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1、關(guān)于醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)第一張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月動(dòng)物實(shí)驗(yàn):動(dòng)物實(shí)驗(yàn)是用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物作為人的替身進(jìn)行各種生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)的過(guò)程。 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)操作技術(shù):是實(shí)施動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的重要手段,在不同的研究領(lǐng)域有其不同的目的和應(yīng)用,一些基本操作技術(shù)是共同的,基本的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)技術(shù)需要訓(xùn)練 。 內(nèi)容:動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)基本操作技術(shù)、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)后的管理技術(shù)以及應(yīng)該注意的影響動(dòng)物實(shí)驗(yàn)效果的因素等第二張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果By Chen Min-li動(dòng)物的反應(yīng) :R(A+B+C)DE式中:R 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的總反應(yīng) A 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種的共同反應(yīng) B 動(dòng)物品種及品系特有的反應(yīng) C
2、動(dòng)物個(gè)體反應(yīng)(個(gè)體差異) D 環(huán)境的影響(包括實(shí)驗(yàn)處理) E 實(shí)驗(yàn)誤差(實(shí)驗(yàn)操作相關(guān))第三張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備一、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)相關(guān)的準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)?zāi)康拿鞔_(課題設(shè)計(jì)):研究、申報(bào)新藥資料動(dòng)物實(shí)驗(yàn)相配套設(shè)備、儀器、試劑標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)設(shè)施第四張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月二、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物相關(guān)的準(zhǔn)備 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的質(zhì)量合格證明 適量的飼料和墊料 (高脂等特殊飼料)運(yùn)輸中的各種因素對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的影響,并應(yīng)查看運(yùn)輸檢疫證明 動(dòng)物需要隔離觀(guān)察(一般37d的適應(yīng)觀(guān)察) 第五張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月三、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的分組隨機(jī)化原則 :樣本具有極
3、好的代表性 ,非實(shí)驗(yàn)因素方面具有極好的均衡性,提高實(shí)驗(yàn)資料的可比性與結(jié)論的說(shuō)服力。 完全隨機(jī)化的效果是否永遠(yuǎn)最好?不一定。關(guān)鍵取決于樣本含量的大小。若樣本含量很大,完全隨機(jī)化的效果比較理想;若樣本含量比較小,有時(shí)完全隨機(jī)化的結(jié)果可能會(huì)出現(xiàn)某些偏差。例如: 24只小鼠,其中16只雌性,8只雄性,若采用完全隨機(jī)化方式均分成2組,則有可能一組中的12只小鼠全是雌性的,另一組中有4只雌性、8只雄性小鼠 ?!靶詣e”這個(gè)重要的非實(shí)驗(yàn)因素就嚴(yán)重地影響實(shí)驗(yàn) 。此時(shí),宜采用“分層隨機(jī)化” 。隨機(jī)化的方法有多種,可以查“隨機(jī)數(shù)字表”、“隨機(jī)排列表”或查“用計(jì)算機(jī)產(chǎn)生的偽隨機(jī)數(shù)字表” 第六張,PPT共一百一十二頁(yè),
