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1、負(fù)一樓動(dòng)物房實(shí)驗(yàn)人員培訓(xùn)建設(shè)原因:1. 籠位緊張2. PI增加3. 學(xué)生增加保種區(qū) 區(qū)飼養(yǎng)實(shí)驗(yàn)區(qū) 區(qū)飼養(yǎng)實(shí)驗(yàn)區(qū) 區(qū)一. 進(jìn)入實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)前必需履行的手續(xù) 二. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范 三. 尊重動(dòng)物的權(quán)利與福利 四. 常見(jiàn)違規(guī)現(xiàn)象和處罰措施五. 動(dòng)物數(shù)量登記 一. 進(jìn)入實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)前必需履行的手續(xù) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物倫理委員會(huì)已經(jīng)批準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)方案和使用動(dòng)物的種類、數(shù)量等 實(shí)驗(yàn)人員接受實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心培訓(xùn),并且考核合格具體考核程序如下:1.實(shí)驗(yàn)人員填寫實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心人員考核申請(qǐng)表并提前交到1005室同時(shí)提供有關(guān)資料學(xué)習(xí) , 另外所有申請(qǐng)人員必須提前去129室詢問(wèn)下學(xué)院門禁卡是否需要修改時(shí)間
2、還有導(dǎo)師名字前加數(shù)字等問(wèn)題否則考核通過(guò)后將無(wú)法授權(quán)。2.按照申請(qǐng)表相應(yīng)日期到場(chǎng)接受實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心老師的培訓(xùn)并且通過(guò)閉卷考試和現(xiàn)場(chǎng)模擬考試達(dá)到合格(閉卷考試分?jǐn)?shù)不低于90分為合格,未通過(guò)者將繼續(xù)學(xué)習(xí)并再另外安排時(shí)間重新考試,直至通過(guò)考核)。3.考核通過(guò)的人員將有培訓(xùn)號(hào),進(jìn)入資格將直接授權(quán)在學(xué)院門禁卡上。(注意:如果是生命學(xué)院本科生或者是別的學(xué)院學(xué)生都需要在申請(qǐng)表上有導(dǎo)師簽名后再遞交) 。培訓(xùn)號(hào): 進(jìn)動(dòng)物前已經(jīng)預(yù)先簽訂并提交動(dòng)物實(shí)驗(yàn)合作協(xié)議 提前!一周或3天提交,需要導(dǎo)師簽字消毒液籠具、飲水、墊料動(dòng)物的來(lái)源 a. 從國(guó)內(nèi)新引進(jìn)的動(dòng)物必須從具有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證的大型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物供應(yīng)基地購(gòu)買,每批動(dòng)物都附
3、有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量合格證,可進(jìn)入負(fù)一樓新動(dòng)物房,區(qū)飼養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。名稱地點(diǎn)上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司上海南京模式動(dòng)物研究所南京軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司北京 湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司長(zhǎng)沙b. 從國(guó)外知名實(shí)驗(yàn)動(dòng)物機(jī)構(gòu)(如Jackson實(shí)驗(yàn)室)引進(jìn)動(dòng)物,必須附有該批動(dòng)物的animal health report才可進(jìn)入負(fù)一樓,區(qū)飼養(yǎng)。 二. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范 獲得授權(quán)入口刷卡換上鞋套更衣室更衣潔凈通道飼養(yǎng)室或?qū)嶒?yàn)室離去通道緩沖間更衣出口換鞋出去1.人員進(jìn)出負(fù)一層流程 (1).所有人員必須經(jīng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心培訓(xùn)、考核,獲得授權(quán)后方可進(jìn)入。(2).人員進(jìn)入:在門口刷卡
