清潔驗證方案

1、KFG300D抗生素瓶螺桿分裝機清潔驗證方案2011 年 10 月驗證方案的起草與審批驗證小組成員部門人員職責(zé)粉針劑車間李海龍負責(zé)驗證方案組織與實施粉針劑車間黃仁春負責(zé)驗證方案的擬定、驗證報告的起草設(shè)備部霍育生負責(zé)驗證所需儀器、設(shè)備的正常運行QA部宋新莉負責(zé)驗證過程中的監(jiān)控和取樣QC部張華負責(zé)驗證過程中環(huán)境和樣品的檢測方案起草部門起草人日期方案審核審核簽名日期驗證委員會進行審閱會簽方案批準(zhǔn)批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期方案實施日期：目錄 TOC o 1-5 h z 驗證概述 4驗證目的 5風(fēng)險評估 5驗證標(biāo)準(zhǔn) 12驗證范圍 12驗證周期 13驗證職責(zé) 13驗證實施的前提條件 14驗證方案的起草與審批 15驗證

2、時間安排 15驗證 16本次驗證具體措施及檢測項目 . 16取樣工具： 17取樣溶劑 17檢驗儀器 17取樣和檢驗方法 17取樣位置 20驗證具體實施方法及可接受標(biāo)準(zhǔn) 22（1）清潔效果驗證 22（2）確定設(shè)備存放時間 23取樣計劃 25偏差處理 32風(fēng)險的接收與評審 33驗證結(jié)果評審和結(jié)論 3415.方案修改記錄 3516.附件 36驗證概述本公司粉針劑車間生產(chǎn)設(shè)備 KFG300D抗生素瓶螺桿分裝機， 主要用于新產(chǎn)品注射用頭孢米諾 鈉的分裝生產(chǎn) , 該設(shè)備主要結(jié)構(gòu)、清潔方法及其所有接觸藥品零部件具體面積見附件。為了確 保后續(xù)產(chǎn)品中沒有帶入超過接受標(biāo)準(zhǔn)的污染物，避免產(chǎn)品的交叉污染，須對KFG3

3、00D抗生素瓶螺桿分裝機生產(chǎn)后的清潔進行驗證， 測定驗證對象清洗程度， 并對設(shè)備清潔最終效果作出評價。 確保藥品生產(chǎn)開始前設(shè)備表面的清潔程度符合要求。設(shè)備清潔 : 是擦拭清潔設(shè)備本身、拆洗設(shè)備關(guān)鍵零部件和擦洗相關(guān)容器具等，其中主要是設(shè) 備關(guān)鍵零部件的清洗，其清潔后隨時用隨時傳進，不用時就傳出清潔滅菌。設(shè)備關(guān)鍵零部件、 容器的滅菌效果已在兩個滅菌柜的驗證中進行，所以這里只需要對分裝機設(shè)備關(guān)鍵零部件、容 器清潔效果以及待清潔、清潔后、滅菌后的最大存放時間進行驗證即可。本驗證以產(chǎn)品生產(chǎn)后， 按設(shè)備清潔標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進行清洗， 檢測設(shè)備清潔效果、 主要活性成 分的殘留量、微生物等，驗證其結(jié)果均在規(guī)定的許

4、可范圍之內(nèi)，不會對下一品種的質(zhì)量造成影響。驗證目的本次驗證 KFG300D抗生素瓶螺桿分裝機在頭孢米諾鈉分裝生產(chǎn)后按照 KFG300D抗生素瓶螺 桿分裝機清潔標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程（文件編號為 SOP-0203-C-007/01）進行清洗后，清潔效果能 夠穩(wěn)定地達到預(yù)定要求。通過本次驗證確定生產(chǎn)結(jié)束至開始清潔的最長時間（待清潔設(shè)備容器保留時間）。已清潔設(shè)備容器用于滅菌前的最長存放時間（設(shè)備清潔有效期）。已滅菌設(shè)備容器的存放有效期。驗證 1%氫氧化鈉溶液滅活效果風(fēng)險評估 按照質(zhì)量風(fēng)險管理規(guī)程，并從影響清潔的綜合因素出發(fā)，發(fā)現(xiàn)直接或間接影響產(chǎn)品質(zhì)量的 因素來確定風(fēng)險識別。經(jīng)驗證小組人員共同結(jié)合設(shè)備結(jié)構(gòu)、產(chǎn)品

