革蘭陰性需氧和兼性厭氧桿菌檢驗課件

1、微生物檢驗技術(shù)劉垣第六章 革蘭陰性需氧和兼性厭氧桿菌檢驗微生物檢驗技術(shù)劉垣第六章 革蘭陰性需氧和兼性厭氧桿菌檢驗重點各菌屬生物學(xué)特性及臨床意義。難點各菌屬微生物學(xué)檢驗重點難點重點各菌屬生物學(xué)特性及臨床意義。難點各菌屬微生物學(xué)檢目 錄一、腸桿菌科二、弧菌科三、非發(fā)酵革蘭陰性桿菌四、其他革蘭陰性苛養(yǎng)菌目 錄一、腸桿菌科腸桿菌科革蘭陰性需氧和兼性厭氧桿菌檢驗課件第一節(jié) 概述革蘭陰性需氧和兼性厭氧桿菌檢驗課件腸桿菌科（Enterobacteriaceae）細(xì)菌是一大群形態(tài)、生物學(xué)性狀相似，需氧或兼性厭氧的革蘭陰性桿菌或球桿菌在自然界中廣泛分布，可棲生在人和動物的腸道內(nèi)，多數(shù)為條件致病菌，少數(shù)為致病菌致

2、病菌：沙門菌、志賀菌、耶爾森菌等條件致病菌：埃希菌、克雷伯菌、枸櫞酸桿菌、腸桿屬菌、沙雷菌、變形桿菌等與醫(yī)學(xué)的關(guān)系分 類腸桿菌科（Enterobacteriaceae）細(xì)菌是一大群1）形態(tài)與染色 革蘭陰性桿狀或球桿狀細(xì)菌，無芽孢，多數(shù)有鞭毛，能運動，少數(shù)細(xì)菌有莢膜或包膜，有致病性的菌株多數(shù)有菌毛共同特性1）形態(tài)與染色 革蘭陰性桿狀或球桿狀細(xì)菌，無芽孢，多2）培養(yǎng)特性 需氧或兼性厭氧，營養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基如血瓊脂和麥康凱培養(yǎng)基上容易生長，大部分菌屬在2235生長良好大腸埃希菌菌落特征（血平板）大腸埃希菌菌落特征（MAC）2）培養(yǎng)特性 需氧或兼性厭氧，營養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng) SS培養(yǎng)基（沙

3、門志賀培養(yǎng)基） 乳糖、中性紅指示劑、膽鹽、煌綠等抑制劑強(qiáng)選擇培養(yǎng)基大腸埃希菌 產(chǎn)酸 桃紅色乳糖發(fā)酵菌落傷寒沙門菌 無色乳糖不發(fā)酵菌落膽鹽、煌綠：抑制大腸埃希菌及G+菌，提高腸道致病菌檢出率乳糖發(fā)酵中性紅呈紅色乳糖不發(fā)酵 SS培養(yǎng)基（沙門志賀培養(yǎng)基）強(qiáng)選擇培養(yǎng)基大腸埃希菌 EMB（伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基），乳糖、伊紅、美蘭弱選擇培養(yǎng)基大腸埃希菌（非致病菌）乳糖發(fā)酵產(chǎn)酸伊紅結(jié)合美藍(lán)形成紫黑色金屬光澤化合物有色的乳糖發(fā)酵菌落傷寒沙門菌等（致病菌）乳糖不發(fā)酵伊紅美藍(lán)不能結(jié)合無色的乳糖不發(fā)酵菌落EMB（伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基），乳糖、伊紅、美蘭弱選擇培養(yǎng)基大腸埃3)生化反應(yīng) 非常活潑。發(fā)酵葡萄糖（產(chǎn)酸或產(chǎn)酸產(chǎn)氣） 、觸

4、酶陽性、氧化酶陰性、硝酸鹽還原陽性4）抗原結(jié)構(gòu)：O抗原 菌體抗原H抗原 菌毛抗原表面抗原3)生化反應(yīng) 非?；顫?。發(fā)酵葡萄糖（產(chǎn)酸或產(chǎn)酸產(chǎn)氣） 、5）變異性 多樣。如S-R變異、H-O變異，生化反應(yīng)變異、耐藥性變異 6）抵抗力 不強(qiáng)。加熱6030min既被殺死，對干燥、化學(xué)消毒劑敏感、耐低溫、耐膽鹽、煌綠（可抑制非致病菌）5）變異性 多樣。如S-R變異、H-O變異，生化反應(yīng)變異臨床意義（一）腸道外感染除志賀菌外，多數(shù)腸桿菌科細(xì)菌均可引起腸道外感染，且往往為獲得性的感染鼠疫耶爾森菌可引起自然疫源烈性傳染病鼠疫，傷寒沙門菌可經(jīng)糞口傳播引起血流感染（二）腸道內(nèi)感染是人和動物腸道感染的重要病原菌。比較明

5、確的腸道病原菌有埃希菌屬、志賀菌屬、沙門菌屬和耶爾森菌屬等臨床意義（一）腸道外感染微生物檢驗KIA（AA）MIU（）IMVC:微生物檢驗KIA（AA）MIU（）IMVC:第二節(jié) 埃希菌屬第二節(jié) 埃希菌屬埃希菌屬主要有5個種，1）大腸埃希菌 臨床最常見2）蟑螂埃希菌3）弗格森埃希菌4）赫爾曼埃希菌5）傷口埃希菌革蘭陰性需氧和兼性厭氧桿菌檢驗課件一、生物學(xué)特性形態(tài)與染色 為革蘭陰性短桿狀，多數(shù)有周鞭毛和菌毛培養(yǎng)特性 兼性厭氧，營養(yǎng)要求不高，在血瓊脂平板上某些菌株可產(chǎn)生-溶血，在SS瓊脂平板上少數(shù)菌株可發(fā)酵乳糖，形成粉紅色菌落。在麥康凱平板上菌落呈粉紅色。在伊紅美藍(lán)瓊脂平板上呈有金屬光澤的紫黑色菌落

6、。在液體培養(yǎng)基中，呈渾濁生長一、生物學(xué)特性形態(tài)與染色 為革蘭陰性短桿狀，多數(shù)有周鞭毛和一、生物學(xué)特性生化反應(yīng)特征：發(fā)酵多種糖，產(chǎn)酸、產(chǎn)氣KIA產(chǎn)酸/產(chǎn)酸、產(chǎn)氣IMViC中4個試驗的結(jié)果為MIU中3個試驗結(jié)果為氧化型發(fā)酵型產(chǎn)堿型陽性:紅色陰性:淡黃色 硝酸鹽還原實驗OF實驗一、生物學(xué)特性生化反應(yīng)特征：氧化型發(fā)酵型產(chǎn)堿型陽性:紅色陰性一、生物學(xué)特性4. 抗原構(gòu)造1)O（菌體）抗原：脂多糖，耐熱2)H（鞭毛）抗原：蛋白質(zhì)，不耐熱3)K（表面）抗原：莢膜多糖，耐熱，能阻止O抗原凝集反應(yīng)一、生物學(xué)特性4. 抗原構(gòu)造一、生物學(xué)特性5.抵抗力 自然狀態(tài)下較強(qiáng)。加熱6030min既被殺死， 耐低溫，對常用化學(xué)