4、創(chuàng)作于2022年6月實(shí)驗(yàn)單位隨機(jī)分為三組分組情況動(dòng)物號(hào)碼123456789101112131415隨機(jī)數(shù)字186240191240839534194491690330余 數(shù)321131221121333歸 組CBAACABBAABACCCA組346910B組2781112C組15131415第七張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第八張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月動(dòng)情前期可見(jiàn)大量有核上皮細(xì)胞第九張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月動(dòng)情期可見(jiàn)大量角化上皮細(xì)胞第十張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月交配后的大鼠陰道分泌物,可見(jiàn)精子第十一張,PPT共一百
5、一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的編號(hào)與標(biāo)記1、染色法:用化學(xué)試劑或藥品在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體表的不同部位進(jìn)行涂染,并用不同顏色區(qū)別各組動(dòng)物。編號(hào)原則是先左后右,從前到后,從上到下。有時(shí)用兩種顏色一個(gè)代表十位、一個(gè)代表個(gè)位。常用的染色劑有3%5%的苦味酸(黃色)、2%的硝酸銀溶液(咖啡色)、0.5%的中性品紅溶液(紅色)和煤焦油酒精溶液(黑色)。第十二張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第十三張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月2、耳緣剪孔法:是在動(dòng)物的耳邊緣剪出不同的缺口或打成不同的小孔進(jìn)行標(biāo)記的方法。為防止孔、口愈合,一般在打孔后用消毒的滑石粉涂抹在孔、口局部。由打孔或
6、剪切的位置和孔數(shù)代表編號(hào),一般在耳內(nèi)按上、中、下打孔,分別代表1、2、3,在相應(yīng)位置剪缺口代表4、5、6,剪兩個(gè)缺口代表7、8、9,無(wú)孔或缺口為10。一般左耳代表個(gè)位數(shù)、右耳代表十位數(shù)。3、烙印法:用烙印鉗或刺針將號(hào)碼刺在或烙印在動(dòng)物無(wú)體毛或明顯部位,如耳、面、鼻部及四肢等,然后用溶在酒精中的黑墨在針刺處涂抹。這種方法適用于大中型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,操作時(shí)要注意防止感染。第十四張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第十五張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(四)號(hào)牌法:用特制的金屬號(hào)牌固定在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的耳上或頸項(xiàng)部,掛牌時(shí)要注意避開(kāi)血管。此法適用于小動(dòng)物,特別是轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的培育和實(shí)驗(yàn)。(
7、五)籠子編號(hào)法:不在動(dòng)物身體上作標(biāo)記而把裝動(dòng)物的籠子進(jìn)行編號(hào),也叫替代法。第十六張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié)、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的抓取與固定第十七張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的抓取和固定第十八張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 1、小鼠的抓取保定: 器材:小鼠飼養(yǎng)盒+面罩1套。 方法步驟: 1、用右手拇指和食指捏 住小鼠尾巴中部將小鼠提 起,放在飼養(yǎng)合的面罩上。 2、用左手拇指和食指迅速、 準(zhǔn)確地捏住小鼠的兩耳后、 頸背部的皮膚,將小鼠提起。第十九張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 3、翻轉(zhuǎn)左手掌,以左手掌心和中指夾 小鼠