5、性質(zhì)對清潔程序驗證進行風(fēng)險評估，對存在的質(zhì) 量風(fēng)險提出了預(yù)防和糾正措施建議，具體見下表 1：表 1： FMEA記錄風(fēng)險因素風(fēng)險影響現(xiàn)有可嚴(yán)檢風(fēng)險優(yōu)先風(fēng)險建議采取措施控制措施能性重度測性數(shù)級別設(shè)備清潔程序設(shè)備清 潔程序不 完善設(shè)備污染、交叉污染已建立清潔規(guī)程53345高對程序進行驗證清潔 劑清潔劑 不適用， 清潔效果 不好設(shè)備上的產(chǎn)品或清潔溶 劑本身不易被清潔除去 造成殘留進而污染下批 生產(chǎn)產(chǎn)品選用工藝用 水和 1%氫氧 化鈉溶液53345高對清潔效果進行目檢， 并通過驗證檢測產(chǎn)品和 清潔劑的殘留消毒 劑消毒劑 不適用， 消毒效果 不好未有效降低設(shè)備表面微 生物增加滅菌殺滅難度 或風(fēng)險75%乙醇

6、33327中對消毒劑的驗證文件和 培訓(xùn)情況進行檢查滅菌滅菌失 效造成產(chǎn)品被微生物污染 風(fēng)險危及用藥安全已建立其操 作和維保規(guī) 程，并進行了 培訓(xùn)33327高對兩臺滅菌柜的驗證情 況，計量情況，以及人 員的相關(guān)培訓(xùn)情況進行 確認人員操作未按設(shè) 備SOP清 潔設(shè)備清潔不徹底、不同 人員清潔效果無重現(xiàn)性 造成交叉污染人員進行操作培訓(xùn)43336高對培訓(xùn)情況進行確認， 要求清洗操作要有人復(fù) 核至少進行目視檢查衛(wèi)生未按文件規(guī)定使設(shè)備污染、交叉污染已建立文件生產(chǎn)區(qū)清42324中對文件和培訓(xùn)情況進行工具用、管理潔工具管理規(guī)程確認生產(chǎn) 后清 潔前 時間未能在 所建立時 間前進行 清潔產(chǎn)品清洗難度增加，可 能原有

7、程序已無法清潔 干凈，產(chǎn)品殘留于設(shè)備 中。交叉污染、微生物 滋生已進行了培 訓(xùn)，并有待清 潔標(biāo)識43336高對培訓(xùn)情況進行確認， 通過驗證確認時間設(shè)備 清潔 后滅 菌前 時間未能在 所建立時 間前進行 滅菌設(shè)備存放時，微生物滋 生已進行了培 訓(xùn)，并有清潔 標(biāo)識43336高對培訓(xùn)情況進行確認， 通過驗證確認滅菌前時 間環(huán)境環(huán)境控 制失效環(huán)境對設(shè)備污染已建立檢驗 和儀器操作 規(guī)程，定期維 保43336高檢查公用系統(tǒng)的驗證情 況，并要求設(shè)備、工具 清洗或滅菌后均應(yīng)干 燥、密閉保存檢測檢測不 可靠不能作出正確判斷建立相關(guān)文 件，定期維保43336高檢查儀器、檢驗方法的 驗證情況和回收率試驗設(shè)備內(nèi)部結(jié)構(gòu)

8、 復(fù)雜不易 拆卸，且 擦拭或刷 洗、消毒清潔不徹底設(shè)為取樣點 重點關(guān)注53345高對取樣點評估，驗證時 進行檢測不好操作評估人：根據(jù)風(fēng)險評估，我們擬定了如下驗證內(nèi)容。經(jīng)分析，對上一步判斷的關(guān)鍵性風(fēng)險和非關(guān)鍵性風(fēng)險應(yīng)采取初步風(fēng)險控制措施和驗證， 并在驗證方案中綜合考慮設(shè)備使用情況、所使用的清潔劑和消毒劑、取樣方法和位置以及 相應(yīng)的取樣回收率、殘留物的性質(zhì)和限度、殘留物檢驗方法的靈敏度等因素，綜述如下：設(shè)備使用情況驗證中使用的文件應(yīng)是最新版本并已生效，參與驗證實施人員都已接受相應(yīng)的崗 位培訓(xùn)和本方案的培訓(xùn)，粉針車間潔凈空調(diào)凈化系統(tǒng)、純化水系統(tǒng)、注射用水系統(tǒng)、公用 系統(tǒng)及粉針車間相關(guān)設(shè)備已通過校驗或

9、驗證，已具備工作能力；檢驗方法已經(jīng)過驗證合格 （見附件 3、4、 5）。列出目前我公司分裝設(shè)備生產(chǎn)的產(chǎn)品的名稱、規(guī)格、批量、活性成分等相關(guān)信息（見表 2），并對設(shè)備使用情況進行簡單描述 （見表 3）。因為注射用頭孢米諾鈉為新產(chǎn)品， 故參照產(chǎn)品定為注射用頭孢米諾鈉中的頭孢米諾鈉，在生產(chǎn)該產(chǎn)品結(jié)束后，進行設(shè)備清洗 驗證。品名活性成 分活性成分水中溶解性批量（萬支）單位 劑量 （g）標(biāo)準(zhǔn)裝 量（）每次給藥劑量每天給藥次數(shù)MTDD（g）LDSD（g）能注射用頭 孢米諾鈉 （0.5g ）頭孢米 諾鈉易溶3.0 （20kg ）0.5g0.6461.0-2.0 g2-32.07.752注射用頭 孢米諾鈉 （