7、消毒劑敏感、對膽鹽、煌綠有選擇性抑制作用，對鏈霉素、卡那霉素等敏感，但易耐藥一、生物學(xué)特性5.抵抗力 自然狀態(tài)下較強(qiáng)。加熱6030m二、臨床意義1.致病因素1）侵襲力： K抗原和菌毛與侵襲力有關(guān)。K抗原有抗吞噬作用，菌毛有黏附作用2）內(nèi)毒素 ：細(xì)胞壁上的脂多糖（LPS）3）腸毒素： 大腸埃希菌可產(chǎn)生兩種腸毒素：一種是不耐熱腸毒素（LT）；另一種是耐熱腸毒素（ST）二、臨床意義1.致病因素二、臨床意義2.所致疾病1）腸道外感染 大腸埃希菌是臨床分離的革蘭陰性桿菌中最常見的菌種，可引起各種類型的感染，主要是引起人類泌尿系感染腸道外感染（多為內(nèi)源性感染）化膿性感染定位轉(zhuǎn)移腹膜炎、闌尾炎、創(chuàng)傷感染、手

8、術(shù)刀口感染等泌尿道感染病原菌來自病人腸道（上行性）占泌尿道感染首位、女性多見（尿道炎、膀胱炎、腎盂腎炎等）二、臨床意義2.所致疾病腸道外感染（多為內(nèi)源性感染）二、臨床意義2）腸道內(nèi)感染 是人和動物腸道的正常菌群，但其中有些菌株能引起輕微腹瀉至霍亂樣嚴(yán)重腹瀉，根據(jù)其不同的血清型別、毒力和所致臨床癥狀的不同，將引起人腹瀉的大腸埃希菌分為5類：二、臨床意義2）腸道內(nèi)感染 是人和動物腸道的正常菌群，但三、微 生物學(xué)常規(guī)檢驗1.標(biāo)本采集腸外感染的標(biāo)本：取血液、痰液、膿液、分泌物等腸內(nèi)感染的標(biāo)本：取腹瀉和食物中毒者的糞便、肛拭和殘留食物三、微 生物學(xué)常規(guī)檢驗三、微 生物學(xué)常規(guī)檢驗2.腸道外感染標(biāo)本的常規(guī)檢

9、驗）檢驗程序）檢驗方法直接檢查分離培養(yǎng)鑒定（KIA、MIU）3.腸道內(nèi)感染標(biāo)本的常規(guī)檢驗1)分離培養(yǎng)：選擇培養(yǎng)基2)鑒定：生化反應(yīng)、血清學(xué)試驗、毒素或毒力試驗三、微 生物學(xué)常規(guī)檢驗2.腸道外感染標(biāo)本的常規(guī)檢驗第三節(jié) 沙門菌屬第三節(jié) 沙門菌屬 案例 一男性病人，高熱10天，有納差、腹部不適、全身酸痛的前驅(qū)癥狀。腹部有壓痛，肝脾腫大。肥達(dá)試驗：H 1:40，O1：160，PA1：20，PB1:20。醫(yī)生懷疑病人得了腸熱癥。請問：1、為明確診斷，應(yīng)采集哪些標(biāo)本來進(jìn)行微生物學(xué)檢驗？ 2、所采集的標(biāo)本應(yīng)做哪些微生物學(xué)檢驗才能有助于疾病的診斷？ 3、為了明確診斷，是否還可以再抽血做肥達(dá)試驗？ 案例 一男性

10、病人，一、生物學(xué)特性1.形態(tài)與染色 革蘭陰性桿菌，不產(chǎn)生芽孢，無莢膜，除少數(shù)菌株（雞沙門菌和雛沙門菌）外，一般都有周鞭毛，能運動一、生物學(xué)特性1.形態(tài)與染色一、生物學(xué)特性2.培養(yǎng)特性 兼性厭氧，對營養(yǎng)的要求不高，在普通營養(yǎng)瓊脂平板上生長的菌落為半透明、S型菌落，可出現(xiàn)粗糙型的菌落（S-R）變異。 在腸道選擇性培養(yǎng)基上因不發(fā)酵乳糖，菌落透明或半透明，有些能產(chǎn)生硫化氫的菌株，在SS瓊脂平板上可形成中心黑色的菌落一、生物學(xué)特性2.培養(yǎng)特性一、生物學(xué)特性3.生化反應(yīng) 發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸、產(chǎn)氣（傷寒沙門菌不產(chǎn)氣），不發(fā)酵乳糖。 多數(shù)沙門菌反應(yīng)特征為：KIA：KA+，MIU：+-，IMViC：-+-+/-一、

11、生物學(xué)特性3.生化反應(yīng)二、臨床意義1、致病因素1侵襲力 菌毛和Vi抗原構(gòu)成2內(nèi)毒素 3腸毒素 2、所致疾病 沙門菌主要通過污染食品和水源經(jīng)口感染1.臨床常見傷寒和副傷寒：腸熱癥 2.胃腸炎3.菌血癥或敗血癥 4.攜帶者二、臨床意義1、致病因素二、臨床意義菌毛穿入淋巴液胸導(dǎo)管第二次菌血癥遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)腸壁壞死、潰瘍高熱、肝脾腫大、玫瑰疹、白細(xì)胞等全身中毒癥狀肝 脾 腎 淋巴結(jié) 膽囊尿排菌 糞便排菌發(fā)病期（1-4W）潛伏期2W腸熱癥傷寒沙門菌等經(jīng)口吸附小腸黏膜細(xì)胞上在腸壁、腸系膜淋巴組織中繁殖（致敏）血流（第一次菌血癥）腸出血、腸穿孔二、臨床意義菌毛穿入淋巴液胸導(dǎo)管第二次菌血癥遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)高三、

12、微生物檢驗標(biāo)本采集1周取血，2、3周取糞，3周取尿液，全病程骨髓，血清學(xué)診斷應(yīng)在病程的不同時期分別采集23份標(biāo)本食物中毒：糞便、嘔吐物、可疑食物帶菌者：糞便尿液：中段尿離心后取沉淀物分離鑒定增菌（血、骨髓）EMB、SS生化反應(yīng)血清鑒定三、微生物檢驗標(biāo)本采集三、微生物檢驗三、微生物檢驗三、微生物檢驗鑒定1）生化反應(yīng)鑒定：可以菌落革蘭染色，若為革蘭陰性桿菌，進(jìn)行氧化酶、觸酶和硝酸鹽還原試驗，氧化酶陰性，后兩者為陽性者可做KIA和MIU等生化反應(yīng)進(jìn)一步鑒定KIA（K A）MIU（）三、微生物檢驗鑒定KIA（K A）四、微生物檢驗2）血清學(xué)鑒定定屬：多價O抗血清對沙門菌分離株進(jìn)行定屬定群：每個O血清群

