中國獸藥典 2015版一部解讀 于曉輝VIP

1、中國獸藥典二一五年版一部 解讀中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所 于曉輝內(nèi)容概況 * 凡例 * 紫外可見分光光度法 * 高效液相色譜法 * 氣相色譜法 * 獸藥質(zhì)量標準分析方法驗證指導(dǎo)原則凡例 三、凡例是為正確使用中國獸藥典進行獸藥質(zhì)量檢定的基本原則，是對中國獸藥典正文、附錄及與獸藥質(zhì)量檢定有關(guān)的共性問題的統(tǒng)一規(guī)定。 凡例是解釋和正確使用中國獸藥典進行質(zhì)量檢定的基本原則，并把正文品種、附錄及質(zhì)量檢定有關(guān)的共性問題加以規(guī)定，避免在全書中重復(fù)說明。凡例中的有關(guān)規(guī)定具有法定的約束力。凡例 二、獸藥典收載的凡例、附錄對獸藥典以外的其他獸用化學(xué)、抗生素、生化藥品等國家標準具同等效力。 其他國家標準：獸藥國家標準 化學(xué)藥

2、品、中藥卷第一冊、獸藥國家標準匯編（獸藥地方標準上升國家標準 第一、二、三冊）、進口獸藥質(zhì)量標準、農(nóng)業(yè)部公告（未成冊）等未收載在本版獸藥典中的標準。凡例【氫氧化鋁/鋁離子含量測定】 精確量取樣品液5ml，置250ml三角瓶中，加0.95mol/L的磷酸溶液1.5ml，使完全溶解。加0.05mol/L的EDTA標準溶液10ml、pH4.5醋酸銨緩沖液10ml，于沸水浴中加熱10分鐘，冷卻至室溫后加0.1%二甲酚橙指示劑1ml，用0.025mol/L鋅滴定液滴定，當(dāng)溶液由亮黃轉(zhuǎn)變?yōu)槌壬礊榈味ńK點，記錄鋅滴定液的用量X。同時做一注射用水空白對照，與樣品液一樣加磷酸溶液、EDTA標準溶液、醋酸銨緩沖

3、液，水浴后用鋅滴定液滴定。凡例 三十、（2）本版獸藥典使用的滴定液和試液，其濃度要求精密標定的滴定液用“XXX滴定液（YYYmol/L）”表示；作其他用途不需精密標定其濃度時，用“YYYmol/L XXX溶液”表示，以示區(qū)別。凡例 三十、（3） 水浴溫度 除另有規(guī)定外，均指98100； 熱水 系指7080； 微溫或溫水 系指4050； 室溫（常溫） 系指1030； 冷水 系指210； 冰浴 系指約0； 放冷 系指放冷至室溫。凡例 三十二、（4） 試驗中的“空白試驗”，系指在不加供試品或以等量溶劑替代供試液的情況下，按同法操作所得的結(jié)果；含量測定中的“并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正”，系指按供試品

4、所耗滴定液的量（ml）與空白試驗中所耗滴定液的量（ml）之差進行計算。凡例 三十二、（1） “精密稱定”系指稱取重量應(yīng)準確至所取重量的千分之一；“稱定”系指稱取重量應(yīng)準確至所取重量的百分之一；“精密量取”系指量取體積的準確度應(yīng)符合國家標準中對該體積移液管的精密度要求；“量取”系指可用量筒或按照量取體積的有效數(shù)位選用量具。取用量為“約”若干時，系指取用量不得超過規(guī)定量的10。 例1：【含量均勻度】 取本品10片，分別精密稱定，每片各置錐形瓶中 例2：【殘留溶劑】甲苯、乙醇 另取甲苯、乙醇適量，精密稱定，加二甲基乙酰胺定量稀釋制成混合對照品溶液。凡例 四、凡例和附錄中采用“除另有規(guī)定外”這一用語，

