食品管理-食品檢測前處理方法基本要求凈化技術(shù)及前處理原則

1、食品檢測前處理方法基本要求凈化技術(shù)及前處理原那么樣品前處理：樣品的制備和對(duì)樣品中待測組分進(jìn)行提取、凈化和濃縮的過程。在整個(gè)食品平安性的檢測分析中，70%80%甚至更多的時(shí)間用在樣品 的前處理上，而給實(shí)驗(yàn)帶來的誤差有60%以上來自樣品的前處理。樣品前處理的目的就是濃縮被測物質(zhì)、消除基質(zhì)干擾、保護(hù)儀器、提高方法 的準(zhǔn)確性、精密度、選擇性和靈敏度。主要的樣品前處理方法：1、超聲萃??；2、微波萃取；3、液一固萃??；4、加速溶劑萃?。?、超臨界萃?。?、固相萃??；7、固相微萃取;8、基質(zhì)分散固相萃??；9、液一液萃取；10、微量化學(xué)法技術(shù)；11、柱層析。樣品制備的基本要求1、食品危害殘留物質(zhì)分析，特點(diǎn)：基

2、體復(fù)雜；目標(biāo)化合物檢測限量越來越嚴(yán) 格；某些危害殘留物質(zhì)在食品樣品中存在的濃度極低；各目標(biāo)化合物的性質(zhì) 差異較大；可能同時(shí)存在多種組分。2、評(píng)價(jià)前處理方法是否合理,應(yīng)考慮的因素：操作是否簡便、省時(shí)；被測組 分的回收率是否高；本錢是否低廉；對(duì)人體及環(huán)境是否產(chǎn)生影響。萃取技術(shù)：用有機(jī)溶劑等方法把被測物從試樣中提取出來，凈化后供測定使 用。萃取技術(shù)要求溶劑盡可能選擇性溶解殘留危害物質(zhì)，而不是不溶解和少 量溶解食品基體，萃取效果的關(guān)鍵是溶劑的選擇，殘留危害物質(zhì)提取回收率 的大小直接決定整個(gè)分析步驟的精確度。凈化技術(shù)包括：1、液一液萃?。?、固相萃取;3、固相微萃取;4、基質(zhì)分散固相萃??；5、柱層析（凝

3、膠、離子交換、親和、分配、吸附柱層析等）；6、免疫檢測技術(shù)（分子印跡法）。免疫檢測技術(shù)是以抗原抗體的特異性、可逆性結(jié)合反響為基礎(chǔ)的分析檢測技 術(shù)。在此基礎(chǔ)上結(jié)合一些生化或物理方法作為信號(hào)顯示或放大系統(tǒng)即可建立 免疫測定法。即抗原可以特異性地與抗體結(jié)合，通過抗原一抗體的特異性識(shí) 別反響來進(jìn)行檢測。抗體是能與抗原特異性結(jié)合的免疫球蛋白（Ig）,與免疫測定有關(guān)的主要為 IgG和IgMo抗原與抗體間的反響是依靠局部的分子間作用力結(jié)合的。主要有四種：氫鍵、范德華力、靜電和疏水相互作用?？乖贵w結(jié)合反響具 有高度特異性、交叉反響和可逆性?？乖贵w結(jié)合的理化特性主要表現(xiàn)為由 親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體。一個(gè)成功

4、的免疫學(xué)測定法必須具備的3個(gè)要素：性能優(yōu)良的抗體、靈敏而專 一的標(biāo)記物和高效的別離手段?，F(xiàn)有的免疫測定方法很多，按照不同的方法 分類。經(jīng)典的免疫測定法不需要標(biāo)記物；標(biāo)記免疫測定法分為放射性標(biāo)記測 定法和非放射性標(biāo)記測定法，按反響介質(zhì)分為均相和非均相免疫測定法。經(jīng) 典免疫測定法在食品平安衛(wèi)生分析上較少采用，而靈敏度高的非均相、非放 射性標(biāo)記免疫測定法種類繁多，開展較快、檢測靈敏度高，使用范圍廣。食品檢測中的樣品前處理，已經(jīng)成為食品行業(yè)中一個(gè)主要的研究方向，在樣 品檢驗(yàn)過程中，對(duì)于檢測樣品的處理能夠保證結(jié)果真實(shí)可靠。食品檢測的第一步就是樣品前處理！,使被測組分從復(fù)雜的樣品中別離出來，制成便于測定的

