抗原沖擊致敏樹(shù)突狀細(xì)胞誘導(dǎo)特異性CTL殺傷Jurkat細(xì)胞實(shí)驗(yàn)研究

1、抗原打擊致敏樹(shù)突狀細(xì)胞誘導(dǎo)特異性CTL殺傷Jurkat細(xì)胞實(shí)行研究林東軍，方志剛，李旭東，劉加軍，陸英【摘要】本研究以康健人外周血單核細(xì)胞為前體細(xì)胞，體外誘導(dǎo)其為樹(shù)突狀細(xì)胞D，別離負(fù)載Jurkat細(xì)胞凍融抗原及T1多肽抗原，產(chǎn)生特異性細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞TL，以探究其對(duì)白血病Jurkat細(xì)胞的殺傷作用。團(tuán)結(jié)應(yīng)用rhG-SF、rhIL-4、rhTNF-及rhsD40L等細(xì)胞因子，密度梯度離心法、貼壁法從外周血獵取單核細(xì)胞并舉行誘導(dǎo)擴(kuò)增，造就出D，別離用凍融抗原及T1多肽抗原打擊致敏D。實(shí)行分4組：凍融抗原致敏D組為實(shí)行組A，T1多肽致敏D組為實(shí)行組B，未致敏D組為比較組A，單核細(xì)胞組為比較組B，不

2、雅察TL對(duì)Jurkat細(xì)胞的殺傷作用。結(jié)果表白：造就出了具有典范特性的D，它高表達(dá)D40、D80、D1a及D86等外貌標(biāo)識(shí)表記標(biāo)幟，能體外誘導(dǎo)猛烈的同種異基因混淆淋巴細(xì)胞增殖反響。實(shí)行組表現(xiàn)高程度殺傷率，與比較組比力均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P0.01，實(shí)行組A、B間比力無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論：Jurkat細(xì)胞凍融抗原及T1多肽抗原打擊致敏D能有用誘導(dǎo)T細(xì)胞抗白血病作用，為臨床研制D疫苗提供了實(shí)行根據(jù)?！娟P(guān)鍵詞】樹(shù)突狀細(xì)胞；Jurkat細(xì)胞；凍融抗原；T1多肽抗原；細(xì)胞毒作用；白血病Antigen-ladedDendritiellsTriggerKillingEffetsfSpeifiyt-txiTLyph

3、ytesnJurkatellsInVitrAbstratThisstudyasaiedtinvestigatetheeffetsfturantigen-ladeddendritiells(D)stiulatingthespeifiyttxiTlyphytes(TL)nJurkatellsinvitr.PeripheralbldnnulearellsereislatedbyFilldensitygradiententrifugatinfrnralhuanheparinizedbld，theadherentnytesereulturedithgranulyte-arphagelnystiulati

4、ngfatr(G-SF)，interleukin-4(IL-4)，alphaturnersisfatr(TNF-)andsD40L，Dsere-ulturedithfrzen-thaedantigenfJurkatellsrT1peptides，andthenTellseretriggeredintspeifiTL.TheresultsshedthatstsuspendedellsexhibiteddistintiverphlgialfeaturesfDhihexpressedD40(96%)，D86(97%)，D80(77%)，D1a(69%)，andgainedtheperfulapait

5、ytstiulateprliferatinfallgenEilyphytes.Undertheeffetrtargetratif201，TLsderivedfrulturesithDandfrzen-thaedantigenfJurkatellsshed91.1%yttxiityagainstJurkatells，TLderivedfrulturesithDandT1peptidesshed87.5%yttxiityagainstJurkatells，yttxiityfTLderivedfrulturesithunladedDagainstJurkatellsas42.1%andyttxiit

6、yfnytesas22.7%.yttxiityfTLderivedfrultureithfrzen-thaedantigenrT1peptidesladedDasstrngerthanthatinntrlgrupsP0.01.Itisnludedthattheturantigen-pulsedDanindueeffiientandspeifianti-turiunity，ayplayagreatrleinlinialtherapyfrleukeia.Keyrdsdendritiell;Jurkatell;frzen-thaedantigen;T1plypeptide;yttxiity;leuk

