國家自然基金標(biāo)書-終稿

1、報(bào)告正文立項(xiàng)依據(jù)與研究內(nèi)容（4000-8000字）： 項(xiàng)目的立項(xiàng)依據(jù)隨著機(jī)械通氣、表面活性物質(zhì)替代療法等新技術(shù)應(yīng)用，危重新生兒、尤其是早產(chǎn)兒存活率已顯著提高。然而，長時(shí)間吸入高濃度氧，幸存者易發(fā)生肺部氧化應(yīng)激損傷。目前，高氧肺損傷已成為發(fā)達(dá)國家NICU最為棘手的問題之一和嬰兒慢性肺疾病的最常見形式。但高氧肺損傷的確切機(jī)制尚未完全闡明，更無有效的防治手段。因此深入研究其發(fā)病機(jī)制，積極防治高氧肺損傷，具有優(yōu)生優(yōu)育、提高人口素質(zhì)的戰(zhàn)略意義。高氧肺損損傷是一一個(gè)涉及及許多細(xì)細(xì)胞活動(dòng)動(dòng)的復(fù)雜雜過程，可分為為早期的的組織損損傷（彌彌散性肺肺泡炎）和晚期期的損傷傷后修復(fù)復(fù)（肺間間質(zhì)重構(gòu)構(gòu)）兩個(gè)個(gè)過程。細(xì)胞外

2、外基質(zhì)（exttraccelllulaar mmatrrix,ECMM）的重重建參與與了高氧氧肺損傷傷的整個(gè)個(gè)病理過過程，若若ECMM重建正正常，則則損傷完完全修復(fù)復(fù)，肺結(jié)結(jié)構(gòu)正常常；若EECM重重建紊亂亂，將導(dǎo)導(dǎo)致肺纖纖維化。因此，ECMM重建是是關(guān)系高高氧肺損損傷結(jié)局局的關(guān)鍵鍵因素。本實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室在國國內(nèi)外率率先開展展了對(duì)早早產(chǎn)大鼠鼠高氧肺肺損傷中中基質(zhì)金金屬蛋白白酶（mmatrrix mettallloprroteeinaasess，MMMPs）和其抑抑制劑(tisssuee innhibbitoor oof mmetaallooprooteiinasses,TIMMPs)表達(dá)的的研究，已發(fā)

3、現(xiàn)現(xiàn)肺損傷傷時(shí)MMMPs過過度表達(dá)達(dá)、MMMPs/TIMMPs失失衡是EECM重重建紊亂亂發(fā)生纖纖維化的的關(guān)鍵原原因 1（具體研研究成果果見研究究基礎(chǔ)欄欄）。有有關(guān)MMMPs在在高氧肺肺損傷中中的作用用已為少少數(shù)國外外學(xué)者所所重視，但高氧氧肺損傷傷后ECCM重建建過程中中，引起起MMPPs過度度增加的的具體機(jī)機(jī)制是什什么？本本實(shí)驗(yàn)室室擬從MMMPss的誘導(dǎo)導(dǎo)劑和抑抑制劑兩兩方面深深入研究究。細(xì)胞外基基質(zhì)金屬屬蛋白酶酶誘導(dǎo)劑劑（exxtraacelllullar mattrixx meetalllopprotteinnasee innduccer,Emmmpriin）在在上調(diào)MMMPss表達(dá)中中

4、起關(guān)鍵鍵作用。Emmmpriin是分分子量為為58KKD的質(zhì)質(zhì)膜糖蛋蛋白，具具有酪氨氨酸蛋白白激酶活活性，不不僅表達(dá)達(dá)于正常常組織，還表達(dá)達(dá)于腫瘤瘤組織如如肺部腫腫瘤細(xì)胞胞，提示示Emmmpriin參與與體內(nèi)生生理及病病理過程程2。目前前，少數(shù)數(shù)文獻(xiàn)已已證明，體外EEmmpprinn與人成成纖維細(xì)細(xì)胞共培培養(yǎng)后，成纖維維細(xì)胞MMMPss表達(dá)增增加。進(jìn)進(jìn)一步研研究表明明，Emmmprrin在在細(xì)胞表表面與自自身受體體或MMMP結(jié)合合，激活活胞內(nèi)MMAPKK p338信號(hào)號(hào)通路，該途徑徑激活促促進(jìn)ECCM降解解3，4。但關(guān)于于Emmmpriin/MMAPKK p338對(duì)MMMPss調(diào)節(jié)的的研究僅僅

