華支睪吸蟲分泌排泄抗原在血清學(xué)診斷中的意義

1、華支睪吸蟲分泌-分泌抗原在血清學(xué)診斷中的意義崔香淑，金元哲，李順玉【關(guān)鍵詞】華支睪吸蟲；,分泌-分泌抗原；,酶連免疫吸附法；,診斷摘要：目的評(píng)價(jià)華支睪吸蟲分泌-分泌抗原在華支睪吸蟲病血清學(xué)診斷中的代價(jià)，應(yīng)用ELISA技能對(duì)華支睪吸蟲的成蟲粗抗原和分泌-分泌抗原的敏感性和特異性舉行比力。要領(lǐng)制備華支睪吸蟲的粗抗原和分泌-分泌抗原，以ELISA要領(lǐng)對(duì)華支睪吸蟲熏染患者509人、麝貓后睪吸蟲熏染者47人、衛(wèi)氏并殖吸蟲熏染者20人、日本血吸蟲熏染者14人以及康健人血清163人，檢測血清特異性IgG。效果比力華支睪吸蟲分泌-分泌抗原的診斷的敏感性高于粗抗原，分泌-分泌抗原的特異性反響顯著高于粗抗原。結(jié)論

2、分泌-分泌抗原用于診斷熏染華支睪吸蟲病有較高的敏感性和特異性,是一種有用的診斷抗原。關(guān)鍵詞：華支睪吸蟲；分泌-分泌抗原；酶連免疫吸附法；診斷TheSignifianefExretry-seretryAntigenflnrhissinensisinSerlgialDiagnsisAbstrat：bjetiveThepresentstudyasundertakentevaluatethediagnstivaluefELISAusingexretry-seretryantigen(ESA)insteadfrudeantigen(A)flnrhissinensis.ethdsThediagnstise

3、nsitivityandspeifiityfrudeantigenandexretry-seretryantigenfserebservedbyELISA.Serafhuaninfetedithlnrhissinensis(509ases),pisthrhisviverrini(47ases),Paragniusesterani(20ases)Shistsajapniu(14ases)andseruf163healthystudentsereusedfrELISA.ResultsThediagnstisensitivityfELISAusingexretry-seretryantigenas9

4、2.5%,hihashigherthanthatfELISAusingrudelnrhissinensisantigen(88.2%).Inaddithin,thespeifiityfexretry-seretryantigenasfund93.1%hilethatfrudeantigenas87.8%.nlusinlnrhissinensisESAasfundtbeabetterserdiagnstiantigenthanAfrELISA.Keyrds：lnrhissinensis;Exretry-seretryantigen;ELISA;Diagnsis華支睪吸蟲又稱肝吸蟲,是一種嚴(yán)峻危害

5、人體康健的人獸共患寄生蟲玻重要漫衍于東亞和華人社區(qū),預(yù)計(jì)有2500萬熏染,此中海內(nèi)有1000萬熏染者1。華支睪吸蟲病的診斷固然做大便查抄可以確診,但是因蟲卵小,輕易漏診,并應(yīng)留意與其他寄生蟲的蟲卵相區(qū)分。因此,應(yīng)用免疫學(xué)診斷要領(lǐng)檢測肝吸蟲抗體是緊張的補(bǔ)貼診斷儀據(jù)。已經(jīng)用于華支睪吸蟲的查抄要擁有皮內(nèi)試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、血清凝集試驗(yàn)、對(duì)流免疫電泳及酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)。此中ELISA要領(lǐng)是敏感性和特異性較高的一種常用的檢測本領(lǐng)。如今,最常用的ELISA診斷抗原是粗抗原,它具有較高的敏感性和特異性,但和其他吸蟲有交織反響2。比來,外洋已有陳訴華支睪吸蟲的分泌-分泌抗原比粗抗原具有更高的敏感性和

6、特異性3。本實(shí)行使用華支睪吸蟲的粗抗原和分泌分泌抗原檢測患者血清抗體,評(píng)價(jià)了分泌-分泌抗原在診斷中的有用性。1質(zhì)料與要領(lǐng)1.1華支睪吸蟲粗抗原及分泌-分泌抗原的制備1.2待檢血清華支睪吸蟲熏染血清509份取自黑龍江省肇源縣。這些熏染者均有恒久食用生魚的汗青，并糞檢陽性。163例康健者血清取自非盛行區(qū)無病癥且糞檢陰性者作為陰性比較。別的相干吸蟲患者血清作交織反響實(shí)行:麝貓后睪吸蟲患者47例，日本血吸蟲患者14例，衛(wèi)氏并殖吸蟲患者20例。全部吸蟲患者均經(jīng)寄生蟲病原學(xué)檢測確診。2效果效果見表13。用粗抗原檢測抗體的ELISA法檢測各組血清,陰性比較組的均勻吸光值較低，為0.0660.058,且個(gè)別間

7、差異較小,華支睪吸蟲患者血清的均勻吸光值為0.3530.115,麝貓后睪吸蟲患者血清為0.2610.135,日本血吸蟲患者血清為0.0930.124,衛(wèi)氏并殖吸蟲患者與肝片形吸蟲患者血清的均勻吸光值稍高于0.1。而用分泌-分泌抗原檢測抗體時(shí),比較組血清樣本的吸光值和粗抗原檢測的吸光值在相似的程度上,華支睪吸蟲患者血清的均勻吸光值升高到0.4040.129,而其他吸蟲患者血清的吸光值均有所落落。509例華支睪吸蟲患者血清，449例在粗抗原檢測抗體中為陽性,敏感性為88.2%；471例在分泌-分泌抗原檢測時(shí)為陽性,敏感性為92.5%,統(tǒng)計(jì)學(xué)上有明顯性差異P0.05。在粗抗原和分泌-分泌抗原的ELI

