羅氏試劑盒說明書 CEA11973223001V151

1、11973223001V15癌胚抗原（Carcinoembryonic antigen，CEA） 2007-08, V 15 中文 4/4 Elecsys 和 cobas e 分析儀11731629 322 100測試本試劑盒適用的分析儀Elecsys 1010Elecsys 2010MODULAR ANALYTICS E170cobas e 411cobas e 601注意：CEA測定值的高低與所采用的檢測方法密切相關(guān)。因此檢測報(bào)告應(yīng)注明所采用的方法。用兩種方法測出的含量不能相互直接比較，以免出錯(cuò)。在療效觀察過程中，如因檢測方法改動(dòng)引起的含量變化，必須用原法同時(shí)測定，進(jìn)行平行比對。主要用途用

2、免疫學(xué)方法定量測定人血清或血漿中癌胚抗原含量。連續(xù)監(jiān)測CEA有助于癌癥病人的治療。電化學(xué)發(fā)光免疫測定試劑，適用于羅氏Elecsys和cobas e免疫測定分析儀。臨床應(yīng)用CEA是一種單體糖蛋白（分子量約為180，000道爾頓），碳水化合物的含量約在45-60%。1CEA類似于AFP，屬于在胚胎期產(chǎn)生的胎兒癌性抗原組。CEA基因家族包括2個(gè)亞組2的17個(gè)活化基因。其中第一組包含CEA和非特異性交叉抗原（NCA）,第二組包含妊娠特異性糖蛋白（PSG）。CEA主要來源于胎兒的胃、腸道和血液。在正常成人的腸道、胰腺和肝組織中也有少量存在。出生后，CEA的形成被抑制，因此，在正常成人的血液中CEA很難測

3、出?；加薪Y(jié)腸腺癌的病人，CEA含量通常很高6，8。而在2050%的良性腸道、胰腺、肝臟和肺部疾患中（例如膽汁淤積、慢性肝炎、胰腺炎、潰瘍性結(jié)腸炎、克羅恩病、肺氣腫）6，7CEA含量會(huì)輕至中度上升，但通常不超過10ng/ml。吸煙會(huì)使CEA升高。CEA測定主要用于指導(dǎo)結(jié)腸癌治療及隨訪。CEA測定不適用于普通人群的癌癥篩查，因?yàn)镃EA正常不能排除惡性疾病存在的可能。與CEA發(fā)生反應(yīng)的抗體與（幾乎所有的檢測方法）胎糞抗原（NCA2）也能反應(yīng)。與NCA1的交叉反應(yīng)率為0.7。CEA的抗原決定簇已經(jīng)被定義，相應(yīng)的單克隆抗體可分為6類。Elecsys CEA檢測使用的單克隆抗體與第2和第5抗原決定簇反應(yīng)。

4、檢測原理雙抗體夾心法，總檢測時(shí)間：18分鐘第一次孵育：10l標(biāo)本、生物素化的CEA單克隆特異性抗體和釕（Ru）a標(biāo)記的CEA特異性單克隆抗體一起孵育，形成抗原抗體夾心復(fù)合物。第二次孵育：添加包被鏈霉素的磁珠微粒進(jìn)行孵育，復(fù)合物與磁珠通過生物素和鏈霉素的作用結(jié)合。將反應(yīng)液吸入測量池中，通過電磁作用將磁珠吸附在電極表面。未與磁珠結(jié)合的物質(zhì)通過ProCell被去除。給電極加以一定的電壓，使復(fù)合體化學(xué)發(fā)光，并通過光電倍增器測量發(fā)光強(qiáng)度。儀器自動(dòng)通過2點(diǎn)校正的定標(biāo)曲線計(jì)算得到檢測結(jié)果。a)Tris(2,2-bipyridyl)ruthenium(II)-complex (Ru(bpy)三聯(lián)吡啶釕試劑工作