8、背部的皮膚,使小鼠整個(gè)呈一條 直線(xiàn)。 4、用左手無(wú)名指壓住小鼠背部的皮膚,小指壓住小鼠的尾巴根部。 5、松開(kāi)捏住小鼠尾巴的右手拇指和食指。 第二十張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第二十一張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月手術(shù)固定法:用乙醚等麻醉藥品麻醉后,用長(zhǎng)2030cm的線(xiàn)繩分別系在四肢上,再把四肢的線(xiàn)繩分別系在固定板四角的釘子上,并且在頭部上顎切齒的地方牽一根線(xiàn)繩達(dá)到完全固定。在靜脈給藥時(shí),先根據(jù)小鼠的大小選擇合適的固定器,打開(kāi)鼠筒蓋,把小鼠放在里面,只露出尾巴;或者用倒放的燒杯將鼠扣住,只露出尾巴并壓住。第二十二張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月二、
9、大鼠的抓取與固定2、大鼠的抓取與固定抓取方法:45周齡以?xún)?nèi)的大鼠同小鼠;周齡較大的大鼠其尾部皮膚容易被剝脫,所以用左手從背部中央到胸部捏起來(lái)抓住。抓取時(shí)最好帶防護(hù)手套,但手套不宜過(guò)厚。手固定法:同小鼠。手術(shù)固定法:同小鼠。靜脈給藥或采血時(shí)同小鼠。第二十三張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第二十四張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第二十五張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月三、豚鼠的抓取與固定抓取方法:抓取幼小豚鼠時(shí),用手捧起來(lái);成熟的大豚鼠,用手大把抓起胸肋部即可。注意不能粗野,更不能抓取腰腹部,這樣容易造成肝破裂而死亡。手固定法:將左手的食指和中指放在豚鼠頸
10、背部?jī)蓚?cè),拇指和無(wú)名指放在肋部,分別用手指夾住左右前肢抓起來(lái)。反轉(zhuǎn)左手,用右手的拇指和食指夾住右后肢,用中指和無(wú)名指夾住左后肢是豚鼠整體伸直成一條直線(xiàn)。一個(gè)人固定操作時(shí),坐在椅子上,用右手拿著豚鼠的后肢夾在兩腿之間,用大腿代替右手夾住。手術(shù)固定法:同大、小鼠。第二十六張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 方法步驟: 1、先用左手輕輕扣、 按住豚鼠背部。 2、順勢(shì)抓緊其肩胛上方皮膚,拇指和食指環(huán)箍其頸部。 3、用右手輕輕托住其臀部,即可將豚鼠抓取保定。 第二十七張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月四、家兔的抓取與固定抓取方法:用一只手大把抓住頸背部皮膚提起來(lái),另一只手托住其臀
11、部,讓其重心落在托其臀部的手上,運(yùn)送時(shí),還要抓住頸肩部皮膚抱著兔子運(yùn)送。手固定法:在灌胃給藥時(shí),人坐在椅子上,用一只手抓住頸背部皮膚,另一只手抓住兩后肢放在兩腿之間,大腿夾住兔子的下半身,用空著的手抓住兩前肢固定之,抓住頸背部的手同時(shí)捏著兩只耳朵,不讓頭部轉(zhuǎn)動(dòng)。第二十八張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月固定器固定法:耳靜脈給藥或采血時(shí)用盒式固定法;從頸動(dòng)脈采血或手術(shù)實(shí)驗(yàn)時(shí)用臺(tái)式固定法。盒式固定法:把兔子放在盒子里,只露出頭部,用轉(zhuǎn)扭擰固定器固定家兔。臺(tái)式固定法:將麻醉的兔子仰臥,用紗布條依次將四肢捆綁固定于固定臺(tái)的兩側(cè),然后把頭部放在金屬制的首伽和咀環(huán)上固定。第二十九張,PPT共一
12、百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月兔的抓取保定方法1:步驟: 1、用右手把兔的兩耳拿在手心并抓住頸后部皮膚,把兔提起。 2、然后用左手托住兔的臀部。 第三十張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月方法2:器材:兔保定架步驟:1、打開(kāi)保定架的上蓋,抓取并將兔放進(jìn)架內(nèi),迅速關(guān)上保定架的上蓋。2、右手抓住兔耳朵將頭部拉過(guò)保定架的卡栓,將兔的脖子保定。3、如果兔掙扎,可用手在它的背上輕輕撫摸,使其安靜。 第三十一張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月五、犬的抓取與固定抓取方法:先給犬帶上系有鐵鏈條的脖套,對(duì)于性情兇猛的犬,要用特制的鉗式長(zhǎng)柄犬夾夾住犬頸部將犬按倒后,再系脖套和鏈條。手固定法
