藥品生產(chǎn)清潔驗(yàn)證課件

1、清潔分析方法驗(yàn)證 蘇芳2022/10/15清潔分析方法驗(yàn)證 蘇芳2清潔驗(yàn)證的背景：FDA歷來的檢查重點(diǎn)：過去FDA 總是更注意檢查青霉素類與非青霉素類藥物之間的交叉污染、藥品與甾類物質(zhì)或激素之間的交叉污染問題。在過去二十年間，因?qū)嶋H或潛在的青霉素交叉污染問題已從市場上撤回了大量的藥品。 有一位幼兒教師，懷抱著一名2小時(shí)前注射過青霉素鈉的嬰兒，孩子的一泡尿撒在了幼兒教師的手臂上，1分鐘后該名幼兒教師呼吸困難、面色蒼白、心慌氣短，不一會(huì)就呈現(xiàn)昏迷狀態(tài)，經(jīng)醫(yī)生診斷為青霉素過敏。清潔驗(yàn)證的背景：FDA歷來的檢查重點(diǎn)：藥品生產(chǎn)清潔驗(yàn)證課件歐盟GMP關(guān)于清潔的要求36.為確認(rèn)清潔規(guī)程的效力，應(yīng)進(jìn)行清潔驗(yàn)證

2、。應(yīng)根據(jù)所涉及的物料，合理的確認(rèn)產(chǎn)品的殘留、清潔劑和微生物污染的限度標(biāo)準(zhǔn)。這個(gè)限度標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)該是可以接受的，能夠被證實(shí)的。37.應(yīng)該使用經(jīng)驗(yàn)證、檢出靈敏度高的檢驗(yàn)方法來檢測殘留或污染物。每種分析方法或儀器的檢測靈敏度應(yīng)足以檢測出設(shè)定合格限度水平的殘留或污染物。歐盟GMP關(guān)于清潔的要求36.為確認(rèn)清潔規(guī)程的效力，應(yīng)進(jìn)行清歐盟GMP關(guān)于清潔的要求38.通常只有接觸產(chǎn)品的設(shè)備表面的清潔規(guī)程需要驗(yàn)證。某些場合下，還應(yīng)考慮不直接接觸產(chǎn)品的部分。應(yīng)驗(yàn)證設(shè)備使用與清潔的間隔時(shí)間,以及已清潔設(shè)備可保留的時(shí)間（即清潔有效期），并通過驗(yàn)證確定清洗的間隔時(shí)間和清潔的方法。39.對于相似產(chǎn)品和相似工藝而言，可從相似產(chǎn)品及

3、工藝中，選擇一個(gè)具有代表性的產(chǎn)品和工藝進(jìn)行清潔驗(yàn)證?？梢圆捎谩白畈顥l件”的方法進(jìn)行單獨(dú)的驗(yàn)證試驗(yàn)，在驗(yàn)證中應(yīng)考慮關(guān)鍵因素（取樣部位、取樣方法、清洗劑等）歐盟GMP關(guān)于清潔的要求38.通常只有接觸產(chǎn)品的設(shè)備表面的清歐盟GMP關(guān)于清潔的要求40.為證明方法是經(jīng)過驗(yàn)證的，通常應(yīng)在3個(gè)連續(xù)批上使用該清潔規(guī)程，并檢驗(yàn)合格。42.如果實(shí)際產(chǎn)品是有毒物質(zhì)或有害物質(zhì)，在清潔驗(yàn)證中，可以例外的采用物化性質(zhì)相似的無毒無害物質(zhì)來模擬。歐盟GMP關(guān)于清潔的要求40.為證明方法是經(jīng)過驗(yàn)證的，通常應(yīng)FDA的要求：在FDA的cGMP 211.67章節(jié) 中規(guī)定了設(shè)備清洗驗(yàn)證的要求。建立書面標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP），其中必須詳細(xì)