13、的單價因子血清定群定型：用單價H因子血清與待測菌做玻片凝集試驗3）血清學(xué)診斷（肥達(dá)試驗）用已知的傷寒沙門菌O.H抗原、副傷寒沙門菌A、B、C的H抗原，檢測受檢血清中有無相應(yīng)的抗體的半定量凝集試驗。結(jié)果解釋：正常值傷寒沙門菌O抗體效1:80，H 抗體效價1:160，副傷寒沙門菌 A、B、C的H抗體效價 1:80才有臨床意義四、微生物檢驗2）血清學(xué)鑒定第四節(jié) 志賀菌屬第四節(jié) 志賀菌屬 案例 男性，35歲。因腹痛，膿血便2天來診。 患者3天前出差回來后突然發(fā)熱達(dá)38，無寒戰(zhàn)，同時有腹痛、腹瀉，大便每日10余次，為少量膿血粘液便，伴里急后重。醫(yī)生接診后，懷疑患者患了細(xì)菌性痢疾。 請問：1、為做病原學(xué)上

14、的檢查，應(yīng)該采集什么標(biāo)本？ 2、應(yīng)該選用什么標(biāo)本來進(jìn)行分離培養(yǎng)？對可疑菌落需做哪些生化反應(yīng)和血清學(xué)試驗來鑒定？ 案例 男性志賀菌屬細(xì)菌是引起人類細(xì)菌性痢疾的主要腸道病原菌之一志賀菌屬可用特異性抗血清將其分為4個血清群（種）：A群為痢疾志賀菌：癥狀最重B群為福氏志賀菌：我國多見C群為鮑特志賀菌D群為宋內(nèi)志賀菌：癥狀最輕，我國多見志賀菌屬細(xì)菌是引起人類細(xì)菌性痢疾的主要腸道病原菌之一一、生物學(xué)特性1.形態(tài)與染色為革蘭陰性短桿菌，無芽胞，無莢膜，無鞭毛，某些菌株有菌毛2.培養(yǎng)特性兼性厭氧，營養(yǎng)要求不高，在腸道鑒別培養(yǎng)基上可形成乳糖不發(fā)酵、中等大小、無色半透明的菌落，宋內(nèi)志賀菌常形成粗糙型菌落，且能遲緩

15、分解乳糖，培養(yǎng)48h后可形成乳糖發(fā)酵的粉紅色菌落。一、生物學(xué)特性1.形態(tài)與染色一、生物學(xué)特性3.生化反應(yīng)發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，不發(fā)酵乳糖。KIA：KA-；MIU：-/+-；IMViC：-/+-一、生物學(xué)特性3.生化反應(yīng)KIA：KA-；MIU：-/+-一、生物學(xué)特性4、抗原構(gòu)造與分類志賀菌屬菌種有O抗原，無H抗原，部分菌種有K抗原。O抗原是分類的依據(jù)，有群特異性和型特異性兩種抗原。根據(jù)生化反應(yīng)和O抗原的不同，將志賀菌屬分為4個血清群（A、B、C、D）和40余個血清型A群 痢疾志賀菌B群 福氏志賀菌（）C群 鮑氏志賀菌D群 宋內(nèi)志賀菌（）一、生物學(xué)特性4、抗原構(gòu)造與分類一、生物學(xué)特性5.變異性（1

16、）S-R變異：宋內(nèi)志賀菌（診斷血清中含有兩相血清）（2）耐藥性變異（3）毒力變異6.抵抗力本屬細(xì)菌對理化因素的抵抗力較其他腸桿菌科細(xì)菌為低。對酸較敏感，在運送培養(yǎng)時須使用含有緩沖劑的培養(yǎng)基，以免被糞便中其他細(xì)菌代謝中的酸所殺死。一、生物學(xué)特性5.變異性二、臨床意義致病因素1）侵襲力2）內(nèi)毒素：志賀菌主要致病物質(zhì)3）外毒素2.所致疾病 主要引起人類細(xì)菌性痢疾，主要有以下3種臨床類型：1）急性細(xì)菌性痢疾2）慢性菌痢3）帶菌者二、臨床意義致病因素二、臨床意義細(xì)菌（菌毛）吸附腸黏膜上皮細(xì)胞穿入細(xì)胞并擴(kuò)散周圍及深入黏膜下層釋放內(nèi)毒素、外毒素腸局部黏膜炎癥（變性、壞死、脫落）出血、壞死、潰瘍膿血便/黏液血

17、便刺激腸壁植物神經(jīng)腸蠕動腸肌痙攣腺體分泌水分吸收腹痛、腹瀉刺激直腸肛門括約肌里急后重便數(shù)增加吸收入血發(fā)熱、白細(xì)胞高熱、休克中毒性腦病DIC死亡毒血癥中毒性菌痢二、臨床意義細(xì)菌（菌毛）吸附腸黏膜上皮細(xì)胞穿入細(xì)胞并擴(kuò)散周圍三、微生物學(xué)檢驗1.標(biāo)本采集 取糞便或肛拭標(biāo)本。 發(fā)病早期采集黏液膿血便做床邊接種。 若不能及時送檢（甘油保存液或卡-布運送培養(yǎng)基內(nèi)）三、微生物學(xué)檢驗三、微生物學(xué)檢驗KIA（KA）MIU（）IMVC（） 三、微生物學(xué)檢驗KIA（KA）MIU（）IMVC（三、微生物學(xué)檢驗3.檢驗方法1）分離培養(yǎng)2）鑒定 先進(jìn)行氧化酶、觸酶和硝酸鹽還原試驗（-+） 后做KIA和MIU等生化反應(yīng)試驗三

18、、微生物學(xué)檢驗第五節(jié) 克雷伯菌屬第五節(jié) 克雷伯菌屬克雷伯菌屬：腸桿菌科中的一屬，為條件致病菌，臨床感染中以肺炎克雷伯菌多見，也是引起醫(yī)院感染的重要病原菌革蘭陰性需氧和兼性厭氧桿菌檢驗課件一、生物學(xué)特性1.形態(tài)與染色肺炎克雷伯菌為革蘭陰性桿菌，單個、成雙或者短鏈狀排列，有明顯莢膜，無芽孢，無鞭毛，有菌毛2.培養(yǎng)特性兼性厭氧，營養(yǎng)要求不高，在普通瓊脂平板上，形成較大、灰白色、黏液型的菌落，相鄰菌落容易發(fā)生融合，用接種針沾取時可挑出長絲狀細(xì)絲在麥康凱或SS瓊脂平板上，形成較大、紅色、黏液型菌落。在血平板上不溶血。粘絲試驗BAP菌落特征染色形態(tài)一、生物學(xué)特性1.形態(tài)與染色粘絲試驗BAP菌落特征染色形態(tài)

19、一、生物學(xué)特性3.生化反應(yīng) 分解葡萄糖、乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，KIA：AA+-；MIU：-+；IMViC:-+4.抗原結(jié)構(gòu)：O抗原K抗原：莢膜多糖，用以分型一、生物學(xué)特性3.生化反應(yīng) 二、臨床意義克雷伯菌屬的細(xì)菌多感染免疫力低下的人群，是醫(yī)院感染中最重要的條件致病菌肺炎克雷伯菌是臨床標(biāo)本中常見的細(xì)菌，可引起典型的原發(fā)性肺炎肺炎克雷伯菌肺炎亞種還能引起各種肺外感染二、臨床意義克雷伯菌屬的細(xì)菌多感染免疫力低下的人群，是醫(yī)院感三、微生物學(xué)檢驗1.采集標(biāo)本 主要有痰液、血液、尿液、膿、腦脊液、糞便、胸腹水等。2.檢驗方法1）直接檢查：膿、痰直接涂片染色鏡檢，尿、腦脊液取離心沉渣涂片染色鏡檢?？梢姼锾m陰性球桿菌

