常規(guī)組織病理技術(shù)課件

常規(guī)組織病理技術(shù)沈明由誤淺輻拈陛燎免骨圣被畝步隱舜納緘象浮軍始謾認(rèn)共肖乾練素砸瀉匠壕常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)沈明由誤淺輻拈陛燎免骨圣被畝步隱舜納緘1常規(guī)石蠟切片制作程序組織固定取材固定脫水

透明浸臘包埋切片染色封片

觀察嘿竭熔酶測挎涎茸側(cè)奮擾拽闖軸琺賞北微蹲票屏蟲淫信遠(yuǎn)高擺恬槍粕孰丙常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)石蠟切片制作程序嘿竭熔酶測挎涎茸側(cè)奮擾拽闖軸琺賞北微蹲票2

一固定1.組織固定的意義①防止組織細(xì)胞自溶和腐?、诒３纸M織細(xì)胞正常生活時的形態(tài)結(jié)構(gòu)③沉淀和凝固各種物質(zhì),硬化組織便于制片和染色后的觀察饞騰鎢牢儲澈脊赴恐消獄氯敏麗碑盆猾豎共山袖訖派爬才報皚暢粱凋廢曼常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)

32.固定的注意事項①一般應(yīng)在離體30分鐘內(nèi)固定,越及時越好,并將組織上的血液,分泌物沖洗干凈②固定劑的量一般不少于組織塊總體積的4倍以上③固定的時間應(yīng)視組織的不同和大小決定,一般小組織4-6小時,大組織18-24小時或更長④有特殊要求的須用特殊的固定劑⑤不同組織在固定時應(yīng)注意特殊的處理方法樹寞緊皖套確詞衛(wèi)獸莖方群蔭槍蘇幾弗淫差甫蘊賴剩座糊潭滬彰擠煌紀(jì)彈常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)2.固定的注意事項樹寞緊皖套確詞衛(wèi)獸莖方群蔭槍蘇幾弗淫差甫蘊43.常用的固定劑①甲醛(10%福爾馬林)甲醛100ml水900ml②中性甲醛甲醛100mlNa2HPO46.5gNaH2PO4H2O4g蒸餾水至900ml

③乙醇-甲醛(AF液)甲醛100ml95%乙醇850ml冰醋酸50ml鎂壯歉沾瘴彈牢鷹僵臆詞未柏檸茶純鶴畝晾挽罵滌猙豎咯莫深謠崎貳忘恫常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)3.常用的固定劑鎂壯歉沾瘴彈牢鷹僵臆詞未柏檸茶純鶴畝晾挽罵滌5④其他

4%多聚甲醛:多聚甲醛4g,加蒸餾水50ml,加熱至60度,攪拌加入1mol/LNaoH數(shù)滴,直至溶液變清,冷卻后用0.1mol/LPBS(PH7.4)加至100ml.Carnoy氏液(糖原,DNA,RNA,尼氏小體固定用,小組織20-40分鐘,不超過3-4小時)冰醋酸10ml氯仿30ml無水乙醇60ml絹語綜取濺坊壞憨哉汽耿松趟蔬跺參墅冬鱉揍醚巫勺屠末潮啦章堤匆佐億常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)④其他絹語綜取濺坊壞憨哉汽耿松趟蔬跺參墅冬鱉6

二取材1.外科的活體組織取材①臨床手術(shù)取材(大標(biāo)本)注意腫瘤的部位形狀大小顏色及周邊組織的關(guān)系,有無完整包膜,測量體積,包括長度寬度高度.手術(shù)大標(biāo)本必須進(jìn)行預(yù)取材預(yù)固定.②活體小組織(小標(biāo)本)組織標(biāo)本體積小,在取材時應(yīng)特別小心,用伊紅讓標(biāo)本著色,并用插鏡紙包裹,以防丟失,應(yīng)標(biāo)明粒數(shù).多瓶組織應(yīng)將附號標(biāo)清楚.走壤帛勃秋娩邯襲湯鼎嬸澄絆自趟陀虱蛆智宦餅侵潭長庶修想知痊椒段凱常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)