5、限于腫腫瘤細(xì)胞胞，有關(guān)關(guān)高氧肺肺損傷后后肺ECCM重建建過程中中，Emmmprrin如如何調(diào)控控MMPPs/TTIMPPs平衡衡，目前前國內(nèi)外外尚無文文獻(xiàn)報(bào)道道。轉(zhuǎn)化生長長因子（Traansfformmingg grrowtth ffacttor betta, TGFF-）在下下調(diào)MMMPs表表達(dá)中起起關(guān)鍵作作用。研研究證明明TGFF-刺激可可使肺成成纖維細(xì)細(xì)胞MMMPs生生成減少少5。另有有研究發(fā)發(fā)現(xiàn)，TTGF-抑制元元件位于于MMPP-1基基因啟動(dòng)動(dòng)子區(qū)，嚴(yán)密調(diào)調(diào)控MMMP-11在不同同生理和和病理情情況下的的表達(dá)6。進(jìn)一步步的研究究表明，TGFF-對(duì)MMMP-11的作用用通過SSMADD

6、信號(hào)途途徑介導(dǎo)導(dǎo)，該途途徑激活活可阻止止ECMM降解5。因此，推測(cè)TTGF-/SMMAD對(duì)對(duì)MMPPs/TTIMPPs平衡衡的調(diào)節(jié)節(jié)可能是是影響肺肺損傷后后ECMM重建的的關(guān)鍵因因素之一一。有關(guān)關(guān)高氧肺肺損傷后后肺ECCM重建建過程中中，TGGF-如何調(diào)調(diào)控MMMPs/TIMMPs平平衡，目目前國內(nèi)內(nèi)外尚無無文獻(xiàn)報(bào)報(bào)道。近年來對(duì)對(duì)信號(hào)轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)統(tǒng)的研究究發(fā)現(xiàn)，位于大大多數(shù)細(xì)細(xì)胞質(zhì)膜膜上約550-1100nnm大小小的囊性性凹陷結(jié)結(jié)構(gòu)小窩（cavveollae），是許許多信號(hào)號(hào)分子完完成跨膜膜信號(hào)轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)導(dǎo)的“驛站”。小窩窩蛋白（cavveollin）是小窩窩胞漿面面包被的的一種221-224kDD

7、的膜蛋蛋白，是是許多信信號(hào)分子子活性狀狀態(tài)的重重要調(diào)節(jié)節(jié)者。在在無胞外外信號(hào)刺刺激下，cavveollin通通常與富富集于小小窩質(zhì)膜膜上的各各種信號(hào)號(hào)分子、受體及及非受體體型酪氨氨酸激酶酶等相結(jié)結(jié)合，抑抑制這些些信號(hào)物物質(zhì)的活活性；在在激動(dòng)劑劑與受體體結(jié)合后后，caaveoolinn分子構(gòu)構(gòu)象發(fā)生生變構(gòu)或或共價(jià)修修飾，調(diào)調(diào)節(jié)信號(hào)號(hào)物質(zhì)的的活化狀狀態(tài)，參參與信號(hào)號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)調(diào)控77。有有關(guān)caaveoolinn在肺EECM重重建中的的作用，有學(xué)者者提出肺肺泡型上皮皮細(xì)胞ccaveeoliin表達(dá)達(dá)缺失可可能是發(fā)發(fā)生肺纖纖維化的的亞細(xì)胞胞指標(biāo)。對(duì)caaveoolinn-1基基因敲除除小鼠的的研究，肺組