20、，有明顯的莢膜。2）分離培養(yǎng)：血液、腦脊液標(biāo)本先經(jīng)肉湯增菌培養(yǎng)，其他標(biāo)本接種血平板或麥康凱瓊脂平板進(jìn)行分離培養(yǎng)。3）鑒定生化反應(yīng)：革蘭染色，氧化酶、觸酶和硝酸酶、KIA、MIU、IMViC 莢膜腫脹試驗三、微生物學(xué)檢驗1.采集標(biāo)本 主要有痰液、血液、尿液、膿第六節(jié) 變形桿菌屬第六節(jié) 變形桿菌屬變形桿菌屬是腸桿菌科中的一菌屬，是一群動力活潑、產(chǎn)硫化氫、可形成遷徙生長，是條件致病菌和醫(yī)院感染的常見菌。變形桿菌屬是腸桿菌科中的一菌屬，是一群動力活潑、產(chǎn)硫化氫、可1.形態(tài)與染色 革蘭陰性桿菌，呈多形性，有周身鞭毛，運動活潑，無芽胞，無莢膜。2.培養(yǎng)特性 兼性厭氧，對營養(yǎng)無特殊要求，在營養(yǎng)瓊脂和血瓊脂平

21、板上，普通變形桿菌和奇異變形桿菌多呈遷徙生長，是本屬細(xì)菌的重要特征。在腸道選擇培養(yǎng)基上，形成透明或半透明的無色菌落。產(chǎn)生硫化氫，在SS平板上形成無色黑心菌落。普通變形桿菌、奇異變形桿菌的一些菌株和產(chǎn)黏變形桿菌在血平板上溶血。一、生物學(xué)特性1.形態(tài)與染色 革蘭陰性桿菌，呈多形性，有周身鞭毛，運動3.生化反應(yīng) 分解葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，不分解乳糖； KIA：KA+；MIU:+/-+； IMViC:+/-+- 迅速分解尿素（2-4h），苯丙氨酸脫氨酶試驗陽性4.抗原構(gòu)造 變形桿菌X19、X2、Xk菌株的O抗原,即OX19、OX2和OXK某些立克次體有共同抗原成分，臨床上用OX19、OX2和OXK代替立克次

22、體的抗原，與病人血清進(jìn)行凝集試驗，用以輔助診斷立克次體病，此試驗稱為外斐試驗。一、生物學(xué)特性3.生化反應(yīng) 分解葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，不分解乳糖；一、生物學(xué)特性二、臨床意義變形桿菌屬中由普通變形桿菌、奇異變形桿菌引起的感染最為常見。主要引起泌尿系感染，發(fā)病率僅次于大腸埃希菌，醫(yī)源性感染較多見 。此外還可以引起食物中毒、呼吸道感染、創(chuàng)口感染及多個部位感染等。二、臨床意義變形桿菌屬中由普通變形桿菌、奇異變形桿菌引起的感1、標(biāo)本采集 有血液、尿、腦脊液、膿液、痰液、糞便，可疑食物等。2、檢驗方法1）直接檢查2）分離培養(yǎng)3）鑒定4）鑒別三、微生物學(xué)檢驗1、標(biāo)本采集 有血液、尿、腦脊液、膿液、痰液、糞便，可疑第

23、七節(jié) 腸桿菌屬第七節(jié) 腸桿菌屬廣泛存在于污水、土壤和蔬菜中，是腸道正常菌叢的成員，能引起多種條件致病性感染。臨床上常見的有：產(chǎn)氣腸桿菌、陰溝腸桿菌、坂崎腸桿菌、泰洛腸桿菌、聚團(tuán)腸桿菌、格高菲腸桿菌5個菌種。廣泛存在于污水、土壤和蔬菜中，是腸道正常菌叢的成員，能引起多1、形態(tài)與染色 革蘭陰性粗短桿菌，有周身鞭毛，無芽胞，部分菌株有莢膜2、培養(yǎng)特性 兼性厭氧，營養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基上能夠生長，形成較大的、灰白色或黃色的黏液狀菌落，在腸道選擇培養(yǎng)基上，形成發(fā)酵乳糖的紅色菌落。3、生化特性 多數(shù)菌株分解葡萄糖、乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣；KIA：AA+-；MIU：+-/+；IMViC:-+一、生物學(xué)特性1、形態(tài)

24、與染色 革蘭陰性粗短桿菌，有周身鞭毛，無芽胞，部腸桿菌屬廣泛存在于自然環(huán)境中，是腸道正常菌群的成員，能引起醫(yī)院感染中多種條件致病性感染在臨床標(biāo)本中最常檢出的是陰溝腸桿菌和產(chǎn)氣腸桿菌，能引起呼吸道、泌尿道及傷口感染，也可引起敗血癥、腦膜炎等。坂崎腸桿菌能引起新生兒腦膜炎和菌血癥，死亡率高達(dá)75二、臨床意義腸桿菌屬廣泛存在于自然環(huán)境中，是腸道正常菌群的成員，能引起醫(yī)1.標(biāo)本采集 血液、尿液、膿液、痰液、腦脊液等。2.檢驗方法 1）直接檢驗2）分離培養(yǎng)3）鑒定MAC上稍大而粘稠的菌落SS上如果生長，為白色或乳白色、不透明粘稠狀的菌落三、微生物學(xué)檢驗1.標(biāo)本采集 血液、尿液、膿液、痰液、腦脊液等。三、

25、微第八節(jié) 其他常見腸桿 菌科細(xì)菌第八節(jié) 其他常見腸桿 菌科細(xì)菌一、沙雷菌屬二、耶爾森菌屬三、愛德華菌屬四、枸櫞酸桿菌屬五、哈夫尼亞菌屬一、沙雷菌屬一、沙雷菌屬一、沙雷菌屬 沙雷菌屬是腸桿菌科中能引起醫(yī)院感染的一個重要的菌屬，臨床標(biāo)本中以黏質(zhì)沙雷菌最常見。條件致病菌，可引起肺炎、敗血癥、腦膜炎、心內(nèi)膜炎、泌尿道感染等。佩戴隱形眼鏡所引起的紅眼病。 沙雷菌屬是腸桿菌科中能引起醫(yī)院感染的一個重要的菌屬，1、形態(tài)與染色 本屬細(xì)菌為革蘭陰性小桿菌，有周身鞭毛，能運動，氣味沙雷菌有微莢膜，其余菌種無莢膜、無芽胞。黏質(zhì)沙雷菌是細(xì)菌中最小者，可用于檢查除菌濾器的除菌效果2、培養(yǎng)特性 兼性厭氧，營養(yǎng)要求不高，在

