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文檔簡介
1、玉米須水提物對2型糖尿病大鼠胰島細胞的庇護【關鍵詞】玉米須水提物;2型糖尿病;穩(wěn)態(tài)模子評估;大鼠prtetinfstigaaydisaqueusextratnpanreatiisletellintype2diabetiratsenxian-hun,lixue-yan,lixia-ing,etal(1.institutefediine,qiqihaeredialllege,qiqihaer161042,hina;2.basiedialllege,heilngjianguniversityft,harbin150040,hina)keyrds:stigaaydisaqueusextrat;type
2、2diabetesellitus;hestasisdelassessent;rat胰島素對抗(ir)和胰島細胞成果缺陷是2型糖尿病發(fā)病的重要機制。研究表現(xiàn),恒久一連高血糖可加重ir程度,也可直接損傷細胞成果,導致血糖進一步升高,形成惡性循環(huán)1。如今多數(shù)實行側重于研究藥物在糖代謝方面的作用機理,而對2型糖尿病胰島細胞庇護作用的研究為數(shù)不多。本研究通過不雅察玉米須水提物對2型糖尿病大鼠胰島細胞的庇護作用,旨在評價其對2型糖尿病ir和胰島細胞排泄成果的影響,為進一步研究中草藥落糖機制提供理論根據。1實行質料1.1動物雄性干凈級sprague-daley大鼠購于北京維通利華實行動物技能,允許證號:sx
3、k(京)2022-0001。1.2試劑和藥物鏈脲佐菌素(stz,美國siga公司),兔抗大鼠胰島素單克隆抗體(美國st公司),兩步法即用型試劑盒(天津灝洋公司),鹽酸二甲雙胍(上海衡山藥業(yè)),血糖試紙(北京厚美德生物技能)等。玉米須水提物提取要領:枯燥玉米須破壞,稱取200g玉米須粉,用1.5l蒸餾水,于50水浴振蕩器中提取2遍,共3h,尼龍布過濾網絡濾液;將濾液離心取其上清液,于80水浴鍋中濃縮至小體積后,用真空枯燥器繼承枯燥,直至水分完全蒸發(fā),即得玉米須水溶性提取物。實行時,蒸餾水溶解配制。1.3重要儀器測力得血糖儀(臺灣厚美德公司產物),7060全主動生化儀(日本日立公司產物),elip
4、setinikn倒置熒光顯微鏡(日本尼康公司),iage-prplus圖像闡發(fā)軟件(ediaybernetis公司)等。2實行要領2.1動物豢養(yǎng)及模子創(chuàng)立雄性sprague-daley大鼠80只,1012周齡,體重(20020)g,順應性喂養(yǎng)1周。將大鼠隨機分為正常比較組(10只)和實行組(70只)。實行組大鼠喂以高脂高糖飼料(5kg尺度飼料參加1.5kg白糖、2kg豬油、1kg奶粉、0.5kg雞蛋、0.3kg食鹽,此中卵白質18%,脂肪32%,碳水化合物50%),直至實行竣事。5周后,禁食10h,賜與腹腔注射在冰浴中奇怪配制的1%stz液30g/(kgd),一連3d,制備2型糖尿病大鼠模子;
5、不雅察“三多一少病癥,并在72h尾靜脈采血測定空腹血糖(fbg),fbg16.7l/l且一連3d保持穩(wěn)定者視為造模樂成。正常比較組喂以尺度飼料(卵白質22%,脂肪18%,碳水化合物60%),直至實行竣事。并在5周后一連3d注射等體積的生理鹽水2-3。2.2分組和給藥造模樂成后將實行組大鼠隨機分為5組,每組10只。模子比較組賜與2l/d生理鹽水灌胃;二甲雙胍組賜與200g/(kgd)二甲雙胍;玉米須水提物低、中、高劑量組別離賜與150、300、600g/(kgd)玉米須水提物灌胃。同時正常比較組賜與2l/d生理鹽水灌胃。實行期間,模子比較組和玉米須水提物低劑量組大鼠別離殞命2只和1只。2.3指標
6、檢測3統(tǒng)計學要領實行數(shù)據以xs表現(xiàn),因fins、ha-ir和ha-為非正態(tài)漫衍,轉化為天然對數(shù)后舉行統(tǒng)計闡發(fā)。全部數(shù)據均接納spss14.0統(tǒng)計軟件anva舉行處置懲罰闡發(fā),多組間比力接納單因素方差闡發(fā),2組間比力接納lsd-t查驗。4結果4.1對糖尿病大鼠空腹血糖和空腹胰島素的影響(見表1)表1各組大鼠fbg和fins的比力注:與模子比較組比力,*p0.05,*p0.01;與二甲雙胍組比力,p0.05,p0.01(下同)4.2對糖尿病大鼠ha-ir和ha-的影響(見表2)表2各組大鼠ir和胰島細胞排泄成果的比力(xs)4.3胰島構造形態(tài)學變革正常比較組胰島細胞間界清楚,細胞形態(tài)規(guī)矩,細胞核呈