5、表示存在與凡例或附錄有關(guān)規(guī)定不一致的情況時，則在正文中另作規(guī)定，并按此規(guī)定執(zhí)行。【滲透壓摩爾濃度】 除另有規(guī)定外，靜脈輸液及椎管注射用注射液按各品種項下的規(guī)定，照滲透壓摩爾濃度測定法檢查，應(yīng)符合規(guī)定?！究梢姰愇铩?除另有規(guī)定外，照可見異物檢查法檢查，應(yīng)符合規(guī)定。凡例十五、（2）溶解度是獸藥的一種物理性質(zhì)。對在特定溶劑中的溶解性能需做質(zhì)量控制時，在該品種項下另作具體規(guī)定。 試驗法：除另有規(guī)定外，稱取研成細粉的供試品或量取液體供試品，置252一定容量的溶劑中，每隔5分鐘強力振搖30秒鐘；觀察30分鐘內(nèi)的溶解情況，如無目視可見的溶質(zhì)顆粒或液滴時，即視為完全溶解。凡例 三十二、（3） 試驗中規(guī)定“按干

6、燥品（或無水物，或無溶劑）計算”時，除另有規(guī)定外，應(yīng)取未經(jīng)干燥（或未去水、或未去溶劑）的供試品進行試驗，并將計算中的取用量按檢查項下測得的干燥失重（或水分、或溶劑）扣除。凡例 三十、（7）液體的滴，系在20時，以1.0ml水為20滴進行換算。（8）溶液后標示的“（110）”等符號，系指固體溶質(zhì)1.0g或液體溶質(zhì)1.0ml加溶劑使成10ml的溶液；未指明用何種溶劑時，均系指水溶液；兩種或兩種以上液體的混合物，名稱間用半字線“-”隔開，其后括號內(nèi)所示的“:”符號，系指各液體混合時的體積（重量）比例。 例 ：鹽酸溶液（91000）； 冰醋酸-水-二乙胺（5:5:2）（10）乙醇未指明濃度時，均系指9

7、5（ml/ml）的乙醇。凡例 三十二、（5） 試驗時的溫度，未注明者，系指在室溫下進行；溫度高低對試驗結(jié)果有顯著影響者，除另有規(guī)定外，應(yīng)以252為準。 例：為防止HNO2的分解與逸失，用亞硝酸鈉滴定液進行永停滴定時，須在30以下進行。 高氯酸滴定液因系以無水冰醋酸為溶劑，其膨脹系數(shù)為0.0011，室溫的變動將嚴重影響滴定液的濃度，因此，在非水滴定時，應(yīng)保持室內(nèi)溫度的恒定。凡例 三十四、試驗用水，除另有規(guī)定外，均系指純化水。酸堿度檢查所用的水，均系指新沸并放冷至室溫的水。 三十五、酸堿性試驗時，如未指明用何種指示劑，均系指石蕊試紙。凡例 三十、（9）本版獸藥典所用藥篩，選用國家標準的R40/3系

8、列，分等如下： 篩號 篩孔內(nèi)徑（平均值） 目號 一號篩 2000m70m 10目 二號篩 850m29m 24目 三號篩 355m13m 50目 四號篩 250m9.9m 65目 五號篩 180m7.6m 80目 六號篩 150m6.6m 100目 七號篩 125m5.8m 120目 八號篩 90m4.6m 150目 九號篩 75m4.1m 200目 凡例 六、正文所設(shè)各項規(guī)定是針對符合獸藥生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范的產(chǎn)品而言。 任何違反獸藥GMP或有未經(jīng)批準添加物質(zhì)所生產(chǎn)的獸藥，即使符合中國獸藥典或按照中國獸藥典暫不能將其添加物或相關(guān)雜質(zhì)定性為何物質(zhì)，亦不能認為其符合規(guī)定。凡例 九、正文內(nèi)容根據(jù)品種和

9、劑型的不同，按順序可分別列有：（1）品名（包括中文名、漢語拼音與英文名）；（2）有機藥物的結(jié)構(gòu)式；（3）分子式與分子量；（4）來源或有機藥物的化學(xué)名稱；（5）含量或效價規(guī)定；（6）處方；（7）制法；（8）性狀；（9）鑒別；（10）檢查；（11）含量測定；（12）類別；（13）作用與用途；（14）用法與用量；（15）注意事項；（16）不良反應(yīng)；（17）休藥期；（18）規(guī)格；（19）貯藏；（20）制劑等。凡例 十七、 采用色譜法檢測有關(guān)物質(zhì)時，雜質(zhì)峰（或斑點）不包括溶劑、輔料或原料藥的非活性部分等產(chǎn)生的色譜峰（或斑點）。必要時，可采用適宜的方法對上述非雜質(zhì)峰（或斑點）進行確認。凡例 十七、處方中含