5、溶液形式；.除去對(duì)分析測定有干擾的基體物質(zhì)；.如果被測組分的濃度較低，還需要進(jìn)行濃縮富集；.如果被測組分用選定的分析方法難以檢測，還需要通過樣品衍生化處理使 其定量地轉(zhuǎn)化成另一種易于檢測的化合物。前處理的原那么：.樣品是否要預(yù)處理，如何進(jìn)行預(yù)處理，采樣何種方法，應(yīng)根據(jù)樣品的性 狀、驗(yàn)的要求和所用分析儀器的性能等方面加以考慮；.應(yīng)盡量不用或少使用預(yù)處理，以便減少操作步驟，加快分析速度，也可減 少預(yù)處理過程中帶來的不利影響，如引入污染、待測物損失等；.分解法處理樣品時(shí)，分解必須完全，不能造成被測組分的損失，待測組分 的回收率應(yīng)足夠高；.樣品不能被污染，不能引入待測組分和干擾測定的物質(zhì)；5,試劑的消

6、耗應(yīng)盡可能少，方法簡便易行，速度快，對(duì)環(huán)境和人員污染少。前處理溶液制備小方法當(dāng)樣品中被測組分為游離狀態(tài)時(shí)溶解法制備溶液。當(dāng)樣品中被測組分為結(jié)合狀態(tài)時(shí)分解法制備溶液。.溶解法（要全部溶解）1）水溶法：用水作為溶劑，適用于水溶性成分，如，無機(jī)鹽、水溶性色素等；2）酸性水溶液浸出法：溶劑為各種酸的水溶液，適用于在酸性水溶液中溶解度增大且穩(wěn)定的組分；3）堿性水溶液浸出法：溶劑為堿性水溶液，適用于在堿性水溶液中溶解度增大且穩(wěn)定的成分；4）有機(jī)溶劑浸出法：適用于易溶于有機(jī)溶劑的待測成分。常用的有機(jī)溶劑有醐、石油酸、仿、丙 酮、正己烷等。根據(jù)“相似相溶”原理選擇有機(jī)溶劑。.分解法1）干灰化法優(yōu)點(diǎn)：基本不添加

7、或添加很少量的試劑，故空白值較低；多數(shù)食品經(jīng)灼燒后所剩下的灰分體積很小，因而能處理較多量的樣品，故 可加稱樣量，在方法靈敏度相同的情況下，可提高檢出率；有機(jī)物分解徹底；操作簡單，灰化過程中不需要人一直看管，可同時(shí)做其他實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備工 作。缺點(diǎn)：處理樣品所需要的時(shí)間較長；由于敞口灰化，溫度又高，容易造成某些揮發(fā)性元素的損失；盛裝樣品的士甘揭對(duì)被測組分有一定的吸留作用，由于高溫灼燒使土甘氓材料 結(jié)構(gòu)改變?cè)斐晌⑿】籽ǎ鼓承┍粶y組分吸留于孔穴中很難溶出，致使測定 結(jié)果和回收率偏低。提高回收率的措施：根據(jù)被測組分的性質(zhì)，采取適宜的灰化溫度；灰化食品樣品，應(yīng)在盡可能低的溫度下進(jìn)行，但溫度過低會(huì)延長灰化時(shí)間

8、， 通常選用50()550。(2灰化2h或在6()()。(：灰化().5ho 一般不要超過600 ;加入灰化固定劑，防止被測組分的揮發(fā)損失和用埸吸留。2)濕消化法優(yōu)點(diǎn)：由于使用強(qiáng)氧化劑，有機(jī)物分解速度快，消化所需時(shí)間短；由于加熱溫度較干法灰化低，故可減少金屬揮發(fā)逸散的損失，同時(shí)容器的 吸留也少；被測物質(zhì)以離子狀態(tài)保存在消化液中，便于分別測定其中的各種微量元 素。缺點(diǎn)：在消化過程中，有機(jī)物快速氧化常產(chǎn)生大量有害氣體，因此操作需在通風(fēng) 櫥內(nèi)進(jìn)行；消化初期，易產(chǎn)生大量泡沫外溢，故需操作人員隨時(shí)照管；消化過程中大量使用各種氧化劑等，試劑用量較大，空白值偏高。3)常用的消化方法在實(shí)際工作中，除了單獨(dú)使用