8、織織顯示肺肺泡隔因因細(xì)胞增增殖而增增厚和肺肺纖維化化。caaveoolinn-1在肺發(fā)發(fā)育的不不同階段段，可表表達(dá)于不不同血管管和上皮皮細(xì)胞，呈時(shí)相相分布8。研究發(fā)發(fā)現(xiàn)，ccaveeoliin1與TTGF-型受受體（TTR）相互互作用，抑制TTGF-介導(dǎo)的的SMAAD-22和下游游分子的的磷酸化化，從而而調(diào)節(jié)信信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)導(dǎo)9。Emmmprrin具具有酪氨氨酸蛋白白激酶活活性，且且其信號(hào)號(hào)傳導(dǎo)為為酪氨酸酸磷酸化化依賴的的MAPPK pp38途途徑，申申請(qǐng)者推推測(cè)caaveoolinn能與EEmmpprinn相互作作用，調(diào)調(diào)控Emmmprrin介介導(dǎo)的MMAPKK p338和下下游分子子的磷酸酸化。

9、簡簡圖如下下：胞外信 caaveoolinn +? caaveoolinn/Emmmprrin作作用 Emmmpriin/MMAPKK p338號(hào)刺激 變構(gòu)構(gòu)活化+ caaveoolinn/TR作用TTGF-/SMMAD信號(hào)整合合 調(diào)調(diào)控肺EECM重重建基于上述述，申請(qǐng)請(qǐng)者提出出如下假假設(shè)：高氧暴暴露下MMMP誘誘導(dǎo)劑/抑制劑劑失衡是是高氧肺肺損傷MMMPss增加，ECMM重建紊紊亂的主主要原因因。高氧暴暴露使質(zhì)質(zhì)膜小窩窩表達(dá)或或功能異異常，從從而影響響Emmmpriin/MMAPKK p338和TTGF-/SMMAD兩兩條信號(hào)號(hào)通路整整合，繼繼而導(dǎo)致致MMPPs增加加，ECCM重建建紊亂。本

10、人所在在的研究究室屬呼呼吸系統(tǒng)統(tǒng)疾病重重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室。多多年來，本人一一直致力力于新生生兒高氧氧慢性肺肺損傷的的研究，已成功功建立了了早產(chǎn)大大鼠高氧氧肺損傷傷的動(dòng)物物模型、掌握了了支氣管管肺泡灌灌洗術(shù)、體外型肺泡泡上皮細(xì)細(xì)胞和成成纖維細(xì)細(xì)胞培養(yǎng)養(yǎng)、核酸酸、蛋白白分析等等技術(shù)，并對(duì)抗抗氧化酶酶、細(xì)胞胞因子水水平、一一氧化氮氮、MMMPs/TIMMPs失失衡等因因素在高高氧肺損損傷發(fā)病病機(jī)制中中所起的的作用進(jìn)進(jìn)行了較較深入的的研究，同時(shí)應(yīng)應(yīng)用地塞塞米松、維甲酸酸、人類類重組促促紅細(xì)胞胞生成素素、EGGb7661進(jìn)行行了抗氧氧化損傷傷的干預(yù)預(yù)研究（見研究究基礎(chǔ)欄欄）。這這些理論論研究和和技術(shù)方方法的積

11、積累為本本課題的的開展奠奠定了堅(jiān)堅(jiān)實(shí)的基基礎(chǔ)。本研究究如能完完成，可可望為探探索高氧氧肺損傷傷后肺EECM重重建紊亂亂的機(jī)制制開拓新新思路，并為尋尋找有效效的預(yù)防防和干預(yù)預(yù)高氧肺肺損傷提提供依據(jù)據(jù)。 參考文獻(xiàn)獻(xiàn)Tayllor PM, Wooodffielld RRJ, Hoddgkiin MMN eet aal.BBreaast canncerr ceell-derriveed EEMMPPRINN sttimuulattes fibbrobblasst MMMP22 reeleaase thrrouggh aa phhospphollipaase A(22) aand 5-llipooxyg