10、有抑菌劑的注射劑和眼用制劑，應(yīng)建立適宜的檢測方法對抑菌劑的含量進行控制。正文已明確列有抑菌劑檢查的品種必須依法對產(chǎn)品中使用的抑菌劑進行該項檢查，并應(yīng)符合相應(yīng)的限度規(guī)定。凡例 十九、類別、作用與用途，系指獸藥的主要作用與用途或?qū)W科的歸屬劃分，不排除在臨床實踐的基礎(chǔ)上作其他類別藥物使用。 二十、用法與用量，系指常用的給藥方法和除另有規(guī)定外成年畜禽的常用劑量。凡例 二十二、貯藏項下的規(guī)定，系為避免污染和降解而對獸藥貯存與保管的基本要求，以下列名詞術(shù)語表示： 遮光 系指用不透光的容器包裝，例如棕色容器或黑紙包裹的無色透明、半透明容器； 避光 系指避免日光直射； 密閉 系指將容器密閉，以防止塵土及異物進

11、入； 密封 系指將容器密封以防止風(fēng)化、吸潮、揮發(fā)或異物進入； 熔封或嚴封 系指將容器熔封或用適宜的材料嚴封，以防止空氣與水分的侵入并防止污染；凡例 陰涼處 系指不超過20； 涼暗處 系指避光并不超過20； 冷處 系指210； 常溫 系指1030。 除另有規(guī)定外，貯藏項下未規(guī)定溫度的一般系指常溫。凡例 二十三、制劑中使用的原料藥和輔料，均應(yīng)符合本版獸藥典的規(guī)定；本版獸藥典未收載者，必須制定符合獸藥用要求的標準，并需經(jīng)國務(wù)院獸醫(yī)行政管理部門批準。 本版獸藥典收載的藥用輔料標準是對在品種【類別】項下規(guī)定相應(yīng)用途輔料的基本要求。 制劑生產(chǎn)企業(yè)使用的藥用輔料即使符合本版獸藥典藥用輔料標準，也應(yīng)進行藥用輔

12、料標準的適用性驗證。 藥用輔料標準適用性驗證應(yīng)充分考慮藥用輔料的來源、工藝，以及制備制劑的特點、給藥途徑、使用對象以及使用劑量等相關(guān)因素的影響。凡例 在采用本版獸藥典或中國藥典收載的藥用輔料時，還應(yīng)考慮制備制劑的給藥途徑、制劑用途、配方組成、使用劑量等其他因素對其安全性的影響。根據(jù)制劑的安全風(fēng)險的程度，選擇相應(yīng)等級的藥用輔料。特別是對注射劑、眼用制劑等高風(fēng)險制劑，在適用性、安全性、穩(wěn)定性等符合要求的前提下應(yīng)盡可能選擇供注射用級別的藥用輔料。 采用本版獸藥典或中國藥典收載的藥用輔料對制劑的適用性及安全性等可能產(chǎn)生影響時，生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)根據(jù)制劑的特點，采用符合要求的藥用輔料，并建立相應(yīng)的藥用輔料標準。

13、凡例 二十四、采用本版獸藥典規(guī)定的方法進行檢驗時應(yīng)對方法的適用性進行確認。 *對象是藥典分析方法或法定分析方法; *證明藥典分析方法或法定分析方法適用于被測樣品; *證明方法使用人員有能力成功地操作藥典分析方法或法定分析方法。凡例 無需確認的項目：干燥失重、熾灼殘渣、重金屬、熱分析法、各種濕法化學(xué)分析，如酸值測定、用簡單儀器進行的檢驗，如pH值測定等。 需要確認：專屬性；被測物濃度在定量限附近的限度檢查，常見的如殘留溶劑檢查；較高濃度的限度檢查和含量測定，常見的如有關(guān)物質(zhì)較高的限度檢查、水分等。凡例 二十八、標準品系指用于生物檢定或效價測定的標準物質(zhì)，其特性量值一般按效價單位（或g）計；對照品