10、1.0g ）頭孢米 諾鈉易溶3.0（40kg ）1.0g1.2911.0-2.0g2-32.07.752表 2. 使用分裝設(shè)備的產(chǎn)品相關(guān)信息注釋：以上產(chǎn)品溶解性資料均來自中國藥典 2010 年版二部、國家藥品標(biāo)準(zhǔn)表 3 設(shè)備使用情況（生產(chǎn)此類產(chǎn)品的關(guān)鍵設(shè)備僅為分裝機）生產(chǎn) 流 程關(guān)鍵設(shè)備設(shè)備面積（cm2）目前共用產(chǎn)品注射用頭孢米諾鈉 0.5g注射用頭孢米諾鈉 1.0g分裝KFG300D抗生 素瓶螺桿分裝 機8130.91cm2注： 表示需要用此設(shè)備； 表示不需要用此設(shè)備所使用的清潔劑和消毒劑清潔劑：注射用水和 1%氫氧化鈉溶液。消毒劑： 75%（V/V）乙醇清潔劑選擇的依據(jù)：頭孢米諾鈉易溶于水

11、，我們選擇水為清潔劑。因頭孢米諾鈉是 ?- 內(nèi)酰胺類抗生素藥物， 為防止其隨清洗水進入下水道帶來環(huán)保污染，故選擇 1%氫氧化鈉溶液做清洗溶劑，破壞頭 孢米諾鈉的化學(xué)結(jié)構(gòu)。且氫氧化鈉易清洗，可采用檢測零部件的浸泡水電導(dǎo)率與沖洗用注 射用水的電導(dǎo)率進行對照，若無顯著區(qū)別，即可判斷氫氧化鈉無殘留。取樣方法和位置以及相應(yīng)的取樣回收率粉針劑車間的 KFG300D抗生素瓶螺桿分裝機是非整體密閉的，我們按照標(biāo)準(zhǔn)操作 規(guī)程對設(shè)備進行拆洗。驗證過程中選擇擦拭取樣法，對清潔后設(shè)備零部件內(nèi)表面進行理化 檢測和微生物限度檢測取樣；取各個零部件的浸泡水進行檢測細菌內(nèi)毒素、電導(dǎo)率（清潔 劑殘留）；并根據(jù)活性物質(zhì)頭孢米諾鈉

12、的水溶解性將理化取樣的溶劑定為滅菌注射用水。 由于上一產(chǎn)品生產(chǎn)對下一產(chǎn)品的污染并不是均勻分布在整個設(shè)備的接觸面上，所以我們采 用對最難清潔部位直接取樣，通過考察有代表性的最難清潔部位的殘留物水平來評價整套 生產(chǎn)設(shè)備的清潔狀況。因此清潔驗證的活性成分取樣計劃的確定必須先進行風(fēng)險分析，且 在風(fēng)險分析中確定清潔驗證的關(guān)鍵部位（風(fēng)險分析見附件 2），具體的取樣點位置見表 7我們采用取樣回收率和檢驗方法回收率結(jié)合進行驗證，通過回收率試驗驗證取樣過程的回收率和重現(xiàn)性。認可標(biāo)準(zhǔn)：以總回收率大于 70，多次取樣回收率的相對標(biāo)準(zhǔn)偏 差小于 20為符合要求（相應(yīng)的取樣回收率驗證情況見附件 5）。每個擦拭部位擦拭的

13、面 積應(yīng)以獲取的殘留物的量在檢測方法的線性范圍內(nèi)為原則。本次驗證每個取樣點的面積為 25cm2。殘留物的性質(zhì)和限度本次驗證依據(jù)最低日治療劑量來確定殘留物限度，并結(jié)合殘留物濃度限度 10ppm （10-62 項下，參照藥品 A已確定為頭孢米諾鈉，因為目前公司產(chǎn)品單一，只能自身對照， 我們?nèi)越Y(jié)合“表 2”從以下幾個風(fēng)險因素分析： 1）后續(xù)品種最大日劑量（安全性風(fēng)險）； 2）后續(xù)品種的最小批量（殘留污染風(fēng)險）；則“表3”中“ LDSD/批量”其比值最大的僅為注射用頭孢米諾鈉 0.5g ，因此將注射用頭孢米諾鈉 0.5g 作為下一批產(chǎn)品 B。則本次驗證中擦拭取樣法可接受的最高限度的計算公式如下：單位面

