大米淀粉含量的測定

1、不同品牌的大米中淀粉的含量測定研究廣東石油化工學(xué)院化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院生物技術(shù)摘 要淀粉跟稀硫酸在加熱的條件下能夠完全水解成葡萄糖、麥芽糖等還原糖。還原糖的測 定是糖定量測定的基本方法。還原糖在堿性條件下被氧化成糖酸及其他產(chǎn)物，3, 5-二硝 基水楊酸則被還原成棕紅色的3-氨基-5硝基水楊酸。在一定范圍內(nèi)，還原糖的量與棕紅 色物質(zhì)的深淺成正比關(guān)系，利用分光光度計，在540nm波長下測定光密度值，查對標(biāo)準(zhǔn) 曲線。由于淀粉完全水解成還原糖的量是成正比的，所以，也與棕紅色物質(zhì)的深淺成正 比關(guān)系。關(guān)鍵詞水解還原糖吸光度1前言最近網(wǎng)上有人提出疑問：“我們吃的大米淀粉含量究竟有多少？哪種大米的淀粉含量 最高

2、？ ”很多人都不太能準(zhǔn)確地回答。對于我們南方人來說，大米是我們的主要食物、 能量來源，基于網(wǎng)上有人提出“大米淀粉含量究竟有多少”的疑問，我們決定對某超市 出售的某幾種大米的淀粉含量進行實驗研究。通過實驗測出不同品種大米的淀粉含量， 比較不同品種大米的淀粉含量的高低。2實驗?zāi)康?、掌握測定稀酸水解淀粉的原理和方法，利用酸水解法測定淀粉的原理，測定不同 品牌的大米中淀粉的含量。3實驗原理淀粉是植物體最主要的貯藏多糖，也是人和動物的重要食物來源和發(fā)酵工業(yè)的基本原 料。主要存在于大米、種子和塊莖中。淀粉經(jīng)過稀硫酸水解后生成葡萄糖、麥芽糖等小 分子物質(zhì)而被機體利用。酸水解淀粉產(chǎn)生葡萄糖、麥芽糖等還原糖能

3、使3, 5-二硝基水楊 酸還原，生成棕紅色的的3-氨基-5-硝基水楊酸，后者在540nm處有最大吸收峰?？捎帽?色法進行測定。反應(yīng)中還原糖被氧化成相應(yīng)的糖酸。反應(yīng)如下：淀粉的含量與產(chǎn)生的還原糖的量成正比。用標(biāo)準(zhǔn)的淀粉溶液制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，用比色法 測定稀硫酸作用于淀粉后生成的還原糖的量，以單位質(zhì)量樣品在過量酸作用下完全水解 生成的還原糖的量從而測定淀粉的含量。4實驗設(shè)備80C水浴鍋高速組織搗碎機分光光度計20 mL具塞比色管X13容量瓶（100 mLX7、1000 mLX2）量筒（20 mL、50 mL）試管架移液管（2mLX6、1mLX6）電子天平膠頭滴管燒杯玻璃棒5實驗材料及試劑5.1樣品來源

4、本研究使用的樣品包括5種不同品牌的大米。將這5種不同品牌的大米用蒸餾水進行沖洗以除去大米中的水溶性雜質(zhì)后待大米晾 干后進行實驗。5.2試劑5.2.1 2mol/L NaOH 溶液準(zhǔn)確稱取4g NaOH固體，溶于15 mL蒸餾水中，并倒入50ml容量瓶中，用蒸餾水 分幾次清洗燒杯并將清洗的溶液倒入容量瓶中，用蒸餾水定容至刻度線。3, 5-二硝基水楊酸試劑準(zhǔn)確稱取3, 5-二硝基水楊酸1g，溶于2mol/L NaOH溶液20mL，加入50mL蒸餾水， 再加入30g酒石酸鉀鈉，待溶解后用蒸餾水定容至100mL。蓋緊瓶塞，勿讓。02進入。 若溶液渾濁，可過濾后使用。0.1mol/L 檸檬酸緩沖液（pH

5、5.6）A液（0.1mol/L檸檬酸）：稱取C6H8O7 H2O 21.01g，用蒸餾水溶解并定容至1000mL。B液（0.1mol/L檸檬酸鈉）：稱取Na3C6H5O7 2H2O 29.41g，用蒸餾水溶解并定容 至 1000mLA液110 mL與B液290 mL混勻，即為0.1mol/L檸檬酸緩沖液（pH5.6）。1mg/mL淀粉溶液稱取0.1g淀粉溶于0.1mol/L檸檬酸緩沖液（pH5.6）100 mL中。20% 硫酸用50mL的量筒量取50mL的水，倒入100mL燒杯中；再用20mL的量筒量取12.6mL98% 的濃硫酸，沿內(nèi)壁緩緩倒入燒杯內(nèi)的水中，邊倒邊用玻璃棒攪拌。等冷至室溫后，

