高二生物（基因工程的基本操作程序）-精講版課件

1、湖南新寧二中生物組生物選修31.2基因工程的基本操作程序?qū)ｎ}1 基因工程湖南新寧二中生物組目的基因的檢測(cè)與鑒定基因工程的基本操作程序的步驟：目的基因的獲取基因表達(dá)載體的構(gòu)建將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞湖南新寧二中生物組閱讀與思考1、什么是目的基因？2、獲取目的基因的方法有哪些？其操作過程分別是怎樣的？一、目的基因的獲取1、目的基因概念：主要指的是編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因。也可以是一些具有調(diào)控作用的因子。2、目的基因獲取方法：從基因文庫(kù)中獲取目的基因利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因化學(xué)方法直接人工合成湖南新寧二中生物組從基因文庫(kù)中獲取目的基因基因文庫(kù)： 將含有某種生物不同基因的許多DNA片斷，導(dǎo)入到受體菌的群體

2、中，各個(gè)受體菌分別含有這種生物的不同基因，稱為基因文庫(kù)。湖南新寧二中生物組基因文庫(kù) 基因組文庫(kù)部分基因文庫(kù)（如cDNA文庫(kù)）基因文庫(kù)的構(gòu)建過程湖南新寧二中生物組基因組文庫(kù)限制酶供體細(xì)胞的全部DNA大量DNA片段拼接到載體上導(dǎo)入受體細(xì)胞擴(kuò)增基因文庫(kù)的構(gòu)建過程湖南新寧二中生物組mRNA單鏈DNA 雙鏈DNA逆轉(zhuǎn)錄cDNA文庫(kù)湖南新寧二中生物組如何從基因文庫(kù)中找到所需要的基因？依據(jù)目的基因的有關(guān)信息。如：根據(jù)基因的核苷酸序列 基因在染色體上的位置 基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA 基因翻譯產(chǎn)物蛋白質(zhì)等特性。從基因文庫(kù)中獲取目的基因利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因PCR的全稱： 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)PCR的原理： DNA復(fù)

3、制 PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的前提條件：要有一段已知的目的基因的核苷酸序列。湖南新寧二中生物組利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因湖南新寧二中生物組模板原料引物酶控制溫度目的基因DNA四種脫氧核苷酸如單鏈DNA分子片段耐熱的DNA聚合酶PCR儀自動(dòng)調(diào)控PCR的條件：湖南新寧二中生物組PCR的過程：利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因變性(90-95)復(fù)性(55-60)延伸(70-75)湖南新寧二中生物組用化學(xué)方法直接人工合成條件：基因較小，核苷酸序列已知。湖南新寧二中生物組二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建核心用切目的基因相同的限制性內(nèi)切酶切割質(zhì)粒湖南新寧二中生物組二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建核心湖南新寧二中生物組二、基因表達(dá)載體的

4、構(gòu)建核心目的基因湖南新寧二中生物組二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建核心1、基因表達(dá)載體的組成目的基因啟動(dòng)子:終止子:標(biāo)記基因等一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段。位于基因的首端。一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段。位于基因的尾端。啟動(dòng)子的作用：湖南新寧二中生物組二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建核心終止子作用：使轉(zhuǎn)錄在所需要的地方停止。標(biāo)記基因作用： 是為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基 因，從而將有目的基因的細(xì)胞篩選出來，如青霉素基因。 是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得蛋白質(zhì)。湖南新寧二中生物組二、基因表達(dá)載體的構(gòu)建核心2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建目的：a.使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代。b.使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。三、目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞 1、什么是轉(zhuǎn)化？ 2、目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常用的方法是什么？具體過程是怎樣的？ 3、目的