光合細(xì)菌的菌種分離和菌種保存技術(shù)

1、4光合骨田菌的菌用重分雕和菌毛重保存技荷菌重的分雕，是雀它生活的璘境中，典混雅的微生物群分雕出來。是 是獴得侵良菌株最基本且必要的手段。菌重大量培餐目前雁用於有檄康水凈化和水走餐殖棠上的光合菌，主要是航螺菌科中彳森舄紫色非硫菌中的一些重類M包括矣工螺菌(RhodosirillunJ.a假 罩胞菌屠(Rhodopseudomona)、和矣工微菌屠(Rhodomicrobiun)在內(nèi)的三彳固屠， 共同特徵是具鞭毛有重削生，不走生兼泡，矣出胞內(nèi)不稹累硫化物。探檬：光合菌生辰4條件，主要有水、有檄和廄氧璘境。因此，在河底、海底的泥土及水田、清渠等經(jīng)常含有有檄物的泥土上，有著呈橙黃色、粉航色墟 狀沉稹物

2、的泥土，都可以探取分雕光合菌的檬品。培餐方式：目前在水走餐殖上雁用的光合菌，主要是光合巽管型航螺菌科，其中以矣工假罩胞菌H(Rhodopseudomona)舄主。探用的餐殖方法有麗重，全封 的廄兼光照培餐方式，放式的微兼光照培餐方式。全封式的廄兼光照培餐探用照色透光的容器，消毒彳爰裝入培餐液，接入2050%的菌重胃液，將容器中 灌滿培餐液，加盍造成廄兼的培餐璘境。，置於有陛光的地方或用人工光源逵行 培*，到指敷生辰期高峰畤，可作舄菌重器液接重。放微兼光照培餐可探用100-200L容量的的塑膝桶或500L容量的鱉年岷孵化桶舄培餐容器。在底 部裝打兼石，培餐畤微充兼，使桶內(nèi)光合矣出菌上下翻重力。在

3、桶的正上方的 30cm左右加裝人工光源，使液面照度建2000lux。容器消毒彳爰裝入培餐液，接入 2050%的菌重胃液，照明，微充兼培餐。培餐基瑩寸培餐光合自管型菌，一般用lass基磴培餐基，加入量的碳酸氫獸作舄二氧化碳的來源，用磷酸整pH 7.08.0，然彳爰加入0.050.1%的 NaS. 9HO作舄雷子供髓和供氫髓，在光照M境，2030C培餐。培餐光合 巽藉型的菌劇需在laS培餐基中再加入0.2%酵胃膏、0.25%乙酸金內(nèi)、0.02% 丙酸金內(nèi)和5%NaHCO3，整其pH至7.0-8.0,根撮璘境需求而定。航螺菌科配方NHCl41.0gNaCl0.5-2.0gNaHCO3 *11.0T.

4、 m.信者液*210mlK2HPO40.2生辰素卓甫助因子信者液*31mlCH COONa31-5g蒸食留水*41000mlMgSO . 7H O0.2gpH *47.0著色菌科配方NHCl41.0gMgCl0.2gNaHCO31.0gT. m.信者液*210mlK2HPO40.5g蒸食留水*41000mlNaS *521.0gpH *48.0-8.5梓菌科配方NHCl41.0gMgCl0.2gNaHCO31.0gT. m.信者液*210mlK2HPO40.5g蒸食留水*41000mlNaS *521.0gpH *47.3*1事先裂偷5%NaHCO3水溶液，經(jīng)遏濾除菌，取20ml典另外高E菌

5、的培餐基混合*2 微量兀素信者液：FeCl3 5mg、CuSO4. 5H2O 0.05mg、H3BO3 1mg、MnCl . 5HO 0.05mg、ZnS。. 7H O Wg、cO (NO ) . 6H O3 22423220.5mg、蒸食留水1000ml*3生辰申甫助因子：隹生素B1、P-胺基苯甲酸、根不同菌彳重加入。*4光合矣出菌如舄海水彳重，改用人工海水，亞整pH值*5事先裂偷10% Na2S水溶液，經(jīng)遏濾除菌，取10ml典另外經(jīng)高fi菌 的培餐基混合。培*硫菌(Chromatium )寺，可再Na S水溶液中加入 0.2%焉來酸金內(nèi)等有檄酸來促逵生辰。培餐方法光合菌的培餐，按次序分舄容

