阿司匹林抗血小板聚集和抗血栓作用培訓課件

1、 血栓形成可導致急性心肌梗死、中風、肺栓塞等心、腦、肺循環(huán)疾病，是外科手術(shù)中常見的并發(fā)癥，也是介入性血管形成術(shù)后再閉塞的重要因素 血小板活化在心腦血管疾病發(fā)病中占有重要地位, 抗血小板聚集藥已作為常規(guī)治療用于心腦血管疾病Background1阿司匹林抗血小板聚集和抗血栓作用10/9/2022 血栓形成可導致急性心肌梗死、中風、肺栓塞等心、血栓形成是血液在流動狀態(tài)下, 止血機制過度激活的一種病理性結(jié)局, 是血小板、 白細胞、內(nèi)皮細胞等多細胞間相互作用的結(jié)果, 而血小板的活化和聚集是其中重要因素之一。用電刺激大鼠頸動脈血栓形成, 其原理是損傷動脈內(nèi)皮, 導致其功能紊亂, 激活白細胞和血小板, 引起

2、血小板聚集, 形成混合型血栓, 此模型重復性好, 誤差小, 與人體動脈血栓相似。 小劑量阿司匹林能明顯延長電刺激大鼠頸動脈血栓形成時間, 從而說明其有較強的抗動脈血栓形成作用.2阿司匹林抗血小板聚集和抗血栓作用10/9/2022 小劑量阿司匹林能明顯延長電刺激大鼠頸動脈血栓形成時間在正常的循環(huán)血液中, 血小板處于靜息狀態(tài),而在某些生理或病理狀態(tài)下, 血小板可以被激活。血小板激活是指血小板在刺激物(誘導劑) 作用下發(fā)生的各種改變, 如變形、粘附和聚集等, 其中血小板的活化聚集是血小板的重要改變形式。3阿司匹林抗血小板聚集和抗血栓作用10/9/2022在正常的循環(huán)血液中, 血小板處于靜息狀態(tài),而在

3、某些生理或病理阿司匹林已應(yīng)用百年，成為醫(yī)藥史上三大經(jīng)典藥物之一，至今它仍是世界上應(yīng)用最廣泛的解熱、鎮(zhèn)痛和抗炎藥，也是作為比較和評價其他藥物的標準制劑。在體內(nèi)具有抗血栓的作用，它能抑制血小板的釋放反應(yīng)，抑制血小板的聚集 臨床上用于預防心腦血管疾病的發(fā)作。 aspirin4阿司匹林抗血小板聚集和抗血栓作用10/9/2022阿司匹林已應(yīng)用百年，成為醫(yī)藥史上三大經(jīng)典藥物之一，至今它仍是血小板活化聚集AA 途徑ADP途徑PAF途徑阿司匹林5阿司匹林抗血小板聚集和抗血栓作用10/9/2022血小板活化聚集AA 途徑ADP途徑PAF途徑阿司匹林5阿司匹6阿司匹林抗血小板聚集和抗血栓作用10/9/20226阿

4、司匹林抗血小板聚集和抗血栓作用10/3/2022TXA2腺苷酸環(huán)化酶cAMP 促進血小板聚集花生四烯酸環(huán)氧化酶PGG2PGH2PGF2PGE2還原酶異構(gòu)酶前列環(huán)素合成酶PGI2血栓烷合成酶阿司匹林腺苷酸環(huán)化酶cAMP 抑制血小板聚集(-)(-)7阿司匹林抗血小板聚集和抗血栓作用10/9/2022TXA2腺苷酸環(huán)化酶cAMP 促進血小板聚集花生四烯酸環(huán)氧化研究和開發(fā)療效好，新型的抗血栓藥物是當代醫(yī)藥界的重要任務(wù)之一作為預防血栓性疾病一線用藥。選用何種劑量較為合適, 一直是臨床爭論的問題。阿司匹林8阿司匹林抗血小板聚集和抗血栓作用10/9/2022研究和開發(fā)療效好，新型的抗血栓藥物是當代醫(yī)藥界的重

