微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)復(fù)習(xí)資料題及其標(biāo)準(zhǔn)答案

1、微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)復(fù)習(xí)題一、選擇題革蘭氏染色的關(guān)鍵操作步驟是：結(jié)晶紫染色碘液固定酒精脫色復(fù)染放線菌印片染色的關(guān)鍵操作是：印片時不能移動染色染色后不能吸干D.A和C3.高氏培養(yǎng)基用來培養(yǎng)A.細(xì)菌B.真菌C.放線菌4.肉湯培養(yǎng)基用來培養(yǎng):A.酵母菌B.霉菌C.細(xì)菌5.無氮培養(yǎng)基用來培養(yǎng):自生固氮菌。硅酸鹽細(xì)菌根瘤菌A、B均可培養(yǎng)A、B、C均可培養(yǎng)片之6.在使用顯微鏡油鏡時，為了提高分辨力，通常在鏡頭和蓋玻間滴加:片之二甲苯水香柏油7.常用的消毒酒精濃度為A.75%B.50%C.90%8.用甲醛進(jìn)行空氣熏蒸八、消毒的用量是:A.20ml/M3B.6ml/M3C.1ml/M39.實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基高壓蒸八、汽滅菌

2、的工藝條件是:121C/30min115C/30min130C/30min巴氏消毒的工藝條件是:62-63C/30min71-72C/15minA.B.均可半固體培養(yǎng)基的主要用途是:檢查細(xì)菌的運(yùn)動性檢查細(xì)菌的好氧性A.B.兩項半固體培養(yǎng)基的瓊脂加入量通常是:1%0.5%0.1%使用手提式滅菌鍋滅菌的關(guān)鍵操作是:排冷氣徹底保溫時間適當(dāng)滅菌完后排氣不能太快A-C目鏡頭上的“K”字母表示：廣視野目鏡惠更斯目鏡補(bǔ)償目鏡目鏡頭上的“P”字母表示：平場目鏡廣視野目鏡平場補(bǔ)償目鏡16物鏡頭上的“PL”字母表示：正低相差物鏡正高相差物鏡負(fù)高相差物鏡17物鏡頭上的“UVFL”字母表示。無熒光物鏡照相物鏡相差物鏡

3、18鏡頭上標(biāo)有“TC”字母的鏡頭是：相差調(diào)整望遠(yuǎn)鏡攝影目鏡相差目鏡“PA”表示：馬鈴薯培養(yǎng)基高氏培養(yǎng)基肉湯培養(yǎng)基無菌室空氣滅菌常用方法是：甲醛熏蒸紫外燈照射噴石炭酸A.B.并用干熱滅菌的關(guān)鍵操作是:滅菌物不能有水保溫過程中不能開箱門降溫不能太快霉菌水浸制片的關(guān)鍵操作是：菌絲要分散菌絲首先要用50%的乙醇浸潤蓋蓋玻片不能有氣泡A-C加熱法染芽胞的染料通常是:孔雀綠結(jié)晶紫復(fù)紅蕃紅復(fù)紅法染鞭毛的關(guān)鍵操作是:玻片干凈染料新鮮菌體活化適當(dāng)A、B、C鍍銀法染鞭毛的關(guān)鍵操作是:玻片干凈染料無沉淀加熱適當(dāng)菌體活化適當(dāng)A-D進(jìn)行簡單染色使用的染色液通常是:復(fù)紅蕃紅結(jié)晶紫孔雀綠A-D均可27物鏡頭上的“APO”字