26、營養(yǎng)瓊脂上能夠生長，形成不透明，白色或有色（紅色、粉紅色）的菌落。色素的產(chǎn)生在室溫中更為明顯。所產(chǎn)生的兩種不同色素是：非水溶性的靈菌紅素和水溶性的吡羧酸。在伊紅美藍(lán)和麥康凱瓊脂平板上形成無色的大而粘稠的菌落。一、生物學(xué)特性1、形態(tài)與染色 本屬細(xì)菌為革蘭陰性小桿菌，有周身鞭毛，能該菌曾一度被認(rèn)為是無害的環(huán)境污染菌，但由于該菌具有侵襲性并對許多常用抗菌藥物有耐藥性，現(xiàn)已成為一種重要的條件病原菌黏質(zhì)沙雷菌是引起腸道外感染的主要病原菌，與許多醫(yī)院內(nèi)感染的暴發(fā)流行有關(guān)二、臨床意義該菌曾一度被認(rèn)為是無害的環(huán)境污染菌，但由于該菌具有侵襲性并對KIA：KA-MIU：+-IMViC：-/+賴氨酸、鳥氨酸、精氨酸

27、：+-DNA酶陽性三、生化反應(yīng)KIA：KA-三、生化反應(yīng)二、耶爾森菌屬二、耶爾森菌屬 與人類疾病密切相關(guān)的有3個菌種，包括鼠疫耶爾森菌、小腸結(jié)腸炎耶爾森菌、假結(jié)核耶爾森菌，都是人畜共患病病原菌。 與人類疾病密切相關(guān)的有3個菌種，包括鼠疫耶爾森菌、小腸結(jié)腸鼠疫耶爾森菌在我國傳染病防治法中被列為甲類傳染病，曾在世界上造成多次大流行，引起大批患者死亡，造成人類重大災(zāi)害，由于世界上鼠疫自然疫源尚未全部消滅，至今仍有人間或鼠間流行，因此，必須予以重視。鼠疫耶爾森菌有兩種毒素：內(nèi)毒素和鼠毒素臨床類型 有3種常見的臨床類型：（1）腺鼠疫（2）敗血型鼠疫（3）肺鼠疫此外尚有較為少見的皮膚鼠疫、腸鼠疫、腦膜炎型

28、鼠疫、眼鼠疫等鼠疫耶爾森菌鼠疫耶爾森菌在我國傳染病防治法中被列為甲類傳染病，曾在世界上為革蘭染色陰性直桿狀或球桿狀，兩端鈍圓，兩極濃染，有莢膜，無芽孢，無鞭毛鼠疫耶爾森菌兼性厭氧，耐低溫，在443均能生長，最適生長溫度為2528，最適pH為6972。在普通培養(yǎng)基上可生長，但發(fā)育緩慢。在血瓊脂平板上培養(yǎng)以37最好，48小時后形成柔軟、粘稠的粗糙菌落。在肉湯培養(yǎng)基中開始混濁生長，24小時后表現(xiàn)為沉淀生長，48小時后逐漸形成菌膜，稍加搖動后菌膜呈鐘乳石狀下垂。肝臟新鮮壓片顯微鏡下形態(tài)特征為革蘭染色陰性直桿狀或球桿狀，兩端鈍圓，兩極濃染，有莢膜，無鼠疫耶爾森菌檢驗程序鼠疫耶爾森菌傳染性極強(qiáng)屬于危害程度

29、第二類的病原微生物采取嚴(yán)格的防護(hù)措施并嚴(yán)格遵守實驗室對烈性傳染病的操作規(guī)程方可進(jìn)行操作鼠疫耶爾森菌檢驗程序鼠疫耶爾森菌傳染性極強(qiáng)鼠疫耶爾森菌分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，對大多數(shù)糖不分解；KIA：KA-；MIU：-；IMViC：-+-；賴氨酸、鳥氨酸、精氨酸：-；不液化明膠；當(dāng)穿刺培養(yǎng)時，培養(yǎng)物表面成膜狀，細(xì)菌沿穿刺線呈縱樹狀生長。鼠疫耶爾森菌分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，對大多數(shù)糖不分解；KIA：小腸結(jié)腸炎耶爾森菌小腸結(jié)腸炎耶爾森菌可寄居在鼠、家畜和兔多種動物體內(nèi)，多表現(xiàn)為小腸炎和結(jié)腸炎，癥狀與菌痢和闌尾炎相似。小腸結(jié)腸炎耶爾森菌為革蘭陰性球桿菌，無芽孢，無莢膜，22-25培養(yǎng)有周鞭毛，呈翻滾螺旋狀運動，3

30、5無動力。兼性厭氧，耐低溫。具有嗜冷性，在4增菌3周可分離純化；25時動力+，37時動力-;VP試驗25時+，37時-；KIA：KA-；賴氨酸、鳥氨酸、精氨酸：-+-小腸結(jié)腸炎耶爾森菌小腸結(jié)腸炎耶爾森菌可寄居在鼠、家畜和兔多種小腸結(jié)腸炎耶爾森菌檢驗程序小腸結(jié)腸炎耶爾森菌檢驗程序三、愛德華菌屬三、愛德華菌屬四、枸櫞酸桿菌四、枸櫞酸桿菌枸櫞酸桿菌屬枸櫞酸桿菌屬以前僅有3個種，即弗勞地枸櫞酸桿菌，異型枸櫞酸桿菌和無丙二酸鹽枸櫞酸桿菌。枸櫞酸桿菌屬是人和動物腸道的正常菌群，也是條件致病菌，能引起腹瀉和腸道外感染如菌血癥、腦膜炎和腦膿腫等枸櫞酸桿菌屬枸櫞酸桿菌屬以前僅有3個種，即弗勞地枸櫞酸桿菌，本菌屬

31、是腸桿菌科中的一屬，為條件致病菌與臨床及醫(yī)院感染相關(guān)的病原菌主要是弗勞地枸櫞酸桿菌，科澤枸櫞酸桿菌和布拉克枸櫞酸桿菌臨床最常見的感染部位是泌尿道，常為老年男性患者（65歲）此外還可引起菌血癥、腹瀉、某些腸道外感染及多菌混合感染，導(dǎo)致延長住院時間及死亡科澤枸櫞酸桿菌還可引起嬰幼兒腦膜炎和腦膿腫本菌屬是腸桿菌科中的一屬，為條件致病菌1、形態(tài)與染色 本屬細(xì)菌為革蘭陰性桿菌，有周身鞭毛、無芽孢、無莢膜2、培養(yǎng)特性 兼性厭氧，營養(yǎng)要求不高，在MAC、EBME、SS上為無色透明或紅色。弗勞地枸櫞酸桿菌可產(chǎn)生硫化氫，在SS瓊脂上形成有黑色中心的菌落。本菌屬的部分生化特性和抗原結(jié)構(gòu)（O抗原）與沙門菌屬相似，應(yīng)

