細(xì)菌培養(yǎng)基課件_第1頁
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文檔簡介

1、關(guān)于細(xì)菌培養(yǎng)基第一張,PPT共二十二頁,創(chuàng)作于2022年6月一 基本理論二 培養(yǎng)基的分類三 培養(yǎng)基的主要成分及其作用四 培養(yǎng)基配制原則五 培養(yǎng)基使用注意事項(xiàng)六 常用培養(yǎng)基及制備方法第二張,PPT共二十二頁,創(chuàng)作于2022年6月一 基本理論培養(yǎng)基的定義:培養(yǎng)基是按照微生物生長繁殖或積累代謝產(chǎn)物所需要的各種營養(yǎng)物質(zhì),由人工配制而成的營養(yǎng)基質(zhì),它專供微生物培養(yǎng)、分離、鑒別、研究和保存用。培養(yǎng)基的用途:主要用于繁殖及分離純化細(xì)菌、傳代和保存菌種、鑒別細(xì)菌種屬、研究細(xì)菌生理及生化特性、制造菌苗、疫苗和其他微生物制劑等。第三張,PPT共二十二頁,創(chuàng)作于2022年6月二 培養(yǎng)基的分類按用途分類按物理性狀分類

2、按成分分類第四張,PPT共二十二頁,創(chuàng)作于2022年6月1.按用途分類基礎(chǔ)培養(yǎng)基營養(yǎng)培養(yǎng)基增菌培養(yǎng)基選擇性培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基顯色培養(yǎng)基第五張,PPT共二十二頁,創(chuàng)作于2022年6月選擇性培養(yǎng)基加入青霉素等抗生素的培養(yǎng)基:分離酵母菌、霉菌等真菌加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基:分離金黃色葡萄球菌不加氮源的無氮培養(yǎng)基:分離固氮菌不加含碳有機(jī)物的無碳培養(yǎng)基:分離自養(yǎng)型微生物加入氨基嘌呤、次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷的培養(yǎng)基:分離雜交瘤細(xì)胞第六張,PPT共二十二頁,創(chuàng)作于2022年6月2.按物理性狀分類液體培養(yǎng)基流體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基第七張,PPT共二十二頁,創(chuàng)作于2022年6月 液體培養(yǎng)基:不含凝固劑,利于

3、菌體的快速繁殖、代謝和積累產(chǎn)物 流體培養(yǎng)基:含0.05-0.07%瓊脂粉,可降低空氣中氧進(jìn)入培養(yǎng)基的速度,利于一般厭氧菌的生長繁殖 半固體培養(yǎng)基:含0.2-0.8%瓊脂粉,多用于細(xì)菌的動(dòng)力觀察、菌種傳代保存及貯運(yùn)細(xì)菌標(biāo)本材料 固體培養(yǎng)基:含1.5-2%瓊脂,用于細(xì)菌的分離、鑒定、菌種保存及細(xì)菌疫苗制備等多方面第八張,PPT共二十二頁,創(chuàng)作于2022年6月3.按成分分類合成培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基半合成培養(yǎng)基第九張,PPT共二十二頁,創(chuàng)作于2022年6月三 培養(yǎng)基的主要成分及其作用 營養(yǎng) 物質(zhì)水分 凝固 物質(zhì) 抑制劑 指示劑主要成分:第十張,PPT共二十二頁,創(chuàng)作于2022年6月主要營養(yǎng)物質(zhì)蛋白胨牛肉浸

4、液糖醇類血液雞蛋和動(dòng)物血清生長因子無機(jī)鹽類第十一張,PPT共二十二頁,創(chuàng)作于2022年6月四 培養(yǎng)基配制原則2.營養(yǎng)要協(xié)調(diào):注意各種營養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比例。3.pH要適宜:各種微生物適宜生長的pH范圍不同。1.目的要明確:根據(jù)微生物的種類、培養(yǎng)目的等確定配制培養(yǎng)基的種類,因?yàn)椴煌奈⑸飳ε囵B(yǎng)物質(zhì)的需求不同。第十二張,PPT共二十二頁,創(chuàng)作于2022年6月五 培養(yǎng)基使用注意事項(xiàng)配制培養(yǎng)基所用的化學(xué)藥品,均應(yīng)化學(xué)純凈。配制培養(yǎng)基時(shí)各種成分應(yīng)準(zhǔn)確稱量。培養(yǎng)基的酸堿度,必須準(zhǔn)確測定,特別對含有指示劑的培養(yǎng)基;測定酸堿度須于冷卻后測定為準(zhǔn)。制備的培養(yǎng)基必須保持澄清,以便細(xì)菌生長后,容易觀察。液體培養(yǎng)基沉