14、系指采用理化方法進行鑒別、檢查或含量測定時所用的標準物質(zhì)，其特性量值一般按純度（%）計。 標準品與對照品的建立或變更批號，應(yīng)與國際標準品或原批號標準品或?qū)φ掌愤M行對比，并經(jīng)過協(xié)作標定。然后按照國家獸藥標準物質(zhì)相應(yīng)的工作程序進行技術(shù)審定，確認其質(zhì)量能夠滿足既定用途后方可使用。 標準品與對照品均應(yīng)按其標簽或使用說明書所示的內(nèi)容使用或貯藏。紫外可見分光光度法 紫外-可見分光光度法是在190800nm波長范圍內(nèi)測定物質(zhì)的吸光度，用于鑒別、雜質(zhì)檢查和定量測定的方法。 例：【鑒別】 照紫外-可見分光光度法測定，在180500nm記錄供試品溶液和對照品溶液的光譜。紫外可見分光光度法 測定法 空白：一般為配制

15、供試品溶液的同批溶劑；用同體積的溶劑代替對照品或供試品溶液，然后依次加入等量的相應(yīng)試劑，并用同樣方法處理，制得。 吸光度讀數(shù)：一般為0.30.7。 狹縫波帶寬度：應(yīng)以減小狹縫寬度時供試品的吸光度不再增大為準。紫外可見分光光度法 測定波長： 在規(guī)定的吸收峰波長2nm以內(nèi)測試幾個點的吸光度，或由儀器在規(guī)定波長附近自動掃描測定，以核對供試品的吸收峰波長位置是否正確。除另有規(guī)定外，吸收峰波長應(yīng)在該品種項下規(guī)定的波長2nm以內(nèi)，并以吸光度最大的波長作為測定波長。 例：照紫外-可見分光光度法，在490nm波長處分別測定吸光度，計算，即得。紫外可見分光光度法1、鑒別和檢查 分別按各品種項下規(guī)定的方法進行。2

16、、含量測定 一般有以下幾種。 （1）對照品比較法 （2）吸收系數(shù)法：吸收系數(shù)通常應(yīng)大于100，并注意儀器的校正和檢定。 （3）計算分光光度法 （4）比色法高效液相色譜法 超高效液相色譜儀是適應(yīng)小粒徑(約2m)填充劑的耐超高壓、小進樣量、低死體積、高靈敏度檢測的高效液相色譜儀。 相比于HPLC，UPLC的運行時間更短、分離度更好、靈敏度更高、溶劑用量更少。 當(dāng)對其測定結(jié)果產(chǎn)生爭議時，應(yīng)以品種項下規(guī)定的色譜條件的測定結(jié)果為準。高效液相色譜法色譜柱： 反相、正相、離子交換、手性分離，等。 品種正文中未指明色譜柱溫度時系指室溫。注意： 如使用緩沖液或含鹽溶液作為流動相，在試驗結(jié)束后，應(yīng)先用不含鹽的流動

17、相沖洗，使色譜柱內(nèi)的鹽完全溶解洗脫出來，再用較高濃度的甲醇/乙腈-水溶液沖洗。 長期保存時，反相柱可貯存于甲醇或乙腈中，正相柱可貯存于經(jīng)脫水處理的正己烷中，離子交換柱可貯存于含5%甲醇或含0.05%疊氮化鈉的水中。高效液相色譜法檢測器選擇性通用型線性流動相紫外檢測器二極管陣列檢測器熒光檢測器電化學(xué)檢測器示差折光檢測器蒸發(fā)光散射檢測器不含鹽高效液相色法色譜條件 不可改變：填充劑種類、流動相組分、檢測器類型。 例：【檢查】 照分子排阻色譜法試驗，用二羥基丙基鍵合硅膠為填充劑，以為流動相，流速為每分鐘2ml，柱溫為35。高效液相色譜法色譜條件 可適當(dāng)改變：色譜柱內(nèi)徑與長度、 填充劑粒徑、 流動相流速