7、卵圓形,胰島內各排泄細胞巨細同等,核仁清楚,染色質勻稱,淡染細胞顆粒,細胞呈索狀擺列;模子比較組胰島數(shù)目淘汰,胰島內細胞布局散亂,大部門細胞核淡染,溶解消散,胞漿出現(xiàn)空泡,不清楚;玉米須水提物低劑量組胰島內細胞形態(tài)布局較模子組無顯著改變;中劑量組胰島內細胞形態(tài)布局較模子組規(guī)矩,胞漿內空泡淘汰,核仁較清楚;高劑量組胰島內排泄細胞形態(tài)、布局靠近正常,胞漿勻稱,少有空泡,核仁較清楚,細胞擺列較勻稱;二甲雙胍組胰島內細胞形態(tài)布局較正常,但細胞尚有腫脹征象。4.4胰島免疫組化不雅察(見表3)表3各組大鼠胰島細胞中胰島素表達環(huán)境的比力5討論ir和胰島細胞成果停滯是2型糖尿病發(fā)病的兩個重要因素,ir是2型糖
8、尿病產生的始動因素,而胰島細胞成果那么是2型糖尿病是否產生的決定性因素。但二者之間的本質接洽還不清楚。研究表白,高血糖產生前,ir可加重胰島細胞代償負荷而損傷細胞,引起血糖一連升高,終極導致糖尿病產生5。別的,一連高血糖不單是細胞成果停滯所導致的結果,還進一步加重它的衰竭和ir。在早期2型糖尿病高血糖狀態(tài)下,胰島細胞成果處于可逆狀態(tài),接納按捺細胞排泄或代償負荷使細胞蘇息,低落高糖毒性,從而可規(guī)復細胞成果,減輕ir,以延緩糖尿病天然病程的希望,可使2型糖尿病回到更初期的階段6。玉米須為禾本科玉蜀黍屬植物的枯燥花絲和柱頭,具有清熱利尿、滋腎養(yǎng)陰、益氣生津等成果。比年來,創(chuàng)造玉米須具有落糖、落壓等藥
9、理作用,用于多飲、多尿、多食、瘦弱、尿糖及血糖升高之氣陰兩虛型消渴癥7-8。2型糖尿病屬于中醫(yī)“消渴領域。當代中醫(yī)臨床研究已表白,氣陰兩虛兼燥熱血瘀是2型糖尿病的根本病機。到如今為止,滋陰益氣法是臨床治療2型糖尿病的重要治法。因此,我們應用玉米須水提物對實行性2型糖尿病大鼠舉行干預,以期明白其抗2型糖尿病的作用及其機制。本研究結果表白,中、高劑量的玉米須水提取物可明顯減低fbg和改進高胰島素血癥,結果與二甲雙胍作用相稱(p0.05)。有報道,玉米須落糖作用大概與其修復胰腺細胞受損的作用有關9。但是,針對玉米須是否刺激胰島素排泄而改進細胞排泄成果的研究鮮有報道。我們應用ha形式評價ir和胰島細胞
10、排泄成果,結果表現(xiàn),中、高劑量玉米須水提物可顯著低落ha-ir,明顯進步ha-細胞排泄指數(shù),提示玉米須水提物大概通過減輕ir和改進胰島細胞成果而使血糖落落。我們進一步舉行了胰島構造形態(tài)學不雅察和胰島素的免疫構造化學闡發(fā),結果表現(xiàn),中、高劑量的玉米須水提物能明顯加強胰島細胞中胰島素表達,同時也改進了胰島內排泄細胞布局和形態(tài)。因此,我們推測玉米須水提物大概通過低落血糖、減輕ir、促進損傷的胰島細胞修復而改進胰島細胞成果。【參考文獻】1defrnzra.pathgenesisftype2(nn-insulin-dependent)diabetesellitus:abalanedverviej.dia
11、betlgia,1992,35:389-397.2馮烈,羅璐,盧筱華.福辛普利對糖尿病大鼠腎臟的庇護作用j.暨南大學學報(醫(yī)學版),2001,22(4):35-39.3reeda,alladj.anialdelsfdiabetesellitusj.diabetiediine,2022,22:359-370.4hanffers,kennedye,gnzalez,etal.aprspetiveanalysisfthehadel:theexiitydiabetesstudyj.diabetesare,1996,19:1138-1141.5asgharz,yaud,hanf,etal.insulinresistaneausesinreasedbeta-ellassbutdefetiveglusestiulatedinsulinseretininaurinedelftype2diabetesj.diabetlgia,2022,49:90-99.6紀立農.“細胞蘇息觀點及其在糖尿病防治中的應用j.外洋醫(yī)學
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