13、:首先綁住犬嘴,方法是飼養(yǎng)員或犬主人從側(cè)面靠近并輕輕撫摸其頸部皮毛,然后迅速用布帶綁住犬嘴,布帶從下頜繞到上頜打一個(gè)結(jié),再繞到下頜打一個(gè)結(jié),然后將布帶繞到頭后頸,在頸后部再打一個(gè)結(jié),最后打一個(gè)活結(jié),對(duì)于未經(jīng)馴服的犬,可用長(zhǎng)柄犬夾夾住犬頸部按倒后強(qiáng)制綁嘴。手術(shù)臺(tái)固定法:麻醉后,松開(kāi)布帶,將犬仰臥在手術(shù)臺(tái)上,先固定四肢,再固定頭部。第三十二張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第三十三張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月六、猴的抓取與固定抓取方法:從籠內(nèi)抓取時(shí),飼養(yǎng)人員應(yīng)右手持短柄網(wǎng)罩,左臂緊靠門(mén)側(cè),以防止籠門(mén)敞開(kāi)時(shí)猴逃出。右手將網(wǎng)罩塞入籠內(nèi),由上而下罩捕。當(dāng)猴被罩住后,應(yīng)立即將
14、網(wǎng)罩翻轉(zhuǎn)取出籠外,罩猴在地,由罩外抓住猴的頸部,清掀網(wǎng)罩,再提取猴的手臂反背握住。固定方法:1.徒手固定:將猴兩前肢反背其背后,操作者用一只手握著,用另一只手將猴兩后肢捉住即可固定。 2.固定架固定:使用“猴限制椅”或“猴固定架”進(jìn)行固定第三十四張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第三十五張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月七、豬的抓取與固定抓取方法:小豬常采用雙手提起后肢,兩膝夾住豬背倒立固定;成豬可采用站立固定。固定方法:可將豬仰放在“V”字型槽內(nèi)固定,也可用木制三角固定架和帆布吊兜固定(挖四個(gè)孔使其四肢下伸)。如沒(méi)有三腳架,也可以用犬固定臺(tái)。第三十六張,PPT共一百一
15、十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月一、常用的麻醉劑(一)揮發(fā)性麻醉劑 包括乙醚、氯仿、異氟烷 (Isoflurane )。(二)非揮發(fā)性麻醉劑 包括苯巴比妥鈉、戊巴比妥鈉(Pentobarbitol)、硫噴妥鈉、氨基甲酸乙脂、水合氯醛、氯胺胴(Ketamine)、噻啦嗪(Xylazine)、速眠新、烏拉坦。(三)中藥麻醉劑 包括洋金花、氫溴酸東莨菪堿等。第三節(jié)、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的麻醉第三十七張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月二、動(dòng)物的麻醉方法 (一)全身麻醉1.吸入麻醉:多采用乙醚做麻醉藥。把帶有乙醚的棉球放入玻璃容器內(nèi),揮發(fā)后將動(dòng)物放入容器內(nèi)46分鐘,動(dòng)物失去運(yùn)動(dòng)力后立即取出動(dòng)物以避免麻醉過(guò)深
16、致死。此法多用于短期操作性實(shí)驗(yàn),乙醚麻醉的優(yōu)點(diǎn)是蘇醒快,但是對(duì)呼吸道刺激性大,長(zhǎng)時(shí)間容易窒息死亡。2.注射麻醉:大、小鼠和豚鼠常采用腹腔注射法進(jìn)行全身麻醉,犬、貓、兔等既可腹腔注射也可靜脈注射給藥。注射時(shí),先用麻醉藥總量的2/3,密切觀(guān)察動(dòng)物生命體征的變化,如已經(jīng)達(dá)到所需麻醉的程度,余下的麻醉藥則不用,避免麻醉過(guò)深抑制大腦呼吸中樞導(dǎo)致動(dòng)物死亡第三十八張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 各種動(dòng)物常用的全身麻醉劑的劑量及途徑劑量(mg/kg體重)動(dòng)物 注射 戊巴比 巴比 苯巴比 硫噴 異戊巴 氯胺酮 氯醛糖 烏拉坦 途徑 妥 鈉 妥鈉 妥 鈉 妥鈉 妥 鈉 比妥鈉 (20%25%) (
17、1%3%) (1%2%) (5%10%) (10%)小鼠 i.p 5080 200 / 1520 100 100200 / / i.m / / / / / / / 1350大鼠 i.p 4050 200 / 40100 100 100200 550 / i.m / / / / / / / 1350 s.c / / 100110 / / / / 8001000豚鼠 i.p 3050 100 / / 100 / / / i.m / / / 2050 / / / 1350兔 i.p 2540 / / / 80120 / / / i.v 2030 225300 / 1520 4050 / 80100
18、7501000犬 i.p 30 / / 2050 80100 1040 / / i.v 30 225 50100 1520 4050 / 60 7501000 口服 / 350 / / / / 100 1500 注:i.p指腹腔注射,i.m指肌肉注射,s.c指皮下注射,i.v指靜脈注射第三十九張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(二)局部麻醉1.表面麻醉:利用局部麻醉藥的組織穿透作用,透過(guò)粘膜,阻滯淺表的神經(jīng)末梢,稱(chēng)為表面麻醉。常用利多卡因,眼部用藥點(diǎn)滴、鼻內(nèi)用要涂敷、咽喉氣管用藥噴霧、尿道灌注給藥。2.區(qū)域阻滯麻醉:在手術(shù)區(qū)內(nèi)四周和底部注射麻醉藥阻斷疼痛的向心傳導(dǎo),稱(chēng)為區(qū)域阻滯麻醉