4、進(jìn)入后脫鞋,穿上鞋套,進(jìn)入走廊。在、或區(qū)的“人員入口”(一更門口)刷卡,進(jìn)入“男更衣室”或“女更衣室”,穿上連體潔凈服和手套等,進(jìn)入“潔凈通道”。進(jìn)入“飼養(yǎng)室”或“動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室”進(jìn)行操作。(3).人員出去:工作結(jié)束后,著連體潔凈服,從“飼養(yǎng)室”或“動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室”進(jìn)入“離去走道”,從“緩沖間”出去。在“緩沖間”出口處脫下連體潔凈服和手套等,返回走廊,在門口穿上自己鞋子等,走出實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。各區(qū)一更門口刷卡刷卡,換鞋套刷卡脫衣脫鞋套a.在門口的鞋柜處脫下鞋子,放入鞋柜,穿上鞋套。b. 盡量穿單薄的衣服進(jìn)入動(dòng)物房,衣柜無(wú)鎖,請(qǐng)自己保管好物品。更衣室空間小 c. 在更衣室按下列順序穿戴:一更室取出超凈服,
5、在二更室超凈服放桌上后手消毒(I區(qū)、區(qū)男更衣室是拿超凈服后手消毒再進(jìn)二更),站在紅色警示線靠門一側(cè)打開(kāi)超凈服外包裝,戴帽子,戴口罩,戴手套,取出超凈服并在有箭頭潔凈一側(cè)上方抖開(kāi),抬一只腳穿入超凈服并踏到有箭頭的潔凈的一側(cè)隨后再穿好另一只腳并雙腳站在有箭頭的一邊注意不要再走回沒(méi)有箭頭的紅色線進(jìn)門的一邊,最后用橡皮筋綁住袖口(注意:10樓,11樓穿戴程序中沒(méi)有手消毒和紅色警示線) d. 進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室或飼養(yǎng)室進(jìn)行相應(yīng)操作。e.經(jīng)離去通道進(jìn)入緩沖間3,脫下超凈服和口罩帽子等注意:進(jìn)出時(shí)不得同時(shí)開(kāi)啟雙門房間的兩扇門口罩、帽、超凈服、手套、鞋套要穿戴嚴(yán)實(shí),盡量不露出自己的衣物和皮膚。動(dòng)物房?jī)?nèi)有固定電話,禁止
6、使用手機(jī)。動(dòng)物大型物品入口噴霧消毒飼養(yǎng)室離去通道出去2. 動(dòng)物進(jìn)出流程 (1). 進(jìn)入動(dòng)物房的動(dòng)物必須從正規(guī)的、有資質(zhì)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物供應(yīng)基地購(gòu)買,每批動(dòng)物進(jìn)入都必須具備實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量合格證。(2). 動(dòng)物必須經(jīng)妥善包裝,動(dòng)物包裝箱破損或?yàn)V膜破損者不得進(jìn)入潔凈區(qū)。(3). 動(dòng)物進(jìn)入:將動(dòng)物包裝箱從外走廊端放入“大型物品入口”,用百毒殺溶液噴霧消毒,將包裝箱外表面噴一遍即可。從“潔凈通道”端進(jìn)入“大型物品入口”拿到動(dòng)物包裝箱,進(jìn)入“飼養(yǎng)室”,“飼養(yǎng)室”內(nèi)的超凈工作臺(tái)需預(yù)先紫外燈照射15分鐘。在超凈工作臺(tái)內(nèi)打開(kāi)動(dòng)物包裝箱,取出動(dòng)物放入飼養(yǎng)盒,加飲水、飼料,懸掛卡片等。將飼養(yǎng)盒裝上IVC籠架。廢棄的動(dòng)物包裝
7、箱推入“離去通道”,待工作人員處理。(4).動(dòng)物傳出:將動(dòng)物連同籠盒從“離去通道”傳至外面。動(dòng)物一旦敞露于非潔凈區(qū)則不能再進(jìn)入動(dòng)物房。 注意: a.引進(jìn)的小鼠必須是SPF級(jí)動(dòng)物;且該單位必須有該種動(dòng)物的生產(chǎn)許可證;同時(shí)附帶實(shí)驗(yàn)動(dòng)物質(zhì)量合格證以及動(dòng)物的品系、性別、年齡等信息經(jīng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心工作人員審查后方可準(zhǔn)備進(jìn)入動(dòng)物房。 b.動(dòng)物運(yùn)輸時(shí)必須有合格的運(yùn)輸盒,清潔級(jí)和SPF級(jí)的動(dòng)物運(yùn)輸盒必須以高效濾膜封閉窗口,同時(shí)以膠帶封口,封口破損或?yàn)V膜破損者不能進(jìn)入屏障系統(tǒng)。 噴霧消毒a. 將包裝箱移入用紫外燈預(yù)先照射15min的超凈工作臺(tái)中b. 在超凈臺(tái)內(nèi)去封條并用消毒過(guò)的大鑷子或用75%酒精噴灑過(guò)的帶著手套