4、母代表：消色差物鏡復(fù)消色差物鏡半消色差物鏡28物鏡頭上的“Ach”字母表示：平場物鏡超平場物鏡消色差物鏡29物鏡頭上的“NH”字母表示：正相差物鏡負(fù)相差物鏡負(fù)高相差物鏡物鏡頭上的“0.17”表示：要求的蓋玻片厚度要求的載玻片厚度鏡頭浸油的深度鏡頭上標(biāo)有“NFK字母的鏡頭是:照相目鏡熒光目鏡相差目鏡目鏡頭上的“PK”字母表示：平場目鏡補(bǔ)償目鏡平場補(bǔ)償目鏡33物鏡頭上的Splan字母表示：超平場物鏡平場物鏡消色差物鏡。34.物鏡頭上的SplanApo表示：TOC o 1-5 h z超平場復(fù)消色差物鏡超平場半消色差物鏡超平場物鏡35物鏡頭上的PlanApo表示：超平場物鏡平場物鏡平場復(fù)消色差物鏡36

5、物鏡頭上的Plan字母表示：平場物鏡消色差物鏡超平場物鏡目鏡頭上的WF字母表示：廣視野高眼點(diǎn)補(bǔ)償目鏡高眼點(diǎn)目鏡廣視野目鏡目鏡頭上的SWK字母表示：超廣視野目鏡高眼點(diǎn)補(bǔ)償目鏡平場補(bǔ)償目鏡目鏡頭上的WHK字母表示：超廣視野目鏡廣視野高眼點(diǎn)目鏡平場補(bǔ)償目鏡物鏡頭上的F.L字母表示：消色差物鏡半消色差物鏡復(fù)消色差物鏡二、判斷題無菌吸管上端塞入棉花是為了過濾口中的有菌空氣。無菌吸管上端塞入棉花的目的是為了防止菌液吸入口中稀釋平板測數(shù)時，放線菌計數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)是選擇每皿中菌落數(shù)在30-300個之間的稀釋度進(jìn)行計數(shù)。稀釋平板測數(shù)時，細(xì)菌計數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)是選擇每皿中菌落數(shù)在30-300個之間的稀釋度進(jìn)行計數(shù)。稀釋平板測數(shù)

6、時，細(xì)菌，放線菌，真菌的計數(shù)標(biāo)準(zhǔn)是選擇每皿中菌落數(shù)在30-300個的稀釋度進(jìn)行計數(shù)。稀釋平板測數(shù)時，真菌的計數(shù)標(biāo)準(zhǔn)是選擇每皿中菌落數(shù)在10-100個的稀釋度進(jìn)行計數(shù)。稀釋平板測數(shù)時，細(xì)菌、放線菌、真菌的計數(shù)標(biāo)準(zhǔn)是選擇每皿中菌落數(shù)在10-100個的稀釋度進(jìn)行計數(shù)。&用混菌法測微生物活菌數(shù)時，每個平皿中的菌液加入量是1ml。用涂抹法測微生物活菌數(shù)時，每個平皿中的菌液加入量是0.1ml。用油鏡鏡檢時應(yīng)將聚光器升至最高。使用高倍鏡時,可將聚光器升至最高。為了滿足微生物對微量元素的需要，配制培養(yǎng)基所用的水最好使用自來水。稀釋測數(shù)用的無菌水通常是由自來水滅菌而成。觀察根霉，青霉只需用低倍鏡觀察即可。實(shí)驗(yàn)室

7、通常使用血球計數(shù)板測微生物的總菌數(shù)。浸油的油鏡頭可用軟的衛(wèi)生紙擦凈。為了節(jié)省時間，可直接在染色涂片上滴加香柏油后,直接用油鏡觀察。使用油鏡的正確操作步驟是:（1）低倍鏡觀察。（2）高倍鏡觀察。（3）轉(zhuǎn)出高倍鏡頭，滴加香柏油后用油鏡觀察。在擦拭顯微鏡鏡頭時，應(yīng)向一個方向擦拭。顯微鏡鏡頭的放大倍數(shù)越大，它的數(shù)值孔徑值越大，其鏡口角也越大。21.稀釋平板測數(shù)通常是采用十倍稀釋法。22.稀釋平板測數(shù)通常采用的是二倍稀釋法。23.做稀釋平板測數(shù)時，只需一支吸管從頭稀釋到尾即可。24.做稀釋平板測數(shù)時，每做一個稀釋度都必須更換一支無菌吸管。25.稀釋平板測數(shù)時，無論是用混菌法，還是用涂抹法,每個平皿中的菌