19、。常用普魯卡因。3.神經(jīng)干(叢)阻滯麻醉:在神經(jīng)干(叢)的四周注射麻醉藥,阻滯其傳導(dǎo),使其所支配的區(qū)域疼痛感覺(jué)消失,稱(chēng)為神經(jīng)干(叢)阻滯麻醉。常用利多卡因。4.局部浸潤(rùn)麻醉:沿手術(shù)切口逐層注射局部麻醉藥,阻滯組織中的神經(jīng)末梢,稱(chēng)為局部浸潤(rùn)麻醉。常用普魯卡因。第四十張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月三、麻醉注意事項(xiàng)1.有些麻醉藥,如乙醚揮發(fā)性很強(qiáng),易燃,使用時(shí)應(yīng)遠(yuǎn)離火源,平時(shí)應(yīng)妥善保存。2.應(yīng)特別注意各種麻醉藥的劑量和給藥途徑,切莫因藥量過(guò)大而引起中毒或死亡。3.注射時(shí),一般要求緩慢注入,并隨時(shí)觀(guān)察動(dòng)物肌肉的緊張性、角膜反射、呼吸頻率、疼痛反射等指標(biāo)。4.注意保溫,采取實(shí)驗(yàn)桌內(nèi)裝燈、
20、電褥、臺(tái)燈照射等。5.萬(wàn)一麻醉過(guò)量,根據(jù)不同情況采取措施,如施行人工呼吸、給予蘇醒劑或注射強(qiáng)心劑、咖啡因、腎上腺素、可拉明等,也可以靜脈注射5%溫?zé)岬钠咸烟侨芤?。第四十一張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月一、小鼠的給藥方法: (一) 灌胃給藥(經(jīng)口給藥) 原理: 將藥液直接注入小鼠的胃內(nèi)。 器材: 小鼠灌胃針1支、注射器1支、 小鼠飼養(yǎng)盒+面罩1套、生理鹽水、 燒杯。 第四節(jié) 給藥方法第四十二張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 方法步驟:1、將灌胃針連接在注射器上,吸入一定量的藥液。2、左手捉持小鼠,使小鼠頭部向上。3、右手將灌胃針頭尖端從小鼠口角處進(jìn)針?lè)胚M(jìn)小鼠口咽部,
21、順咽后壁輕輕往下推,灌胃針會(huì)順著食管滑入小鼠的胃內(nèi)。灌胃針插入約3cm.4、用右手食指將針?biāo)聣?,將注射器中的藥液灌入小鼠的胃中。第四十三張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月最大劑量:0.4ml10g體重。 注意:在灌胃過(guò)程中,避免誤插入氣管。第四十四張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(二)注射給藥1、皮下注射給藥: 原理:將藥液注入皮下結(jié)締組織,經(jīng)毛細(xì)血管、淋巴管吸收進(jìn)入血液循環(huán)。器材:1m1注射器1支、生理鹽水、燒 杯、酒精、碘酒、棉球。 第四十五張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 方法步驟: (1)注射部位:選小鼠項(xiàng)背部的皮下。(2)常規(guī)消毒注射部
22、位的皮膚,用注射針頭取一銳角角度刺入皮下, (3)將針頭輕輕向左右擺動(dòng),易擺動(dòng)則表示已刺入皮下,再輕輕抽吸,如無(wú)回血,可緩慢地將藥物注入皮下。 注射量:0.01ml0.03mlg體重。第四十六張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月2、肌肉注射給藥 原理:將藥液注入動(dòng)物的肌肉組織,經(jīng)毛細(xì)血管吸收進(jìn)入血液循環(huán)。 器材:1ml注射器1支、生理鹽水、燒杯、酒精、碘酒、棉球。 第四十七張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月方法步驟:(1)操作時(shí)1人先將小鼠捉持保定好。(2)另1人用左手抓住小鼠的1條后肢,右手拿注射器,常規(guī)消毒注射部位的皮膚。(3)將注射器針頭在動(dòng)物后肢大腿外側(cè)肌肉豐富處
23、呈60度角迅速刺入后注入藥液。注射量:0.01m1g體重。第四十八張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月3、靜脈注射給藥 原理:將藥液注入小鼠的尾靜脈。 器材:1m1注射器1支、生理鹽水、燒杯、金屬籠或小鼠固定器 、酒精、碘酒、棉球。 第四十九張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 方法步驟: (1)將小鼠放在金屬籠或小鼠固定器中,通過(guò)金屬籠或小鼠固定器的孔拉出小鼠尾巴。(2) 用左手捏住小鼠尾巴中部,用75酒精棉球反復(fù)擦拭尾部。 (3) 注射時(shí),以左手拇指和中指捏住鼠尾兩側(cè),用食指從下面托起尾巴,以無(wú)名指夾住尾巴的末梢。(4) 右手持4號(hào)針頭的注射器,使針頭與靜脈平行(小于3