4、規(guī)定設(shè)備各部件的清洗過程。 必須建立書面的清洗方法驗(yàn)證通則。 清洗方法驗(yàn)證通則應(yīng)規(guī)定執(zhí)行驗(yàn)證的負(fù)責(zé)人、批準(zhǔn)驗(yàn)證工作的負(fù)責(zé)人、驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)（合格標(biāo)準(zhǔn)）、再驗(yàn)證的時(shí)間。 對各生產(chǎn)系統(tǒng)或各設(shè)備部件進(jìn)行清洗驗(yàn)證之前，應(yīng)制定專一特定的書面驗(yàn)證計(jì)劃，其中應(yīng)規(guī)定取樣規(guī)程、分析方法（包括分析方法的靈敏度）。FDA的要求：在FDA的cGMP 211.67章節(jié) 中規(guī)定了內(nèi)容介紹1.標(biāo)記化合物的選擇及限度計(jì)算2.清潔方法的開發(fā)和設(shè)計(jì)3.清潔分析方法（HPLC）的驗(yàn)證4.HPLC法與TOC法比較內(nèi)容介紹1.標(biāo)記化合物的選擇及限度計(jì)算一、標(biāo)記化合物的選擇一般藥品都由活性成分和輔料組成。對于接觸多個(gè)產(chǎn)品的共用設(shè)備，所有這些殘

5、留物都是必須清潔干凈的，在清潔驗(yàn)證中不必為所有殘留物都制定限度標(biāo)準(zhǔn)并一一檢測，因?yàn)檫@是不切實(shí)際且沒有必要的。在一定的意義上，清潔的過程是個(gè)溶解的過程，因此，通常的做法是從各組分中確定最難清潔(溶解)的物質(zhì)，以此作為參照物質(zhì)。通常，相對與輔料，人們最更關(guān)注活性成分的殘留，因?yàn)樗赡苤苯佑绊懴屡a(chǎn)品的質(zhì)量、療效和安全性。一、標(biāo)記化合物的選擇一般藥品都由活性成分和輔料組成。對于接觸一、標(biāo)記化合物的選擇（續(xù)）毒性在清洗溶劑中的溶解度清洗問題如：對設(shè)備表面材質(zhì)有一定的附著力 包含色料、芳香劑或矯味劑的產(chǎn)品 設(shè)備的使用率（生產(chǎn)頻率高的產(chǎn)品相應(yīng)的清洗頻率也高）清洗過程中如果使用清洗劑，則其殘留物也應(yīng)視為標(biāo)記

6、物一、標(biāo)記化合物的選擇（續(xù)）毒性一、標(biāo)記化合物的選擇（續(xù)）目標(biāo)化合物選擇：A D一、標(biāo)記化合物的選擇（續(xù)）目標(biāo)化合物選擇：A D化學(xué)殘留限度計(jì)算： 濃度限度：十萬分之一（10ppm） 在下一產(chǎn)品中的殘留物數(shù)量級別應(yīng)不超過十萬分之一（10ppm） 設(shè)下批產(chǎn)品的生產(chǎn)批量為B(kg)，因殘留物濃度最高為10106，即10mgkg，則殘留物總量最大為B1010610B(mg)；單位面積殘留物的限度為殘留物總量除以測量的與產(chǎn)品接觸的內(nèi)表面積，設(shè)設(shè)備總內(nèi)表面積為SA(cm2)，則表面殘留物限度L 為10BSA(mgcm2)。化學(xué)殘留限度計(jì)算：化學(xué)殘留限度計(jì)算：（續(xù)） 千分之一殘留限度的計(jì)算MTDa = 清

7、洗前產(chǎn)品最小每日給藥劑量中的活性成分含量；Nb = 清洗后產(chǎn)品的批量；MDDb = 清洗后產(chǎn)品的最大日給藥劑量的活性成分含量；Sb = 清洗后產(chǎn)品活性成分含量的百分比(%w/w)。數(shù)據(jù)1/1000來源：一般認(rèn)為藥物的十分之一處方劑量是無效的。化學(xué)殘留限度計(jì)算：（續(xù)） 千分之一殘留限度的計(jì)算二、清潔方法的開發(fā)和設(shè)計(jì)：清潔方式選擇通常清潔方法分為:手工清潔（Manual Cleaning）在線清潔（Cleaning In Place）在線清潔的特點(diǎn)：1. 設(shè)備、容器、管道能夠自動(dòng)進(jìn)行清洗；2. 對容器采用噴林法清潔，對管道采用壓力法清潔；3. 極少的手工操作，重復(fù)性高。二、清潔方法的開發(fā)和設(shè)計(jì)：清