5、溶液M包被鏈霉素的磁珠微粒（透明瓶蓋），1瓶,8ml；包被鏈霉素的磁珠微粒，0.72mg/ml；防腐劑R1 生物素化的抗CEA單克隆抗體（灰蓋），1瓶，10ml；生物素化的抗CEA抗體（鼠/人）濃度3.0mg/L，磷酸緩沖液100mmol/L，pH 6.0；防腐劑R2 Ru(bpy)32+標(biāo)記的抗CEA單克隆抗體（黑蓋），1瓶，8ml，釕標(biāo)記的抗CEA單抗（鼠）濃度4.0mg/L，磷酸緩沖液100mmol/l，pH6.5；防腐劑警告和注意事項(xiàng)僅用于體外診斷。在使用本試劑盒時(shí)必需遵循所有試驗(yàn)室試劑操作的注意事項(xiàng)。所有廢棄物必需按照當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)進(jìn)行處置。專業(yè)人員可要求獲得安全數(shù)據(jù)報(bào)告。避免試劑和樣本（

6、樣本、定標(biāo)液和質(zhì)控品）產(chǎn)生氣泡。試劑處理試劑盒（M,R1和R2）為即用型，不能分開使用。試劑相關(guān)信息可以通過試劑條形碼閱讀獲取。儲(chǔ)存及穩(wěn)定性存放于28。請垂直擺放Elecsys CEA試劑盒，確保儀器的自動(dòng)攪拌器能夠完全混勻磁珠微粒。穩(wěn)定性：未開封試劑，28有效期內(nèi)均可使用開封試劑，2812周放置分析儀MODULAR ANALYTICS E170 和cobas e 601上6周放置分析儀Elecsys 2010 和 cobas e 411上6周放置分析儀Elecsys 1010上4周（試劑交替放置于冰箱和20-25的分析儀中，持續(xù)開蓋的情況下至多20小時(shí)）樣本的采集和準(zhǔn)備僅以下羅列的樣本類型通

7、過檢測要求。血清樣本須用標(biāo)準(zhǔn)試管或有分離膠的真空管收集。肝素鋰、肝素鈉、K3-EDTA和枸櫞酸抗凝的血漿都適用。使用枸櫞酸抗凝血漿檢測結(jié)果需+10糾正。標(biāo)準(zhǔn)：回收率90-110%，斜率0.9-1.1，截距0.95。穩(wěn)定性：2-8保存7天；-20保存6個(gè)月9選擇合適的試管進(jìn)行不同類型樣本的采集，不是所有的試管均可用于檢測。不同廠商的樣本采集系統(tǒng)可能含有不同的物質(zhì)，某些情況下會(huì)影響檢測結(jié)果。如果使用原始管進(jìn)行檢測（樣本前處理系統(tǒng)）時(shí)，應(yīng)遵循生產(chǎn)商所提供的指導(dǎo)。有沉淀的樣本檢測前必須先作離心處理。避免使用熱滅活的樣本。添加疊氮化合物的樣本和質(zhì)控品均不能使用。檢測前，樣本、定標(biāo)液及質(zhì)控品須室溫平衡(2

8、0-25)。由于蒸發(fā)因素的影響，樣本、定標(biāo)液及質(zhì)控品在分析儀上的檢測必須2小時(shí)內(nèi)完成。提供的物品參閱“試劑工作溶液”章節(jié)。需要的物品（未提供）貨號11731645, CEA CalSet ,規(guī)格4 x1 ml貨號11776452, PreciControl Tumor Marker，規(guī)格2 x3 ml，分別為PreciControl Tumor Marker 1和2 貨號11732277，Diluent Universal，2*16 ml 樣本稀釋液，或者貨號03183971. Diluent Universal，2*36 ml樣本稀釋液實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)設(shè)備Elecsys 1010/2010 、MO

9、DULAR ANALYTICS E170或cobas e分析儀Elecsys 1010/2010和cobas e 411分析儀所需材料：貨號11662988, ProCell, 6 x 380 mL ,系統(tǒng)緩沖液貨號11662970, CleanCell, 6 x 380 mL,測量池洗液 貨號11930346, Elecsys SysWash, 1 x 500 mL 附加洗液貨號11933159, SysClean 適配器 貨號11706829, Elecsys 1010分析杯, 12 x 32反應(yīng)管或者貨號11706802, Elecsys 2010 分析杯, 60 x 60 反應(yīng)管貨號1