24、0度角)。 第五十張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(5) 從小鼠尾巴下14處進(jìn)針,仔細(xì)觀(guān)察, 如果無(wú)阻力,無(wú)白色皮丘出現(xiàn),說(shuō)明 已刺入血管,即可注入藥物。 (6) 拔出針頭后,用干棉球壓住注射部位 約l、2min,防止出血。 注射量: 0.05m10.025 m1g體重。 第五十一張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 4、腹腔注射給藥 原理:將藥液注入小鼠的腹腔。 器材:注射器1支、生理鹽水、燒杯、 酒精、碘酒、棉球。 第五十二張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 方法步驟: (1)用左手將小鼠捉持保定,使鼠腹部 朝上,鼠頭略低于尾部。 (2)右手持注射器將針
25、頭在下腹部靠近 腹白線(xiàn)的兩側(cè)進(jìn)行穿刺。 第五十三張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(3) 針頭刺入皮下后進(jìn)針3mm左右,接著使注射針頭與皮膚呈45度角刺入腹肌,穿過(guò)腹肌進(jìn)入腹膜腔,當(dāng)針尖穿過(guò)腹肌進(jìn)入腹膜腔后抵抗感消失。(4)固定針頭,保持針尖不動(dòng),回抽針?biāo)ǎ鐭o(wú)回血、腸液和尿液后即可注射藥液。 注射量: 0.5m11m1只。 第五十四張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月二、大鼠的給藥方法: (一)灌胃給藥 原理:將藥液直接注入大鼠的胃內(nèi)。 器材:大鼠灌胃針1支、注射器1支、大鼠 飼養(yǎng)盒+面罩l套、生理鹽水、燒杯。 第五十五張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月方法
26、步驟: 1、將灌胃針連接在注射器上,吸入一定量的藥液。 2、左手捉持保定大鼠,右手將灌胃針頭尖端放進(jìn)大鼠口咽部,順咽后壁輕輕往下推,灌胃針會(huì)順著食管滑入大鼠的胃內(nèi)。灌胃針插入約5cm. 第五十六張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 3、用右手食指將針?biāo)聣?,將注射器中的生理鹽水灌入大鼠的胃中。劑量:2ml100g體重。注意:在灌胃過(guò)程中,避免誤插入氣管。 第五十七張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(二) 注射給藥 1、皮下注射給藥 原理:將藥液注入皮下結(jié)締組織,經(jīng)毛細(xì) 血管、淋巴管吸收進(jìn)入血液循環(huán)。 器材:5ml注射器1支、生理鹽水、燒杯、 酒精、碘酒、棉球。 第五
27、十八張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 方法步驟: (1) 注射部位:選大鼠的項(xiàng)背部的皮下。 (2) 常規(guī)消毒注射部位的皮膚,用注射針頭取一銳角角度刺入皮下。(3) 將針頭輕輕向左右擺動(dòng),易擺動(dòng)則表示已刺入皮下,再輕輕抽吸,如無(wú)回血,可緩慢地將藥物注入皮下。注射量:0.01mlg體重。 第五十九張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月2、肌肉注射給藥 原理:將藥液注入動(dòng)物的肌肉組織,經(jīng) 毛細(xì)血管吸收進(jìn)入血液循環(huán)。 器材:1m1注射器1支、生理鹽水、燒杯、 酒精、碘酒、棉球。 第六十張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 方法步驟: (1) 操作時(shí)1人先將大鼠捉持保定好
28、。(2) 另1人用左手抓住大鼠的1條后肢,右手拿注射器,常規(guī)消毒注射部位的皮膚。 (3) 將注射器針頭在動(dòng)物后肢大腿內(nèi)側(cè)肌肉豐富處呈90度角,迅速刺入后注入藥液。注射量:0.5m1-1m1。第六十一張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 3、靜脈注射給藥 原理:將藥液注入大鼠的尾靜脈。 器材: 1ml注射器1支、生理鹽水、燒杯、 金屬籠或大鼠固定器、酒精、碘酒、棉球。 第六十二張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 方法步驟: (1) 將大鼠放在金屬籠或大鼠固定器中,通過(guò)金屬籠或鼠夾的孔拉出大鼠尾巴。 (2) 用左手捏住大鼠尾巴中部,用75酒精棉球反復(fù)擦拭尾部。 (3) 注射時(shí)
29、,以左手拇指和中指捏住鼠尾兩側(cè),用食指從下面托起尾巴。 第六十三張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 (4) 右手持4號(hào)針頭的注射器,使針頭與靜脈平行(小于30度角)。(5) 從大鼠尾巴下14或13處進(jìn)針,仔 細(xì)觀(guān)察,如果無(wú)阻力,無(wú)白色皮丘出 現(xiàn),說(shuō)明已刺入血管,即可注入藥物。注射量:0.050.25 ml10g體重。 第六十四張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 4、腹腔注射給藥 原理:將藥液注入大鼠的腹腔。 器材:注射器1支、生理鹽水、燒杯。 第六十五張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 方法步驟: (1) 用左手將大鼠捉持保定,使鼠腹部朝上,鼠頭略低于尾部。