5、要任務(wù)之一驗證阿司匹林抗血小板的聚集及抗血栓作用探討阿司匹林的臨床治療量，指導臨床用藥Purpose9阿司匹林抗血小板聚集和抗血栓作用10/9/2022驗證阿司匹林抗血小板的聚集及抗血栓作用探討阿司匹林的臨床治療Reagents and Instrument阿司匹林( aspirin, ASP) 結(jié)晶花生四烯酸( arachidonicacid, AA )血小板活化因子( platelet activating factor,PAF) 腺苷二磷酸( adenosine diphos2phate, ADP)戊巴比妥鈉三道電子刺激器，超聲血液流量計，四道血液凝聚儀，離心機10阿司匹林抗血小板聚集和

6、抗血栓作用10/9/2022Reagents and Instrument阿司匹林( a電刺激大鼠頸動脈血栓形成雄性SD大鼠40只, 隨機分成4組, 每組10只。A 組: 0.19 % NS 作為空白對照組; B-D組:10、20和30 mg/kgASP組。大鼠用30mg/kg戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉后,上述各組份均以0.11mL/100g體重大鼠股靜脈注射.給藥后15min,分離大鼠左頸總動脈, 置兩根銀制電極,超聲探針置遠心端, 用電刺激器以115mA的直流連續(xù)刺激大鼠頸動脈7min, 用超聲血流量儀記錄血栓形成時間(即從刺激開始至頸動脈血流量為“零”的時間, occlusion time,

7、 OT)。觀察刺激開始后60min內(nèi)的血流量變化, 如血管仍未栓塞,則以60min作為最大OT。11阿司匹林抗血小板聚集和抗血栓作用10/9/2022電刺激大鼠頸動脈血栓形成雄性SD大鼠40只, 隨機分成4組血小板聚集體內(nèi)試驗健康家兔40只, 隨機分成4組, 每組10只。A 組: 0.19 % NS 作為空白對照組; B-D組:10、20和30 mg/kgASP組。給藥前取血1次, 然后按上述分組分別沿兔耳緣靜脈給藥后, 分別于30、60、120 和180 min取血。各時間點所取血液用3.5mg/mL肝素抗凝(血與抗凝劑的體積比為9: 1),收集于塑料離心管中, 以900g離心9min, 取

8、上層液即為富血小板血漿(platelet-rich plasma, PRP),剩余血液繼以25000g離心10 min取上層液得貧血小板血漿(platelet-poor plasma PPP)。12阿司匹林抗血小板聚集和抗血栓作用10/9/2022血小板聚集體內(nèi)試驗健康家兔40只, 隨機分成4組, 每組1實驗過程中, PRP中的血小板數(shù)應(yīng)控制在約5 108 cell / mL。按Born比濁法進行血小板聚集性測定, 用PPP 300L 調(diào)零, 于比濁管中加入PRP 300L,分別加入3 種誘導劑:AA終濃度0.35 mmol/L, ADP終濃度3mol/L,PAF終濃度7.2nmol/L, 并

9、記錄300s內(nèi)最大聚集率。13阿司匹林抗血小板聚集和抗血栓作用10/9/2022實驗過程中, PRP中的血小板數(shù)應(yīng)控制在約5 108 ceResults組別劑量( gkg-1) OT(min)對照A組B組C組D組ASP對電刺激大鼠頸總動脈血栓形成的影響( x s n = 10)14阿司匹林抗血小板聚集和抗血栓作用10/9/2022Results組別劑量( gkg-1) ASP對ADP、AA、PAF誘導血小板聚集的影響( x s, n = 10)組別 劑量 （gkg-1)最大聚集率ADP30 60 120 180（min） AA 30 60 120 180 （min） PAF30 60 120

10、180（min）對照組B組C組D組15阿司匹林抗血小板聚集和抗血栓作用10/9/2022組別 劑量最大聚集率ADP AA PAF對照臨床試驗設(shè)計16阿司匹林抗血小板聚集和抗血栓作用10/9/2022臨床試驗設(shè)計16阿司匹林抗血小板聚集和抗血栓作用10/3/21 人體內(nèi)血栓形成很難直接觀察到, 從而給血栓及抗血栓的研究和疾病的防治帶來困難。通過模擬血栓狀況來判斷心腦血管疾病發(fā)病期間患者體內(nèi)血栓形成與栓塞程度, 以此來預測心腦血管疾病前期(潛伏期) 體內(nèi)隱性血栓的存在和發(fā)展, 其臨床意義是十分明顯的。本實驗用CAST儀形成的體外血栓與體內(nèi)血栓有十分相似的結(jié)構(gòu), 可分為頭體尾三部分。血栓指數(shù)Q值下降