7、eia樹(shù)突狀細(xì)胞(dendritiell，D)是體內(nèi)成效最強(qiáng)的專職抗原呈遞細(xì)胞，最大特點(diǎn)是能刺激初始型T細(xì)胞活化和增殖，是特異性免疫應(yīng)答的始動(dòng)者，D在抗腫瘤免疫反響中起關(guān)鍵作用。但大多數(shù)白血病患者有D成效缺陷，在體外擴(kuò)增D并誘導(dǎo)白血病特異性細(xì)胞毒性T細(xì)胞發(fā)揮最大限度特異性抗白血病效應(yīng)，使消除白血病病灶、延伸患者壽命、防范復(fù)發(fā)成為大概。本實(shí)行應(yīng)用細(xì)胞因子rhG-SF、rhIL-4、rhTNF-及rhsD40L等由康健人外周血單核細(xì)胞(nytes)誘導(dǎo)活化出D，使其別離負(fù)載Jurkat細(xì)胞凍融抗原及T1多肽抗原(ilsturantigen，T1)，體外誘導(dǎo)產(chǎn)生特異性細(xì)胞毒性T細(xì)胞yttxiTlyp

8、hyte，TL，不雅察TL對(duì)Jurkat細(xì)胞的特異性殺傷效應(yīng)，為D疫苗在白血病免疫治療中的臨床應(yīng)用提供實(shí)行根據(jù)。質(zhì)料和要領(lǐng)重要試劑及儀器rhG-SF、rhIL-4、rhTNF-、rhsD40L均購(gòu)自美國(guó)ytlab公司；鼠抗人FIT-D14、D1a、D40、D80、D83、PE-D86等流式細(xì)胞熒光標(biāo)識(shí)表記標(biāo)幟抗體美國(guó)eBisiene公司產(chǎn)物；LDH-yttxiity闡發(fā)(美國(guó)Bivisin公司產(chǎn)物)；NiknTE2000-U倒置顯微鏡(日本Nikn產(chǎn)物；del680型酶標(biāo)儀美國(guó)Bi-Rad公司產(chǎn)物;FASalibur流式細(xì)胞儀美國(guó)BetnDikinsn公司產(chǎn)物。急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞株Jur

9、kat為T1基因+細(xì)胞系本院血液室保存，RT-PR檢測(cè)T1基因陽(yáng)性。單核細(xì)胞泉源的D的體外誘導(dǎo)造就及斷定網(wǎng)羅奇怪抗凝康健人外周血，用淋巴細(xì)胞分散液分散得到單個(gè)核細(xì)胞(nnulearells)，以含10%胎牛血清FBS的RPI1640造就液調(diào)解細(xì)胞濃度為3109/L，接種于25l塑料造就瓶，在5%2飽和濕度、37條件下孵育3小時(shí)，吸出非黏附細(xì)胞，用預(yù)熱的造就液洗去未貼壁的細(xì)胞，即得到貼壁的單核細(xì)胞nytes。參加含10%FBS的RPI1640造就液含rhG-SF100g/L，rhIL-450g/L，2l/LL-谷氨酰胺，在5%2、37條件下造就，第3、5天半量換液，劃一量添加上述細(xì)胞因子，在第5

10、天網(wǎng)絡(luò)懸浮細(xì)胞于6孔板造就，并添加rhTNF-20g/L，rhsD40L2g/L。第7天勞績(jī)細(xì)胞，瑞氏染色并攝片，流式細(xì)胞儀檢測(cè)免疫表型?；煜馨图?xì)胞反響(LR)網(wǎng)絡(luò)上述要領(lǐng)中得到的非貼壁單個(gè)核細(xì)胞淋巴細(xì)胞，參加RPI1640(含rhIL-220000U/L低濃度造就)，每2-3天半量換液，造就7天作為反響細(xì)胞;刺激細(xì)胞為向D誘導(dǎo)的細(xì)胞，網(wǎng)絡(luò)造就第7天的D懸液，離心。同種異基因混淆淋巴細(xì)胞反響組為實(shí)行組，與同種同基因淋巴細(xì)胞反響組為比較組。TT法檢測(cè)淋巴細(xì)胞增殖活性：D與淋巴細(xì)胞比例別離為110，120，1100淋巴細(xì)胞濃度為2109/L，各0.1l接種于96孔板，混和孵育72小時(shí)，加TT10