8、的雙手,捏住動(dòng)物尾根,將動(dòng)物移入IVCc.加飼料和飲水后將IVC籠盒放在IVC架上固定位置,最后填寫并懸掛卡片,注意卡片上最后一行需要標(biāo)記位置,請(qǐng)按照籠架上橫坐標(biāo)和縱坐標(biāo)相對(duì)應(yīng)的字母進(jìn)行標(biāo)記,這樣每個(gè)籠盒都有自己的位置不至于亂放,方便同學(xué)做實(shí)驗(yàn)和工人師傅換籠外來(lái)引進(jìn)動(dòng)物放進(jìn)IVC程序:動(dòng)物拿出實(shí)驗(yàn)的特殊情況:11樓進(jìn)行輻照:動(dòng)物始終處于輻照筒中,可以繼續(xù)放到負(fù)一樓、區(qū)飼養(yǎng)。10樓小動(dòng)物成像儀檢測(cè):運(yùn)輸過(guò)程中始終放在IVC籠盒內(nèi),檢測(cè)時(shí)短時(shí)間敞露在屏障環(huán)境中。 3天內(nèi)的短期觀察不再放到負(fù)一層動(dòng)物房?jī)?nèi)飼養(yǎng),如果長(zhǎng)期觀測(cè)可以繼續(xù)放到10樓動(dòng)物房DIRTY ROOM飼養(yǎng)。10樓現(xiàn)設(shè)有DIRTY ROO
9、M動(dòng)物一旦進(jìn)行了敞露在外界的實(shí)驗(yàn),則不能放回負(fù)一層動(dòng)物房飼養(yǎng)!注意: a. 包裝盒或?yàn)V膜是否破損,如有破損絕不能進(jìn)入動(dòng)物房,將有動(dòng)物房工作人員予以監(jiān)督。 b. 注意動(dòng)物進(jìn)入時(shí)的衛(wèi)生消毒。小型物品傳遞窗紫外線消毒飼養(yǎng)室實(shí)驗(yàn)室離去通道出去需高壓滅菌物品雙扉高壓滅菌器飼養(yǎng)室實(shí)驗(yàn)室離去通道出去儀器設(shè)備大型物品入口 紫外線消毒飼養(yǎng)室實(shí)驗(yàn)室離去通道出去3.物品進(jìn)出流程 (1). 所有物品進(jìn)入潔凈區(qū)內(nèi)都要經(jīng)過(guò)消毒、滅菌。物品進(jìn)入通道有三:“傳遞窗”、“大型物品入口”和“高壓滅菌器”。潔凈物品傳出通道有二:“傳遞窗”和“離去通道”。(2). 所有物品必須走單獨(dú)的進(jìn)出通道,不得跟隨人員進(jìn)入。(3). 以下列舉常
10、用物品進(jìn)入、傳出程序,其他物品可參照?qǐng)?zhí)行。小型物品如注射器和手術(shù)器械進(jìn)入:在“外準(zhǔn)備間”放入“傳遞窗”紫外燈照射15分鐘后,從“內(nèi)準(zhǔn)備間”拿入。小型物品的拿出:從離去通道跟隨人員一起出去。細(xì)胞或需要避光的藥物進(jìn)入:通過(guò)75%酒精擦拭容器表面后經(jīng)“傳遞窗”進(jìn)入。細(xì)胞或藥物容器拿出:從離去通道跟隨人員一起出去。小型儀器的進(jìn)入:從外走廊推入“大型物品入口”,經(jīng)里面的紫外燈照射30分鐘,從“潔凈走道”拿入。小型儀器的傳出:從“動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室”推入“離去通道”,從“緩沖間”拿出。紫外消毒 注意:不準(zhǔn)將物品直接從緩沖間和更衣室隨人帶入動(dòng)物房!IVC(Individually VentilatedCages)是
11、獨(dú)立通風(fēng)籠盒的簡(jiǎn)稱.它的特點(diǎn)是具有一定的密閉性,同時(shí)讓經(jīng)主機(jī)中HEPA過(guò)濾的潔凈空氣流入盒內(nèi),使盒內(nèi)保持正壓,減少了可能的感染來(lái)源,適合于飼養(yǎng)SPF級(jí)動(dòng)物,以及一些免疫缺陷動(dòng)物IVC的操作要點(diǎn)和操作程序操作要點(diǎn): 對(duì)IVC中的動(dòng)物進(jìn)行的一切操作均在動(dòng)物超凈工作臺(tái)中進(jìn)行操作程序:a.使用超凈工作臺(tái)前15min用75%酒精噴霧工作臺(tái)內(nèi)表面,同時(shí)放入經(jīng)表面消毒的各種滅菌物料和實(shí)驗(yàn)用品,并打開(kāi)紫外燈和風(fēng)機(jī) b.15min后用75%酒精噴霧IVC的外表面、工作車、雙手手套,將籠盒移入工作臺(tái)后進(jìn)行換窩,喂飼,喂水,實(shí)驗(yàn)等工作注意:把IVC籠盒放回籠架固定位置的時(shí)候要檢查下籠架上紅色指示物是否消失。4.動(dòng)物