11、是因為小劑量阿司匹林使血小板內(nèi)血栓素(TXA2)的生成減少，從而抗血栓形成。17阿司匹林抗血小板聚集和抗血栓作用10/9/20221 人體內(nèi)血栓形成很難直接觀察到, 從而給血栓及抗血栓的研2 血小板聚集率是間接反應(yīng)血小板代謝所產(chǎn)生的TXA2的含量與血栓形成的可能性及關(guān)聯(lián)度。血栓形成是反映血液在循環(huán)中由血管壁、血小板、血細胞、纖維蛋白原及各種凝血因子在流體效應(yīng)尤其是在TXA2 作用下所形成的病理性塞子以及其危險性。二者在臨床和實驗中都呈正相關(guān)。18阿司匹林抗血小板聚集和抗血栓作用10/9/20222 血小板聚集率是間接反應(yīng)血小板代謝所產(chǎn)生的TXA2的含量Materials and methods

12、 儀器 CASTI型體外血栓模擬儀，MG型血小板聚集儀， TXA型天平稱一般資料 選取符合如下條件的心腦血管疾病患者160 例。無應(yīng)用 ASP 禁忌證, 用藥前測定血小板聚集率 50 %者為入選條件。 19阿司匹林抗血小板聚集和抗血栓作用10/9/2022Materials and methods 儀器 CAS服用指征 MASP：10mg片；安慰劑：相當于l0mg片 M ASP大小 MASP服用指征：男性，血栓指數(shù)Q值40患者每天餐后分別服用10、20、30、40、50mg；女性，血栓指數(shù)Q值8l6者每天餐后服用10mg，余同男性。20阿司匹林抗血小板聚集和抗血栓作用10/9/2022服用指征

13、 MASP：10mg片；安慰劑：相當于l0m臨床試驗1、血栓指數(shù)Q值：餐后2h用一次性注射器自靜脈取血l ml注入硅化硅膠管內(nèi)，置CAST 一I型血栓儀(37)。自控旋轉(zhuǎn)8min后止。將血栓平鋪在濾紙上，測其長度(mm)。再用濾紙吸干水分(以栓體在濾紙上無滲透為準)。用TXA型天平稱重量(mg)。21阿司匹林抗血小板聚集和抗血栓作用10/9/2022臨床試驗1、血栓指數(shù)Q值：餐后2h用一次性注射器自靜脈取血l臨床試驗2 血小板聚集率(PAG)；用）0.2ml枸櫞酸鈉加靜脈血1.8ml混勻。500rmin分離血小板層，用血小板聚集儀和花生四烯酸（AA）誘導劑測其1min和最大聚集率。3 統(tǒng)計學處

14、理將服用M-ASP和安慰劑前后3、6個月的各項指標作配對比較t檢驗，并計算x s值。22阿司匹林抗血小板聚集和抗血栓作用10/9/2022臨床試驗2 血小板聚集率(PAG)；用）0.2ml枸櫞酸鈉加Expected results 服MASP前血栓指數(shù)Q值、小板聚集率與服藥后36個月比較血栓指數(shù)Q值、血小板聚集率明顯下降。23阿司匹林抗血小板聚集和抗血栓作用10/9/2022Expected results 服MASP前血栓指數(shù)Q值Conclusion小劑量有明顯的抗血小板聚集與抗血栓形成的作用小劑量阿司匹林在心腦血管疾病中抗血小板療效顯著。24阿司匹林抗血小板聚集和抗血栓作用10/9/2022Conclusion小劑量有明顯的抗血小板聚集與抗血栓形成的References 1 李家增抗血小板藥的臨床應(yīng)用J中國處方藥，005，(6)22 BORN G V R1Aggregation of blood p latelets by adeno2 sine diphosphate and its reversal J 1 Nature, 1962,194 (6) : 927 - 9293糜賢鳳,閉雄杰,蔣紅,等.阿司匹林與血小板抑制關(guān)系的臨床研究。臨床血液學雜志,1998,11:60-63.4 包承鑫. 抗血小板藥物研究某些進展J . 中華血液病學雜志, 1990