實驗二十四凱氏定氮法測定生物樣品中有機氮含量

1、實驗二十四凱氏定氮法測定生物樣品中有機氮的含量(精)實驗二十四凱氏定氮法測定生物樣品中有機氮的含量(精)5/5實驗二十四凱氏定氮法測定生物樣品中有機氮的含量(精)實驗二十五凱氏定氮法測定生物樣品中有機氮的含量一實驗目的學習凱氏定氮法的基本源理和操作；用凱氏定氮法測定生物樣品中氮的含量。二實驗原理凱氏定氮法是使樣品經(jīng)硫酸和催化劑一起加熱消化，使有機氮分解，此中有機氮素轉變成氮，與硫酸化合為硫酸銨。此后加堿蒸餾，使銨游離出來，用硼酸汲取，再用標準硫酸或鹽酸滴定，依據(jù)標準酸的耗費量，即可計算有機氮的含量。三主要儀器及試劑1.凱氏定氮瓶及蒸餾裝置2.硫酸銅3.硫酸鉀4.硫酸5.2%硼酸溶液6.40%氫

2、氧化鈉溶液7.0.2%甲基紅8.0.2%溴甲酚綠9.0.2%甲基紅及0.2%溴甲酚綠的1+5混淆指示劑的標準鹽酸溶液(或1/2硫酸溶液)：0.1mol/LHCl的配制及標定：?汲取9mL濃HCl注入大概1000mL無二氧化碳蒸餾水中，此溶液濃度約為0.1mol/L，用下述方法進行標定：正確稱取于180烘2小時，并于干燥器內(nèi)冷至室溫的無水碳酸鈉11.5g，置于250mL容量瓶中，定容后搖勻，用移液管汲取25mL放入錐形瓶內(nèi)，加入無二氧化碳蒸餾水至100mL及4滴甲基橙指示劑，用待標的0.1mol/LHCl滴定至淡桔紅色，記錄取量。同時用無二氧化碳蒸餾水做空白滴定。計算鹽酸標準溶液的濃度。m100

3、0C(HCl)(V1V0)53.00式中：m無水NaCO的重量，g；23V1滴定無水NaCO耗費HCl溶液體積，mL；23V0滴定無二氧化碳蒸餾水耗費HCl溶液體積，mL；53.00M(1/2Na2CO3),g/mol。四實驗操作步驟精準稱取固體試樣1g（含氮總量約30-40mg）于500mL凱氏定氮瓶中，加研細的硫酸銅0.5g，?硫酸鉀10g，濃硫酸20mL，輕輕搖勻。于瓶口裝好小漏斗，將凱氏瓶以45角斜支于石棉網(wǎng)上，小火加熱，使其所有碳化（泡沫消逝）后，增強火，使溶液微沸，至液體變成藍綠色透明再加熱30min。冷后加200mL水再放冷。連結蒸餾裝置，冷凝管下端插入接收瓶液面下。?接收瓶內(nèi)盛

4、有2%硼酸溶液50mL及混淆指示劑2-3滴。從漏斗放入40%氫氧化鈉溶液70-80mL，搖動，瓶內(nèi)物料變成深藍色或產(chǎn)生黑色，自漏斗再加水100mL。加熱蒸餾至氨所有蒸餾出來（250mL），使冷凝管下端走開汲取液，再蒸餾1min，停止加熱。用水沖刷冷凝管下端的外面下端。汲取液用標準鹽酸滴定至灰色為終點。同時做空白實驗。注意事項1.消化時若不易呈透明溶液，可將試液放冷后慢慢加入30過氧化氫23mL，以促使氧化。消化過程以微火集中于凱氏瓶底部，保持遲緩沸騰，防范試樣濺于瓶壁，難于消化使氨損失。實驗中要保證硫酸足量，不然過多的硫酸鉀形成硫酸氫鉀，而削弱了硫酸的消化作用。硫酸鉀的作用是增添溶液的沸點，硫

5、酸銅為催化劑，并且可做蒸氨時加入堿量的指示劑。五實驗結果計算有機氮(%)(V1V2)C0.014100W式中：V1樣品耗費標準酸的體積，mL；V2試劑空白耗費標準酸的體積，mL；標準鹽酸的物質的量濃度，mol/L；0.014每毫升1mol/LHCl相當于氮的克數(shù)W樣品重量（或體積），g（或mL）。數(shù)據(jù)列表表示以下：鹽酸濃度的標定：瓶+NaCO3編瓶+NaCO3重NaCO3重VHClCHCld相對重m2（g）m（g）（mL）V（0mL）（%）號（mol/L）m1（g）123均勻值樣品測定:WVVC有機氮12HCld（%）(g)(mL)(mL)（mol/L）相對編號(%)123均勻值六思慮題蒸氨時為何蒸餾瓶內(nèi)要加濃堿？汲取液為何要用硼酸溶液？為何要將冷凝管下端插入接