臨床檢驗方法的評價課件

1、臨床檢驗方法的評價郭 健衛(wèi)生部北京醫(yī)院衛(wèi)生部臨床檢驗中心臨床檢驗方法的評價1臨床檢驗方法的評價郭 健臨床檢驗方法的評價1方法評價方法選擇分析前準備常規(guī)分析樣品統(tǒng)計質(zhì)控報告結(jié)果預防措施方法發(fā)展臨床檢驗方法的評價2方法評價方法選擇分析前準備常規(guī)分析樣品統(tǒng)計質(zhì)控報告結(jié)果預防措分析方法分級決定性方法（definitive method）：經(jīng)詳盡研究尚未發(fā)現(xiàn)不準確度或不確定性原因的方法。參考方法（reference method）：經(jīng)詳盡研究證實其不準確度與不精密度可以忽略的方法。常規(guī)方法（routing method）：可滿足臨床或其他目的需要的日常使用的方法。臨床檢驗方法的評價3分析方法分級決定性方

2、法（definitive method）臨床檢驗方法的評價4臨床檢驗方法的評價4臨床檢驗方法的評價5臨床檢驗方法的評價5方法分級被測物決定性方法參考方法血細胞計數(shù)ICSH血清酶IFCCHbA1cIFCC or NGSP臨床檢驗方法的評價6方法分級被測物決定性方法參考方法血細胞計數(shù)ICSH血清酶IF常規(guī)方法參考方法決定性 方法準確度增加應(yīng)用范圍增加不同方法的關(guān)系臨床檢驗方法的評價7常規(guī)方法參考方法決定性準確度增加應(yīng)用范圍增加不同方法的關(guān)系臨標準品分級標準品（reference material）：充分均勻并具有一個或多個良好確定的特性值的材料或物質(zhì)，用來校準儀器設(shè)備、評估測定方法或給其它物質(zhì)賦值

3、。一級標準品（原級參考物）：具有最高計量學特性的參考物質(zhì)，由一級參考測量過程定值 二級標準品：用一級標準品校準，參考方法定值。校準品：用二級標準品校準，擬被用于校準的常規(guī)方法定值。用于對常規(guī)方法和儀器的校準。臨床檢驗方法的評價8標準品分級標準品（reference material）：充國際單位原級參考方法一級參考品次級參考方法二級參考品廠家選定方法標準方法廠家工作校準品產(chǎn)品校準品終用戶方法常規(guī)樣品檢測結(jié)果材料 校準和賦值 測量過程 執(zhí)行者 不確定度IFCCARMLMLEnd-user臨床檢驗方法的評價9國際單位原級參考方法一級參考品次級參考方法二級參考品廠家選定檢驗結(jié)果的可溯源性校準品的應(yīng)用

4、與試劑、儀器配套使用使用有證參考品（CRM， GBW）不能使用定值質(zhì)控品（Control Materials)代替校準品(Calibrator)臨床檢驗方法的評價10檢驗結(jié)果的可溯源性校準品的應(yīng)用臨床檢驗方法的評價10臨床樣本國家標樣JJG464-96校準品廠家標準TC 158 mg/dl 1.5TG = 150 mg/dl 1.4HDL-C = 56.2 mg/dl 0.4檢測結(jié)果TGTCHDL-C國家計量標準吸光度 0.005波長 340 nm/505nm漂移 0.0015自動生化分析儀儀器名稱：HITACHI 7170A測定范圍：TC = 3-800 mg/dl 3%TG = 0-11.

