葉綠體中色素的提取和分離肖用華

1、歡迎各位領(lǐng)導(dǎo)蒞臨指導(dǎo)2022/8/261“葉綠體中色素的提取和分離”實(shí)驗(yàn)改進(jìn)2022/8/262色素提取原理：利用相似相溶原理，色素可以溶解于酒精、丙酮等有機(jī)溶劑中，形成色素液。一實(shí)驗(yàn)原理：色素分離原理：由于四種色素在層析液的溶解度不同，因而四種色素在濾紙上的擴(kuò)散速度也不同，從而將它們分離開來。2022/8/263二、目的要求1.初步掌握提取和分離葉綠體中色素的方法。2.探索葉綠體中有幾種色素。胡蘿卜素、葉黃素、葉綠素a、葉綠素b隨層析液在濾紙上擴(kuò)散速度不同，可以分出四條色素帶。2022/8/264三、重點(diǎn)與難點(diǎn)重點(diǎn): 初步掌握提取和分離葉綠體中色素的方法和探索葉綠體中有幾種色素。難點(diǎn):該實(shí)驗(yàn)

2、中應(yīng)注意的問題和培養(yǎng)學(xué)生獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的能力,掌握探究實(shí)驗(yàn)的方法。2022/8/265四、對(duì)實(shí)驗(yàn)的幾個(gè)地方進(jìn)行的改進(jìn)1實(shí)驗(yàn)材料的改進(jìn)：用菠菜作為實(shí)驗(yàn)材料，易受季節(jié)性限制，此外，色素提取液呈黃綠色，色素帶顏色淺，實(shí)驗(yàn)效果差。用韭菜，蘿卜葉，蒿菜，天竺葵代替菠菜，所得到的實(shí)驗(yàn)效果很好，又可以克服菠菜因季節(jié)原因，難于取材。2022/8/2662提取液的改進(jìn)：除丙酮外，也可用酒精（無水乙醇）替代，用量相同，結(jié)果大致相同；和酒精相比，丙酮有一定毒性，因而不妨換一下。2022/8/2673過濾和制濾液的改進(jìn)：獲取高濃度的色素提取液是該實(shí)驗(yàn)成功的一個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)。一般我們要求色素提取液呈墨綠色。為了得到墨綠色的色素提

3、取液，我們可嘗試取消漏斗基部放脫脂棉這一步，而用34層紗布包裹充分研磨過的綠葉，用4層紗布過濾，通過漏斗將汁液擠于試管中，將濾液收集到試管或小燒杯中備用。這樣可以降低葉片含水量，從而提高葉綠體中色素的提取效率。實(shí)驗(yàn)證明，改進(jìn)后較改進(jìn)前實(shí)驗(yàn)效果明顯。2022/8/2682022/8/2694分離色素的改進(jìn)：分離色素時(shí)教材中的條形紙層析法，據(jù)許多中學(xué)老師反映實(shí)驗(yàn)效果不很理想，存在的問題有:采用毛細(xì)吸管吸取濾液，畫線很難達(dá)到“細(xì)、勻、齊”的要求;制備濾紙條時(shí)剪去兩角，不容易把握;層析液容易沒及濾液細(xì)線。條形紙很容易下滑層析后容易出現(xiàn)色素帶分離不夠充分，或色素帶分離過度而造成胡蘿卜素在濾紙條上消失的現(xiàn)

4、象。 4分離色素的改進(jìn)： 2022/8/2610另一種新的方法叫培養(yǎng)皿法 不用濾紙條，也不劃濾液細(xì)線，而取直徑為10cm的干燥圓形定性濾紙，用毛細(xì)吸管吸取色素濾液，在濾紙的中央點(diǎn)成圓形的色素斑，重復(fù)45次。然后取一枚縫衣針，穿一條細(xì)棉線，在棉線末端打個(gè)結(jié)，將針穿過濾紙上的色素斑中心，在距線結(jié)約4cm處剪斷棉線。取直徑l0cm的培養(yǎng)皿一套，向培養(yǎng)皿底中加入5ml層析液。把上述圓形濾紙扣在培養(yǎng)皿底上面，無線結(jié)的一面朝下，棉線則浸沒在層析液中。再將培養(yǎng)皿蓋蓋在濾紙上。 2022/8/26112022/8/2612采用該方法，可以看到色素隨層析液由線結(jié)處向周圍均勻擴(kuò)散。因此得到的4條色素帶呈同心環(huán)狀，由內(nèi)而外分別是黃綠色、藍(lán)綠色、黃色和橙黃色，十分清晰。而且層析時(shí)，濾紙上的色素不會(huì)沒及層析液中，點(diǎn)色素斑比劃濾液細(xì)線容易得多，實(shí)驗(yàn)效果非常顯著。結(jié)果證明：運(yùn)用燈芯法分離色素，色素量大，分層清晰，四種色素分離出鮮明的四圈色素環(huán)，效果顯著；操作過程較易掌握，失誤較少。此實(shí)驗(yàn)方法關(guān)鍵有兩點(diǎn)需注意:一是幾次滴液體要在同一點(diǎn)上，否則不能形成圓環(huán);二是要