10、1706799, Elecsys 2010 分析吸頭, 30 x 120移液管吸頭MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 601分析儀所需材料：貨號04880340,ProCell M, 2 x 2 L 系統(tǒng)緩沖液貨號04880293, CleanCell M, 2 x 2 L測量池洗液 貨號03023141, PC/CC杯, 12個(gè)用于在檢測前預(yù)熱Procell M及Cleancell M。貨號03005712,ProbeWash M, 12 x 70 mL 清洗液，用于在檢測完畢后或更換試劑時(shí)清洗試劑針。貨號12102137,反應(yīng)杯/吸頭 組合裝84反應(yīng)杯/吸頭 組合

11、裝48盒,廢物袋 貨號03023150, WasteLiner,廢物袋 貨號03027651,系統(tǒng)清潔適配器 M所有分析儀需要：貨號11298500, Elecsys SysClean, 5 x 100 mL 系統(tǒng)清洗液 檢測要優(yōu)化檢測性能，請遵照本說明書中有關(guān)分析儀的相關(guān)指導(dǎo)，并參照分析儀操作手冊。試劑使用前分析儀自動(dòng)攪拌磁珠微粒，使其處于懸浮狀態(tài)。試劑相關(guān)信息可通過條形碼自動(dòng)讀取，在特殊情況下，分析儀無法自動(dòng)讀取條碼信息時(shí)，請輸入條碼標(biāo)簽上的15位數(shù)字序列。MODULAR ANALYTICS E170、Elecsys2010和cobas e分析儀：將冷藏試劑室溫平衡至20C左右，放置分析儀

12、的試劑盤（20C）內(nèi)。避免泡沫產(chǎn)生。分析儀能自動(dòng)調(diào)節(jié)試劑溫度和開、關(guān)各試劑盒瓶蓋。Elecsys 1010 分析儀: 將冷藏試劑室溫平衡至20-25C左右，放置分析儀的試劑盤（20- 25C）內(nèi)。避免泡沫產(chǎn)生。使用前后手動(dòng)開關(guān)試劑盒瓶蓋。使用后保存于2-8C冰箱。定標(biāo)溯源性：該檢測方法可溯源至IRP WHO參考標(biāo)準(zhǔn) 73/601。每套Elecsys CEA試劑的條碼標(biāo)簽上均含有其批特異的定標(biāo)信息。使用Elecsys CEA定標(biāo)液可調(diào)整預(yù)設(shè)置的定標(biāo)曲線。定校頻率：新批號試劑必須進(jìn)行定標(biāo)（新試劑盒在分析儀上放置不能超過24小時(shí)）。以下情況建議重新進(jìn)行定標(biāo)：MODULAR ANALYTICS E17

13、0, Elecsys 2010 和cobas e 分析儀:使用同一批號試劑，1月后（28天）7天后（同一試劑盒在分析儀上使用）Elecsys 1010 分析儀:每盒試劑7天后（環(huán)境溫度 20-25C）3天后（環(huán)境溫度 25-32C）所有儀器根據(jù)需要：如失控。質(zhì)控可使用Elecsys PreciControl Tumor Marker1和2。其他合適的質(zhì)控品也適用。各濃度質(zhì)控至少每24小時(shí)內(nèi)檢測一次，每次更換試劑盒或定標(biāo)后也須進(jìn)行質(zhì)控。每個(gè)實(shí)驗(yàn)室可根據(jù)各自的情況設(shè)定合適的控制限和質(zhì)控周期。質(zhì)控值必須處于規(guī)定的控制限內(nèi)。若失控每個(gè)試驗(yàn)室必須采取相應(yīng)的糾正措施。計(jì)算儀器會(huì)自動(dòng)計(jì)算每個(gè)樣本中的分析物濃