8、SA檢測中,比較組血清和肝片吸蟲患者血清均末見交織反響,但麝貓后睪吸蟲患者血清在兩種抗原檢測中均有較高的交織反響,日本血吸蟲患者及衛(wèi)氏并殖吸蟲患者用粗抗原作檢測交織反響,別離為7.1%1/14與25%5/20,而用分泌-分泌抗原作檢測,均末見交織反響。分泌-分泌抗原檢測抗體的ELISA法特異性明顯高于用粗抗原檢測抗體的ELISA法特異性別離為93.1%和87.8%。表1華支睪吸蟲粗抗原和分泌-分泌抗原吸光度的比力略與比較組比力，*P0.05，*P0.01表2華支睪吸蟲粗抗原和分泌-分泌抗原敏感性的比力略與粗抗原體比力，*P0.05表3華支睪吸蟲粗抗原和分泌-分泌抗原特異性的比力略與比較組比力，

9、#P0.05，*P0.013討論ELISA法已是最普及地用于華支睪吸蟲的免疫學(xué)診斷。ELISA法所用抗原多為成蟲可溶性卵白抗原,按照浩繁學(xué)者的研究和應(yīng)用,其敏感性可達(dá)83.1%100%,但與日本血吸蟲,肺吸蟲有10%擺布的交織反響4。為了進(jìn)步ELISA測定的特異性,差異抗原已用于華支睪吸蟲的診斷。有關(guān)華支睪吸蟲特異性抗原包羅全蟲抗原、表皮膜抗原、代謝抗原、蟲卵抗原及去膜蟲體抗原等。此中已證明代謝抗原的血清敏感性較高,其抗原中大概含有高活性的組分5。本實(shí)行證明,用華支睪吸蟲粗抗原和分泌-分泌抗原作診斷抗原，以ELISA法診斷人體華支睪吸蟲病及其他寄生蟲病，其診斷的敏感性和特異性均分泌-分泌抗原優(yōu)

10、于粗抗原。華支睪吸蟲的分泌-代謝抗原的抗原條帶為7-8,12.5,17及26-28kDa,而粗抗原還可以不雅察到35,43,70kDa,此中7和8kDa是重要身分6,分泌-分泌抗原已被證明為急性熏染期的有用診斷抗原7。華支睪吸蟲7-8kDa大概是7和8kDa的混淆物，在免疫構(gòu)造化學(xué)染色中，它們會(huì)合漫衍于體表及精子囊,并已證明這些條帶進(jìn)步診斷的成果。分泌-分泌抗原的另一個(gè)身分是12.5和17kDa,此中17kDa卵白質(zhì)條帶已被證明為半胱氨酸卵白酶8。這條帶卵白質(zhì)抗原性并不強(qiáng)，但與其他吸蟲有較普及的交織反響，因此從分泌-分泌抗原中能去除此身分將進(jìn)步診斷的特異性。分泌-分泌抗原的第3種身分是26和2

11、8kDa條帶。這兩種條帶是一種卵白質(zhì)范例，已證明為谷胱甘肽-S轉(zhuǎn)移酶。這兩種條帶具有抗原性,與其他寄生蟲有較低的交織反響，已被對(duì)待為候補(bǔ)診斷抗原9。華支睪吸蟲的分泌-分泌抗原用于ELISA檢測中，可進(jìn)步診斷的敏感性和特異性。分泌-分泌抗原的敏感性的進(jìn)步大概與7-8和26-28kDa條帶的高含量有關(guān)。粗抗原除了這兩種抗原條帶以外,還含有其他卵白質(zhì)條帶,因此這些有用抗原成份很大概被稀釋,導(dǎo)致敏感性的低落。已有報(bào)道華支睪吸蟲粗抗原中35和70kDa抗原卵白與其他蠕蟲有交織反響10。分泌-分泌抗原含有較高的7-8和26-28kDa抗原條帶,但含有少量的35或70kDa卵白質(zhì)條帶，因此可以進(jìn)步診斷的特異

12、性。ELISA檢測特異性抗體已普及應(yīng)用于寄生蟲病查抄,包羅華支睪吸蟲病，而分泌-分泌抗原的應(yīng)用將進(jìn)步診斷的敏感性和特異性,但是得到充實(shí)的分泌-分泌抗原現(xiàn)實(shí)上有必然的難度。在以后的研究中,確定分泌-分泌抗原的有用身分，研制重組卵白將會(huì)補(bǔ)充這些不敷。參考文獻(xiàn)：1吳德,余新炳,吳宗道.華支睪吸蟲病的盛行外表J.熱帶醫(yī)學(xué)雜志，2002，23:277.2HngST.hangesfanti-lnrhissinensisIgGantibdyinseruafterpraziquanteltreatentinhuanlnrhiasisJ.KreanJParasitl,2001,16：1.3KiSI.Alnrhi

13、ssinensis-speifiantigenthatdetetsativehuanlnrhiasisJ.KreanJParasitl，36:37.4RiHJ.lnrhiasisinKreaJ.KreanJParasitl.28Suppl：63.5余海斯,周禮神.華支睪吸蟲成蟲四種抗原的免疫學(xué)特性比力J.中華熏抱病雜志，1989，74：212.6hungYB,Lee,YangHJ,etal.haraterizatinfpartiallypurified8kDaantigeniprtEinflnrhissinensisJ.KreanJParasitl，40：83.7KiSI.AlnrhissinensisspeifiantigenthatdetetsativehuanlnrhiasisJ.KreanJParasitl，36:37.8hungYB,KngY,YunDH,etal.PersistingantibdyreatininparagniiasisafterpraziquenteltreatentiselitedainlybyeggantigensJ.KreanJParasitl，38:75.9Kang