8、液加入量都是1ml。26.稀釋平板測數(shù)時，無論是用混菌法，還是用涂抹法，每個平皿中的菌液加入量都是0.1ml。27.實(shí)驗(yàn)室做固體培養(yǎng)基時，常加1.8%的瓊脂作凝固劑，做半固體培養(yǎng)基時,瓊脂加入量通常是0.5%。實(shí)驗(yàn)室做固體培養(yǎng)基，常加2%的瓊脂作凝固劑，做半固體培養(yǎng)基時，瓊脂加入量通常是1%。E.coli經(jīng)革蘭氏染色后，菌體呈紅色，它是革蘭氏正反應(yīng)細(xì)菌。在光學(xué)顯微鏡下，根霉的孢子囊是透明的。使用手提滅菌鍋滅菌后，為了盡快排除鍋內(nèi)蒸汽，可直接打開排氣閥排氣。所有蘇云金桿菌的芽胞在菌體的中央。所有真菌菌落的表面干燥，呈絨毛狀。所有放線菌菌落表面干燥，呈粉粒狀。所有細(xì)菌菌落的表面都是光滑濕潤狀。鏡臺

9、測微尺每小格的實(shí)際長度是10微米。目鏡測微尺每小格的實(shí)際長度是10umo鏡臺測微尺每小格的實(shí)際長度是10nm（納米）。血球計數(shù)板兩邊的平臺比計數(shù)區(qū)高0.1cmo血球計數(shù)板兩邊的平臺比計數(shù)區(qū)高0.1mmo棉花塞塞入試管的長度應(yīng)為棉塞全長的2/3o棉花塞入試管的長度應(yīng)為棉塞全長的1/2o擺斜面的長度應(yīng)不超過試管長度的2/3o擺斜面的長度應(yīng)不超過試管長度的1/2。血球計數(shù)板計數(shù)區(qū)的面積是1mm2o用血球計數(shù)板計數(shù)時，任數(shù)5個大方格（80個小格）的菌數(shù)即可。47.在使用細(xì)菌計數(shù)板計數(shù)時，為了防止計數(shù)偏大，計數(shù)區(qū)四周壓線的菌只能數(shù)兩邊48.目鏡測微尺每格的實(shí)際長度是未知的，需用長度已知的鏡臺測微尺校正。

10、49.測微生物的細(xì)胞大小時,需要校正的是鏡臺測微尺每格的實(shí)際長度。50.測微生物細(xì)胞大小時，需要校正的是目鏡測微尺每格的實(shí)際長度。血球計數(shù)板計數(shù)區(qū)每小格的體積是1/4000mm3。血球計數(shù)板計數(shù)區(qū)共有400個小格，每小格的面積是1/400cm2。用分裝器將培養(yǎng)基分裝試管時，應(yīng)謹(jǐn)防培養(yǎng)基沾染試管口。瓊脂的熔化溫度是80C以上，凝固溫度是45C以下。瓊脂的熔化溫度是95C以上，凝固溫度是45C以下。玻璃器材洗凈后在急需時可采用高壓蒸汽滅菌，而不能用干熱滅菌。57.細(xì)菌計數(shù)板每小格的體積是1/20000mm3。58.血球計數(shù)板計數(shù)區(qū)每小格的體積是1/4000cm3。59.無菌室用甲醛熏蒸消毒后可噴氨