14、積（ cm2）最大允許殘留量（ g） ARL為：最低日治療劑量（ MTDD）的 1/1000 最小批量ARL = 最大日服用劑量設(shè)備內(nèi)表面積（設(shè)備與物料直接接觸的總面積）2.0g 1/1000 20kg2= =634.61 ug /cm 227.752g 8130.91 cm 2而按殘留物濃度限度 10ppm標(biāo)準(zhǔn)計算得出： ARL=最小批量 10ppm/ 設(shè)備內(nèi)表面積（設(shè)備與634.61 ug /cm物料直接接觸的總面積） =20kg10ppm/8130.91 cm 2=24.60 ug /cm故我們選擇化學(xué)殘留物濃度限度 10ppm（10-6 ）標(biāo)準(zhǔn)計算出的可接受的最高限度， 即為 24.6

15、ug/cm2 。微生物殘留量接受標(biāo)準(zhǔn)（清潔效果的驗證） 15cfu/25cm 2。因 2010 版 GMP附錄要求 C級區(qū)動態(tài)表面微生物接觸碟 （ 55mm法） 測試標(biāo)準(zhǔn)為 25cfu/ 碟, 計算出即為 25cfu/23.75 cm 2，本公司參照此標(biāo)準(zhǔn)和藥品生產(chǎn)驗證指南（ 2003） 標(biāo)準(zhǔn)選擇可接受標(biāo)準(zhǔn)為 15cfu/25cm 2。殘留物檢驗方法的靈敏度本次驗證之前須確認檢驗方法的驗證（驗證的參數(shù)有回收率、精密度、線性范圍、檢 測限和定量限、 系統(tǒng)適用性） 和分析儀器設(shè)備及時有效的校準(zhǔn)， 保證分析方法的真實可靠， 具有可信度（殘留物檢驗方法的驗證情況見附件 5）。4. 驗證標(biāo)準(zhǔn)中國藥典（

16、2010 版二部）、藥品生產(chǎn)驗證指南（ 2003年版）、藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī) 范（ 2010年修訂）5. 驗證范圍本方案主要適用于生產(chǎn)注射用頭孢米諾鈉時對分裝機的清潔操作及清潔效果的評價。 方 案中需要驗證的設(shè)備清潔操作規(guī)程如下：（表 4）（注射用頭孢米諾鈉生產(chǎn)用）設(shè)備名稱設(shè)備編號清潔標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程文件編號KFG300D抗生素瓶螺桿分裝機SC-0203-003KFG300D型抗生素瓶螺桿分裝機清潔標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程SOP-0203-C-007/016. 驗證周期在下列情況發(fā)生時，必須考慮是否要進行再驗證：清潔劑改變或清潔程序作重要修改；設(shè)備有重大變更；生產(chǎn)產(chǎn)品變化時；產(chǎn)品質(zhì)量回顧分析趨勢表明需要再驗證時

17、。驗證職責(zé)驗證委員會負責(zé)驗證文件格式、內(nèi)容的審核。負責(zé)對驗證中出現(xiàn)的偏差和驗證結(jié)果進行分析討論， 并作出評價，決定再驗證周期組織協(xié)調(diào)驗證活動，確保驗證進度。審批驗證報告。驗證委員會主任負責(zé)驗證證書的簽字批準(zhǔn)。驗證小組參與擬訂驗證方案7.2.2負責(zé)驗證方案的實施。7.2.3負責(zé)收集各項驗證、試驗記錄，并對試驗結(jié)果進行分析后，起草驗證報告，報驗證委員會。設(shè)備部7.3.1負責(zé)組織試驗所需儀器、設(shè)備的驗證。7.3.2負責(zé)儀器、儀表、量具等的校正。質(zhì)量管理部7.4.1負責(zé)驗證所需的標(biāo)準(zhǔn)品、樣品、試劑、試液等的準(zhǔn)備。7.4.2負責(zé)取樣及對樣品的檢驗。7.4.3負責(zé)驗證證書發(fā)放，驗證的文檔管理。粉針劑車間7

18、.5.1負責(zé)設(shè)備的清潔。7.5.2負責(zé)根據(jù)驗證試驗結(jié)果，修改設(shè)備清潔規(guī)程。驗證實施的前提條件驗證中使用的文件是最新版本并已生效。見附件 3參與驗證實施人員都已接受相應(yīng)的崗位培訓(xùn)和本方案的培訓(xùn)。見附件4、附件 12粉針車間潔凈空調(diào)凈化系統(tǒng)、純化水系統(tǒng)、注射用水系統(tǒng)、公用系統(tǒng)及粉針車間相關(guān) 設(shè)備已通過校驗或驗證，已具備工作能力；檢驗方法已驗證合格。見附件 5相關(guān)試驗用儀器、培養(yǎng)基、試液的準(zhǔn)備。見附件 6驗證方案的起草與審批本次驗證方案由驗證小組起草，驗證委員會進行審閱會簽，質(zhì)量副總進行批準(zhǔn)。驗證時間安排擬將生產(chǎn) 3 批注射用頭孢米諾鈉產(chǎn)品 1.0g 三批，待每批生產(chǎn)結(jié)束后按照 KFG300D型 抗