18、、 流動相組分比例、 柱溫、 進樣量、 檢測器靈敏度等。高效液相色譜法 調(diào)整流動相組分比例時， 當(dāng)小比例組分的百分比例X小于等于33時，允許改變范圍為0.7X1.3X；當(dāng)X大于33時，允許改變范圍為X-10X+10。 例1 兩組分50:50，調(diào)節(jié)范圍為40:6060:40. 例2 兩組分2:98，調(diào)節(jié)范圍為1.4:98.62.6:97.4. 例3 三組分60:35:5，對于35%的組分，調(diào)節(jié)范圍為50:45:570:25:5；對于5%的組分，調(diào)節(jié)范圍為58.5:35:6.561.5:35:3.5. 高效液相色譜法系統(tǒng)適用性試驗 理論板數(shù)：應(yīng)指明測定物質(zhì)，一般為待測物質(zhì)或內(nèi)標物質(zhì)的理論板數(shù)。 分

19、離度：除另有規(guī)定外，待測物質(zhì)色譜峰與相鄰色譜峰之間的分離度應(yīng)大于1.5。 拖尾因子：以峰高作定量參數(shù)時，除另有規(guī)定外，T值應(yīng)在0.951.05之間；以峰面積作定量參數(shù)時，嚴重拖尾會對積分造成影響，此時應(yīng)在品種正文項下對拖尾因子作出規(guī)定。高效液相色譜法重復(fù)性： 采用外標法時，通常取各品種項下的對照品溶液，連續(xù)進樣5次，除另有規(guī)定外，其峰面積的RSD應(yīng)不大于2.0%。 采用內(nèi)標法時，通常配制相當(dāng)于80%、100%和120%的對照品溶液，加入規(guī)定量的內(nèi)標溶液，配成3種不同濃度的溶液，分別至少進樣2次，計算平均校正因子,其RSD應(yīng)不大于2.0%。 高效液相色譜法 靈敏度：用于評價色譜系統(tǒng)檢測微量物質(zhì)的

20、能力，通常以信噪比(S/N)來表示。通過測定一系列不同濃度的供試品或?qū)φ掌啡芤簛頊y定信噪比。定量測定時，信噪比應(yīng)不小于10；定性測定時，信噪比應(yīng)不小于3。系統(tǒng)適用性試驗中可以設(shè)置靈敏度實驗溶液來評價色譜系統(tǒng)的檢測能力。高效液相色譜法測定法 內(nèi)標法：可避免樣品前處理及進樣體積誤差對測定結(jié)果的影響。 外標法 加校正因子的主成分自身對照法 不加校正因子的主成分自身對照法 面積歸一化法：用于雜質(zhì)檢查時，由于儀器響應(yīng)的線性限制，峰面積歸一化法一般不宜用于微量雜質(zhì)的檢查。 氣相色譜法載氣源：氦氣、氮氣、氫氣。進樣部分：溶液直接進樣、自動進樣、頂空進樣。色譜柱：填充柱、毛細管柱。柱溫箱檢測器：FID、ECD

21、，等。載氣類型和流速平衡溫度、平衡時間、傳輸線溫度、定量環(huán)溫度獸藥質(zhì)量標準分析方法指導(dǎo)原則 需驗證的情況：建立獸藥質(zhì)量標準、獸藥生產(chǎn)工藝變更、制劑的組分變更、原分析方法進行修訂。 驗證項目：鑒別試驗，限量或定量檢查，原料藥或制劑中有效成分含量測定，制劑中其他成分（如防腐劑等）測定，獸藥溶出度、釋放度中溶出量的測定。 驗證指標：準確度、精密度（包括重復(fù)性、中間精密度和重現(xiàn)性）、專屬性、檢測限、定量限、線性、范圍和耐用性。 在分析方法驗證中，須采用標準物質(zhì)進行試驗。獸藥質(zhì)量標準分析方法指導(dǎo)原則 項 目內(nèi) 容鑒 別雜質(zhì)測定含量測定及溶出量測定校正因子定 量限 度準確度-+-+精密度重復(fù)性-+-+中間