5、淀法和濾紙法;固體培養(yǎng)基可用脫脂棉花濾清。第十三張,PPT共二十二頁,創(chuàng)作于2022年6月培養(yǎng)基必須達(dá)到完全無菌的目的。要注意有些培養(yǎng)基高壓滅菌的磅數(shù)不可過高,時(shí)間不可過長,否則能使培養(yǎng)基變質(zhì)。如乳糖高壓滅菌磅數(shù)過高,可能分解為葡萄糖。制備的培養(yǎng)基不宜保存過久,以少量勤做為宜。平板及少量分裝的試管培養(yǎng)基均宜保存于4冰箱內(nèi)。培養(yǎng)基所用的一切玻璃器皿,必須是中性硬料,否則能影響培養(yǎng)基酸堿度。第十四張,PPT共二十二頁,創(chuàng)作于2022年6月配制培養(yǎng)基的容器,不宜用銅或鐵。含銅大于0.3mol/L時(shí),細(xì)菌不易生長;含鐵大于0.14mol/L妨礙細(xì)菌產(chǎn)生毒素。培養(yǎng)基分裝時(shí)不宜超過容器的2/3,以免滅菌時(shí)

6、溢出。第十五張,PPT共二十二頁,創(chuàng)作于2022年6月六 常用培養(yǎng)基及制備方法牛肉膏 0.3克蛋白胨 1.0克NaCl 0.5克水 100毫升pH 7.07.2在燒杯中加水,稱取牛肉膏、蛋白胨和NaCl,加熱溶化后,調(diào)節(jié)pH值至7.07.2。分裝,加棉塞,高壓蒸汽滅菌即成。常用于培養(yǎng)細(xì)菌。 ThemeGallery is a Design Digital Content & Contents mall developed by Guild Design Inc.1.營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基 第十六張,PPT共二十二頁,創(chuàng)作于2022年6月六 常用培養(yǎng)基及制備方法牛肉膏 0.3克蛋白胨 1.0克NaCl

7、0.5克水 100毫升pH 7.07.2在營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中增加20克瓊脂即成。常用于培養(yǎng)細(xì)菌。ThemeGallery is a Design Digital Content & Contents mall developed by Guild Design Inc.2.營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基第十七張,PPT共二十二頁,創(chuàng)作于2022年6月六 常用培養(yǎng)基及制備方法蛋白胨20g瓊脂25-30gNaCl5g乳糖(CP)10g膽鹽(3號(hào)膽鹽或牛膽酸鈉)5g1%中性紅水溶液5ml蒸餾水1 000ml除去中性紅水溶液外,其余各成分混合于鍋內(nèi)加熱溶解。調(diào)pH值到7.07.2,煮沸,以脫脂棉過濾。加入1中性紅水溶液

8、,搖勻,滅菌15分鐘,待冷卻至 50時(shí),傾倒平皿。待平皿內(nèi)培養(yǎng)基凝固后,置溫箱內(nèi)烤干表面水分即可用。保存于冰箱內(nèi)(4)?,F(xiàn)有廠家專門配制、出售麥糠凱瓊脂干粉劑,用時(shí),加水溶解,滅菌后即成。3.麥糠凱(Macconkey) 瓊脂培養(yǎng)基 第十八張,PPT共二十二頁,創(chuàng)作于2022年6月六 常用培養(yǎng)基及制備方法可溶性淀粉 2克K2HPO4 0.05克MgSO47H2O 0.05克KNO3 0.1克NaCl 0.05克FeSO4 0.001克瓊脂 2克水 100毫升pH 7.27.4在燒杯中加水95毫升,加熱至沸騰,取可溶性溶粉2克,用5毫升水調(diào)成糊狀,倒入沸水中和勻。再稱取其它藥品,陸續(xù)加入燒杯內(nèi)(待一種藥品溶解后,再加入第二種藥品)。待全部藥品溶解后,停止加熱,補(bǔ)足失水,調(diào)pH值至7.27.4。分裝后,高壓蒸汽滅菌。本培養(yǎng)基常用于培養(yǎng)放線菌。 4.高氏一號(hào)培養(yǎng)基(淀粉瓊脂培養(yǎng)基)第十九張,PPT共二十二頁,創(chuàng)作于2022年6月常用于培養(yǎng)酵母菌。六 常用培養(yǎng)基及制備方法馬鈴薯 200克蔗糖 10克瓊脂 20克水 1000毫升自然pH稱取200克馬鈴薯片,加水1000毫升,煮沸半小時(shí),用紗布過濾,補(bǔ)足失水。在上述濾汁中加入10克蔗糖、20克瓊脂,加熱使瓊脂熔化。分裝后,高壓蒸汽滅菌。5.馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基 第二十張,PPT共二

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