19、生素瓶螺桿分裝機清潔標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程 對分裝生產(chǎn)設(shè)備進行清潔， 我們選擇最差條件 （規(guī) 格 1.0g ）三批生產(chǎn)清潔結(jié)束后按照驗證方案取樣進行檢查。時間進度如下（表5 ）：ID任務(wù)名稱品種規(guī)格批號生產(chǎn)時間取樣時間1第一次驗證注射用頭孢米諾鈉 1.0g生產(chǎn)結(jié)束清場時2第二次驗證注射用頭孢米諾鈉 1.0g生產(chǎn)結(jié)束清場時-3第三次驗證注射用頭孢米諾鈉 1.0g生產(chǎn)結(jié)束清場時-驗證11.1 本次驗證具體措施及檢測項目如下表：（表 6）驗證措施取樣方法檢測項目設(shè)備的清潔效果的驗證擦拭取樣法微生物限度擦拭取樣法活性殘留物浸泡水取樣細菌內(nèi)毒素、電導(dǎo)率待清潔設(shè)備保留時間的驗證擦拭取樣法微生物限度設(shè)備清潔有效期的驗

20、證擦拭取樣法微生物限度已滅菌設(shè)備的存放有效期的驗證擦拭取樣法微生物限度1%氫氧化鈉溶液滅活試驗活性成分檢測11.2 取樣工具： 取樣工具按取樣管理規(guī)程（SOP-0101-ZL-002/01）準(zhǔn)備和處理。取樣工具有無菌棉簽 （ 要 求為脫脂棉球 ） （15cm）、帶螺旋蓋試管（ 15cm）、帶螺旋蓋無菌試管（ 15cm）、無菌剪刀、 250 ml 碘量瓶、無菌無熱原的 100 ml 具塞錐形瓶11.3 取樣溶劑滅菌注射用水、 0.9%無菌氯化鈉溶液。檢驗儀器LC-20AT、SPD-M20A島津高效液相色譜儀；檢測器為二極管整列檢測器。取樣和檢驗方法根據(jù)活性物質(zhì)注射用頭孢米諾鈉的溶解性將理化取樣的

21、溶劑定為滅菌注射用水。微生物取 樣的擦拭溶劑定為 0.9%無菌氯化鈉溶液。擦拭取樣方法和檢驗方法驗證應(yīng)有驗證證書（見 附件 5 相關(guān)驗證情況檢查表）。取樣方法擦拭取樣方法使用被核準(zhǔn)的棉簽（藥用棉簽供貨單位：南昌市康樂衛(wèi)生材料有限公司），使用清潔驗證中指定的溶劑對活性成分取樣。將棉簽浸到指定的溶液中，飽和后靠在瓶口上擠壓以擠去多余的溶劑。注意避免操作中棉簽被污染。（棉簽適用性要求：有一定的機械強度和韌 性，經(jīng)久耐用，棉簽的外觀和顏色沒有改變，預(yù)先用取樣用溶劑清洗后，沒有纖維脫落及 沉淀產(chǎn)生，水的吸收能力滿足取樣回收率的要求）戴上無菌手套后拿住棉簽，在取樣范圍內(nèi)，將棉簽頭按在取樣表面上，用力使其稍

22、彎曲（使棉簽對設(shè)備產(chǎn)生一定的摩擦力），平穩(wěn)而緩慢地擦拭取樣表面，在向前移動的同時將 其從一邊移到另一邊。在事先劃好面積的設(shè)備表面用力均勻的擦拭，擦拭過程應(yīng)覆蓋整個 表面。翻轉(zhuǎn)棉簽，讓棉簽的另一面也進行擦拭。但與前次擦拭移動方向垂直。將擦拭好的棉簽剪下放入標(biāo)記好的試管中，并用螺旋蓋旋緊密封，避免外來污染。取樣 必須盡快完成以免溶劑揮發(fā)和污染物沉積到樣品表面。對所有的取樣點進行取樣，程序同上。微生物檢測取樣在理化檢測取樣之前進行，再在 周圍附近進行理化取樣。每支棉簽擦拭取樣 25 cm2, 每個取樣點的微生物檢測取樣、理化 檢測取樣各用 1 支棉簽。將樣品送到 QC部化驗。浸泡水取樣方法：11.5