8、潔方式選擇通常清潔方法分為:二、清潔方法的開發(fā)和設(shè)計(jì):清潔劑的選擇1. 清潔劑應(yīng)能有效溶解殘留物，不腐蝕設(shè)備，且本身易被清除。2. 人用藥品注冊技術(shù)要求國際標(biāo)準(zhǔn)協(xié)調(diào)會(huì)(ICH)在“殘留溶劑指南”中將溶劑分為3個(gè)級別，對其使用和殘留限度有明確的要求。3. 隨著環(huán)境保護(hù)標(biāo)準(zhǔn)的提高，還應(yīng)要求清潔劑對環(huán)境盡量無害或可被無害化處理。4. 滿足以上要求的前提下應(yīng)盡量廉價(jià)。二、清潔方法的開發(fā)和設(shè)計(jì):清潔劑的選擇1. 清潔劑應(yīng)能有效溶二、清潔方法的開發(fā)和設(shè)計(jì):清潔劑的選擇（續(xù)）根據(jù)這些標(biāo)準(zhǔn)，對于水溶性殘留物，水是首選的清潔劑。不同批號的清潔劑應(yīng)當(dāng)有足夠的質(zhì)量穩(wěn)定性。因此不宜采用一般家用清潔劑，因其成分復(fù)雜、質(zhì)

9、量波動(dòng)較大且供應(yīng)商不公布詳細(xì)組份。因此，應(yīng)盡量選擇組份簡單、成分確切的清潔劑。根據(jù)殘留物和設(shè)備的性質(zhì)，企業(yè)還可自行配制成分簡單效果確切的清潔劑，如一定濃度的酸、堿溶液等。企業(yè)應(yīng)有足夠靈敏的方法檢測清潔劑的殘留情況，并有能力回收或?qū)U液進(jìn)行無害化處理。二、清潔方法的開發(fā)和設(shè)計(jì):清潔劑的選擇（續(xù)）根據(jù)這些標(biāo)準(zhǔn)，對取樣方法和取樣點(diǎn)的確認(rèn)：通常設(shè)備的取樣清潔驗(yàn)證中如何確定合適取樣方法和取樣點(diǎn)是驗(yàn)證方案的關(guān)鍵內(nèi)容之一，必須由合適的理由來確認(rèn)取樣點(diǎn)，此取樣點(diǎn)應(yīng)能夠代表設(shè)備的“最臟點(diǎn)”。（1） 取樣方法的選擇 直接表面擦拭 淋洗液沖洗 浸泡液取樣取樣方法和取樣點(diǎn)的確認(rèn)：通常設(shè)備的取樣清潔驗(yàn)證中如何確定合適取

10、樣方法和取樣點(diǎn)的確認(rèn)： 擦拭取樣優(yōu)點(diǎn)：是能對最難清潔部位直接取樣，通過選擇適當(dāng)?shù)牟潦萌軇⒉潦霉ぞ吆筒潦梅椒?，可將清洗過程中未溶解的，已“干結(jié)”在設(shè)備表面或溶解度很小的物質(zhì)擦拭下來。檢驗(yàn)的結(jié)果能直接反映出各取樣點(diǎn)的清潔狀況。 擦拭取樣缺點(diǎn)：是很多情況下須拆卸設(shè)備后方能接觸到取樣部位，對取樣工具、溶劑、取樣人員的操作等都有一定的要求。取樣方法和取樣點(diǎn)的確認(rèn)： 擦拭取樣優(yōu)點(diǎn)：是能取樣方法和取樣點(diǎn)的確認(rèn)： 淋洗取樣法優(yōu)點(diǎn)：是取樣面大，對不便拆卸或不宜經(jīng)常拆卸的設(shè)備也能取樣。因此其適用于擦拭取樣不易接觸到的表面，尤其適用于設(shè)備表面平坦、管道多且長的的生產(chǎn)設(shè)備。 淋洗水取樣缺點(diǎn)：溶解與流體力學(xué)原理，當(dāng)溶

11、劑不能在設(shè)備表面形成湍流進(jìn)而有效溶解殘留物時(shí)，或者殘留物不溶于水或“干結(jié)”在設(shè)備表面時(shí)，淋洗水就難以反映真實(shí)的情況。 取樣方法和取樣點(diǎn)的確認(rèn)： 淋洗取樣法優(yōu)點(diǎn)：取樣方法和取樣點(diǎn)的確認(rèn)：（2） 取樣點(diǎn)的確認(rèn) 通常不可能擦拭設(shè)備的全部表面，因此應(yīng)該選擇設(shè)備的最差區(qū)域作為取樣點(diǎn)。這些區(qū)域應(yīng)在清潔難度和殘留水平方面代表著對清潔規(guī)程最大程度的挑戰(zhàn)，例如料斗的底部、槳拌槳槳葉底部和閥門的周圍。取樣方法和取樣點(diǎn)的確認(rèn)：（2） 取樣點(diǎn)的確認(rèn)三、清洗分析方法驗(yàn)證的內(nèi)容：專屬性線性范圍準(zhǔn)確度精密度（重復(fù)性、中間精密度、重現(xiàn)性）檢測限（LOD）和定量限（LOQ）藥品溶液的穩(wěn)定性三、清洗分析方法驗(yàn)證的內(nèi)容：專屬性專屬