11、l(5g/L)再作用4小時(shí)，酶標(biāo)儀檢測(cè)波長(zhǎng)490n的A值。Jurkat細(xì)胞凍融抗原制備和T1多肽合成及抗原打擊致敏D網(wǎng)絡(luò)Jurkat細(xì)胞，生理鹽水洗滌，調(diào)解細(xì)胞濃度為1109/L，安排-70冰箱10分鐘，37水浴復(fù)溫，重復(fù)凍融5次，500g離心10分鐘，網(wǎng)絡(luò)上清，10000g低溫離心30分鐘，取上清用0.22微孔濾膜過(guò)濾，-20冰箱保存?zhèn)溆?；選用T1卵白第126-134位9個(gè)氨基酸殘基的多肽，氨基酸序列為RFPNAPYL，由上海生工公司合成，HPL純度檢測(cè)95%，分子量1108.3，取5g溶于5lPBS中，分裝，-20冰箱保存?zhèn)溆谩Ｔ贒造就的第4天每毫升造就體系實(shí)行組別離加Jurkat細(xì)胞凍融

12、抗原及T1多肽50l，作用24小時(shí)，RPI1640造就液洗滌，重新添加細(xì)胞因子繼承造就。IL-12含量的檢測(cè)及活化T細(xì)胞免疫表型檢測(cè)網(wǎng)絡(luò)誘導(dǎo)造就的第7天D上清，用ELISA法定量檢測(cè)IL-12的含量，詳細(xì)操縱按試劑盒(法國(guó)Dilne公司產(chǎn)物)說(shuō)明書(shū)舉行。網(wǎng)絡(luò)上述要領(lǐng)中分散得到的非貼壁異體單個(gè)核細(xì)胞，用含IL-220000U/L的RPI1640造就液造就7天，加D繼承誘導(dǎo)造就72小時(shí)，D與淋巴細(xì)胞濃度比為120。D誘導(dǎo)的T細(xì)胞表型為實(shí)行組，未經(jīng)D誘導(dǎo)的T細(xì)胞表型為比較組，網(wǎng)絡(luò)造就的細(xì)胞懸液，洗滌、離心后加PBS懸浮，參加D3、D4、D8及D28熒光抗體，用流式細(xì)胞儀檢測(cè)。細(xì)胞毒作用的乳酸脫氫酶L

13、DH開(kāi)釋法測(cè)定網(wǎng)絡(luò)上述要領(lǐng)造就的活化T細(xì)胞作為效應(yīng)細(xì)胞，取傳代后24小時(shí)的Jurkat細(xì)胞為靶細(xì)胞，效靶比為51、101、201。實(shí)行分4組：實(shí)行組A：Jurkat細(xì)胞凍融抗原打擊致敏D+異體淋巴細(xì)胞+Jurkat細(xì)胞；實(shí)行組B：T1多肽抗原打擊致敏D+異體淋巴細(xì)胞+Jurkat細(xì)胞；比較組A：未致敏D+異體淋巴細(xì)胞+Jurkat細(xì)胞；比較組B：?jiǎn)魏思?xì)胞+異體淋巴細(xì)胞+Jurkat細(xì)胞。LDH開(kāi)釋法測(cè)定細(xì)胞毒效應(yīng)，按LDH-yttxiity試劑盒說(shuō)明書(shū)操縱，酶標(biāo)儀檢測(cè)波長(zhǎng)490n處的A值，參考波長(zhǎng)為630n。細(xì)胞殺傷活性盤算：細(xì)胞毒%=實(shí)行組A值-低控組A值/高控組A值-低控組A值100%統(tǒng)計(jì)