5、4 mmol/l 2.4%HDL-C = 3-150 mg/dl 2.6%臨床檢驗方法的評價11臨床樣本國家標樣校準品廠家標準檢測結(jié)果國家計量標準自動生化分臨床檢驗方法的評價12臨床檢驗方法的評價12人血清無機成分分析標準物質(zhì)GBW09135血清膽固醇標準物質(zhì)GBW09138一級標準物質(zhì)二級標準物質(zhì)紅細胞微粒標準物質(zhì)GBW（E）090001膽紅素標準物質(zhì)GBW（E）090002氰化高鐵血紅蛋白溶液標準物質(zhì)GBW（E）090004純化血紅蛋白標準物質(zhì)GBW（E）090011臨床檢驗方法的評價13人血清無機成分分析標準物質(zhì)GBW09135一級標準物質(zhì)二級方法的評價的主要內(nèi)容初步評價（NCCLS E

6、P10） 精密度（ NCCLS EP5） 對比及偏差（ NCCLS EP9） 線性（ NCCLS EP6） 抗干擾能力（ NCCLS EP7） 基質(zhì)效應(yīng)（ NCCLS EP14） 臨床準確度（NCCLS GP10）臨床檢驗方法的評價14方法的評價的主要內(nèi)容初步評價（NCCLS EP10）臨床檢NCCLS文件EP9-A用患者樣本進行方法對比及偏差評估批準指南1995年12月臨床檢驗方法的評價15NCCLS文件EP9-A用患者樣本進行方法對比批準指南199目的及用途引進新方法前或用一種方法替代另一種方法時進行偏差分析。評價兩種分析方法（同一分析項目）的偏差。臨床檢驗方法的評價16目的及用途引進新方

7、法前或用一種方法替代另一種方法時進行偏差分評價操作要求熟悉儀器操作熟悉評價方案質(zhì)控足夠的數(shù)據(jù)臨床檢驗方法的評價17評價操作要求熟悉儀器操作臨床檢驗方法的評價17實驗樣本要求來源于健康人或患者，無干擾，盡量避免貯存；測定物濃度范圍應(yīng)在醫(yī)學決定水平范圍內(nèi)均勻分布；樣本數(shù)至少40例，增加數(shù)量能提高可信性臨床檢驗方法的評價18實驗樣本要求來源于健康人或患者，無干擾，盡量避免貯存；臨床檢對比方法廠家要求的實驗室常規(guī)方法或公認的參考方法。 具有好的精密度 沒有已知的干擾物 相同單位 相對國家標準或參考方法的偏差是已知的臨床檢驗方法的評價19對比方法廠家要求的實驗室常規(guī)方法或公認的參考方法。臨床檢驗方測定方

8、法每天分別用兩種方法進行測定，測定順序：1、2、3、4、5、6、7、88、7、6、5、4、3、2、1測定次數(shù)：至少測定5天，共40個樣本臨床檢驗方法的評價20測定方法每天分別用兩種方法進行測定，臨床檢驗方法的評價20數(shù)據(jù)監(jiān)督系統(tǒng)誤差人為誤差常規(guī)質(zhì)控臨床檢驗方法的評價21數(shù)據(jù)監(jiān)督系統(tǒng)誤差臨床檢驗方法的評價21熟悉儀器及方法收集數(shù)據(jù)檢查方法內(nèi)的離群點 界限： （雙份測定）相對差值均值的4倍實驗步驟臨床檢驗方法的評價22熟悉儀器及方法實驗步驟臨床檢驗方法的評價22繪圖 均值散點圖（X，Y） 所有值散點圖（Yij，Xi） 偏差圖 散點圖（ Yij -Xij），Xi）臨床檢驗方法的評價23繪圖 均值散點

9、圖（X，Y）臨床檢驗方法的評價23臨床檢驗方法的評價24臨床檢驗方法的評價24臨床檢驗方法的評價25臨床檢驗方法的評價25均值散點圖（X，Y）臨床檢驗方法的評價26均值散點圖（X，Y）臨床檢驗方法的評價26偏差圖：每次測定的Y均值與X均值 之差-相應(yīng)X均值圖臨床檢驗方法的評價27偏差圖：每次測定的Y均值與X均值臨床檢驗方法的評價27線性相關(guān)目測檢查兩種方法間離群值目測檢查 界限：4倍兩種方法間絕對偏差的均值 絕對差值允許范圍: 相對差值允許范圍:臨床檢驗方法的評價28線性相關(guān)目測檢查臨床檢驗方法的評價28適合范圍 計算 r，r2 = 0.95 范圍適合 r2 0.95 擴大數(shù)據(jù)范圍線性回歸 計