11、水以減少甲醛的刺激三、填空題1.霉菌水浸片的制片程序是,放線菌印片染色的操作程序是固體培養(yǎng)基常用作凝固劑，普通固體培養(yǎng)基的用量TOC o 1-5 h z般為，半固體培養(yǎng)基的用量一般為。簡單染色的操作程序是,使用手提式滅菌鍋進(jìn)行滅菌的操作程序是6實(shí)驗(yàn)室配制固體培養(yǎng)基的操作程序是有莢膜的細(xì)菌用負(fù)染色法染色后,莢膜為色，菌體為色。細(xì)菌經(jīng)革蘭氏染色后，革蘭氏正反應(yīng)菌呈，革蘭氏負(fù)反應(yīng)菌呈。細(xì)菌經(jīng)簡單染色后呈。顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)由,和組成。顯微鏡的機(jī)械部分包括、等九部分組成。12高氏培養(yǎng)基通常用來培養(yǎng)，其pH值為。PA培養(yǎng)基通常用來培養(yǎng)，其pH值為。牛肉膏、蛋白胨培養(yǎng)基通常用來培養(yǎng)菌，其pH值為。干熱滅菌的

12、工藝條件是。使用顯微鏡低倍鏡觀察時,聚光器應(yīng)該，使用顯微鏡高倍鏡觀察時，聚光器應(yīng)該。革蘭氏染色的關(guān)鍵操作是。顯微鏡的放大倍數(shù)越大，焦深，調(diào)焦應(yīng)該。19按培養(yǎng)基的形態(tài)，可將培養(yǎng)基分為、三種類型。配制常規(guī)培養(yǎng)基時通常用水。干熱滅菌通常用來滅菌，培養(yǎng)基的滅菌通常用細(xì)菌稀釋測數(shù)通常采用稀釋法，稀釋用試管無菌水為毫升。配制培養(yǎng)基時常用和調(diào)節(jié)pH值。TOC o 1-5 h z按培養(yǎng)基的特殊用途，可將培養(yǎng)基分成、選擇培養(yǎng)基可用來分離培養(yǎng)我們所需的特殊微生物類群，例如我們要從土壤中分離纖維分解菌，可以利用作唯一碳源來篩選；要分離產(chǎn)蛋白酶的微生物，可以利用作唯一氮源分離。革蘭氏染色的操作程序是，培養(yǎng)基是人工配制

13、的適合不同微生物生長繁殖或的營養(yǎng)基質(zhì)。按營養(yǎng)物質(zhì)的不同來源可分為、三大類。高倍鏡頭的數(shù)值孔徑通常為，放大倍數(shù)為。油鏡頭的數(shù)值孔徑通常為，放大倍數(shù)為。低倍鏡頭的數(shù)值孔徑通常是，放大倍數(shù)為。穿刺接種使用的接種工具為，斜面接種使用的接種工具為。進(jìn)行稀釋測數(shù)使用的主要器材有、用孔雀綠和復(fù)紅作細(xì)菌芽胞染色時，可使菌體呈色，使芽胞呈色。用日光燈作光源時,通常用反光鏡，用自然光作光源時，通常用反光鏡。無菌室殺菌通常采用和相結(jié)合的方法。半固體培養(yǎng)基通常用來檢查。擺試管斜面的基本操作方法是、。不能加熱滅菌的液體培養(yǎng)基應(yīng)采用除菌，通常用的器皿有和。藍(lán)細(xì)菌的培養(yǎng)可用培養(yǎng)基。分離酵母菌時為了抑制細(xì)菌的生長，通常用培養(yǎng)

14、基。從土壤中分離真菌時,通常在培養(yǎng)基中加入和抑制細(xì)菌的生長。TOC o 1-5 h z測微生物大小使用的主要工具是、和進(jìn)行酵母菌的顯微計數(shù)使用的主要工具是和進(jìn)行細(xì)菌的顯微計數(shù)時使用的主要工具是和普通光學(xué)顯微鏡測酵母菌的大小的操作程序是46.顯微計數(shù)的操作程序是、。47.莢膜染色法的操作程序是、。48.芽胞染色的操作程序是、5:1時，有利于；當(dāng)C:NZ5:1時有利于。由于各種微生物對某種化合物如抗生素、染料的敏感性不同，可以利用這一特征來從土壤中分離出不同類群的微生物。如在培養(yǎng)基中加入，會殺死或抑制的生長而分離出；在培養(yǎng)基中加入，有利于分離到革蘭氏陰性菌。細(xì)菌在革蘭氏染色過程中，最后用蕃紅復(fù)染因