6、倒入 100ml容量瓶中，用蒸餾水分幾次清洗燒杯并將清洗的溶液倒入容量瓶中，用蒸餾水定容 至刻度線。6操作步驟6.1樣品淀粉溶液的制備準(zhǔn)備5種不同品牌的大米，標(biāo)號I -1，11-2,皿-3, W-4，V-5，分別稱取適量樣 品按1:1的比例加蒸餾水在組織搗碎機中以1200r/min搗成勻漿，分別準(zhǔn)確稱取0.2g搗 碎后的勻漿置于5個100ml的容量瓶中，再用6ml的蒸餾水分幾次將殘渣洗入容量瓶中， 搖勻后，加水定容至刻度線，即配成1mg/ml樣品淀粉溶液，并在相應(yīng)的容量瓶上貼上標(biāo) 簽1號淀粉溶液，2號淀粉溶液，3號淀粉溶液，4號淀粉溶液，5號淀粉溶液。6.2淀粉標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作取7支潔凈的具塞比

7、色管，編號，按表1內(nèi)容進行操作：淀粉標(biāo)準(zhǔn)曲線制作12345671mg/mL標(biāo)準(zhǔn)淀粉溶液/mL00.20.61.01.41.82.020%硫酸/mL1.01.01.01.01.01.01.0蒸餾水/mL2.01.81.41.00.60.20混勻，置于80C水中水浴反應(yīng)34min，冷卻一段時間后2mol/LNaOH 溶液/mL0.50.50.50.50.50.50.53,5-二硝基水楊酸/mL2.0混勻2.02.02.02.02.02.0混勻，置沸水浴煮沸5min，取出，冷至室溫后，以1號為參比溶液，試管號操作項目于540nm處測定各試管吸光度各試管淀粉含量/mg00.20.61.01.41.82

8、.0A540將測定結(jié)果記錄于表1中，以淀粉含量（mg）為橫坐標(biāo)，吸光度A540為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。6.3樣品淀粉的測定取6支潔凈的具塞比色管，編號，按表2內(nèi)容進行操作。顯色反應(yīng)后，以0為參比溶液，于540nm處測定1-1，11-2,皿-3, W-4，V-5管 的吸光度A540,將測定結(jié)果記錄于表2中。7結(jié)果及計算將測定結(jié)果記錄于表2中，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出相應(yīng)的樣品淀粉含量（mg）。表2樣品淀粉測定操作項目試管號O1-1II-2m-3W-4V-51mg/mL樣品淀粉溶液/mL01.01.01.01.01.020%硫酸/mL1.01.01.01.01.01.0蒸餾水/mL2.01.01.01.0

9、1.01.0混勻，置80C水浴中反應(yīng)34min,冷卻一段時間后，2mol/LNaOH 溶液/mL0.50.50.50.50.50.5混勻3,5-二硝基水楊酸/mL2.02.02.02.02.02.0混勻，置于沸水中水浴反應(yīng)5min，取出，冷至室溫后，以0號為參比溶液， 于540nm處測定各試管吸光度A540根據(jù)測定I-1，II-2，III-3，W-4，V-5管的吸光度A在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出各支540試管的淀粉含量（mg）,按下列公式計算各種大米淀粉含量：大米淀粉含量二淀粉含量（mg）/樣品大米的質(zhì)量（mg）X100%8注意事項1由于本實驗是以酸作催化劑水解淀粉的，其水解的主要特點是非專一性，因此為

10、了獲 得較高純度的淀粉溶液，應(yīng)盡量減少糖化時雜質(zhì)的生成，因此選用的大米外觀要無結(jié) 塊，無霉變，無異味2大米所含雜質(zhì)越少越好，尤其應(yīng)盡量設(shè)法除去水溶性雜質(zhì)。3在稱取樣品時要準(zhǔn)確稱量，以免造成實驗誤差。4水解了淀粉后，要加入碳酸鈉與試管內(nèi)，中和硫酸，否則會影響3, 5-二硝基水楊酸與 還原糖的反應(yīng)。5由于本實驗要用到濃硫酸配制成20%的硫酸，不論是98%的濃硫酸還是配制好的稀硫酸 都具有很強的腐蝕性，98%硫酸還具強烈的吸水性，會燒傷皮膚。因此操作時都要穿戴好 勞防用品。6濃硫酸在稀釋過程中會產(chǎn)生大量的熱量，因此絕對不容許將水往濃硫酸中倒，而只能 將濃硫酸往水中倒，在操作時也只能慢慢地、緩緩地將濃硫酸加入水中，并不斷進行攪 拌1。9費用預(yù)算物品名稱費用預(yù)算