30、 (2)右手持注射器將針頭在下腹部靠近腹白線(xiàn)的兩側(cè)進(jìn)行穿刺。 第六十六張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(3)針頭刺入皮下后進(jìn)針3mm左右,接著使注射針頭與皮膚呈45度角刺入腹肌,穿過(guò)腹肌進(jìn)入腹膜腔,當(dāng)針尖穿過(guò)腹肌進(jìn)入腹膜腔后抵抗感消失。(4)固定針頭,保持針尖不動(dòng),回抽針?biāo)?,如無(wú)回血、腸液和尿液后即可注射藥液。注射量:0.010.02m1g體重。 第六十七張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第六十八張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第六十九張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第七十張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第七十一張,PPT共一
31、百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第七十二張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第七十三張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第七十四張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第七十五張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第七十六張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第七十七張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第七十八張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月三、豚鼠的給藥方法: (一)灌胃給藥 原理:將藥液直接注入豚鼠的胃內(nèi)。 器材:灌胃針1支、注射器1支、 生理鹽水、燒杯。 第七十九張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 方法步驟:
32、1、將灌胃針連接在注射器上,吸入一定 量的生理鹽水。 2、左手捉持保定豚鼠,右手將灌胃針頭 尖端放進(jìn)豚鼠口咽部,順咽后壁輕輕 往下推,灌胃針會(huì)順著食管滑入大鼠 的胃內(nèi)。灌胃針插入約5cm。 第八十張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月3、用右手食指將針?biāo)聣?,將注射器中的生理鹽水注入豚鼠的胃中。 劑量:15ml。 注意:在灌胃過(guò)程中,避免誤插入氣管。 第八十一張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 (二) 注射給藥 1、皮下注射給藥原理: 將藥液注入皮下結(jié)締組織,經(jīng)毛細(xì)血管、淋巴管吸收進(jìn)入血液循環(huán)。 器材: 1m1注射器1支、生理鹽水、燒杯、酒精、碘酒、棉球。 第八十二張
33、,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 方法步驟: (1) 注射部位:選豚鼠的項(xiàng)背部的皮下。 (2) 常規(guī)消毒注射部位的皮膚,注射針頭 取一銳角角度刺入皮下。 (3) 將針頭輕輕向左右擺動(dòng),易擺動(dòng)則 表示已刺入皮下,再輕輕抽吸,如 無(wú)回血,可緩慢地將藥物注入皮下。注射量:0.01mlg 。第八十三張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 2、肌肉注射給藥 原理:將藥液注入動(dòng)物的肌肉組織,經(jīng) 毛細(xì)血管吸收進(jìn)入血液循環(huán)。 器材:1m1注射器1支、生理鹽水、燒杯、 酒精、碘酒、棉球。 第八十四張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 方法步驟: (1) 操作時(shí)1人先將豚鼠捉持保定好
34、。 (2) 另1人用左手抓住豚鼠的1條后肢, 右手拿注射器,常規(guī)消毒注射部位。(3) 將注射器針頭在動(dòng)物后肢大腿外側(cè) 肌肉豐富處呈60度角,迅速刺入后 注入藥液。注射量:0.01mlg 。第八十五張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 四、兔的給藥方法 (一)灌胃給藥 原理:將藥液直接注入兔的胃內(nèi)。 器材:兔開(kāi)口器、14號(hào)胃管、注射器1支、 生理鹽水、燒杯、石蠟油。 第八十六張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 步驟: 1、將兔放進(jìn)保定架內(nèi),助手用手輕輕壓住兔的背部,避免兔的掙扎。 2、灌胃者用在手拇指和中指擠壓兔兩頰,將下頜擠開(kāi)使兔被動(dòng)張口。 3、右手將開(kāi)口器從一側(cè)口角插入