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18、 p338和TTGF-/SMMAD兩兩條信號(hào)號(hào)通路整整合的影影響，為為高氧肺肺損傷發(fā)發(fā)生機(jī)制制和尋找找有效防防治措施施提供理理論依據(jù)據(jù)。研究內(nèi)容容：Emmpprinn/MAAPK p388信號(hào)通通路活化化狀態(tài)及及高氧肺肺損傷所所致ECCM重建建紊亂的的相關(guān)性性： 研究究高氧肺肺損傷不不同時(shí)間間點(diǎn)肺組組織中EEmmpprinn、P338、磷磷酸化PP38的的表達(dá)。 研究究高氧肺肺損傷EEmmpprinn/MAAPK p388信號(hào)通通路活化化狀態(tài)與與MMPPs表達(dá)達(dá)雙變量量關(guān)系。TGF-/SMMAD信信號(hào)通路路活化狀狀態(tài)及高高氧肺損損傷所致致ECMM重建紊紊亂的相相關(guān)性： 研究究高氧肺肺損傷不不同

19、時(shí)間間點(diǎn)肺組組織中TTGF-、TR、SMMAD、磷酸化化SMAAD的表表達(dá)。 研究究高氧肺肺損傷TTR的激酶酶活性，計(jì)算磷磷酸化SSMADD與非磷磷酸化SSMADD比值。 研究究高氧肺肺損傷TTGF-/SMMAD信信號(hào)通路路的活化化狀態(tài)與與MMPPs/TTIMPPs的雙雙變量關(guān)關(guān)系。caveeoliin-11對(duì)Emmmprrin/MAPPK pp38和和TGFF-/SMMAD兩兩條信號(hào)號(hào)通路及及其與高高氧肺損損傷所致致ECMM重建紊紊亂的相相關(guān)性：研究高氧氧肺損傷傷不同時(shí)時(shí)間點(diǎn)肺肺組織中中cavveollin-1表達(dá)達(dá)及酪氨氨酸磷酸酸化水平平。研究高氧氧肺損傷傷肺組織織質(zhì)膜小小窩內(nèi)ccavee

20、oliin-11與Emmmprrin的的共定位位。研究高氧氧肺損傷傷肺組織織質(zhì)膜小小窩內(nèi)ccaveeoliin-11與TR的共定定位。擬解決的的關(guān)鍵問問題：成年動(dòng)物物急性高高氧肺損損傷模型型，因其其肺發(fā)育育已成熟熟，不能能如實(shí)反反映不成成熟肺的的損傷情情況，并并且與臨臨床上早早產(chǎn)兒需需長期用用氧情況況差異較較大。本本項(xiàng)目采采用早產(chǎn)產(chǎn)大鼠慢慢性高氧氧肺損傷傷模型，能更如如實(shí)模擬擬支氣管管肺發(fā)育育不良的的發(fā)生情情況。雖雖然此模模型技術(shù)術(shù)難度較較大，但但本研究究組在早早產(chǎn)大鼠鼠模型制制備方面面已積累累了豐富富經(jīng)驗(yàn)，能成功功完成此此模型的的復(fù)制。本研究假假設(shè)caaveoolinn與Emmmprrin的

21、的相互作作用可調(diào)調(diào)控Emmmprrin/MAPPK pp38信信號(hào)通路路活化；cavveollin-1與TTR的相互互作用可可調(diào)控TTGF-/SMMAD信信號(hào)通路路活化。以往由由于技術(shù)術(shù)條件限限制，未未能從形形態(tài)學(xué)上上直接證證實(shí)。借借助共聚聚焦顯微微鏡觀察察和熒光光雙重標(biāo)標(biāo)記技術(shù)術(shù)可解決決這一技技術(shù)難題題。擬采取的的研究方方案及可可行性分分析。研究方法法： 本課題題采用共共聚焦顯顯微鏡（connfoccal miccrosscoppe）、免疫熒熒光雙重重標(biāo)記和和免疫組組織化學(xué)學(xué)等研究究方法，輔以蛋蛋白質(zhì)與與核酸分分析技術(shù)術(shù)（Weesteern Bloot、NNorttherrn BBlott方

