飼料和飼料添加劑畜禽靶動物耐受性評價試驗指南

1、 PAGE PAGE 142：試行適用范圍本指南規(guī)定了飼料原料和飼料添加劑畜禽靶動物耐受性評價試驗的根本原則、試驗方案、試驗方法和試驗報告 等要求。本指南適用于為飼料和飼料添加劑、進口飼料和 飼料添加劑申報以及已經(jīng)批準使用的飼料和飼料添加劑再評價而進展的畜禽靶動物耐受性評價試驗。畜禽飼料產(chǎn)品的靶動物體內(nèi)耐受性評價試驗可參照 本指南的要求進展。根本原則靶動物耐受性評價試驗的目的是為飼料和飼料添加劑以下簡稱為“受試物”對靶動物的短期毒性供給有限評 價；當受試物使用劑量超出推舉用量時，也可用來確立受試 物的安全范圍。應依據(jù)中國的養(yǎng)殖業(yè)生產(chǎn)實際開展靶動物耐受性評 價試驗，以保證評價結(jié)果的科學性、客觀性

2、。靶動物耐受性評價試驗應對受試物所適用的每一種靶動物分別進展評價4.3 以及其他另有規(guī)定的特別狀況除外。靶動物耐受性評價試驗應由具備肯定專業(yè)學問和試驗技能的專業(yè)人員在適宜的試驗場所、使用適宜的設備設 施、依據(jù)標準的操作程序進展，并且由試驗機構(gòu)指定的負責試驗動物應安康并且具有相像的遺傳背景；飼養(yǎng)環(huán)境不應對試驗結(jié)果造成影響；受試物和試驗日糧不得受到污染。在符合靶動物耐受性評價試驗相關(guān)要求的前提下，靶動物耐受性評價試驗可與靶動物有效性評價試驗合并進行。靶動物耐受性評價試驗應充分考慮試驗動物毒理學爭辯的結(jié)果。試驗方案試驗開頭前，應依據(jù)受試物和靶動物的特點，對試驗進展系統(tǒng)設計，形成試驗方案。試驗方案應包

3、括試驗目的、試驗方法、儀器設備、具體的動物品種和類別、動物數(shù)量、飼試驗動物：狀況；式；預飼期的條件要求； 重復的動物數(shù)必需滿足統(tǒng)計學要求、統(tǒng)計方法； 養(yǎng)分成分含量實測值和能量水平；留意依據(jù)受試物特點和使用方法配制日糧，使用的原料應符合我國法規(guī)和相關(guān)標 粒度、加工工藝等應全都；受試物的測定： 受試物及其有效成分的通用名稱、生產(chǎn)廠家、規(guī)格、生產(chǎn)批號、有效成分含量的測試方法及測 試結(jié)果、測試機構(gòu)，受試物有效成分在試驗日糧中的含量；觀測工程和時間： 檢測和觀看工程名稱、實施和持續(xù)的準確時間；疾病治療和預防措施： 不應干擾受試物的作用模式并逐一記錄；突發(fā)狀況處理： 動物個體和各試驗組發(fā)生的全部非預期的突

4、發(fā)狀況，都應記錄其發(fā)生的時間和范圍。試驗方法受試物對于申請產(chǎn)品審定或登記的受試物，應與擬生產(chǎn)或擬進口的產(chǎn)品完全全都。產(chǎn)品應由申報單位自行研制 并在中試車間或生產(chǎn)線生產(chǎn)，同時供給產(chǎn)品質(zhì)量標準和使用 說明。試驗機構(gòu)應將受試物樣品送國家或農(nóng)業(yè)部認可的 質(zhì)檢機構(gòu)對其有效成分的含量進展實際測定。劑量與分組 組，即比照組、有效劑量組、多倍劑量組。試驗劑量比照組通常不應含有受試物，但是，對于某些動物機體 的必需養(yǎng)分素如氨基酸、維生素、微量元素等，可以添 加，但添加量應維持在最低必需水平。一般狀況下，有效劑量組應中選用最高限量。假設沒有 最高限量，應選用最高推舉劑量。假設沒有最高推舉量，應 2-5 倍作為有效

