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1、第十九章免疫學(xué)檢測(cè)第十九章免疫學(xué)檢測(cè)第十九章免疫學(xué)檢測(cè)課件第十九章免疫學(xué)檢測(cè)課件(二)抗原抗體反應(yīng)的主要影響因素 1.抗原、抗體反應(yīng)的濃度、比例 2.電解質(zhì) 3.溫度 4.酸堿度第十九章免疫學(xué)檢測(cè)課件第十九章免疫學(xué)檢測(cè)課件三、血清學(xué)反應(yīng)的種類(一)凝集反應(yīng)(agglutination) 1.直接凝集反應(yīng)(direct agglutination) 是指顆粒性抗原(凝集原)與相應(yīng)的抗體(凝集素)直接結(jié)合所呈現(xiàn)的凝集現(xiàn)象。如紅細(xì)胞ABO血型的測(cè)定,細(xì)菌凝集試驗(yàn)。第十九章免疫學(xué)檢測(cè)課件 2.間接凝集反應(yīng) (indirect passive agglutination) 是可溶性抗原或抗體吸附于與免疫
2、無關(guān)的微球載體上,形成致敏顆粒,與相應(yīng)的抗體或抗原在電解質(zhì)存在的條件下進(jìn)行反應(yīng),出現(xiàn)凝集。第十九章免疫學(xué)檢測(cè)課件第十九章免疫學(xué)檢測(cè)課件(二)沉淀反應(yīng)(precipetation) 是指可溶性抗原與相應(yīng)抗體在合適的電解質(zhì)存在下,出現(xiàn)肉眼可見的沉淀現(xiàn)象。 1.單向瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn) 2.火箭電泳 3.雙向瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn) 4.對(duì)流免疫電泳(二)沉淀反應(yīng)(precipetation)第十九章免疫學(xué)檢測(cè)課件第十九章免疫學(xué)檢測(cè)課件第十九章免疫學(xué)檢測(cè)課件第十九章免疫學(xué)檢測(cè)課件(三)補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn) (complement fixation test,CFT) 是在補(bǔ)體參與下,以綿羊紅細(xì)胞和溶血素作為指示系統(tǒng),來檢測(cè)未知
3、抗原或抗體的試驗(yàn)。第十九章免疫學(xué)檢測(cè)課件(四)中和反應(yīng)(nertralization) 毒素、酶、激素或病毒等與其相應(yīng)的抗體結(jié)合后,導(dǎo)致生物活性的喪失。 1.病毒中和反應(yīng) 2.毒素中和反應(yīng) 第十九章免疫學(xué)檢測(cè)課件(五)免疫標(biāo)記技術(shù) 1.免疫酶技術(shù) 2.免疫熒光技術(shù) 3.放射免疫測(cè)定 4.免疫膠體金標(biāo)記技術(shù)(五)免疫標(biāo)記技術(shù)第十九章免疫學(xué)檢測(cè)課件 第二節(jié) 免疫細(xì)胞的檢測(cè)一、免疫細(xì)胞的分離(一)外周血單個(gè)核細(xì)胞的分離(二)T、B及其它免疫細(xì)胞的純化(三)免疫磁珠分離法(四)熒光激活細(xì)胞分離儀分離法二、免疫細(xì)胞的計(jì)數(shù)(一)花環(huán)形成試驗(yàn)(二)熒光抗體染色 第二節(jié) 免疫細(xì)胞的檢測(cè)第十九章免疫學(xué)檢測(cè)課件三
4、、免疫細(xì)胞功能的檢測(cè)(一)T細(xì)胞功能的測(cè)定 淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn):T細(xì)胞在體外受特異性抗原或有絲分裂原(PHA、ConA等)刺激后,能轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞。試驗(yàn)時(shí)取外周血,分離淋巴細(xì)胞,加入有絲分裂原或特異性抗原,在培養(yǎng)液中培養(yǎng)72小時(shí),經(jīng)涂片染色后鏡檢計(jì)算轉(zhuǎn)化百分率。三、免疫細(xì)胞功能的檢測(cè)(二)B細(xì)胞功能的檢測(cè)1.空斑形成細(xì)胞檢測(cè)(plaque formingcell,PFC) 是動(dòng)物體外檢測(cè)B細(xì)胞功能的方法。2.定量溶血分光光度法(QHS) 又稱B細(xì)胞介導(dǎo)的紅細(xì)胞定量溶血分光光度法,反映機(jī)體的體液免疫功能。3.酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)試驗(yàn)(二)B細(xì)胞功能的檢測(cè)(三)其他淋巴細(xì)胞功能的檢測(cè) 1.NK 細(xì)胞活性測(cè)定 (1)NK細(xì)胞自然殺傷功能的檢測(cè) (2)ADCC試驗(yàn) 2.LAK細(xì)胞活性測(cè)定(四)吞噬細(xì)胞功能檢測(cè) 1.中性粒細(xì)胞吞噬功能的測(cè)定 2.大吞噬細(xì)胞的檢測(cè)(三)其他淋巴細(xì)胞功能的檢測(cè) 第三節(jié) 細(xì)胞因子的檢測(cè)一、細(xì)胞生物學(xué)活性檢測(cè)法二、免疫學(xué)標(biāo)記技術(shù)法三、分子生物學(xué)方法 人類干擾素的檢測(cè) 白細(xì)胞介素-1
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