22、法），檢測(cè)測(cè)各指標(biāo)標(biāo)的動(dòng)態(tài)態(tài)變化，并對(duì)各各指標(biāo)進(jìn)進(jìn)行定位位、定性性、定量量分析。1.建立立早產(chǎn)大大鼠慢性性高氧肺肺損傷模模型：參照申請(qǐng)請(qǐng)者著作作，實(shí)用用兒科臨臨床雜志志，.檢測(cè)測(cè)cavveollin-1酪氨氨酸磷酸酸化水平平：應(yīng)用抗ccaveeoliin-11pAbb 進(jìn)行行免疫沉沉淀應(yīng)用抗磷磷酸化酪酪氨酸mmAb 進(jìn)行WWestternn Bllot分分析.檢檢測(cè)肺組組織中EEmmpprinn、P338、磷磷酸化PP38 、TGGF-、TGGF-型受受體（TTR）及SSMADD-2、磷酸化化SMAAD表達(dá)達(dá)，探討討高氧肺肺損傷所所致ECCM重建建紊亂的的分子機(jī)機(jī)制： 蛋白白質(zhì)水平平檢測(cè)Wes

23、sterrn BBlott。mRNNA水平平檢測(cè)Norrtheern Bloot（或或RT-PCRR）。. 檢測(cè)測(cè)肺組織織中TR的激酶酶活性： TRR分離提提取免疫沉沉淀法（immmunoopreecippitiion）TRR與純化化的激酶酶底物GGST-SMAAD2（由美國國國立癌癌癥研究究機(jī)構(gòu)dde CCaessteccherr, MM教授提提供）反反應(yīng)，應(yīng)應(yīng)用免疫疫印跡法法檢測(cè)磷磷酸化SSMADD2水平平，計(jì)算算TR的激酶酶活性。. 檢檢測(cè)肺組組織質(zhì)膜膜小窩內(nèi)內(nèi)cavveollin /Emmmprrin及及cavveollin-1/TTR的共定定位及表表達(dá)：樣本制制備： 制備備組織切切片

24、加入抗抗cavveollin mAbbPE標(biāo)標(biāo)記的二二抗加入抗抗Emmmpriin/TTR的pAAbFITTC標(biāo)記記二抗共聚焦焦顯微鏡鏡（TCCSSPP型，德德國Leeicaa公司）檢測(cè)共共定位；應(yīng)用圖圖象分析析軟件對(duì)對(duì)cavveollin表表達(dá)強(qiáng)度度進(jìn)行半半定量。應(yīng)用用統(tǒng)計(jì)學(xué)學(xué)方法處處理數(shù)據(jù)據(jù)：應(yīng)用SAAS統(tǒng)計(jì)計(jì)分析軟軟件，對(duì)對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)計(jì)學(xué)分析析。技術(shù)路線線：早早產(chǎn)大鼠鼠高氧肺肺損傷模模型cavveollaecavveollin酪酪氨酸磷磷酸化狀狀態(tài)（免疫沉沉淀、免免疫印跡跡）Emmpprinn/MAAPK p388 TGGF-/SMMAD信號(hào)通通路研究究信號(hào)通通路研究究Emmppri

25、nn、P338、磷磷酸化PP38TGFF-、TR、SSMADD、磷酸酸化SMMAD表達(dá)（免免疫印跡跡與Noorthhernn Bllot 表達(dá)達(dá)（Weesteern Bloot和NNorttherrn BBlott）或RT-PCRR)TR激酶活活性（免免疫沉淀淀和免疫疫印跡）caveolin/Emprin共定位 (熒光雙標(biāo)記、共聚焦顯微鏡)caveolin/ TR共定位 (熒光雙標(biāo)記、共聚焦顯微鏡)可行性分分析：申請(qǐng)者所所在的研研究室屬屬于呼吸吸系統(tǒng)疾疾病重點(diǎn)點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室室臨床二二室，本本室在慢慢性阻塞塞性肺疾疾病和肺肺纖維化化發(fā)病機(jī)機(jī)制的研研究領(lǐng)域域已有大大量工作作積累，為本項(xiàng)項(xiàng)目的研研究打下下