5、劑量。10 倍。10 價試驗應能通過尸檢、組織病理學以及其他適宜的試驗方法 提出反映受試物毒性的特異性指標，并計算出受試物的安全 系數(shù)。或 動物數(shù)必需滿足數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析的要求。一般狀況下，每組 6 1 個動物即可為 1 個重復，而小動物如家禽、兔等則要求每個重復的10 只。性別比例應一樣。試驗期豬：14 天之后至斷奶前進展，生長育肥豬試驗開頭體重應不大于 35 kg。假設哺乳仔豬和斷奶仔豬均需要進展耐受性評價試驗，承受一個組合 14 28 天。假設已進展了斷奶仔豬的耐受性評價試驗，則不必再進展生長育肥豬 的耐受性評價試驗。選用 1 日齡雛禽。肉仔雞獲得的靶動物耐受性評價試驗數(shù)據(jù)可以外推至蛋用和種

6、用雛雞，肉用火雞的數(shù)據(jù)也可外推至蛋 1/3 產(chǎn)蛋期進展。生產(chǎn)小牛肉的肉用犢牛的試驗應選用體重不超 70 kg 的犢牛。假設犢牛和育肥牛均需要進展靶動物耐受28 天。假設哺乳期和斷奶期的家兔都需進展耐受性評價試驗，試驗應自仔兔誕生后 1 周開頭，試驗時間不少于49天，并且母兔應與仔兔一同飼養(yǎng)直至斷奶。其他靶動物耐受性評價試驗需要的最短試驗期取決于 適用動物的種類和生長階段，具體要求見附錄 A。對于附錄A 28 天，成42 天。假設受試物僅適用于動物的特定生長階段并且短于附錄 A ，但不得少于 28 天，而且應考察相關(guān)的特異性指標假設在妊娠母豬上使用，應考察產(chǎn)活仔數(shù)；假設在泌乳母豬上使用，則應考察

7、斷奶仔豬的體重和斷奶成活率等。觀看與檢測臨床觀看試驗期內(nèi)應每天觀看試驗動物臨床表現(xiàn)、采食和飲水情 況、生長狀況以及相關(guān)動物產(chǎn)品的產(chǎn)量和特性。也應具體觀 察和記錄不良反響。對試驗中消滅的不明緣由的死亡應進展 尸檢，假設可能，最好進展組織學分析。血液學檢測試驗開頭和試驗完畢必要時增加試驗中期時每組隨 機抽檢肯定數(shù)量的動物，性別比例適當，分別采集血樣進展血液常規(guī)、生化指標及其他與受試物相關(guān)的各種生理參數(shù)的 檢測。血液常規(guī)指標主要包括白細胞計數(shù)WBC數(shù)RBC、血紅蛋白HGB、紅細胞壓積HCT板計數(shù)PLT等指標；生化指標主要指谷氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶ALASALTPROALBUNCRE、血糖GL、總膽紅素TBI

8、L等指標。組織病理學檢查尸體解剖學檢查：試驗完畢時，各組屠宰肯定數(shù) 量的試驗動物(性別比例適當)，進展系統(tǒng)尸體解剖學檢查，為進一步的組織學檢查供給依據(jù)。臟器系數(shù)測定：試驗完畢時，各組隨機屠宰肯定 數(shù)量動物(性別比例適當)，剖檢取心、肝、脾、肺、腎等臟器稱重，并計算各器官與體重的比值。組織病理學檢查：試驗完畢時，對多倍劑量組及尸檢特別動物的主要器官進展系統(tǒng)的組織病理學檢查，具體檢查的器官和組織包括：心、肝、脾、肺、腎、胸腺、胰腺、 胃、十二指腸、回腸、直腸、淋巴結(jié)、骨髓等組織。其他特異性觀測指標依據(jù)受試物的作用特點和用途，增加相應的特異性觀測指標和敏感性功能指標。數(shù)據(jù)記錄 一記錄。數(shù)據(jù)記錄應真實