15、是，高倍鏡下能看到的物象在油鏡下看不到往往是由于和引起。微生物在培養(yǎng)基中生長時，由于其而使培養(yǎng)基發(fā)生改變；所以在配制培養(yǎng)基時，為維持該條件的相對恒定，常在培養(yǎng)基中加入緩沖物質(zhì)如或。一般而言，微生物在含糖基質(zhì)上生長，會產(chǎn)，而使；微生物分解蛋白質(zhì)或氨基酸會產(chǎn)，而使在微生物培養(yǎng)過程中使用的培養(yǎng)皿首先是被采用的，因此又稱培養(yǎng)皿為dish。在其妻子的啟發(fā)下，將固體培養(yǎng)基使用的凝固劑由明膠改為。顯微鏡的微動螺旋每轉(zhuǎn)一圈升降距離為。兩個典型的革蘭氏正反應(yīng)細(xì)菌和革蘭氏負(fù)反應(yīng)細(xì)菌經(jīng)革蘭氏染色后都呈陰性反應(yīng)往往是由于和引起。檢查乳品和飲料是否含有等腸道細(xì)菌，可采用培養(yǎng)基，在這種培養(yǎng)基平板上會形成具有光澤的紫黑色小

16、菌落。TOC o 1-5 h z細(xì)菌鞭毛經(jīng)鍍銀法染色后呈色。細(xì)菌鞭毛經(jīng)李夫森法染色后呈色。69由于升汞（HgCLj有腐蝕作用，所以不能用于消毒，特別是制品。70.無氮培養(yǎng)基通常用來培養(yǎng)，其氮源來自。四、名詞解釋1.電子顯微鏡2.普通光學(xué)顯微鏡3.合成培養(yǎng)基4.培養(yǎng)基5.天然培養(yǎng)基6.半合成培養(yǎng)基7.革蘭氏染色法。8.簡單染色。9.稀釋平板計數(shù)法10.顯微直接計11.巴氏消毒12.間歇滅菌13.消毒14.滅菌15.過濾除菌16.濕熱八、滅菌17.干熱八、滅菌18.選擇培養(yǎng)基19.加富培養(yǎng)基20.鑒別培養(yǎng)基21.數(shù)值孔徑22.分辨力23.超凈工作臺24.純培養(yǎng)技術(shù)25.焦深26.暗視野顯微27.熒

17、光顯微術(shù)28.負(fù)相差29.正相差五、問題數(shù)法術(shù)試述在普通光學(xué)顯微鏡下測定微生物細(xì)胞大小的基本方法。以測蘇云金桿菌工業(yè)菌粉中的活菌數(shù)為例，試述稀釋平板計數(shù)的基本方法。試述劃線分離的操作方法。如何檢查細(xì)菌的運(yùn)動性?簡述配制培養(yǎng)基的基本原則:試述配制培養(yǎng)基的基本過程及應(yīng)該注意的問題。試述顯微計數(shù)的基本方法。標(biāo)本片上的某一物象，第一次看到后如何再次找到它?9.試述在光學(xué)顯微鏡下所看到的Anabaenaazotica的主要特征。10.革蘭氏染色反應(yīng)的成敗關(guān)鍵是什么?為什么革蘭氏染色有十分重要的理論與實(shí)踐意義?11.如何從土壤中分離得到一個微生物的純培養(yǎng)體?察氏培養(yǎng)基的組成為:蔗糖:30克,磷酸氫二鉀:1

