生物安全實驗室操作技術(shù)規(guī)范課件

1、生物安全實驗室操作規(guī)范2009年，北京理工大學(xué)爆炸事故原因：厭氧培養(yǎng)箱壓力不穩(wěn)定2015年，清華大學(xué)實驗室爆炸事故原因：氫氣瓶爆炸起火2010年，東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)實驗室因未按規(guī)定對山羊標(biāo)本進(jìn)行檢疫，導(dǎo)致28人感染嚴(yán)重布魯氏桿菌傳染。生物危險輻射危險個體防護危險廢物的處理常用儀器使用的注意事項化學(xué)危險臨床樣本均具有不同程度的潛在傳染性血液傳播性病原體（如HBV和HIV）的操作應(yīng)在BSL-2下進(jìn)行應(yīng)由受過培訓(xùn)的人員采集患者的血樣操作時應(yīng)戴手套及眼睛和粘膜的保護裝置血液和血清應(yīng)當(dāng)小心吸取，不能傾倒適當(dāng)?shù)南緞﹣砬逑磭姙R和溢出的標(biāo)本感染性廢物應(yīng)經(jīng)過滅菌和焚燒處理實驗室常見化學(xué)危險品及標(biāo)識化學(xué)危險乙

2、醚、乙醇、乙醛、苯、甲醇強酸（濃鹽酸、濃硫酸）、強堿（氫氧化鈉）或其他腐蝕品（氯化銅、甲醛溶液）受熱、受壓或撞擊時產(chǎn)生爆炸或燃燒，如疊氮鈉、TNT高溫、摩擦、撞擊等易燃燒，甚至爆炸，如硝酸鹽等釙、鐳、鈷等，高毒甚至劇毒揮發(fā)性強，可以通過口鼻等進(jìn)入身體危害健康Trizol含有苯酚，有毒性和刺激性，應(yīng)避免皮膚接觸。眼睛接觸可能導(dǎo)致失明，皮膚大量接觸可能致死。如不慎接觸皮膚，應(yīng)立即用大量去垢劑和水沖洗。溴化乙錠(EB)強誘變劑，嵌入堿基分子中導(dǎo)致錯配，高致癌性。應(yīng)避免皮膚接觸或者吸入，操作時穿戴合適的防護服、手套和護目鏡。焦磷酸二乙酯（DEPC）是一種潛在的蛋白質(zhì)變質(zhì)劑，且為可疑的致癌劑。開啟時瓶口

3、不要指向操作者或其他人。瓶內(nèi)壓可導(dǎo)致噴濺。戴好手套并穿實驗室工作服，在通風(fēng)櫥內(nèi)操作。三羥甲基氨基甲烷(Tris)吸入，攝入，皮膚吸收可造成傷害。戴好手套、口罩和護目鏡氯仿（三氯甲烷）刺激眼睛、呼吸道、皮膚和黏膜，為一種致癌劑。有肝、腎毒性。有揮發(fā)性。避免吸入蒸汽。戴好手套和護目鏡。在通風(fēng)櫥內(nèi)操作。生物實驗室常見危險品-巰基乙醇吸入或皮膚吸收可致命，攝入有害。高濃度溶液對黏膜、上呼吸道、皮膚和眼睛有極大損害。-巰基乙醇有難聞氣味，應(yīng)戴好手套和護目鏡，在通風(fēng)櫥內(nèi)操作。丙烯酰胺為一種潛在的神經(jīng)毒素，可通過皮膚吸收（有累積效應(yīng)）。應(yīng)戴好手套和面罩，在化學(xué)通風(fēng)櫥內(nèi)操作。蛋白酶K有刺激性。吸入，攝入，皮膚

4、吸收可造成傷害。戴好手套口罩和護目鏡。四甲基乙烯二胺（TEMED）易燃易揮發(fā)，具有腐蝕性和強神經(jīng)毒性。避免皮膚接觸和吸入。過硫酸銨對黏膜組織、上呼吸道、眼睛和皮膚有極大的破壞性。吸入可致命。戴好手套和護目鏡，穿好防護服。必須在化學(xué)通風(fēng)櫥內(nèi)操作。操作后要徹底清洗?；瘜W(xué)品的存儲在適宜的溫度和濕度下儲存化學(xué)品，須遠(yuǎn)離高熱源，如烤箱；避免陽光直射，如靠近窗臺定期目測原料和包裝容器：顏色、是否溢出、腐蝕等不得將化學(xué)品存放在實驗臺上，防止被碰倒不得將化學(xué)品存放在地面上，即使是臨時放置也不允許不能將通風(fēng)櫥用作化學(xué)品的存放地，以免破壞通風(fēng)櫥的通風(fēng)效果不得將易漏有害性或腐蝕性化學(xué)品存放在視力水平以上的藥品架上個