10、算 均勻離散度的直觀檢查臨床檢驗方法的評價29適合范圍臨床檢驗方法的評價29臨床檢驗方法的評價30臨床檢驗方法的評價30臨床檢驗方法的評價31臨床檢驗方法的評價31預期偏差及可信范圍 線性回歸方程 計算偏差（高、中、低3組）解釋實驗結(jié)果并與內(nèi)部標準比較臨床檢驗方法的評價32預期偏差及可信范圍臨床檢驗方法的評價32臨床檢驗方法的評價33臨床檢驗方法的評價33臨床檢驗方法的評價34臨床檢驗方法的評價34定量分析方法的線性評價Evaluation of The Linearity of Quantitative Analytical MethodsEP6-P臨床檢驗方法的評價35定量分析方法的線性評

11、價Evaluation of The L目的為實驗室中采用定量分析方法的用戶提供評價儀器或方法是否滿足廠家線性指標的評價方法。用戶可為分析方法設(shè)定線性范圍。臨床檢驗方法的評價36目的為實驗室中采用定量分析方法的用戶提供評價儀器或方法是否滿定義實驗范圍（Assay Range）： 或者線性范圍（Linear Range)：分析系統(tǒng)最終輸出的、與被測物濃度或活性成比例的、濃度或活性值范圍臨床檢驗方法的評價37定義實驗范圍（Assay Range）： 或者臨床檢驗方法定義線性（Linearity）:曲線接近直線的程度的量；與完整系統(tǒng)的反應(yīng)相關(guān)（是最后的分析結(jié)果或解釋，不僅是儀器的輸出結(jié)果）臨床檢驗方

12、法的評價38定義線性（Linearity）:臨床檢驗方法的評價38Scope and Limitations線性是分析方法的一個特征，不同于準確性和精密度。線性實驗應(yīng)該使用與待分析物基質(zhì)相似的樣本。線性檢驗系統(tǒng)反應(yīng)，包括校準、線性化技術(shù)、系數(shù)和儀器反應(yīng)。臨床檢驗方法的評價39Scope and Limitations線性是分析方法的一使用者的需求用簡單的實驗來檢驗廠家標示的線性范圍及定量分析方法的分析范圍。在實驗室中作為方法學的信息（方法線性）。進行線性評價實驗。臨床檢驗方法的評價40使用者的需求用簡單的實驗來檢驗廠家標示的線性范圍及定量分析方儀器的熟悉過程執(zhí)行分析過程的實驗室人員必須掌握儀器

13、操作和維護程序、樣本準備方法和校準。對較簡單的設(shè)備需要5天或更少時間。對較復雜的多通道設(shè)備需要5天或更長時間。臨床檢驗方法的評價41儀器的熟悉過程執(zhí)行分析過程的實驗室人員必須掌握儀器操作和維護實驗周期在完成儀器熟悉過程后開始實驗并收集數(shù)據(jù)。全部實驗和數(shù)據(jù)采集應(yīng)在同一工作日內(nèi)完成。臨床檢驗方法的評價42實驗周期在完成儀器熟悉過程后開始實驗并收集數(shù)據(jù)。臨床檢驗方法線性評價實驗樣本要求： 最少4個濃度水平，推薦5個水平。基質(zhì)效應(yīng)： 應(yīng)使用與病人樣本相似的樣本或注明基質(zhì)類型。臨床檢驗方法的評價43線性評價實驗樣本要求：臨床檢驗方法的評價43可以使用的樣本病人混合血清 理想的樣本基質(zhì) 高值樣本：高于上限