12、性： 通常在進(jìn)行清潔分析時(shí)，即使活性成分的樣品（如：取樣棉簽、淋洗溶液）中的含量也很低，所以在進(jìn)行專屬性驗(yàn)證時(shí)無需考慮正常產(chǎn)品中的雜質(zhì)，降解產(chǎn)物的影響，只需考慮輔料及空白溶劑的影響。 專屬性：專屬性的試驗(yàn)方法：1.預(yù)先按處方比例配制足夠量的輔料混合物，研磨均勻。2.按照試驗(yàn)方法配制一定濃度（濃度來自于：標(biāo)記化合物的理論限度濃度）的標(biāo)準(zhǔn)溶液。3.精密稱量同標(biāo)準(zhǔn)溶液中所用標(biāo)準(zhǔn)品成比例的輔料混合物，按照標(biāo)準(zhǔn)品溶液的配制方法配制。過濾后使用。專屬性的試驗(yàn)方法：1.預(yù)先按處方比例配制足夠量的輔料混合物，專屬性的接受標(biāo)準(zhǔn)：1.應(yīng)當(dāng)證明潛在的干擾成分不會(huì)對方法的性能產(chǎn)生副作用。對于色譜檢測方法，要求證實(shí)雜質(zhì)

13、之間、雜質(zhì)與主峰之間的分離度1.0。2.空白對照應(yīng)無干擾。專屬性的接受標(biāo)準(zhǔn)：1.應(yīng)當(dāng)證明潛在的干擾成分不會(huì)對方法的性能線性與范圍： 線性是定量測定的基礎(chǔ)，所以定量清洗分析方法需要進(jìn)行線性驗(yàn)證而定性清洗分析方法無法進(jìn)行線性驗(yàn)證。 可用一貯備液經(jīng)精密稀釋或分別精密稱樣，制備一系列的供試品進(jìn)行測定，至少制備5個(gè)濃度（通常選取50%、80%、100%、120%和150%），另外需要將定量限加入到線性中。線性與范圍：精密度： 1.重復(fù)性 重復(fù)性系指在同樣的操作條件下，在較短時(shí)間間隔內(nèi)，由同一分析人員測定所得結(jié)果的接近程度。精密度：精密度：重復(fù)性的評價(jià)： 在方法規(guī)定的線性范圍內(nèi)至少測定9次（如3個(gè)濃度級別

14、80%，100%和120%，或者30%，50%和100%；每個(gè)濃度級別測定3次）或者在100%的試驗(yàn)濃度，至少測定6次。可接受標(biāo)準(zhǔn)：定量清洗分析方法驗(yàn)證時(shí)，活性成分的RSD10%。精密度：2.中間精密度：系指同一實(shí)驗(yàn)室不同日期、不同儀器、不同分析人員對同一樣品、采用同一方法處理樣品所得結(jié)果之間的接近程度。 驗(yàn)證方法：同一樣品每位分析人員準(zhǔn)備6份進(jìn)樣測量，計(jì)算兩人之間的平均值的差異。 可接受限度：平行六份樣品的RSD10%，兩人之間的平均值之差的相對值10%。藥品生產(chǎn)清潔驗(yàn)證課件準(zhǔn)確度試驗(yàn)：棉簽取樣回收率試驗(yàn)淋洗取樣回收率試驗(yàn)浸泡法取樣回收率試驗(yàn)準(zhǔn)確度試驗(yàn)：棉簽取樣回收率試驗(yàn)清洗回收率：棉簽取樣