26、了良好好的工作作基礎(chǔ)。申請(qǐng)者者及所在在研究室室在產(chǎn)兒兒高氧損損傷領(lǐng)域域進(jìn)行了了一系列列開拓性性研究，已熟練練掌握急急、慢性性高氧肺肺損傷模模型復(fù)制制，蛋白白、核酸酸分析等等技術(shù)。（詳見見研究基基礎(chǔ)欄）本項(xiàng)目研研究的主主要成員員之一，香港合合作者教教授，是是國際上上新生兒兒肺損傷傷研究的的前沿科科學(xué)家，目前與與本研究究小組密密切合作作，進(jìn)行行有關(guān)慢慢性肺損損傷研究究?；籼┨┹x教授授除承擔(dān)擔(dān)實(shí)驗(yàn)指指導(dǎo)，并并提供部部分試劑劑。新一代共共聚焦顯顯微鏡具具有觀察察亞細(xì)胞胞結(jié)構(gòu)的的立體定定位功能能，用其其檢測(cè)在在體組織織cavveollin/Emmmpriin、ccaveeoliin/ TR信號(hào)分分子在亞

27、亞細(xì)胞位位點(diǎn)的共共定位表表達(dá)，雖雖無文獻(xiàn)獻(xiàn)報(bào)道，在技術(shù)術(shù)上難度度較大，但申請(qǐng)請(qǐng)者已掌掌握了多多種熒光光標(biāo)記技技術(shù)，應(yīng)應(yīng)用共聚聚焦顯微微鏡觀察察cavveollin-1在細(xì)細(xì)胞質(zhì)膜膜上的定定位表達(dá)達(dá)也已獲獲成功。申請(qǐng)人人所在單單位的醫(yī)醫(yī)學(xué)中心心的共聚聚焦顯微微鏡和本本實(shí)驗(yàn)室室的基本本研究設(shè)設(shè)備，能能保證本本實(shí)驗(yàn)研研究完成成。本項(xiàng)目的的特色與與創(chuàng)新之之處。理論上的的創(chuàng)新：研究Emmmprrin/MAPPK pp38信信號(hào)通路路在器官官發(fā)育和和組織病病理損傷傷中的作作用,國國內(nèi)外尚尚無文獻(xiàn)獻(xiàn)報(bào)道。本課題研研究caaveoolinn對(duì)Emmmprrin/MAPPK pp38、TGFF-/SMMAD共共

28、調(diào)節(jié)機(jī)機(jī)制，將將為早產(chǎn)產(chǎn)兒高氧氧肺損傷傷發(fā)病機(jī)機(jī)制開辟辟新的研研究領(lǐng)域域，并為為其防治治開拓新新思路。方法上的的創(chuàng)新：以在體組組織為研研究對(duì)象象，應(yīng)用用免疫熒熒光雙重重標(biāo)記共共聚焦顯顯微鏡技技術(shù)研究究cavveollin/Emmmpriin、ccaveeoliin/TTR共定位位，國內(nèi)內(nèi)外未見見文獻(xiàn)報(bào)報(bào)道，可可望為深深入研究究小窩蛋蛋白對(duì)信信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)導(dǎo)的調(diào)控控機(jī)制開開辟新途途徑。年度研究究計(jì)劃及及預(yù)期研研究結(jié)果果。年度研究究計(jì)劃及及預(yù)測(cè)進(jìn)進(jìn)展 本課課題研究究內(nèi)容預(yù)預(yù)計(jì)用33年時(shí)間間完成.220044年1月月8月月購買所所需試劑劑。建立預(yù)預(yù)實(shí)驗(yàn)動(dòng)動(dòng)物模型型。進(jìn)行各各項(xiàng)預(yù)實(shí)實(shí)驗(yàn)。220044年9月月