14、30% 低值樣本：線性低限或更低。臨床檢驗方法的評價44可以使用的樣本病人混合血清臨床檢驗方法的評價44可以使用的樣本含添加物的混合病人血清：加入品在沒有干擾物存在時不需高純度。經(jīng)處理的材料稀釋的混合血清用于降低分析物濃度，材料處理：透析、熱處理、層析。臨床檢驗方法的評價45可以使用的樣本含添加物的混合病人血清：臨床檢驗方法的評價45可以使用的樣本生理鹽水稀釋的混合血清：在線性實驗中使用此類樣本可掩蓋不同的基質(zhì)效應(yīng)。商品質(zhì)控或校準品：此類樣本由于不是正常的生理形式，可掩蓋實際的線性結(jié)果。臨床檢驗方法的評價46可以使用的樣本生理鹽水稀釋的混合血清：臨床檢驗方法的評價46可以使用的樣本不同比例稀釋

15、商品質(zhì)控物；水溶液 ：一般無基質(zhì)效應(yīng)其它溶液：基質(zhì)效應(yīng)與有機溶劑相似臨床檢驗方法的評價47可以使用的樣本不同比例稀釋商品質(zhì)控物；臨床檢驗方法的評價47推薦的樣本添加材料ALB：白蛋白干粉、human fraction V.乙醇：無水乙醇ALP：純酶AMS：腮腺或胰腺提取物BIL： 膽紅素純品Ca: CaCO3Cl: NaCl臨床檢驗方法的評價48推薦的樣本添加材料ALB：白蛋白干粉、human fract推薦的樣本添加材料CHOL：膽固醇純品或稀釋質(zhì)控品CO2： CaCO3CREA：標準液或高值血清-ALT： 純酶GLU： 右旋糖AST： 純酶ALT： 純酶臨床檢驗方法的評價49推薦的樣本添加

16、材料CHOL：膽固醇純品或稀釋質(zhì)控品臨床檢驗方推薦的樣本添加材料HBD： 純酶LDH： 純酶Lipase： 胰腺提取物Mg： MgCl2P: K(H)2PO4或Na(H)PO4TP： 白蛋白干粉、人或牛的成份VUA： 在得不到高值病人樣本時，使用標準儲備液或干燥尿酸 。BUN：在得不到高值病人樣本時，使用標準儲備液或干燥尿素 。臨床檢驗方法的評價50推薦的樣本添加材料HBD： 純酶臨床檢驗方法的評價樣本分析順序分析序列應(yīng)為隨機排列。有顯著攜帶污染時，應(yīng)用空白隔開樣本。每個實驗組內(nèi)應(yīng)至少分析4個（最好是5個）不同濃度水平的樣本。臨床檢驗方法的評價51樣本分析順序分析序列應(yīng)為隨機排列。臨床檢驗方法

17、的評價51樣本濃度范圍應(yīng)覆蓋待評線性范圍的上、下限。評價結(jié)果不滿意時應(yīng)重新設(shè)定濃度。線性范圍內(nèi)至少應(yīng)保留有4個濃度。臨床檢驗方法的評價52樣本濃度范圍應(yīng)覆蓋待評線性范圍的上、下限。臨床檢驗方法的評價樣本的準備足量的混合血清。低濃度混合血清（No1）；高濃度混合血清（No5）血清（No2）：3份“No1” + 1份“No5”血清（No3）：2份“No1” + 2份“No5”血清（No4）：1份“No1” + 3份“No5”臨床檢驗方法的評價53樣本的準備足量的混合血清。臨床檢驗方法的評價53樣本濃度計算 C1V1 + C5 V5濃度 = - V1 + V5臨床檢驗方法的評價54樣本濃度計算臨床檢