14、學(xué)處置懲罰SPSS11.0軟件舉行統(tǒng)計(jì)學(xué)闡發(fā)，數(shù)據(jù)用XSD表現(xiàn)，兩組資料接納t查驗(yàn)，P0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果外周血D的誘導(dǎo)擴(kuò)增及斷定造就48小時(shí)后，懸浮細(xì)胞增多，第4-5天，多數(shù)細(xì)胞呈懸浮生長(zhǎng)，并聚攏成團(tuán)，細(xì)胞體積顯著增大，圓形或不規(guī)矩形，外貌有毛刺樣突起。第7天懸浮細(xì)胞較散在漫衍，細(xì)胞體積大，毛刺、樹(shù)枝樣突起增多、變長(zhǎng)圖1A。瑞氏染色RG可見(jiàn)細(xì)胞體積大，直徑約15-35，呈圓形、不規(guī)矩形，外貌有偽足樣突起圖1B。流式細(xì)胞儀檢測(cè)D86達(dá)97%，D40達(dá)96%，D80均勻?yàn)?7%，D1a均勻?yàn)?4.62%，D83均勻?yàn)?0%，而單核細(xì)胞特性性標(biāo)識(shí)表記標(biāo)幟D145%圖2，表白經(jīng)細(xì)胞因子誘導(dǎo)后

15、絕大部門單核細(xì)胞轉(zhuǎn)釀成了D。混淆淋巴細(xì)胞反響結(jié)果結(jié)果見(jiàn)表1。D與同種同基因或同種異基因淋巴細(xì)胞按差異比例混淆都可產(chǎn)生增殖反響，120，110比例下，兩組比力均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P0.05。在110時(shí)增殖反響最強(qiáng)，這表白經(jīng)細(xì)胞因子誘導(dǎo)得到的D具有強(qiáng)的免疫原性，具有更強(qiáng)的刺激同種異基因淋巴細(xì)胞增殖反響的本領(lǐng)，且隨著D細(xì)胞數(shù)的增多，刺激同種異基因淋巴細(xì)胞增殖反響的本領(lǐng)加強(qiáng)。Table1.PrliferativerespnseafterixturefDithautgeneiandallgeneilyphytes略活化T細(xì)胞免疫表型及IL-12的含量檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表2。由表2可見(jiàn)經(jīng)D引發(fā)的T細(xì)胞有顯著上調(diào)D3、

16、D4、D8、D28分子的作用因檢測(cè)例數(shù)少，未進(jìn)一步作統(tǒng)計(jì)學(xué)闡發(fā)。ELISA法定量檢測(cè)IL-12的含量為61g/L。Table2.PhentypefTlyphyteseffetedbyD略致敏D誘導(dǎo)TL細(xì)胞毒作用的不雅察用LDH開(kāi)釋法檢測(cè)TL的細(xì)胞毒效應(yīng)，結(jié)果見(jiàn)表3。用配對(duì)t查驗(yàn)，對(duì)實(shí)行組A、實(shí)行組B及比較組A、比較組B在各差異效靶比下的殺傷率作兩兩比力，在任一結(jié)實(shí)效靶比例下，實(shí)行組A、B與比較組A、B兩兩比力，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P0.01。實(shí)行組A、B間兩兩比力P0.05不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這些結(jié)果表白，經(jīng)抗原致敏D能明顯加強(qiáng)TL對(duì)Jurkat細(xì)胞的殺傷作用。Table3.Frzen-thae

17、dantigenandT1peptide-ladedDtriggeringTLediatedkillingeffetsnJurkatell略討論比年來(lái)研究證明，D被種種情勢(shì)的腫瘤抗原致敏后可以在體表里誘導(dǎo)出腫瘤特異性TL1-5，如今使用D舉行腫瘤免疫治療已進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段。G-SF與IL-4團(tuán)結(jié)應(yīng)用可誘導(dǎo)單核細(xì)胞成為具有未成熟表型的D，再予必然的刺激信號(hào)作用，如TNF-、D40L等細(xì)胞因子，可誘導(dǎo)出成熟D，使其抗原呈遞成效到達(dá)最正確狀態(tài)。D40L是人類D成熟緊張刺激信號(hào)，sD40L在體外不但具有明顯的誘導(dǎo)D分化、促進(jìn)D成熟的成效，并且經(jīng)sD40L作用的D能更有用地引發(fā)T細(xì)胞6，sD40L有盼望