23、.1.2.1 把分裝機全部零部件 * 放入已清潔的小不銹鋼桶中，加注射用水至剛浸沒零部 件為止，蓋蓋，浸泡 0.5 小時后，先用無菌無熱原的 100 ml具塞錐形瓶 *取注射用水 50ml 作內(nèi)毒素檢查，再用普通 250 ml 碘量瓶 * 取注射用水 50ml 作電導(dǎo)率檢測。取完后，密封，及時做好標(biāo)記，送化驗室?！?注釋： 分裝機全部零部件是指分裝機的兩個分裝頭的所有接觸藥品的零部件 （具體包括 2 個進粉蝶閥、 2 個送粉計量室、 2 個送粉螺桿、 2 個攪粉計量室、 2 個攪粉法蘭、 2 個下粉 斗、2 個下粉螺桿、 2個下粉嘴）； *注釋：無菌無熱原的 100 ml 具塞錐形瓶，用超純水

24、* 注釋：普通 250 ml 碘沖瓶內(nèi)壁及外塞 3 次，將其于 250 烘箱內(nèi)烘 1 h ，冷卻備用量瓶，用注射用水清洗干凈即可。】檢驗方法11.5.2.1 棉簽擦拭法理化檢測取樣：樣品用高效液相色譜法進行檢測。生產(chǎn)注射用頭孢米諾鈉后，按各設(shè)備清潔標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程對設(shè)備進行清潔后，取無菌棉簽用 滅菌注射用水濕潤后，將其靠在瓶口上擠壓以擠去多余的溶劑，嚴(yán)格按照擦拭取樣方法， 1 支棉簽擦拭一個取樣點，每支棉簽擦拭取樣 25 cm2 。將棉簽頭剪下放入標(biāo)記好的空試管中 （樣品上標(biāo)簽應(yīng)注明產(chǎn)品名稱、批號、樣品編號、取樣目的、取樣人及取樣日期）。供試品的制備： 將粉針車間送來的裝有棉簽頭的空試管中加入 1

25、0mlpH=4.5的醋酸銨緩沖液 （取醋酸銨 7.7g ，加水溶解，加冰醋酸 6ml 與適量的水使成 1000 ml ）-甲醇（ 94：6）浸 泡，超聲 10分鐘，然后用 0.45 m的濾膜過濾，濾液即為供試品溶液。對照品的制備：取頭孢米諾對照品替代品適量，精密稱定，置 50ml 容量瓶中，用流動相定 容,混勻；再精密量取 10ml置 50ml容量瓶中，用流動相定容 ,混勻, 再精密量取 5ml置 50ml 容量瓶中，用流動相定容 , 混勻即得 6g/ml 的對照品溶液。檢測方法：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以 pH=4.5 醋酸銨緩沖液（取醋酸銨 7.7g ， 加水溶解，加冰醋酸 6ml

26、 與適量的水使成 1000ml，搖勻, 即得）甲醇（ 94:6 ）為流動相， 流速為 1.0ml/s ；檢測波長 273nm；取供試品溶液與對照溶液各 20l ，分別注入液相色譜 儀，記錄色譜圖。按外標(biāo)法以峰面積計算供試品中 C16H21N7O7S3 的殘留含量。棉簽擦拭法微生物取樣：取樣液用菌落計數(shù)法進行檢測。生產(chǎn)注射用頭孢米諾鈉后， 按設(shè)備清潔標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程對設(shè)備進行清潔后 （應(yīng)在化學(xué)殘留 檢測取樣前取樣），取無菌棉簽 1 支，用滅菌注射用水濕潤后，并將其靠在瓶口上擠壓以 擠去多余的溶劑，嚴(yán)格按照擦拭取樣方法， 1 支棉簽擦拭一個取樣點，每支棉簽分別擦拭 取樣 25 cm2。將棉簽頭剪下放入

27、裝有 0.9%無菌氯化鈉溶液的無菌試管中（樣品上標(biāo)簽應(yīng)注 明產(chǎn)品名稱、樣品編號、取樣目的、取樣人及取樣日期）。將取樣液超聲 2min 直接過濾入 濾膜中，濾膜剪成兩份，一份放入營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中，置 35培養(yǎng) 72h 計數(shù)，另一份放入 玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基中，置 28培養(yǎng) 120h 計數(shù)。取樣位置棉簽擦拭法應(yīng)擦拭取樣最難清洗的部位（取樣點）。我們根據(jù)設(shè)備構(gòu)造、設(shè)備與物料接觸的表面以及實際經(jīng)驗列出了風(fēng)險識別，并通過詳細的風(fēng)險風(fēng)析（附件1），確定了設(shè)備最難清洗的部位。清潔效果驗證取樣點的確認表如下（表 7）。設(shè)備名稱（ 所在房間 ）取樣部件名稱難清洗部位圖例（取樣點為箭頭位置）取樣點編號KFG300D