29、20005年年2月建立動(dòng)動(dòng)物模型型。完成標(biāo)標(biāo)本的收收集。220055年3月月7月月 完成MMMPss、TIIMPss、TGGF-、TR、SMMAD22及其mmRNAA表達(dá)的的研究，并進(jìn)行行階段性性總結(jié)。220055年8月月20005年年12月月 完成ccaveeoliin-11表達(dá)和和cavveollin-1/TTR共定位位研究，并進(jìn)行行階段性性總結(jié)。220066年1月月20006年年6月 完成ccaveeoliin-11的酪氨氨酸磷酸酸化狀態(tài)態(tài)研究，并進(jìn)行行階段性性總結(jié)。 220066年7月月122月 研究數(shù)據(jù)據(jù)資料分分析、總總結(jié)、論論文撰寫寫及成果果鑒定。 預(yù)期研研究成果果本項(xiàng)目所所建立的

30、的早產(chǎn)新新生大鼠鼠慢性高高氧肺損損傷模型型，不僅僅為本課課題提供供了研究究對(duì)象，而且為為研究高高氧肺損損傷后肺肺ECMM重建提提供了模模型。本研究可可望為闡闡明早產(chǎn)產(chǎn)兒高氧氧肺損傷傷機(jī)制提提供新的的線索：高氧暴暴露下MMMP誘誘導(dǎo)劑/抑制劑劑失衡是是高氧肺肺損傷MMMPss增加，ECMM重建紊紊亂的主主要原因因。高氧暴暴露使質(zhì)質(zhì)膜小窩窩表達(dá)或或功能異異常，從從而影響響Emmmpriin/MMAPKK p338和TTGF-/SMMAD兩兩條信號(hào)號(hào)通路整整合，繼繼而導(dǎo)致致MMPPs增加加，ECCM重建建紊亂。本研究究內(nèi)容也也可能為為預(yù)防和和干預(yù)高高氧肺損損傷提供供理論依依據(jù)。（二）研研究基礎(chǔ)礎(chǔ)與工

31、作作條件工作基礎(chǔ)礎(chǔ)1. 與與本項(xiàng)目目有關(guān)的的研究工工作積累累和已取取得的研研究工作作成績本課題組組多年來來一直進(jìn)進(jìn)行高氧氧肺損傷傷的發(fā)病病機(jī)制及及防治的的研究，做了許許多基礎(chǔ)礎(chǔ)和臨床床研究工工作。已已成功建建立早產(chǎn)產(chǎn)新生大大鼠高濃濃度氧（85%955%）急急性肺損損傷和慢慢性肺纖纖維化的的模型；已完成成肺組織織中各種種抗氧化化酶活力力、羥脯脯氨酸含含量與肺肺纖維化化的相關(guān)關(guān)性研究究；內(nèi)源源性一氧氧化氮在在高氧肺肺損傷中中雙重作作用的研研究；體體外高氧氧對(duì)肺泡泡巨噬細(xì)細(xì)胞分泌泌IL-8的影影響研究究；TGGF-在早產(chǎn)產(chǎn)大鼠高高氧肺損損傷肺組組織中表表達(dá)的研研究；基基質(zhì)金屬屬蛋白酶酶及其抑抑制劑在在高氧肺肺損傷中中的作用用機(jī)制的的研究；及促紅紅細(xì)胞生生成素、地塞米米松、維維甲酸對(duì)對(duì)新生鼠鼠高氧肺肺損傷的的干預(yù)研研究。獲獎(jiǎng)?wù)n題題目前正承承擔(dān)的相相關(guān)科研研項(xiàng)目：1. 2. 相關(guān)研究究工作發(fā)發(fā)表的文文章：附：基質(zhì)質(zhì)金屬蛋蛋白酶及及其抑制制劑在高高氧肺損損傷中的的作用1. 高高氧組病病理學(xué)改改變 2. 高氧氧組MMMPs表表達(dá)圖1 肺肺發(fā)育不不良，示示肺泡圖2 細(xì)胞胞增生、間質(zhì)纖纖維圖3 MMMP-2強(qiáng)陽陽性表達(dá)達(dá)數(shù)目減少少、結(jié)構(gòu)構(gòu)簡單化改變變