18、.0克,硝酸鈉:2克，硫酸鎂0.5克，氯化鉀：0.5克，硫酸亞鐵：0.01克，蒸餾水：1000ml.試述：該培養(yǎng)基的C源，N源各是什么物質(zhì)。除C源和N源外的其它物質(zhì)起什么作用：(3)該培養(yǎng)基為什么不加生長因子?微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)復(fù)習(xí)題答案一、選擇題CDCCDCABACCBACAAAAADADADEABCCAACAACACABB二、判斷題對。錯。對。對。錯。對。錯。對。對。對。錯。對。對。錯。錯。錯。錯。對。對。對。對。錯。錯。對。錯。錯。對。錯。錯。錯。錯。錯。錯。錯。錯。對。錯。錯。錯。對。對。錯。錯。對。對。錯。對。對。錯。對。對。錯。對。錯。對。56對。對。錯。對。三、填空題加一滴水于載玻片中

19、央，用解剖針挑取菌絲少許,將菌絲用50%的酒精浸潤，將菌絲用蒸餾水水洗，將菌絲放入載玻片水滴中并小心分散，蓋上蓋玻片印片,干燥,固定,復(fù)紅染色2-3分鐘,水洗,晾干洋菜（瓊脂），1.5-2.0%，0.5%涂片，干燥，固定，復(fù)紅染色1-2分鐘，水洗，晾干鍋內(nèi)加水，滅菌物體裝鍋，對稱上緊密封螺帽將鍋密封，加熱升溫,排盡鍋內(nèi)冷空氣，升溫至滅菌工藝條件一般為98kpa,在工藝條件下保壓計時一般為30分鐘，到時間后切斷熱源，降溫，出鍋照配方稱取藥品，將藥品溶解在一定量的水中后加熱煮沸，將瓊脂按量稱取后用水浸濕，將浸濕的瓊脂加入煮沸的營養(yǎng)液中，待瓊脂全部融化后調(diào)節(jié)pH值，補(bǔ)充損失的水分，分裝培養(yǎng)基入不同的

20、容器中無色，紅色紫色，紅色所染染料的顏色反光鏡,聚光鏡,物鏡,目鏡鏡座，鏡臂，載物臺，轉(zhuǎn)換器，鏡筒，推動器,粗動螺旋,微動螺旋，聚光鏡升降螺旋放線菌，7.5-8.0真菌，5-6細(xì)菌、6.8-7.215.160-170C/2h降低，適當(dāng)升高酒精脫色越小，越小心液體，固體，半固體自來玻璃器材，高壓蒸汽滅菌22.10倍,923.1molNaOH、1molHCL選擇培養(yǎng)基，加富培養(yǎng)基，鑒別培養(yǎng)基纖維素，纖維分解菌，酪蛋白，蛋白分解菌涂片，干燥，固定，結(jié)晶紫染色1分鐘，水洗,碘液媒染1分鐘，水洗，95%的乙醇脫色25秒，水洗，蕃紅復(fù)染3-5分鐘，水洗，晾干積累代謝產(chǎn)物，天然培養(yǎng)基，合成培養(yǎng)基,，半合成培

21、養(yǎng)基28.0.65，40 x29.1.25,100 x或90 x30.0.25,10 x或8x接種針，接種環(huán)酒精燈，1ml無菌吸管，9ml試管裝無菌水，9cm的無菌平皿紅色,綠色平面，凹面紫外燈照射，噴灑化學(xué)藥劑（如酚）細(xì)菌的運(yùn)動性將擺斜面用特制木條放在桌面上，將裝有固體培養(yǎng)基的試管趁熱放在特制木條上擺成斜面，斜面長度不得超過試管長度的1/2，將試管棉塞部分用滅菌報紙蓋上，以防空氣中微生物落到棉塞上引起污染過濾法，蔡氏細(xì)菌過濾器，濾膜無氮酸性孟加拉紅，鏈霉素顯微鏡，鏡臺測微尺，目鏡測微尺顯微鏡血球計數(shù)板。顯微鏡細(xì)菌計數(shù)板。將鏡臺測微尺置載物臺上，調(diào)焦找到臺尺，在低倍鏡下校正目鏡測微尺每格的長，在高倍鏡下校正目鏡測微尺每格的長，去掉臺尺換上待測樣本片，在高倍鏡下測出十個酵母菌寬和長的