28、抗 生素瓶螺桿 分裝機 分 裝間2 個進粉 蝶閥01022 個送粉 計量室03044 組觀察 窗（濕熱 滅菌）052 個送粉 螺桿06072 個攪粉 計量室082 組攪粉 法蘭、下 粉斗（ 濕熱滅 菌）09102 組下粉 螺桿、下 粉嘴（ 濕熱滅 菌）11驗證具體實施方法及可接受標(biāo)準(zhǔn)（1）清潔效果驗證操作方法： 當(dāng)驗證批次生產(chǎn)結(jié)束時， 操作人員按設(shè)備清潔標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進行清潔， 記 錄清潔過程（見分裝崗位設(shè)備清潔記錄）。清潔結(jié)束后，目檢并記錄，再按取樣計劃進行 微生物限度和化學(xué)殘留取樣（先微生物取樣，再在周圍附近進行理化取樣），檢測結(jié)果記 錄見附件 8。并在擦拭取樣結(jié)束后，收集所有的直接接觸藥粉

29、設(shè)備零部件，按浸泡水取樣 方法操作，先用無菌無熱原的 100 ml 具塞錐形瓶取注射用水 50ml 作內(nèi)毒素檢查，再用普 通 250 ml 碘量瓶取注射用水 50ml 作電導(dǎo)率檢測。驗證應(yīng)連續(xù)進行 3 次。清潔效果驗證可接受標(biāo)準(zhǔn)：目測檢查，設(shè)備在清潔后，無可見的物質(zhì)殘留在設(shè)備表面，潔凈、干燥。化學(xué)檢測殘留物可接受限度標(biāo)準(zhǔn)：最大允許殘留量 ARL=24.6ug /cm2擦拭樣品微生物限度： 15 cfu / 25 cm 2內(nèi)毒素檢查結(jié)果、電導(dǎo)率檢測結(jié)果應(yīng)符合注射用水的標(biāo)準(zhǔn)。（2）確定設(shè)備存放時間生產(chǎn)結(jié)束至開始清洗的最長時間（待清潔設(shè)備保留時間）的驗證操作方法：每批注射用頭孢米諾鈉（規(guī)格 1.0g

30、 ）生產(chǎn)結(jié)束后，采用設(shè)備零部件 11、膠 塞轉(zhuǎn)運不銹鋼桶、盛裝污粉的不銹鋼飯盒（一）、不銹鋼瓢（一）為檢測對象，使用后不 進行清潔，在器具清洗間存放六個小時，在存放期間內(nèi)采用棉簽擦拭法取樣，于1、2、 4、6 小時各取樣一次，進行微生物限度檢查。本試驗進行 3 次監(jiān)測，以確定未清潔零部件、 容器具能存放的最長時間。下次生產(chǎn)時準(zhǔn)備替代品備用，檢測結(jié)果記錄見附件8。待清潔時間驗證可接受標(biāo)準(zhǔn)：若微生物檢查結(jié)果均不大于 25cfu/25cm2 ，則確定最大待清潔時間為 4 小時已清洗設(shè)備零部件用于滅菌前的最長存放時間（設(shè)備清潔有效期）的驗證操作方法：注射用頭孢米諾鈉（規(guī)格 1.0g ）每批生產(chǎn)后，對設(shè)

31、備零部件進行清洗，存放至容器具存放間。我們選擇取樣點鋁蓋轉(zhuǎn)運不銹鋼桶、不銹鋼盤、不銹鋼飯盒（二）、 不銹鋼鑷子（一）為檢測對象，分別在 1 小時、 2 小時、4 小時、6 小時采用棉簽擦拭法 取樣，進行微生物限度檢查，每個時間只取一個取樣點。本試驗進行3 次監(jiān)測，以確定已清洗的設(shè)備零部件、容器具在滅菌前能存放的最長時間。檢測結(jié)果記錄見附件8。設(shè)備零部件、容器具清潔有效期驗證可接受標(biāo)準(zhǔn)：若微生物檢查結(jié)果均不大于 15cfu/25cm 2，則確定清洗后 A/B 級區(qū)設(shè)備零部件、容器具 有效期為 4 小時。已滅菌設(shè)備的存放有效期驗證操作方法：以每批注射用頭孢米諾鈉 （規(guī)格 1.0g ）生產(chǎn)后的盛污粉

32、容器具不銹鋼瓢 （二）、 不銹鋼桶、不銹鋼鑷子（二）為檢測對象，通過清洗、滅菌后，取出，密閉存放至 A 級區(qū) 下。將其存放至 0 小時、 36小時、 48小時時采用擦拭取樣法取樣檢測微生物限度，下次生 產(chǎn)使用替代品。 本試驗進行 3 次監(jiān)測，以確定清潔滅菌后的設(shè)備零部件能存放的最長時間。 微生物檢測結(jié)果記錄見附件 8。設(shè)備零部件、容器具清潔有效期驗證可接受標(biāo)準(zhǔn)：若微生物檢查結(jié)果均小于 1cfu/25cm 2，則確定清潔滅菌后設(shè)備零部件使用有效期為 36 小時。3） 1%氫氧化鈉溶液滅活效果驗證 在 QC部理化室稱取 10g頭孢米諾鈉， 放入準(zhǔn)備好的 200ml1%氫氧化鈉溶液中， 即為樣品 H