5、體防護實驗室人員進(jìn)出進(jìn)入退出公共清潔區(qū)更衣室緩沖間污染區(qū)污染區(qū)緩沖間更衣室公共清潔區(qū)淋浴間常用儀器使用的注意事項離心機在裝載離心管后應(yīng)正確平衡離心管應(yīng)始終牢固蓋緊放置好離心管后蓋上蓋子才可開始離心離心機放置高度應(yīng)使實驗人員能看到離心機內(nèi)部有危險性的微生物，必須使用可封口的離心桶高壓滅菌鍋滅菌條件組合 134oC 3min，126oC 10min，121oC 15min， 115oC 25min注意事項物品應(yīng)放在空氣能排出并具有良好滲透性的容器中，包裝稍松散，待滅菌的物品放置不宜過緊。滅菌完畢后，不可放氣減壓，否則瓶內(nèi)液體會劇烈沸騰，沖掉瓶塞而外溢甚至導(dǎo)致容器爆裂。待溫度下降到80以下后才可打開

6、門取出物品。烘箱烘箱嚴(yán)禁烘焙易燃、易爆物品。使用烘箱時注意底層散熱板上不能放置物品。烘箱內(nèi)物品不要塞得過滿，以免影響熱氣流流通。當(dāng)烘箱進(jìn)行高溫烘焙時（如200 以上），嚴(yán)禁直接打開箱門。冷空氣突然進(jìn)入可能使玻璃門及烘箱內(nèi)玻璃制品因驟冷而破裂。烘箱周圍2米范圍內(nèi)不得放置或堆積任何易燃、易爆、易揮發(fā)性物品，如：汽油、紙類、二甲苯、稀釋劑等。烘箱溫度不能超過最高閾值。當(dāng)利用烘箱滅菌需要較高溫度（160以上）時，不能放置紙、棉塞等低燃點易燃物。嚴(yán)禁過夜使用烘箱，因為當(dāng)烘箱溫控系統(tǒng)出現(xiàn)故障時會導(dǎo)致溫度不斷升高，容易引發(fā)安全事故。應(yīng)在每個工作臺上放置盛放廢棄物的容器、盤子或廣口瓶，最好是不易破碎的容器(如

7、塑料制品)。當(dāng)使用消毒劑時，應(yīng)使廢棄物充分接觸消毒劑(即不能有氣泡阻隔)，并根據(jù)所使用消毒劑的不同保持適當(dāng)接觸時間。盛放廢棄物的容器在重新使用前應(yīng)高壓滅菌并清洗。廢棄物的處理尿、胸水、腹水、腦脊液、涎液、胃液、腸液、關(guān)節(jié)腔液等在含有效氯消毒液中作用半小時以上，隨后交由有資質(zhì)的醫(yī)療廢棄物處理機構(gòu)進(jìn)行處理。痰、膿、血、糞(包括動物糞便)及其他液體標(biāo)本在含有效氯消毒液中作用2小時以上后交由有資質(zhì)的醫(yī)療廢棄物處理機構(gòu)進(jìn)行處理。對廢酸、廢堿等廢液采用中和法、稀釋法等稀釋至pH值為中性時方可排入下水道。液體廢棄標(biāo)本帶有血凝塊等的廢棄樣品管，在加蓋后應(yīng)當(dāng)放在適當(dāng)?shù)姆缆┤萜鲀?nèi)高壓滅菌和(或)焚燒。固體廢棄物標(biāo)本剩余標(biāo)本，如組織器官、動物尸體、檢驗后的廢棄標(biāo)本及其容器，如塑料袋、紙袋，應(yīng)及時交由醫(yī)療廢棄物處理機構(gòu)處理。檢驗剩余的標(biāo)本及使用過的帶菌平板、試管均須集中地點安全放置，經(jīng)消毒