12、處死、解剖和取樣10樓或11樓在1004房間或動(dòng)物房?jī)?nèi)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。不準(zhǔn)帶到PI實(shí)驗(yàn)室解剖和取樣!特殊實(shí)驗(yàn)需向?qū)嶒?yàn)動(dòng)物中心申報(bào)(如動(dòng)物在大型儀器上的活體觀測(cè))負(fù)一樓在動(dòng)物房?jī)?nèi)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行或到1004房間。小動(dòng)物麻醉機(jī)二氧化碳處死裝置負(fù)一樓動(dòng)物房配備冷凍離心機(jī)冰箱動(dòng)物尸體處理動(dòng)物尸體和動(dòng)物器官應(yīng)和實(shí)驗(yàn)卡或繁殖卡一起密封在塑料袋中,塑料袋口要扎緊。 放到動(dòng)物太平間的冰柜中。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)廢棄物品的處理墊料等廢棄物與動(dòng)物籠盒一起從離去通道出系統(tǒng)小的注射器連同針頭套上套子放入空的酒精瓶,大的注射器的針頭單獨(dú)套上套子放入空的酒精瓶,針管可扔到小垃圾桶,其他小刀片等尖銳物品也放入空的酒精瓶以防刺傷工作人員,酒精瓶滿
13、后蓋上蓋子待工作人員清理動(dòng)物房?jī)?nèi)無(wú)排水系統(tǒng),液體廢棄物請(qǐng)傳出系統(tǒng)后再處理廢棄的動(dòng)物包裝盒從滅菌系統(tǒng)推入離去通道傳出去口罩、手套、帽子、鞋套為一次性物品,用過(guò)后就應(yīng)丟棄,滅菌工作服可放在緩沖間,中心工作人員會(huì)對(duì)其進(jìn)行處理。The Three Rs: Replacement: Substitution of non-living material (i.e. tissue cultures) or methods (i.e. computer modeling) for animals, or substitution of a lower species, which might be less
14、 sensitive to pain and distress, for a higher species. For example using brain tissue slices in culture for studying neuro-epileptic agents. Reduction: Reductions in the numbers of animals used to obtain information as achieved by statistical analysis. Refinement: Decrease in the incidence or severi
15、ty of pain and distress in those animals that are used. For example using inhalant anesthesia instead of injectable so that animals recover consciousness more rapidly.三. 尊重動(dòng)物的權(quán)利與福利 四.常見(jiàn)違規(guī)現(xiàn)象以及懲罰措施 常見(jiàn)違規(guī)現(xiàn)象:未經(jīng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心工作人員審核就直接引進(jìn)動(dòng)物,所有動(dòng)物進(jìn)入必須有工作人員在場(chǎng)審核簽字后才能進(jìn)入。2. 有進(jìn)入資格的同學(xué)帶領(lǐng)沒(méi)有資格的同學(xué)進(jìn)入,或一人刷卡多人進(jìn)入。3. 被取消資格的同學(xué)取別人的卡進(jìn)入。4. 每籠的小鼠超過(guò)5只(哺乳期除外,哺乳期為4周)。5. 沒(méi)有每2天探視動(dòng)物一次。6. 將動(dòng)物拿出試驗(yàn)后又放入動(dòng)物房飼養(yǎng)(特殊試驗(yàn)除外,如小動(dòng)物成像儀長(zhǎng)期觀測(cè)試驗(yàn),觀測(cè)后可放于10樓動(dòng)物房?jī)?nèi)飼養(yǎng),但不能放到負(fù)一樓動(dòng)物房飼養(yǎng))。7. 小物品未經(jīng)傳遞窗消毒進(jìn)入動(dòng)物房。8. 進(jìn)入更衣室未按正確順序穿戴或者未穿潔凈服進(jìn)入動(dòng)物房。9.
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