32、注意鑒別1、形態(tài)與染色 本屬細(xì)菌為革蘭陰性桿菌，有周身鞭毛、無芽 3.枸櫞酸桿菌的基本生化反應(yīng)特征：三糖鐵瓊脂中產(chǎn)酸/產(chǎn)酸產(chǎn)氣或產(chǎn)堿/產(chǎn)酸、產(chǎn)氣、產(chǎn)生硫化氫，枸櫞酸鹽陽性，脲酶陰性/陽性，吲哚陽性/陰性，動力陽性，VP陰性，鳥氨酸陽性/陰性，精氨酸陽性，賴氨酸陰性枸櫞酸桿菌屬與類似菌屬的鑒別 3.枸櫞酸桿菌的基本生化反應(yīng)特征：三糖鐵瓊脂中產(chǎn)酸/產(chǎn)酸產(chǎn)腸桿菌科小結(jié)腸桿菌科細(xì)菌是革蘭陰性桿菌中最主要的成員，也是臨床最常見的病原菌，是臨床泌尿道、呼吸道、腸道、腹腔和盆腔等感染的常見病原菌現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)與人類感染有關(guān)的腸桿菌科細(xì)菌有33個菌屬，約有40種以上的腸桿菌科的細(xì)菌可在臨床標(biāo)本中檢測出腸桿菌科細(xì)菌為

33、革蘭陰性桿狀或球桿狀、無芽孢、多數(shù)有鞭毛，能運動，有致病性的菌株多數(shù)有菌毛腸桿菌科小結(jié)腸桿菌科細(xì)菌是革蘭陰性桿菌中最主要的成員，也是臨需氧或兼性厭氧，營養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基上生長良好主要生化特性為發(fā)酵葡萄糖、觸酶陽性、氧化酶陰性、硝酸鹽還原陽性革蘭氏陰性桿菌除腸桿菌科外，還有弧菌科和非發(fā)酵菌，所以首先應(yīng)與這些菌進(jìn)行鑒別，鑒別可用形態(tài)、葡萄糖氧化或發(fā)酵、氧化酶、鞭毛等加以區(qū)別腸桿菌科細(xì)菌的檢驗要點為直接涂片檢查，分離培養(yǎng)，細(xì)菌鑒定，必要時還要作血清學(xué)鑒定及毒素檢測需氧或兼性厭氧，營養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基上生長良好實驗室抗菌藥物敏感試驗抗菌藥物的選擇，需參照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上，咨詢醫(yī)院相關(guān)專業(yè)

34、人士，結(jié)合醫(yī)院的具體情況來選擇實驗室提供的抗菌藥物敏感試驗結(jié)果對臨床合理使用抗生素意義重大同時細(xì)菌的耐藥譜，還可作為醫(yī)院感染流行病學(xué)調(diào)查的一個重要實驗室依據(jù)實驗室抗菌藥物敏感試驗抗菌藥物的選擇，需參照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上弧菌科弧菌科案例 2014年9月19日下午5點，李滄區(qū)下午5點，李滄區(qū)疾控中心接到市八醫(yī)的電話報告：9月19日下午4：00，該院腸道門診接診2例腹瀉病患者，癥狀相似，腹瀉十余次，嘔吐四次。截止7點，該院已累計收治了7例疑似霍亂病人，病人的臨床表現(xiàn)劇烈腹瀉，先瀉后吐，無腹痛、無發(fā)熱，發(fā)病時間分別為9月18、19日。區(qū)疾控中心應(yīng)急處置分隊對7例病人進(jìn)行了個案流行病學(xué)檢查，發(fā)現(xiàn)7例病人均

35、為附近某小區(qū)居民，9月17日中午，均參加了村民姜先生在手拉手餐館舉辦的結(jié)婚午宴，同時霍亂快診O139陽性。請問：1：結(jié)合臨床表現(xiàn)，你初步懷疑什么菌感染？2：應(yīng)采集幾級防護(hù)？除個人防護(hù)用品外，還應(yīng)準(zhǔn)備什么？3：霍亂采樣的注意事項有哪些？應(yīng)做哪些微生物學(xué)檢查？ 案例一、弧菌屬弧菌屬分布廣泛，以水中最多。人類致病的主要有霍亂弧菌和副溶血性弧菌，分別引起霍亂和食物中毒。一、弧菌屬（一）霍亂弧菌 霍亂弧菌是霍亂的病原菌，該病為一種急性烈 性腸道傳染病，發(fā)病急，傳染性強(qiáng)，病死率高，屬于國際檢疫傳染病，為我國甲類傳染病。 霍亂弧菌包括兩個生物型：古典生物型和埃爾托（Eltor）生物型。（一）霍亂弧菌一、生物

36、學(xué)特性1.形態(tài)與染色 革蘭陰性，弧形或逗點狀，單端鞭毛，運動活潑。取患者米泔樣糞便作懸滴觀察，可見該菌呈穿梭樣或流星狀運動，做涂片染色鏡檢，可見“魚群狀”排列一、生物學(xué)特性1.形態(tài)與染色 革蘭陰性，弧形或逗點狀，2、培養(yǎng)特性 需氧或兼性厭氧菌，營養(yǎng)要求不高，最適溫度35，耐堿不耐酸，最適pH8.8-9.9,在堿性蛋白胨水中，經(jīng)35培養(yǎng)6-9h形成菌膜，可達(dá)快速增菌目的。在堿性瓊脂平板上，形成較大、圓形、扁平、無色透明或半透明似水滴狀菌落。在TCBS上，因發(fā)酵蔗糖產(chǎn)酸形成較大黃色菌落。在亞碲酸鉀瓊脂平板上，菌落中心呈灰褐色。在血平板上，Eltor生物型有溶血。2、培養(yǎng)特性 需氧或兼性厭氧菌，營養(yǎng)

37、要求不高，最適溫度33、生化反應(yīng) 4、抗原結(jié)構(gòu)及分型 H抗原 弧菌屬所共有，特異性低O抗原 特異性高，O1和O139群引起霍亂，O1型根據(jù)特異性分為古典生物型和埃爾托生物型5、抵抗力 抵抗力弱，不耐熱，耐堿不耐酸。埃爾托（Eltor）生物型較古典生物型強(qiáng)。3、生化反應(yīng) 1、致病物質(zhì) 鞭毛、菌毛和霍亂腸毒素（主要致病物質(zhì)）2、所致疾病 引起霍亂，人是唯一易感者，通過污染的水源或經(jīng)食物經(jīng)口感染。霍亂后可獲得牢固的免疫二、臨床意義1、致病物質(zhì) 鞭毛、菌毛和霍亂腸毒素（主要致病物質(zhì)）二1、標(biāo)本采集 發(fā)病早期及未服抗生素前采樣。可采取患者糞便、嘔吐物或肛拭子。采集標(biāo)本及時接種于堿性蛋白胨水中2、檢驗程序

38、三、微生物學(xué)檢驗1、標(biāo)本采集 發(fā)病早期及未服抗生素前采樣?？刹扇』颊呒S便3、檢驗方法 1）直接鏡檢 革蘭染色鏡檢，如見魚群狀排列的革蘭陰性弧菌，可初步報告。動力及制動試驗：去病人米泔水樣便或嘔吐物，懸滴法鏡檢，可見流星樣運動的細(xì)菌。加入O1群霍亂弧菌多價血清后動力消失，制動試驗陽性，可早期報告2）增菌培養(yǎng) 堿性蛋白胨水 3）分離培養(yǎng) 堿性瓊脂平板和TCBS瓊脂平板4）血清學(xué)鑒定3、檢驗方法 （二）溶血性弧菌 溶血性弧菌是一種嗜鹽性細(xì)菌，主要來自海產(chǎn)品。引起食物中毒。（二）溶血性弧菌一、生物學(xué)特性1、形態(tài)與染色 革蘭陰性，直或微彎的桿狀，在不同培養(yǎng)基上菌體形態(tài)差異較大。兩極濃染，單端鞭毛，運動活

