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1、同濟大學(xué)附屬同濟醫(yī)院檢驗科生化組項目操作指導(dǎo)書TJYYJYKSH/XMZ115第2版標(biāo)題:血清尿酸(UA)測定第章 第15節(jié)第 PAGE 3 頁 共 NUMPAGES 3 頁1. 目的:保證UA檢測結(jié)果準(zhǔn)確、可靠2. 適用范圍:UA在全自動生化分析儀上的檢測3. 項目名稱:UA4. 檢測方法:尿酸酶-過氧化物酶偶聯(lián)法原理:樣品和加入試劑R1(緩沖液/酶/TOOS),加入試劑R2(緩沖液/酶/4-氨基安替比林),啟動反應(yīng): 尿酸酶 尿酸 + O2 +2H20 尿囊素 + CO2 + H202尿酸在尿酸酶催化下,氧化生成尿囊素和過氧化氫。 過氧化物酶POD2H2O2 + H+ + TOOS + 4
2、-氨基安替比林 醌亞胺有色物質(zhì)+ 4H2OTOOS:N-乙基-N-(2-羥基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺過氧化氫與4-氨基安替比林和TOOS在過氧化物酶的作用下,生成有色物質(zhì)(醌亞胺化合物),其色澤與樣品中尿酸濃度成正比。6. 試劑:6.1 檢測試劑:6.1.1 品牌:羅氏6.1.2 貨號:R1:11929429 216; R2:1929437 2166.1.3 包裝規(guī)格:R1:6258 ml ; R2:668 ml6.1.4 試劑組成:R1:緩沖液/酶/TOOS磷酸鹽緩沖液:0.05 mol/L,pH7.8;TOOS:7 mmol/L;脂肪酸聚乙二醇醚:4.8%; 抗壞血酸氧化酶: 5 U/
3、mlR2:緩沖液/酶/4-氨基安替比林磷酸鹽緩沖液:0.1 mol/L,pH7.8;過氧化物酶: 1 U/ml;鐵氰化鉀:0.30mmol/L; 尿酸酶: 0.5 U/ml;4-AAP: 3 mmol/L;6.2 標(biāo)準(zhǔn)品:羅氏C.F.A.S.混合定標(biāo)液7. 儀器:HITACHI 7180 生化分析儀8. 操作:自動生化分析儀測定,具體參數(shù)見附錄。 線性范圍:11.9 1487 umol/L 參考范圍:210 420 umol/L11. 臨床意義:11.1 血清尿酸測定對痛風(fēng)診斷最有幫助,痛風(fēng)患者血清中尿酸增高,但有時亦會出現(xiàn)正常尿酸值.11.2 在核酸代謝增加時,如白血病,多發(fā)性骨髓瘤,真性紅
4、細胞增多癥等血清尿酸值亦常見增高.11.3 在腎功能減退時,常伴有血清尿酸增高.11.4 在氯仿中毒,四氯化碳中毒及鉛中毒,子癇,妊娠反應(yīng)及食用富含核酸的食物等,均可引起血中尿酸增高. 標(biāo)本要求:血清、血漿(非EDTA、枸櫞酸、草酸鹽抗凝)標(biāo)本。以空腹時采血為佳,但有節(jié)制的早餐不會使尿酸明顯升高。血樣本采集應(yīng)避免在過度的肌運動后或暴露于強光下,否則會使結(jié)果升高。標(biāo)本在室溫中穩(wěn)定3天。13. 注意事項:13.1 遇高濃度 VitC 的標(biāo)本,可使測定結(jié)果偏低。13.2 紅細胞內(nèi)有多種非特異性還原物資存在,因此用血清測定比用全血好。13.3 以甲醛為防腐劑的商品尿酸標(biāo)準(zhǔn)液,僅可用于磷鎢酸還原法,不能用于尿酸酶法。14. 參考文獻
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