6、器、工具的消毒，培餐基的利莆，接 彳重和培餐管理四侗步驟。容器、工具的消毒，參考微藻培餐方法部分。培餐基的裂偷 淡水彳重光合菌使用消毒遏的淡水裂偷，生走培餐可用消毒的自來水 (或井水)配裂。如果培餐海水彳重光合矣出菌劇用天然海水配裂培餐基， 在海水中加入磷元素畤，不能用KHPO,雁用KHPO，不然畬走生大量沉）殿。22威菌和消毒菌彳重培餐用的培餐基雁速同培餐容器用高摩蒸兼威菌威菌。大型生 豳生培餐劇把經(jīng)沉）殿砂渤爰的水用漂白液消毒倒吏用。培餐基配裂根撮所培*的管餐需要避撐合遒的培餐基配方。按培餐 基配方把所需物稍量，逐一溶解，混合，配成培餐基。也可先配成胃 液，使用畤按比例加入一定的量即可。接

7、彳重培餐基配好彳爰，雁立即逵行接彳重。光合菌生走生培餐的接彳重量需求重交高，一般舄20%一50%，即菌彳重胃液量和新配培餐液堇隹之比舄1: 4一1： 1，不雁低於20%，尤其是微兼培餐，接彳重量更雁高些，否劇光合菌在培餐液 中很BttH，影警最走量和量。培餐管理光合菌的培餐遏程中，管理工作包括日常管理操作和測，生辰情 況的察、梭查以及出現(xiàn)冏題的分析虔理等三侗方面。日常管理和測授拌和打兼：光合菌培餐遏程中必硝甯助沉）殿的光合菌上浮獴 得光照，保持菌胞的良好生辰。大型廄兼培餐劇用檄械授拌或使 用小型沉水焉建使水慢循璘，保持菌髓浮。微兼培餐是通遏打兼甯助菌髓上浮，因舄打兼畬使溶氧含量增加， 光合菌繁

8、殖受到抑制，所以必硝格控制供兼量。一般探用定畤 ft#充兼，充兼量控制在11.5L/（L*hr）之，溶解氧量保持在 1ppm以下。志周筋光照度：培餐光合矣出菌需要#ffi行照明。白天可利用日光培 餐，晚上劇使用人工光源，或完全利用人工光源培餐。一般培餐光 照弓鼠度雁控制在20005000 lx之。如果光合矣出菌胞密度高，劇 光照弓鼠度雁提高到500010000 lx。筋溫度：光合菌空寸溫度的BWKH在2339C內(nèi)，均能正常生 辰繁殖，可不必整溫度。常溫下培餐也可通遏整，將溫度控制 在光合矣出菌生辰繁殖最遒宜的Ho酸度的測定和整：培餐光合菌必硝注意酸度的燮化。光合 矣出菌大量繁殖畤，菌液pH值上

9、升，此畤舄指敷生辰期。但富pH值 超遏生辰的BWKHK，光合矣出菌生辰下降。如果能及畤整，使 pH值保持在最H，光合菌能黑圈#生辰繁殖。測定和整pH 值，可以羞襄光合菌保持在指敷生辰期。一般探用加酸的瓣法來降 低酸值。醋酸、乳酸和獸酸均可使用，最常用的是醋酸。日常管理工作中，必硝每天或隔天測定pH值，富pH值上升超出最H, 即加酸整。生辰情）兄的察和梭查光合菌生辰情）兄的好讀是培餐成敗的檬率。在培餐遏程中，可以通遏 察菌液的色及其燮化來了解光合菌生辰繁殖的大髓情兄，菌液的 色是否正常，接彳重彳爰色是否由凌燮深，均反映光合菌是否正常生 辰繁殖以及繁殖速度的快慢。必要畤可通遏微箓梭查，了解情兄。冏題的分析和虔理通遏日常管理、梭測、梭查，了解光合矣出菌的生辰情兄，就可以結(jié)合富 畤璘境4條件的燮化逵行分析，找出影警光合菌生辰繁殖的原因，探取 相雁的措施。影警光合菌生辰的原因很多，內(nèi)因是菌彳重是否侵良，外因是光照、溫度、管餐、敏害和廄兼程度等。溫度、光照和pH值都能影警著光合菌的生 辰，而且溫度、光照和pH值之是互相制的的，溫度典光照的弓鼠弱是瑩寸立統(tǒng)一 的，所以光合菌生辰的最遒4條件雁是互雁的，即溫度高，光照雁弱；溫度低， 光照雁弓虱如果是溫度高，