35、口腔并固定。 4、用泡在石蠟油中的胃管,經(jīng)開(kāi)口器的孔插入,向前推進(jìn)約15cm,可達(dá)胃內(nèi)。 5、在插管時(shí)應(yīng)將胃管另一端泡在水中確認(rèn)沒(méi)有冒氣泡,即可用注射器經(jīng)胃管注入藥液。 第八十七張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月灌胃量: 80-100ml只次。注 意:在灌胃過(guò)程中,避免誤插入氣管。 第八十八張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月三、兔耳緣靜脈或兔耳中央動(dòng)脈穿刺 (用于兔的給藥、抽血): 原理:穿刺兔的耳緣靜脈或耳中央動(dòng)脈。 器材:兔保定架、注射器1支、生理鹽水、 燒杯、酒精、碘酒、棉球。第八十九張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 方法步驟: (1) 將兔放在保定
36、架內(nèi)保定。 (2) 酒精消毒并揉搓血管,使兔的耳緣靜脈或耳中央動(dòng)脈充盈。 第九十張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月(3) 用左手食指和中指夾住兔的耳緣靜脈或耳中央動(dòng)脈近心端,拇指和小指夾住耳郭邊緣部分,無(wú)名指和小指放在耳郭下作墊。(4) 右手拿注射器,針尖的斜面朝上,將針頭插入血管,放松對(duì)靜脈近心端的壓迫,緩慢把地藥液注射進(jìn)血管,或?qū)⒀撼槌鰜?lái)。注射或采血量:5一10ml。 第九十一張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 五、吸入給藥 1、氣管內(nèi)滴注法 2、經(jīng)口腔和經(jīng)氣管給藥法 3、吸入室法 大小鼠氣管插管技術(shù) 六、經(jīng)腸給藥1、兔直腸給藥 2、麻醉后小腸或十二指腸灌注給藥
37、第九十二張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 一、小鼠的采血摘除眼球采血法: 原理:將小鼠的眼球摘除后取血液的方法。 器材:眼科彎鑷、試管。 第五節(jié) 樣品采集方法第九十三張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月方法步驟 (1)左手抓住小鼠頸部皮膚,輕壓在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,取側(cè)臥位; (2)左手食指盡量將小鼠眼周皮膚往頸后壓,使眼球突出。(3)用眼科彎鑷夾去眼球,將鼠倒立,用試管接住流出的血液。(4)采血完畢立即用紗布?jí)浩戎寡?采血量:每次0.6-1.0ml/次。 小鼠眼內(nèi)眥取血?jiǎng)赢?huà)小鼠眼眶后靜脈叢取血 第九十四張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 二、大鼠的采血 眼眶后靜脈
38、叢(竇)取血: 器材: 毛細(xì)管(玻璃或塑料均可)、 1肝素溶液、干燥皿、 乙醚、試管、干棉球。 第九十五張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月 方法步驟: 1、先將毛細(xì)管浸泡在1肝素溶液中數(shù)分鐘,然后取出干燥備用。 2、將大鼠進(jìn)行麻醉,使大鼠保持側(cè)臥位。 3、左手拇指、食指抓住兩鼠耳之間的頸部頭皮,并輕輕向下壓迫頸部?jī)蓚?cè),致大鼠靜脈血回流障礙,眼球外突,眶后靜脈叢充血。4、右手持毛細(xì)管由大鼠的內(nèi)毗部插入結(jié)膜,使毛細(xì)管與眶壁平行地向喉頭方向推進(jìn),深度約35mm 。5、輕輕旋動(dòng)毛細(xì)管,使其穿破靜脈叢, 讓血流順毛細(xì)管流出。采血量:0.40.6ml次。第九十六張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第九十七張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第九十八張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第九十九張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第一百?gòu)?,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月第一百零一張,PPT共一百一十二頁(yè),創(chuàng)作于2022年6月三、豚鼠采血方法1、耳緣切口采血2、背中足靜脈采血 3、心臟采血四、兔的采血方法1、耳緣靜脈采血2、耳中央動(dòng)脈采血3、頸靜脈采血 4、心臟采血 第一百零二
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