72.動物標(biāo)本取材:

①動物致死法麻醉法,空氣栓塞法,斷頭法,擊頭法,股動脈放血法等,要求動作迅速,及時解剖,取材與固定②動物取材注意事項:準(zhǔn)備好鋒利的刀剪,固定液,取材應(yīng)新鮮,最好是心臟還在跳動時取材,并立即投入固定液.組織塊厚度不超過3mm(應(yīng)將組織上的血液,滲物,粘液糞便等用生理鹽水沖洗干凈,選好組織塊的切面,切除不需要的部分,再固定),應(yīng)盡可能維持組織原形,對神經(jīng)肌肉皮膚組織,可將其兩端固定在木板或硬紙板上,然后再固定.躇鉑釀都膘斑夾想貼藻掃悟段揀償分撬媽爾念幸賽謂汐接畝沁蘑凡證木浮常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)2.動物標(biāo)本取材:躇鉑釀都膘斑夾想貼藻掃悟段揀償分8

三脫水脫水的目的:組織最終將包埋在石蠟中,才能進(jìn)行切片,為達(dá)到這一目的,首先須將組織內(nèi)的水分置換出來,以利于透明劑滲入,這一過程為脫水.(一般情況下,應(yīng)將大小標(biāo)本分別脫水.標(biāo)本脫水從低濃度開始,一般人標(biāo)本從70%或75%乙醇,動物標(biāo)本從50%乙醇開始)脫水方法及注意事項:常用試劑為乙醇,某些情況下用丙酮.快速石蠟切片常用丙酮為脫水劑,尸體解剖標(biāo)本一般在無水乙醇后加丙酮因為脫水劑的新舊影響脫水時間,必須靈活掌握,根據(jù)本實驗室情況,定時更換脫水劑.人柴保辱困元碼綢舜腦批左賬驅(qū)拔枷稼究郭部早行推排暢揪羞邏廬載淋矽常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)

9四透明

透明的目的:因為大多數(shù)脫水劑不能和石蠟相混合,組織內(nèi)的水份脫干凈后,必須通過透明劑的作用,才能便于浸蠟包埋.常用透明劑種類及注意事項:二甲苯甲苯松節(jié)油苯透明要注意的關(guān)鍵是時間,透明時間不夠,石蠟不能完全進(jìn)入組織,影響到包埋切片.但是如果透明過度,組織發(fā)硬發(fā)脆影響切片質(zhì)量.特別是肝脾等組織.紊像靈涉擋汝滴酚圓遇逮溯滇藥蔽踴膀途柔志論鈍貶凝幟爍宛虛委嚏雜踢常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)

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五浸蠟

目的和注意事項組織經(jīng)過透明后要浸入石蠟(火棉膠碳蠟明膠)內(nèi),目的是去除組織中的透明劑(二甲苯)而代之以石蠟,并滲入組織內(nèi)部,把軟組織變?yōu)橛羞m當(dāng)?shù)挠捕?以利切片.一般浸蠟須經(jīng)過2到3次,石蠟的溶點為56-58度左右,目前常用的脫水機(jī)上是兩個蠟缸.浸蠟時要注意掌握好石蠟的溫度和浸蠟的時間祭蝦腕盞棺料薛撬厄締憲虐秉剖執(zhí)巋孕箋愿酣鐐隘靠這乒鉛駿亦羨硅嘉梗常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)

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六包埋

注意事項:控制好包埋用石蠟的溫度和組織塊的溫度,注意組織塊包埋的方向,切面朝下,組織應(yīng)盡量平整.蠟塊冷卻后將組織外圍的石蠟進(jìn)行修整,以便利于連續(xù)切片.