18、驗方法的評價54數(shù)據(jù)收集x1 y1-1 y1-2 y1-3 y1-4x2 y2-1 y2-2 y2-3 y2-4x3 y3-1 y3-2 y3-3 y3-4 x4 y4-1 y4-2 y4-3 y4-4x5 y5-1 y5-2 y5-3 y5-4臨床檢驗方法的評價55數(shù)據(jù)收集x1 y1-1 數(shù)據(jù)評價觀察有無明顯的數(shù)據(jù)錯誤。若有明顯異常時應(yīng)判斷是否為離群點。如離群點超出2點，則保留全部數(shù)據(jù)或重做全部實驗。臨床檢驗方法的評價56數(shù)據(jù)評價觀察有無明顯的數(shù)據(jù)錯誤。臨床檢驗方法的評價56離群點檢查用于特定濃度Y值離群點的檢驗。將4個重復值從大到小排列（Y1到Y(jié)4）。計算：D = Y1 - Y4若Y1可能

19、是離群點，計算： D1 = （Y1 - Y2）/ D若Y4可能是離群點，計算： D4 = （Y3 - Y4）/ D臨床檢驗方法的評價57離群點檢查用于特定濃度Y值離群點的檢驗。臨床檢驗方法的評價5離群點判斷判斷值（Critical value)(0.05) 0.765(0.01) 0.889臨床檢驗方法的評價58離群點判斷判斷值（Critical value)臨床檢驗方法繪圖和評價線性X-Y圖，X軸為分析物濃度。反應(yīng)值或儀器輸出值為Y軸。目測離群值。 ( Y= aX + b )目測線性判斷是否符合要求。進行統(tǒng)計學判斷和評價。臨床檢驗方法的評價59繪圖和評價線性X-Y圖，X軸為分析物濃度。臨床檢

20、驗方法的評價注意：統(tǒng)計學標準和臨床可接受限不同。慎用方法學線性范圍從0開始。有臨床意義的濃度應(yīng)在線性評價中：最小的線性濃度醫(yī)學決定水平最大的線性濃度臨床檢驗方法的評價60注意：統(tǒng)計學標準和臨床可接受限不同。臨床檢驗方法的評價60參考文獻Dixon W.J. and Massey F.J. introduction to statistical analysis, 3rd edition, McGraw-Hill Book Co., New York, 1969, pp308-310, 500, 536-537.Weissberg A. and Beatty G.H. Tables of tol

21、erance-limit factors for normal distributions, Technometrics 2:4, 1960Graybill, Franklin A. An introduction to linear statistical models, volume I, McGraw-Hill Book Company, 1961, p191.臨床檢驗方法的評價61參考文獻Dixon W.J. and Massey F.J.臨床化學設(shè)備的精密度評價Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry Devi

22、ces, Approved Guideline, 1984EP5臨床檢驗方法的評價62臨床化學設(shè)備的精密度評價Evaluation of Prec精密度的內(nèi)容批內(nèi)批間日內(nèi)日間總精密度臨床檢驗方法的評價63精密度的內(nèi)容批內(nèi)臨床檢驗方法的評價63實驗方法試劑和校準物：同一批號樣本：基質(zhì)與臨床樣本相似，2個以上濃度（參考醫(yī)學決定水平）。實驗天數(shù)：20天以上實驗次數(shù)：每天2批，每批2個（批號）樣本，每個樣本重復2次臨床檢驗方法的評價64實驗方法試劑和校準物：同一批號臨床檢驗方法的評價64精密度實驗天數(shù)1批2批XX11X12X1X11-X12X21X22X2X21-X2212345臨床檢驗方法的評價65