9、硫酸的消化方法外，經(jīng)常采取幾種不同的氧化 性酸配合使用，利用各種酸的特點(diǎn)，取長補(bǔ)短，以到達(dá)平安、快速、完全破 壞有機(jī)物的目的。幾種常用的消化方法如下：單獨(dú)使用的消化方法此法在樣品消化時(shí)，僅加入硫酸，在加熱的情況下， 依靠的脫水炭化作用，破壞有機(jī)物；硝酸一高酸消化法；硝酸一消化法。消化操作技術(shù)都有啥？(1)敞口消化法；(2)回流消化法；(3)冷消化法；(4)密封罐消化法。消化操作時(shí)要注意：（1）消化所用的試劑，應(yīng)采用高純的酸和氧化劑，所含雜質(zhì)要少，并同時(shí) 按與品相同的操作做空白試驗(yàn)，以扣除消化試劑對(duì)測定數(shù)據(jù)的影響。如果空 白值較高，應(yīng)提高試劑純度，并選擇質(zhì)量較好的玻璃器皿進(jìn)行消化。（2）消化瓶內(nèi)

10、可以加玻璃珠或瓷片，以防止暴沸；凱氏燒瓶的瓶口應(yīng)傾 斜，不應(yīng)對(duì)著自己或他人。加熱時(shí)火力應(yīng)集中于底部，瓶頸部位應(yīng)保持較低 的溫度，以冷凝酸霧，并減少被測成分的揮發(fā)損失。如果產(chǎn)生大量的泡沫， 除迅速減小火力外，可加入少量不影響測定的消泡劑，如辛醇、硅油等；也 可將樣品和消化液在室溫下浸泡過夜，第二天再進(jìn)行加熱消化。（3）在加熱過程中需要補(bǔ)加酸或氧化劑時(shí)，首先停止加熱，待消化液稍冷 后才沿瓶壁緩緩加入，以免發(fā)生劇烈反響，引起噴濺。另外，在高溫下補(bǔ)加 酸，會(huì)使酸迅速揮發(fā)，既浪費(fèi)又污染環(huán)境。.常用的別離與富集方法主要是智取法：操作迅速，別離效果好，應(yīng)用廣泛。但萃取試劑通常易燃、 易揮發(fā)，且有毒性。在萃取

11、時(shí)，特別是當(dāng)溶液呈堿性時(shí)，常常會(huì)產(chǎn)生乳化現(xiàn)象，影響別離。破壞 乳化的方法有：1）較長時(shí)間靜置；2）輕輕地旋搖漏斗，加速分層；3）假設(shè)因兩種溶劑（水與有機(jī)溶劑）局部互溶而發(fā)生乳化，可以加入少量電 解質(zhì)如化鈉），利用鹽析作用加以破壞I假設(shè)因兩相密度差小發(fā)生乳化，也可 以加入電解質(zhì)，以增大水相的密度；4）假設(shè)因溶液呈堿性而產(chǎn)生乳化，?？杉尤肷倭康南←}酸或采用過濾等方法 消除。根據(jù)不同情況，還可以加入等消除乳化；固相萃取:分為活化吸附劑、上樣、洗滌和洗脫四個(gè)步驟。其它方法：固相微萃取法；超臨界流體萃取法；蒸鐳與揮發(fā)法；膜別離法。樣品的前處理是農(nóng)藥殘留量檢測過程中重要的步驟之一，它對(duì)保證測定結(jié)果的 準(zhǔn)確性和可靠性，減少對(duì)色譜柱和檢測儀器的污染，提高檢測效率都具有重要 的影響。食品中農(nóng)藥的殘留量一般在10-6iow/W）或更低的水平，除了要 求檢測方法具有相當(dāng)高的靈敏度和選擇性外，也對(duì)樣品