39、潑。一、生物學(xué)特性1、形態(tài)與染色 革蘭陰性，直或微彎的2、培養(yǎng)特性 需氧或兼性厭氧菌，營養(yǎng)要求不高，最適NaCL濃度為3.5%，在無鹽培養(yǎng)基上不生長。在堿性蛋白胨水中，經(jīng)35培養(yǎng)6-9h形成菌膜。在3.5%NaCL瓊脂平板上，呈蔓延生長，菌落周圍不整齊，凸起，光滑濕潤，不透明，在TCBS上，不發(fā)酵蔗糖，菌落綠色（與霍亂弧菌相區(qū)別）。在羊血瓊脂平板上，形成圓形、凸起，光滑濕潤，灰白色菌落，有溶血。在SS平板上，蠟滴狀，不易挑起，挑起有黏絲狀2、培養(yǎng)特性 需氧或兼性厭氧菌，營養(yǎng)要求不高，最適NaC革蘭陰性需氧和兼性厭氧桿菌檢驗課件3、生化反應(yīng) 致病菌株能使人或兔紅細(xì)胞發(fā)生溶血，對馬紅細(xì)胞不溶血，稱

40、神奈川試驗。4、抵抗力 抵抗力弱，不耐熱，耐堿不耐酸。3、生化反應(yīng) 致病菌株能使人或兔紅細(xì)胞發(fā)生溶血，對馬紅細(xì)胞1、致病物質(zhì) 粘附因子（主要為菌毛）、毒素2、所致疾病 引起食物中毒二、臨床意義1、致病物質(zhì) 粘附因子（主要為菌毛）、毒素二、臨床意義1、標(biāo)本采集 采取患者糞便、肛拭、可疑食物。采集標(biāo)本立即送檢，如不能及時送檢，應(yīng)將標(biāo)本置于3.5%NaCL蛋白胨水或卡布培養(yǎng)基中送檢。2、檢驗方法1）增菌培養(yǎng) 3.5%NaCL蛋白胨水2）分離培養(yǎng) TCBS瓊脂平板和3.5%NaCL瓊脂平板3）鑒定三、微生物學(xué)檢驗1、標(biāo)本采集 采取患者糞便、肛拭、可疑食物。采集標(biāo)本立即二、氣單胞菌屬氣單胞菌屬廣泛分布于

41、自然界，可引起腹瀉和腸道外感染二、氣單胞菌屬一、生物學(xué)特性1、形態(tài)與染色 革蘭陰性直桿狀，有時成球桿狀或絲狀，單極鞭毛，運動極為活潑，無芽孢，有窄的莢膜。2、培養(yǎng)特性 需氧或兼性厭氧菌，營養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基上經(jīng)培養(yǎng)，形成微白色半透明菌落；在血平板上，形成較大、扁平菌落，有溶血；在腸道培養(yǎng)基上，形成扁平、無色菌落；在TCBS上，生長不良；液體培養(yǎng)基呈均勻渾濁。3、生化反應(yīng) 發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸，氧化酶和觸酶試驗陽性，在6%NaCL中不生長一、生物學(xué)特性1、形態(tài)與染色 革蘭陰性直桿狀，有時成球1、致病物質(zhì) 溶血毒素和細(xì)胞毒素2、所致疾病 主要引起人類腸內(nèi)感染（腹瀉）和腸外感染（傷口感染和敗血癥）。

42、二、臨床意義1、致病物質(zhì) 溶血毒素和細(xì)胞毒素二、臨床意義1、標(biāo)本采集 采取患者糞便、肛拭、血液、膿液、腦脊液、尿液等標(biāo)本。2、檢驗方法1）直接涂片 革蘭陰性短桿菌，懸滴法細(xì)菌運動活潑2）分離培養(yǎng) 冷增菌3）鑒定）鑒別與腸桿菌科及非發(fā)酵菌的鑒別：本屬氧化酶陽性，能發(fā)酵葡萄糖 與鄰單胞菌和弧菌屬的鑒別：本菌屬對O/129耐藥，TCBS平板上不生長三、微生物學(xué)檢驗1、標(biāo)本采集 采取患者糞便、肛拭、血液、膿液、腦脊液、尿三、鄰單胞菌屬鄰單胞菌屬只有一個種即類志賀鄰單胞菌。引起人類水樣腹瀉和食物中毒。三、鄰單胞菌屬1、染色及形態(tài) 本菌為革蘭陰性桿菌，1-5根極端鞭毛，運動活潑2、培養(yǎng)特性 兼性厭氧，營養(yǎng)

43、要求不高，在腸道選擇鑒別培養(yǎng)基上，形成不發(fā)酵乳糖的無色菌落，TCBS平板上不生長。3、生化反應(yīng) 氧化酶、觸酶試驗陽性，硝酸鹽還原試驗陽性，發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，吲哚試驗陽性，O/129敏感4、鑒別試驗 1） 與志賀菌屬鑒別：氧化酶和動力試驗為陽性，志賀菌屬均為陰性 2）與氣單胞菌和弧菌屬的鑒別：本菌屬對O/129敏感，TCBS平板上不生長1、染色及形態(tài) 本菌為革蘭陰性桿菌，1-5根極端鞭毛，運一、生物學(xué)特性1.形態(tài)與染色 革蘭陰性，直或微彎的桿狀，在不同培養(yǎng)基上菌體形態(tài)差異較大。兩極濃染，單端鞭毛，運動活潑。一、生物學(xué)特性1.形態(tài)與染色 革蘭陰性，直或微彎的2、培養(yǎng)特性 需氧或兼性厭氧菌，營養(yǎng)

44、要求不高，最適NaCL濃度為3.5%，在無鹽培養(yǎng)基上不生長。在堿性蛋白胨水中，經(jīng)35培養(yǎng)6-9h形成菌膜。在3.5%NaCL瓊脂平板上，呈蔓延生長，菌落周圍不整齊，凸起，光滑濕潤，不透明，在TCBS上，不發(fā)酵蔗糖，菌落綠色（與霍亂弧菌相區(qū)別）。在羊血瓊脂平板上，形成圓形、凸起，光滑濕潤，灰白色菌落，有溶血。在SS平板上，蠟滴狀，不易挑起，挑起有黏絲狀2、培養(yǎng)特性 需氧或兼性厭氧菌，營養(yǎng)要求不高，最適NaC1、致病物質(zhì) 粘附因子（主要為菌毛）、毒素2、所致疾病 引起食物中毒二、臨床意義1、致病物質(zhì) 粘附因子（主要為菌毛）、毒素二、臨床意義1、標(biāo)本采集 采取患者糞便、肛拭、可疑食物。采集標(biāo)本立即送