18、成為制備高效D疫苗的緊張細(xì)胞因子。D40L與D外貌的D40彼此作用后能誘導(dǎo)D的分化成熟7-9，上調(diào)共刺激分子的表達(dá)，且D40-D40L的彼此作用誘導(dǎo)D排泄一系列細(xì)胞因子和趨化因子，如IL-12、TNF-、IP-等。IL-12重要泉源于D的排泄，其成效重要是操縱D4+T細(xì)胞向Th1細(xì)胞亞群的分化，誘導(dǎo)產(chǎn)生INF-，在體液抗腫瘤免疫方面發(fā)揮緊張作用。1990年all等16從ils瘤細(xì)胞中分散出T1基因，其基因定位于染色體11P13，編碼龐大的RNA，由于其2個(gè)可變毗連區(qū)的變革，可產(chǎn)生4種差異的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物。比年來(lái)研究創(chuàng)造，在正常造血體系及造血體系惡性腫瘤中T1基因有差異表達(dá)，在多種實(shí)體瘤如乳腺癌、肺癌

19、等中高表達(dá)。接納RT-PR技能檢測(cè)T1基因的表達(dá)，創(chuàng)造在AL、ALL及L急性變中有高表達(dá)11，12。T1多肽是已經(jīng)斷定出的白血病多肽。hinani等9用T1多肽致敏T細(xì)胞后，后者對(duì)HLA-A24陽(yáng)性白血病細(xì)胞株具有特異性的細(xì)胞毒作用。T1多肽致敏的D通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞毒T細(xì)胞對(duì)表達(dá)T1基因的急性白血并慢性白血并骨髓增生非常綜合征和實(shí)體瘤等腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生殺傷效應(yīng)，故可用于白血并實(shí)體瘤的免疫治療13-15。我們從康健人外周血中分散出單核細(xì)胞，經(jīng)誘導(dǎo)造就出具有典范樹(shù)突狀形態(tài)特性的D，它高表達(dá)D86最高達(dá)97%、D80、D40最高達(dá)96%及D1，表達(dá)D83均勻?yàn)?0%，混淆淋巴細(xì)胞反響提示其具有極強(qiáng)的免疫原性

20、。在D造就至未成熟階段，用Jurkat細(xì)胞凍融抗原及T1多肽抗原致敏D，繼而參加TNF-、sD40L，使D趨于成熟，誘導(dǎo)激活T細(xì)胞，引起特異性抗腫瘤效應(yīng)。打擊致敏D誘導(dǎo)引發(fā)的TL在凍融抗原及T1多肽抗原差異效靶比下對(duì)Jurkat細(xì)胞的殺傷率均高于單純D組和單核細(xì)胞比較組(P0.05)，且在每一組中，它們所引發(fā)的TL殺傷活性均隨著效靶比的進(jìn)步而相應(yīng)進(jìn)步，表現(xiàn)了殺傷活性的量效干系，說(shuō)明D已樂(lè)成攝取了凍融抗原或T1多肽抗原，加工后經(jīng)H類分子呈遞給淋巴細(xì)胞，同時(shí)通過(guò)共刺激分子、黏附分子等將T細(xì)胞激活，對(duì)白血病細(xì)胞產(chǎn)生了特異性殺傷作用。此中未致敏D、單核細(xì)胞組表現(xiàn)出必然的殺傷效應(yīng)，它們對(duì)白血病細(xì)胞黑白特

21、異性殺傷，以是服從較低。實(shí)行組A、B間兩兩比力P0.05不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可見(jiàn)T1多肽抗原單一腫瘤細(xì)胞特異性抗原與Jurkat細(xì)胞凍融抗原得到全腫瘤細(xì)胞抗原所激活的TL對(duì)Jurkat靶細(xì)胞殺傷效應(yīng)相稱，這也不失為有用負(fù)載腫瘤抗原的要領(lǐng)，此兩種要領(lǐng)都具有臨床應(yīng)用代價(jià)，為進(jìn)一步應(yīng)用于免疫治療的體內(nèi)實(shí)行奠基了基矗我們只合成此中一種T1多肽負(fù)載D，至于別的3種多肽抗原負(fù)載D可否誘導(dǎo)出更強(qiáng)的TL，尚需進(jìn)一步研究。的抗原不必然能誘導(dǎo)出最正確抗腫瘤免疫反響。一種抗原負(fù)載D，其長(zhǎng)處在于誘發(fā)的免疫反響特異性強(qiáng)，但是誘發(fā)的僅是單一克隆的TL，結(jié)果有限，存在誘發(fā)抗原調(diào)變的傷害。凍融抗原所獵取的抗原信息量大，可提供多