23、精密度實驗天數(shù)1批2批XX11X12X1X11-X12X21精密度評價批內(nèi)：日內(nèi)：（批間）日間：總精密度：臨床檢驗方法的評價66精密度評價批內(nèi)：臨床檢驗方法的評價66批內(nèi)不精密度I = 總實驗天數(shù)（一般為20天）j = 每天測定的批次（一般為2批）Xij1 = 第i天j批實驗第一次結(jié)果Xij2 =第i天j批實驗第二次（重復）結(jié)果臨床檢驗方法的評價67批內(nèi)不精密度I = 總實驗天數(shù)（一般為20天）臨床檢驗方法的批間不精密度I = 實驗天數(shù)（通常為20天）Xi1 = 第i天第一批實驗結(jié)果的平均值（通常重復2次）Xi2 = 第i天第二批實驗結(jié)果的平均值（通常重復2次）臨床檢驗方法的評價68批間不精密

24、度I = 實驗天數(shù)（通常為20天）臨床檢驗方法的評日間不精密度I= 實驗天數(shù)X = 所有結(jié)果的平均值Xi第I天所有結(jié)果的平均值臨床檢驗方法的評價69日間不精密度I= 實驗天數(shù)臨床檢驗方法的評價69總不精密度臨床檢驗方法的評價70總不精密度臨床檢驗方法的評價70實驗室檢驗的臨床準確性評價NCCL GP-10臨床檢驗方法的評價71實驗室檢驗的臨床準確性評價NCCL GP-10臨床檢驗方法的GP10-AAssessment of The Clinical Accuracy of Laboratory Tests Using Receiver Operating Characteristic (ROC

25、) Plots; Approved Guideline (1995)“用ROC曲線圖評價實驗室檢驗的臨床準確性”臨床檢驗方法的評價72GP10-AAssessment of The Clinic定義臨床準確性 Clinical Accuracy： 衡量檢驗項目對于不同健康狀況的區(qū)分能力。如：健康與疾??；良性與惡性疾?。粚χ委煹姆磻?yīng)性與不反應(yīng)性；預測疾病的好轉(zhuǎn)與惡化臨床檢驗方法的評價73定義臨床準確性 Clinical Accuracy：臨床檢驗定義臨床有用性 Usefulness： 檢驗信息在病人管理中的實用價值。 如： 檢驗成本； 假陽（或假陰）性率； 有損傷小、成本低的其他方法； 檢驗技術(shù)

26、要求； 檢驗創(chuàng)傷和舒適性臨床檢驗方法的評價74定義臨床有用性 Usefulness：臨床檢驗方法的評價74定義臨床檢驗信息：準確性 敏感性 Sensitivity 特異性 Specificity有用性臨床檢驗方法的評價75定義臨床檢驗信息：臨床檢驗方法的評價75定義ROC： Receiver Operating Characteristic 接收機操作特性ROC曲線： 描述實驗室檢驗的敏感性和特異性關(guān)系的曲線。臨床檢驗方法的評價76定義ROC：臨床檢驗方法的評價76ROC曲線臨床檢驗方法的評價77ROC曲線臨床檢驗方法的評價77定義特異性 Specificity真陰性結(jié)果（NT）數(shù)真陰性結(jié)果數(shù)

27、 + 假陽性結(jié)果（PF）數(shù)臨床檢驗方法的評價78定義特異性 Specificity臨床檢驗方法的評價78定義敏感性 Sensitivity真陽性結(jié)果（PT）數(shù)真陽性結(jié)果數(shù) + 假陰性結(jié)果（NF）數(shù)臨床檢驗方法的評價79定義敏感性 Sensitivity臨床檢驗方法的評價79定義陽性預測值 （PPV）真陽性結(jié)果數(shù)真陽性結(jié)果數(shù) + 假陽性結(jié)果數(shù)臨床檢驗方法的評價80定義陽性預測值 （PPV）臨床檢驗方法的評價80定義陰性預測值 （NPV）真陰性結(jié)果數(shù)真陰性結(jié)果數(shù) + 假陰性結(jié)果數(shù)臨床檢驗方法的評價81定義陰性預測值 （NPV）臨床檢驗方法的評價81ROC曲線的意義臨床檢驗方法的評價82ROC曲線的意義臨床檢驗方法的評價82ROC曲線的意義臨床檢驗方法的評價83ROC