33、；樣品用高效液相色譜法檢測。若經(jīng)檢測無活性成份，則1%氫氧化鈉溶液滅活效果可行。檢 測結(jié)果記錄見附件 8。1%氫氧化鈉溶液滅活效果驗證的合格標(biāo)準(zhǔn)：所檢測的對象：無化學(xué)活性成份（頭孢米諾）殘留取樣計劃在注射用頭孢米諾鈉生產(chǎn)后按清潔規(guī)程實施清潔。取樣前應(yīng)對整個設(shè)備、零部件、容器具的 清潔情況進行目測檢查。目測合格的才能繼續(xù)取樣，并按擦拭取樣位置圖的指示取表面理 化殘留物樣和表面微生物樣，應(yīng)先取微生物樣，后在鄰近位置取殘留物樣。且標(biāo)識明確。 取樣計劃如下表 8（取樣記錄填寫見附件 7）。表 8 ：粉針車間第一次清潔效果驗證擦拭取樣計劃設(shè)備編號設(shè)備型號名稱取樣點（編號）樣品編號（ A 表示微生物樣、

34、B 表示殘留物樣）取樣日期KFG3002 個進粉蝶閥01-1A01-1BSC-0203-00D抗生01、0202-1A02-1B素瓶螺3桿分裝2 個送粉計量室機03、0403-1A03-1B觀察窗 052 個送粉螺桿 06、072 個攪粉計量室 082 組攪粉法蘭、 下粉斗 09、102 組下粉螺桿、 下粉嘴 1104-1A05-1A06-1A07-1A08-1A09-1A10-1A11-1A04-1B05-1B06-1B07-1B08-1B09-1B10-1B11-1B表 8. 粉針車間第二次清潔效果驗證擦拭取樣計劃設(shè)備編號設(shè)備型號名稱取樣點（編號）樣品編號（ A表示微生物樣、 B 表 示殘

35、留物樣）取樣日期2 個進粉蝶閥01-2A01-2BKFG30001、02D抗生02-2A02-2BSC-0203-003素瓶螺2 個送粉計量室03、0403-2A03-2B桿分裝機觀察窗 0504-2A04-2B2 個送粉螺桿06、072 個攪粉計量室 082 組攪粉法蘭、 下粉斗 09、102 組下粉螺桿、 下粉嘴 1105-2A06-2A07-2A08-2A09-2A10-2A11-2A05-2B06-2B07-2B08-2B09-2B10-2B11-2B表 8. 粉針車間第三次清潔效果驗證擦拭取樣計劃設(shè)備編號設(shè)備型號名稱取樣點（編號）樣品編號（ A表示微生物樣、 B 表示殘留物樣）取樣日

36、期2 個進粉蝶閥01-3A01-3B01、02KFG30002-3A02-3BD抗生2 個送粉計量室SC-0203-00素瓶螺03、 0403-3A03-3B3桿分裝觀察窗 05機04-3A04-3B2 個送粉螺桿06、0705-3A05-3B2 個攪粉計量室 082 組攪粉法蘭、 下粉斗 09、102 組下粉螺桿、 下粉嘴 1106-3A07-3A08-3A09-3A10-3A11-3A06-3B07-3B08-3B09-3B10-3B11-3B表 8. 粉針車間清潔效果驗證浸泡水取樣驗證次數(shù)S表示內(nèi)毒素樣D表示電導(dǎo)率樣取樣日 期第一次1S1D第二次2S2D第三次3S3D表 8. 粉針車間設(shè)

37、備待清潔時間驗證取樣計劃設(shè)備編驗證取樣點樣品編號取樣日期號、名稱次數(shù)（存放于器具清洗 間）（A表示微生物樣， 下標(biāo) 1、2、4、6 表 示存放 1、2、 4、6 小時）SC-0203 -003KFG300D 抗生素 瓶螺桿 分裝機1設(shè)備零部件 1112-1A1膠塞轉(zhuǎn)運不銹鋼桶13-1A2盛裝污粉的不銹鋼飯盒（一）14-1A4不銹鋼瓢（一）15-1A62設(shè)備零部件 1112-2A1膠塞轉(zhuǎn)運不銹鋼桶13-2A2盛裝污粉的不銹鋼飯盒（一）14-2A4不銹鋼瓢（一）15-2A63設(shè)備零部件 1112-3A1膠塞轉(zhuǎn)運不銹鋼桶13-3A2盛裝污粉的不銹鋼飯盒（一）14-3A4不銹鋼瓢（一）15-3A6表 8. 設(shè)備清潔保留時間（清潔有效期）驗證取樣計劃設(shè)備編 號、名稱驗證次數(shù)取樣點（存放于器具存放間）樣品編號（ A 表示微生物樣，下 標(biāo) 1