞合,轉(zhuǎn)到HAT(產(chǎn)生特異抗體)培養(yǎng)基上培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞出未融合細(xì)胞死亡雜交瘤細(xì)胞生長圖中過程是。對動物細(xì)胞來說,過程獨有的方法是。過程的目的是TOC o 1-5 h z。過程的目的是獲得。在培養(yǎng)過程中為防止雜菌感染,應(yīng)向
13、培養(yǎng)液中添力口;其體外培養(yǎng)需用CO2培養(yǎng)箱,其中CO2的主要作用是。若要大量制備抗該蛋白的單克隆抗體,可將該雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠的中使其增殖。單克隆抗體與傳統(tǒng)抗體相比,其優(yōu)點是。13.現(xiàn)有甲、乙兩個番茄品種(染色體數(shù)2n=24),其基因型分別為AAbb和aaBB,這兩對基因位于非同源染色體上,且在光照強度大于500勒克斯時,都不能生長,這是由于它們中的一對隱性純合基因(aa或bb)作用的結(jié)果。取甲乙兩品種的花粉分別培養(yǎng)成植株,將它們的葉肉細(xì)胞制成原生質(zhì)體,并將兩者相混,使之融合,誘導(dǎo)產(chǎn)生細(xì)胞團。然后,放到大于500勒克斯光照下培養(yǎng),結(jié)果有的細(xì)胞團不能分化,有的能分化發(fā)育成植株。請回答下列問題:
14、(1)甲、乙兩番茄品種花粉經(jīng)過花藥離體培養(yǎng)技術(shù)而形成的植株是倍體。(2)將葉肉細(xì)胞制成原生質(zhì)體時,使用破除細(xì)胞壁。在細(xì)胞融合技術(shù)中,常用的化學(xué)試劑是。融合后形成的細(xì)胞類型有種(這里僅考慮2個原生質(zhì)體的相互融合)。TOC o 1-5 h z細(xì)胞融合成功的標(biāo)志是。細(xì)胞融合后誘導(dǎo)產(chǎn)生的細(xì)胞團叫。在大于500勒克斯光照下培養(yǎng),能分化的細(xì)胞團的基因型是(這里只考慮2個原生質(zhì)體的相互融合)。由該細(xì)胞團分化發(fā)育成的植株,其染色體數(shù)是。14根據(jù)資料請回答下列問題:資料甲:某種細(xì)菌體內(nèi)有抗蟲基因,該基因能指導(dǎo)抗蟲毒蛋白的合成。我國科學(xué)家成功地將該抗蟲基因?qū)朊藁?xì)胞中,培育出了抗蟲效果好的棉花新品種。資料乙:研究表明,抗H蛋白單克隆抗體能抑制過量表達(dá)H蛋白的乳腺癌細(xì)胞的生長,科學(xué)家利用小鼠制備出了抗H蛋白的單克隆抗體。資料甲中,獲取抗蟲基因時可使用EcoRI,其原因是含抗蟲基因的DNA片段中含有。向棉花細(xì)胞導(dǎo)入抗蟲基因時,我國科學(xué)家采用了法??瓜x基因?qū)朊藁?xì)胞后,為確定棉花植株是否具有抗蟲特性以及抗性的程度如何,需要做實驗進(jìn)行個體水平的鑒定。
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