15、方法驗(yàn)證 取樣棉簽種類、規(guī)格、品牌等；溶解用溶劑；取樣人員的操作；樣品的溶出。清洗回收率：棉簽取樣方法驗(yàn)證 藥品生產(chǎn)清潔驗(yàn)證課件棉簽取樣方法清洗回收率準(zhǔn)備一塊與設(shè)備表面材質(zhì)相同的板材，如平整光潔的316L不銹鋼板；在鋼板上劃出100mm100mm的區(qū)域；將5倍限度量的的待檢測物溶液，定量裝入校驗(yàn)的微量注射器；將其溶液盡量均勻的涂布100mm100mm的區(qū)域內(nèi)；自然干燥或用電吹風(fēng)溫和的吹干不銹鋼板；棉簽取樣方法清洗回收率準(zhǔn)備一塊與設(shè)備表面材質(zhì)相同的板材，如平棉簽取樣方法清洗回收率用選的的擦拭溶劑潤濕擦拭棉簽，按下圖所示進(jìn)行擦拭取樣； 第一步 第二步棉簽取樣方法清洗回收率用選的的擦拭溶劑潤濕擦拭棉

16、簽，按下圖所藥品生產(chǎn)清潔驗(yàn)證課件藥品生產(chǎn)清潔驗(yàn)證課件棉簽取樣清洗回收率重復(fù)以上規(guī)程3次；將擦拭棉簽分別放入棉簽管中，加入預(yù)定的溶劑5ml，超聲；依法分析，計(jì)算回收率和回收率的RSD棉簽取樣清洗回收率重復(fù)以上規(guī)程3次；藥品生產(chǎn)清潔驗(yàn)證課件棉簽取樣方法清洗回收率總結(jié)： 取樣過程需經(jīng)過驗(yàn)證，通過回收率試驗(yàn)驗(yàn)證取樣過程的回收率和檢驗(yàn)方法回收率結(jié)合進(jìn)行。接受標(biāo)準(zhǔn)： 總回收率一般（企業(yè)可以根據(jù)實(shí)際情況確定）不低于70%，多次取樣回收率的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)不大于20%棉簽取樣方法清洗回收率總結(jié)：淋洗法清洗回收率：淋洗溶劑選擇溶解度；同設(shè)備內(nèi)表面的相容性；易清除性；毒性；環(huán)境的危害性；獲取的難易性。淋洗法清洗回收

17、率：淋洗溶劑選擇清洗回收率淋洗法淋洗溶劑或淋洗水的淋洗速度選擇：清洗回收率淋洗法淋洗溶劑或淋洗水的淋洗速度選擇：淋洗法清洗回收率試驗(yàn)方法： 選擇同生產(chǎn)設(shè)備材質(zhì)相同的平板，劃出10cm*10cm區(qū)域，在該區(qū)域內(nèi)均勻涂抹一定量（取決于分析方法的測量范圍的下限乘以清洗所有溶液的體積）的標(biāo)記化合物，待干燥后，使用一定體積的淋洗溶劑，采用一定速度沖洗平板，收集全部淋洗液，如有必要可以重復(fù)清洗過程。待沖洗完成后，吸取一定體積的淋洗液進(jìn)行測試，并計(jì)算回收率。淋洗法清洗回收率試驗(yàn)方法： 選擇同生產(chǎn)設(shè)清洗回收率淋洗法接受標(biāo)準(zhǔn)：回收率通常應(yīng)不低于95%； 外觀檢查即清洗后的淋洗溶液樣品同淋洗前的淋洗液做視覺檢查，

18、確定是否有顏色差異和異物存在；如果有上述現(xiàn)象發(fā)生，可直接判斷樣品不合格。注意：淋洗法樣品可對沖洗液直接檢測，也可對稀釋/濃縮后檢測。清洗回收率淋洗法接受標(biāo)準(zhǔn)：檢測限和定量限：檢測限系指在確定的試驗(yàn)條件下，試樣中的被測物能被檢查的最小量；定量限系指在確定的試驗(yàn)條件下，試樣中被測物能被準(zhǔn)確測定的最小量，其檢測結(jié)果應(yīng)具有一定準(zhǔn)確度和精密度。檢測限和定量限：檢測限系指在確定的試驗(yàn)條件下，試樣中的被測物檢測限和定量限：1.信噪比法：該方法適用于出現(xiàn)噪音的分析方法。 性噪比的測定時(shí)通過比較含已知低濃度被分析物的樣品與空白樣品的測試信號，確定被分析物可被確切的檢測的最小濃度，典型的性噪比為3:1；對于定量限典型的信噪比為10:1。檢測限和定量限：1.信噪比法：檢測限和定量限：2.根據(jù)相應(yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)差和斜率檢測限：LOD=3.3/S+空白值定量限：LOQ=10/S+空白值其中：為響應(yīng)值的標(biāo)準(zhǔn)差；S為校正曲線的斜率；S可從被分析物的校正曲線來估算；的值可由多種途徑估算