22、種和未知腫瘤特異性或相干性抗原，誘導(dǎo)T細(xì)胞多克隆擴(kuò)增，制止產(chǎn)生某些變異株的免疫逃逸，包管抗腫瘤免疫的全面性和強(qiáng)效性；缺點(diǎn)是特異性抗原純度底，對(duì)D的負(fù)載結(jié)果相對(duì)較不特異。固然Jurkat細(xì)胞凍融抗原和T1多肽抗原打擊致敏D激活TL，體外對(duì)Jurkat細(xì)胞產(chǎn)生顯著殺傷效應(yīng)，但是在體內(nèi)結(jié)果怎樣有待進(jìn)一步研究。致敏D誘導(dǎo)TL細(xì)胞毒作用的不雅察用LDH開(kāi)釋法檢測(cè)TL的細(xì)胞毒效應(yīng)，結(jié)果見(jiàn)表3。用配對(duì)t查驗(yàn)，對(duì)實(shí)行組A、實(shí)行組B及比較組A、比較組B在各差異效靶比下的殺傷率作兩兩比力，在任一結(jié)實(shí)效靶比例下，實(shí)行組A、B與比較組A、B兩兩比力，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P0.01。實(shí)行組A、B間兩兩比力P0.05不具

23、有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這些結(jié)果表白，經(jīng)抗原致敏D能明顯加強(qiáng)TL對(duì)Jurkat細(xì)胞的殺傷作用。Table3.Frzen-thaedantigenandT1peptide-ladedDtriggeringTLediatedkillingeffetsnJurkatell略討論比年來(lái)研究證明，D被種種情勢(shì)的腫瘤抗原致敏后可以在體表里誘導(dǎo)出腫瘤特異性TL1-5，如今使用D舉行腫瘤免疫治療已進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段。G-SF與IL-4團(tuán)結(jié)應(yīng)用可誘導(dǎo)單核細(xì)胞成為具有未成熟表型的D，再予必然的刺激信號(hào)作用，如TNF-、D40L等細(xì)胞因子，可誘導(dǎo)出成熟D，使其抗原呈遞成效到達(dá)最正確狀態(tài)。D40L是人類D成熟緊張刺激信號(hào)，sD4

24、0L在體外不但具有明顯的誘導(dǎo)D分化、促進(jìn)D成熟的成效，并且經(jīng)sD40L作用的D能更有用地引發(fā)T細(xì)胞6，sD40L有盼望成為制備高效D疫苗的緊張細(xì)胞因子。D40L與D外貌的D40彼此作用后能誘導(dǎo)D的分化成熟7-9，上調(diào)共刺激分子的表達(dá)，且D40-D40L的彼此作用誘導(dǎo)D排泄一系列細(xì)胞因子和趨化因子，如IL-12、TNF-、IP-等。IL-12重要泉源于D的排泄，其成效重要是操縱D4+T細(xì)胞向Th1細(xì)胞亞群的分化，誘導(dǎo)產(chǎn)生INF-，在體液抗腫瘤免疫方面發(fā)揮緊張作用。1990年all等16從ils瘤細(xì)胞中分散出T1基因，其基因定位于染色體11P13，編碼龐大的RNA，由于其2個(gè)可變毗連區(qū)的變革，可產(chǎn)生4種差異的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物。比年來(lái)研究創(chuàng)造，在正常造血體系及造血體系惡性腫瘤中T1基因有差異表達(dá)，在多種實(shí)體瘤如乳腺癌、肺癌等中高表達(dá)。接納RT-PR技能檢測(cè)T1基因的表達(dá)，創(chuàng)造在AL、ALL及L急性變中有高表達(dá)11，12。T1多肽是已經(jīng)斷定出的白血病多肽。hinani等9用T1多肽致敏T細(xì)胞后，后者對(duì)HLA-A24陽(yáng)性白血病細(xì)胞株具有特異性的細(xì)胞毒作用。T1多肽致敏的D通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞毒T細(xì)胞對(duì)表達(dá)T1基因的急性白血并慢性白血并骨髓增生非常綜合征和實(shí)體瘤等腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生殺傷效應(yīng)，故可用于白血并實(shí)體瘤的免疫治療13-15。我們從康健人外周血中分散出單核細(xì)胞，經(jīng)誘導(dǎo)造