22、精密度-+-+專屬性+檢測限-+-定量限-+-+線性-+-+范圍-+-+耐用性+ 已有重現(xiàn)性驗證，不需要驗證中間精密度。 如一種方法不夠?qū)?，可用其他分析方法予以補充。 視具體情況予以驗證。獸藥質(zhì)量標準分析方法指導(dǎo)原則 一、準確度：方法測定的結(jié)果與真實值或參考值接近的程度，一般用回收率（）表示。 1、含量測定 原料藥：對照品 與另一已知準確度的方法比較。 制劑： 處方量空白輔料中添加對照品； 制劑中添加對照品 與另一已知準確度的方法比較 準確度也可由所測定的精密度、線性和專屬性推算出來。獸藥質(zhì)量標準分析方法指導(dǎo)原則 2、雜質(zhì)定量測定 原料藥中添加已知雜質(zhì)； 制劑處方量空白輔料中添加已知雜質(zhì)；

23、與另一成熟方法比較； 不加校正因子的主成分自身對照法計算。獸藥質(zhì)量標準分析方法指導(dǎo)原則3、校正因子（10版為響應(yīng)因子）的準確度 絕對（或定量）校正因子是指單位面積的色譜峰代表的待測物質(zhì)的量。待測物質(zhì)與所選定的參照物質(zhì)的絕對校正因子之比，即為相對校正因子。 相對校正因子可采用替代物（對照品）和被替代物（待測物）標準曲線斜率比值進行比較獲得；采用紫外吸收檢測器時，可將替代物（對照品）和被替代物（待測物）在規(guī)定波長和溶劑條件下的吸收系數(shù)比值進行比較，計算獲得。 獸藥質(zhì)量標準分析方法指導(dǎo)原則4、數(shù)據(jù)要求 同一濃度（相當(dāng)于100%濃度水平），至少測定6份。 3種不同濃度（1.21、11、0.81左右），

24、每種3份測定。 應(yīng)報告測定方法、測定結(jié)果和RSD%或置信區(qū)間。樣品中待測成分含量和回收率限度關(guān)系可參考表2。獸藥質(zhì)量標準分析方法指導(dǎo)原則待測成分含量回收率限度（%）100%9810110%951021%921050.1%901080.01%8511010g/g（ppm）801151g/g7512010g/kg（ppb）70125表2 樣品中待測成分含量和回收率限度獸藥質(zhì)量標準分析方法指導(dǎo)原則 二、 精密度：在規(guī)定的測試條件下，同一份均勻供試品，經(jīng)多次取樣測定所得結(jié)果之間的接近程度。 重復(fù)性：同實驗室、同時間、同人員。 中間精密度：同實驗室、不同時間、不同人員。 重現(xiàn)性：不同實驗室、不同人員。獸

25、藥質(zhì)量標準分析方法指導(dǎo)原則重復(fù)性 同一濃度（相當(dāng)于100%濃度水平），至少測定6份。 3種不同濃度（1.21、11、0.81左右），每種3份測定。獸藥質(zhì)量標準分析方法指導(dǎo)原則精密度的數(shù)據(jù)要求待測成分含量重復(fù)性（RSD%）重現(xiàn)性（RSD%）100%1210%1.531%240.1%360.01%4810g/g（ppm）6111g/g81610g/kg（ppb）1532表3 樣品中待測成分含量和精密度RSD可接受范圍獸藥質(zhì)量標準分析方法指導(dǎo)原則 三、專屬性：在其他成分（如雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、輔料等）存在下，采用的分析方法能正確測定被測物的能力。 如方法專屬性不強，應(yīng)采用多種不同原理的方法予以補充。1、鑒別反應(yīng) 應(yīng)呈陰性反應(yīng)獸藥質(zhì)量標準分析方法指導(dǎo)原則2、含量測定和雜質(zhì)測定 雜質(zhì)可得：向試樣中加入雜質(zhì)或輔料，考察分離度或測定結(jié)果。 雜質(zhì)不可得：與另一得到驗證方法比較； 加速破壞試驗。 比較測定結(jié)果或雜質(zhì)個數(shù)。獸藥質(zhì)量標準分析方法指導(dǎo)原則 四、檢測限：試樣中被測物能被檢測出的最低量。 檢測限作為限度試驗指標和定性鑒別的依據(jù)，沒有定量意義。 1、直觀法（10版 非儀器分析目視法） 用已知濃度的被測物，試驗出能被可靠地