45、檢，如不能及時送檢，應(yīng)將標(biāo)本置于3.5%NaCL蛋白胨水或卡布培養(yǎng)基中送檢。2、檢驗方法1）增菌培養(yǎng) 3.5%NaCL蛋白胨水2）分離培養(yǎng) TCBS瓊脂平板和3.5%NaCL瓊脂平板3）鑒定三、微生物學(xué)檢驗1、標(biāo)本采集 采取患者糞便、肛拭、可疑食物。采集標(biāo)本立即弧菌科小結(jié) 霍亂是烈性傳染病，凡在流行季節(jié)和地區(qū)有腹瀉癥狀的患者均應(yīng)快速準(zhǔn)確作出病原學(xué)診斷。標(biāo)本直接檢查有助于快速診斷。將標(biāo)本直接接種于堿性胨水后，轉(zhuǎn)種TCBS等平板觀察菌落形態(tài)?？梢删鋺?yīng)使用O1群和O139群霍亂弧菌多價和單價抗血清進(jìn)行凝集。結(jié)合菌落特征和菌體形態(tài)，作出初步報告。進(jìn)一步純培養(yǎng)，依據(jù)全面生化反應(yīng)，血清學(xué)分群及分型進(jìn)行最

46、后鑒定。符合霍亂弧菌的菌株尚需區(qū)分古典生物型和El-Tor生物型弧菌科小結(jié) 霍亂是烈性傳染病，凡在流行季節(jié)和地區(qū)有腹瀉 副溶血性弧菌具有嗜鹽性，在不含NaCl的培養(yǎng)基上不生長。主要引起食物中毒和急性腹瀉，從腹瀉患者中分離到的菌株95%以上能使人或兔紅細(xì)胞發(fā)生溶血，對馬紅細(xì)胞不溶血，為神奈川現(xiàn)象 副溶血性弧菌具有嗜鹽性，在不含NaCl的培養(yǎng)基上不生 氣單胞菌屬是革蘭陰性直桿菌、球桿菌或絲狀菌，極端單鞭毛，動力陽性，來自人類菌種（嗜溫菌）在1042生長；來自魚類或環(huán)境菌種（嗜冷菌）在2225生長。氧化酶、觸酶、硝酸鹽還原陽性，發(fā)酵葡萄糖等糖類產(chǎn)酸產(chǎn)氣，O/129耐藥。引起腹瀉和菌血癥等。與腸桿菌科

47、和非發(fā)酵菌鑒別：本菌屬氧化酶陽性，發(fā)酵葡萄糖；腸桿菌科發(fā)酵葡萄糖，氧化酶陰性。非發(fā)酵菌可能氧化酶陽性或陰性，不發(fā)酵葡萄糖。與弧菌屬鑒別：本菌屬在6NaCL培養(yǎng)基不生長，分解甘露醇，O/129耐藥 。 氣單胞菌屬是革蘭陰性直桿菌、球桿菌或絲狀菌，極端單鞭非發(fā)酵革蘭陰性桿菌非發(fā)酵革蘭陰性桿菌非發(fā)酵菌是一大群不發(fā)酵葡萄糖或僅以氧化形式利用葡萄糖的需氧或兼性厭氧、無芽胞的革蘭陰性桿菌廣泛存在于人體體表、開放體腔，以及醫(yī)院相關(guān)的外環(huán)境中，多為條件致病菌。醫(yī)院感染中銅綠假單胞菌、不動桿菌占重要地位。非發(fā)酵菌是一大群不發(fā)酵葡萄糖或僅以氧化形式利用葡萄糖的需氧假單胞菌屬為一群嚴(yán)格需氧、有鞭毛、無芽胞、無莢膜的

48、革蘭陰性桿菌。氧化酶和觸酶試驗陽性。可產(chǎn)生大量水溶性色素，如綠膿素、紅膿素假單胞菌屬一、銅綠假單胞菌屬 假單胞菌屬的代表菌屬，產(chǎn)生水溶性色素綠膿素，使膿液或培養(yǎng)基呈綠色，而得名。為條件致病菌，是醫(yī)院感染的常見菌。一、銅綠假單胞菌屬 1、形態(tài)與染色 革蘭陰性桿菌，球桿狀或絲球狀，長短不一。單個、呈雙或短鏈狀排列。無芽孢，有莢膜，有1-3根鞭毛，運動活潑，臨床分離株常有菌毛。2、培養(yǎng)特性 專性需氧，部分菌株兼性厭氧，營養(yǎng)要求不高。在普通瓊脂平板和SS平板上生長良好，可生長溫度25-42，最適生長溫度35，4不生長而42生長是該菌的鑒別點之一。在血平板和麥康凱平板上形成不同形態(tài)菌落，生姜氣味。在SS

49、瓊脂平板上，經(jīng)48h培養(yǎng)菌落中央呈棕綠色（與沙門菌和志賀菌相區(qū)別）在普通瓊脂平板上，可產(chǎn)生多種色素，以綠膿素和青膿素為主一、生物學(xué)性狀1、形態(tài)與染色 革蘭陰性桿菌，球桿狀或絲球狀，長短革蘭陰性需氧和兼性厭氧桿菌檢驗課件3、生化反應(yīng) 葡糖糖、木糖氧化；觸酶、氧化酶陽性；利用枸櫞酸鹽、還原硝酸鹽并產(chǎn)生氮氣；液化明膠，吲哚陰性；4、抵抗力 比其他無芽孢細(xì)菌抵抗力強(qiáng)。革蘭陰性需氧和兼性厭氧桿菌檢驗課件二、臨床意義1、致病物質(zhì) 產(chǎn)生多種致病性的毒素和侵襲性的酶2、所致疾病 條件致病菌，在抵抗力低時引起皮膚、呼吸道、泌尿道及燒傷創(chuàng)面等感染，可導(dǎo)致菌血癥、敗血癥、心內(nèi)膜炎及嬰幼兒嚴(yán)重腹瀉。醫(yī)院常見病原菌3、

50、免疫性 免疫原性強(qiáng)，可刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性抗體，具有一定的抗感染作用二、臨床意義1、致病物質(zhì) 產(chǎn)生多種致病性的毒素和侵襲三、微生物學(xué)檢驗1、標(biāo)本采集 按疾病和檢查目的分別采取不同的臨床標(biāo)本，醫(yī)院環(huán)境檢測可從空氣、水、物體表面等處采樣。2、檢驗方法1）直接涂片染色鏡檢2）分離培養(yǎng)3）鑒定4）鑒別三、微生物學(xué)檢驗1、標(biāo)本采集 按疾病和檢查目的分別采取二、產(chǎn)堿桿菌屬 產(chǎn)堿桿菌屬典型的菌種是糞產(chǎn)堿桿菌。二、產(chǎn)堿桿菌屬一、生物學(xué)性狀1、形態(tài)與染色 革蘭陰性桿菌，常呈單、雙或鏈狀排列。具有周鞭毛，無芽孢，多數(shù)菌株無莢膜。2、培養(yǎng)特性 專性需氧，營養(yǎng)要求不高。在普通瓊脂平板上生長良好。麥康凱和SS平板上，形成不發(fā)酵乳糖的無色透明菌落。在蛋白胨的肉湯中產(chǎn)氨，可使培養(yǎng)基pH增至8.6以上二、臨床意義臨床最常見的是糞產(chǎn)堿桿菌，大部分感染是條件致病三、微生物學(xué)檢驗一、生物學(xué)性狀三、不動桿菌屬 不動桿菌屬歸屬于奈瑟菌科，臨床上分離出來的絕大多數(shù)為鮑曼不動桿菌。三、不動