9、、準確、完整、標準、清楚，并妥 善保管。 法定計量單位和國家推舉使用的單位。統(tǒng)計分析 計分析方法進展數(shù)據(jù)分析。統(tǒng)計顯著性差異水平至少應到達 P0.05。試驗報告試驗報告應供給試驗獵取的全部數(shù)據(jù)，包括全部試驗動物和試驗重復。未納入統(tǒng)計分析的數(shù)據(jù)或由于數(shù)據(jù)缺乏、數(shù)據(jù)喪失而無法評價的狀況也應報告，并說明在各組別 中的分布狀況。每個靶動物耐受性評價試驗必需單獨形成最終報告。 每個試驗最終報告中應包含試驗概述見附錄 B和報告正文。試驗報告正文至少應包括：A、試驗名稱；B、摘要；D、受試物；F、試驗材料和方法；G、結(jié)果與爭辯；H、結(jié)論；I 據(jù)或由于數(shù)據(jù)缺乏、數(shù)據(jù)喪失而無法評價的狀況應具體說明；J、參考文獻

10、；K、試驗機構(gòu)和操作人員，包括試驗機構(gòu)的名稱，試驗 加蓋簽發(fā)機構(gòu)的單位公章或特地的分析測試章；托付檢測的數(shù)據(jù)應供給檢測機構(gòu)出具的檢測報告。應對試驗報告每頁進展編碼，格式為 “第 頁，共頁”資料存檔最終報告、原始記錄、圖表和照片、試驗方案、受試物 樣品及其檢測報告等原始資料應存檔備查，保存時間一般不 5 10 年。附錄A：試驗期類 別試驗階段*體重或日齡起始完畢日齡 完畢體重kg最短試驗期哺乳和 14 日齡2142日齡14 日齡2142120120611353514 天28 天42 天生長 注：35 kg 120250或 80150依據(jù)當?shù)亓?當?shù)亓晳T慣42天*少一個生殖周期分娩前兩周至斷奶試驗

11、階段：指試驗用動物所處的生長階段，最短試驗期應處于所對應的試驗階段*假設已有斷奶仔豬的耐受性評價試驗數(shù)據(jù)，則不必再進展生長育肥豬的耐受性評價試驗類別起始試驗階段體重或日齡完畢體重類別起始試驗階段體重或日齡完畢體重最短試驗期完畢日齡kg肉仔雞出殼35 天1.62.435天蛋用雛雞出殼16(20)周齡35天*產(chǎn)蛋雞1621周齡1318月齡56天*育肥用火雞出殼母：710公：122042天種用火雞后備種用火雞開頭產(chǎn)蛋30周齡出殼60 周齡30 周齡母：15公：3056天42天*注：僅當肉仔雞的耐受性評價試驗數(shù)據(jù)無法供給時進展*1/3 產(chǎn)蛋期進展*僅當育肥用火雞的耐受性評價試驗數(shù)據(jù)無法供給時進展類別試

12、驗階段體重或日齡犢牛起始類別試驗階段體重或日齡犢牛起始誕生或60-80 kg70kg全斷奶完畢日齡4 月齡kg145最短試驗期42 天生產(chǎn)小牛肉的肉用犢牛6 月齡18025028 天育肥牛1036 月齡35070042 天泌乳奶牛56 天生殖母牛初次受精受精至斷奶，周期類別試驗階段體重或日齡最短試驗期育成羔羊類別試驗階段體重或日齡最短試驗期育成羔羊起始誕生3 月齡kg152028 天育肥羔羊誕生6 月齡或以上4028 天泌乳奶綿羊生殖綿羊初次受精42 天至少一個繁 殖周期類別試驗階段體重或日齡起始育成羔羊類別試驗階段體重或日齡起始育成羔羊誕生3 月齡kg1520最短試驗期28 天育肥羔羊誕生6 月齡或以上4028 天泌乳奶山羊42 天生殖山羊生殖山羊初次受精受精至斷奶，周期6. 家兔類 別哺乳和斷奶兔試驗階段體重或日齡開頭完畢日齡誕生后一周最短試驗期49 天育肥兔 泌乳母兔斷奶后 811周28 天少一個生殖周期分娩前兩周至斷奶附錄B：試驗概述表試驗編號：受產(chǎn)品類別：試生產(chǎn)單位：物量及包裝規(guī)格：收(抽)樣日期：適用時試驗動物品種：性別：試驗齡：動物飼養(yǎng)條件：時間 試驗起始時間：與場所 試驗場所：分組設計方法：試驗組數(shù)量(含比照組)：每個重復動物數(shù)：日糧中有效成分添加量1 頁，共 頁有