14、度，單位是ng/mL或IU/L 。1ng/mL CEA相當(dāng)于16.9 mIU/mL。干擾因素檢測結(jié)果不受黃疸（膽紅素1129mol/L或66 mg/dL）, 溶血（血紅蛋白1.4mmol/L或 2.2g/dL）, 脂血(脂肪乳劑 1500mg/dL)和生物素120ng/mL或 5mg/天），必須在末次生物素治療8小時(shí)后采集樣本。檢測結(jié)果不受類風(fēng)濕因子影響（RF1500 IU/ml）。CEA檢測不受hook效應(yīng)影響（CEA濃度200,000 ng/mL）體外對26種常用藥物進(jìn)行試驗(yàn)未發(fā)現(xiàn)會(huì)影響檢測結(jié)果。由于檢測試劑使用單克隆抗鼠抗體，因此接受過小鼠單抗診療的病人會(huì)出現(xiàn)錯(cuò)誤結(jié)果。少數(shù)病例中高濃度的

15、釕抗體會(huì)影響檢測結(jié)果。試劑的添加物可將影響因素降到最低。作為診斷指標(biāo)，必須結(jié)合患者病史，臨床檢查和其他臨床資料來綜合評估檢測結(jié)果。檢測范圍0.200-1000 ng/mL（通過最低檢出限和廠商定標(biāo)曲線的最高值確定）。低于檢出限的值報(bào)告1000 ng/mL (1:50稀釋結(jié)果可報(bào)告至50000 ng/mL)。稀釋高于檢測范圍的標(biāo)本可用通用稀釋液（Elecsys Diluent Universal）稀釋。建議1:50稀釋（MODULAR ANALYTICS E170, Elecsys 1010/2010 和cobas e 分析儀可以自動(dòng)稀釋，也可以手工稀釋）。稀釋標(biāo)本的CEA濃度必須高于 20 n

16、g/mL。如用手工稀釋，結(jié)果應(yīng)乘稀釋倍數(shù)。如果是機(jī)器自動(dòng)稀釋，機(jī)器會(huì)自動(dòng)計(jì)算結(jié)果。期望值Elecsys CEA參考范圍來源自于352名健康人的調(diào)查，以下為研究數(shù)據(jù)：各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)各自建立參考范圍。特殊的性能指標(biāo)試劑在分析儀上的性能試驗(yàn)數(shù)據(jù)如下。各實(shí)驗(yàn)室由于具體情況不同，所得出的數(shù)據(jù)可能會(huì)稍有差異。精密度應(yīng)用Elecsys試劑盒、人混合血清樣本和質(zhì)控品驗(yàn)證重復(fù)性，按照NCCLS的EP5-A執(zhí)行：每天6次，共10天(n=60)；批內(nèi)精密度由 MODULAR ANALYTICS E170分析儀完成，n=21下面是獲得的結(jié)果。分析靈敏度（最低檢出限）0.20 ng/mL最低檢出限指區(qū)別于零濃度的分析物最低

17、檢測濃度。最低檢出限是最低濃度標(biāo)準(zhǔn)品+2SD得到的濃度（廠商定標(biāo)品1+2SD，批內(nèi)精密度，n=21）。方法學(xué)比較使用臨床標(biāo)本比較Elecsys CEA 檢測（y）和CEA酶免疫檢測（x），相關(guān)性數(shù)據(jù)如下：標(biāo)本數(shù)n=108Passing/Bablok10 線性回歸y = 0.91x +0.06 y = 0.90 x +0.04T = 0.913 r = 0.992樣品比較的濃度范圍約為0.752 ng/mL。分析特異性試劑使用的單克隆抗體，發(fā)現(xiàn)存在以下交叉反應(yīng)：NCA10.7%，NCA2 72%與AFP和1酸性糖蛋白無交叉反應(yīng)。沒有關(guān)于與肺和肝臟中糖蛋白可能發(fā)生交叉反應(yīng)的調(diào)查研究參考文獻(xiàn)1. G

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