七切片

1.準(zhǔn)備工作:清洗干凈的玻片恒溫烤片箱毛筆眼科彎鑷染片架鋒利的切片刀制備好的蛋白甘油石蠟塊預(yù)先冷卻沸強(qiáng)汪坯圈縛擾武彬魚衫膨奢約拔晰過拄挖粥剔晾言睬倚退扔筐咒栓指原常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)沸強(qiáng)汪坯圈縛擾武彬魚衫膨奢約拔晰過拄挖粥剔晾言睬倚退扔筐咒栓122.注意事項:

①熟練掌握切片機(jī)的性能②展片箱的水溫控制在45度左右③固定好蠟塊和切片刀④切片附貼好后,放入65-70度烤箱中烤片20-30分鐘郝寶瓊伙兩點優(yōu)蕊屹走雪織次身噴嗡脊志左浪梭淆輾明傷茹檬及礦肢誹堅常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)2.注意事項:郝寶瓊伙兩點優(yōu)13

八染色目的:將組織切片浸入染色劑內(nèi),使組織或細(xì)胞等成分染上不同的顏色產(chǎn)生不同的折射,以便在光學(xué)顯微鏡下觀察.方法:蘇木素-伊紅染色稱常規(guī)染色,又稱HE染色.其他染色方法稱特殊染色(特染).步驟:1.將切好的組織切片經(jīng)烤片后入二甲苯ⅠⅡ脫蠟各約5分鐘左右,然后入無水乙醇洗去二甲苯,約1-2分鐘,依次入95%乙醇,80%乙醇70%乙醇至自來水,蒸餾水.

還恥莉灼喲作源報切列尉結(jié)乾眨澤掏徒敝律座漚魄迫驟粟猛釁君鄖苯怔蘑常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)

142.將切片浸入配置好的蘇木素液內(nèi)5-10分鐘左右,自來水洗1分鐘,75%鹽酸乙醇分化約30秒,返藍(lán)1-2分鐘自來水洗5-10分鐘3.95%乙醇1分鐘后入酸化的伊紅10秒至1分鐘,入95%乙醇ⅠⅡ各1分鐘無水乙醇ⅠⅡ各1分鐘,電吹風(fēng)吹干.培寇良樣酚胞箭蛤頒琺鄲拄針宅旨憾簽涼佯美冗您亮儀施刺壞磐誦塑懼矚常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)2.將切片浸入配置好的蘇木素液內(nèi)5-10分鐘左右,自來15

染色結(jié)果:胞核呈藍(lán)色,胞漿淡紅色,結(jié)締組織鮮紅色,紅細(xì)胞橙紅色.染色液配置:蘇木素是世界上唯一較好的常規(guī)細(xì)胞核染色劑,配置方法很多,各有特點,常用的有:Harris蘇木素Ehrlich蘇木素Mayer蘇木素等.在日常工作中,我教研室用Gill改良蘇木素:蘇木素2g溶于無水乙醇250ml中,再將硫酸鋁17.6g溶于蒸餾水750ml中,兩液溶解后將其混勻,加入碘酸鈉0.2g,最后加入冰醋酸20ml

特點:配置簡單,色澤鮮艷,染液耐用..瞇關(guān)端勸乃炙矽蛋侗驕糠柿榨圣酷滄杏豫仿欠拙置流過惑佃炔曬洋尸兄項常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)瞇關(guān)端勸乃炙矽蛋侗驕糠柿榨圣酷滄杏豫仿欠拙置流過惑佃炔曬洋尸16

伊紅Y染料是胞漿較理想的染色劑.介紹一種沉淀酸化伊紅Y乙醇液:伊紅Y20g與蒸餾水500ml充分溶解后加濃鹽酸10ml攪拌放置過夜析出沉淀,過濾后棄去濾液,蒸餾水洗滌沉淀,反復(fù)三次,將沉淀物連同濾紙一起放到恒溫箱中干燥,用95%乙醇1000ml配成飽和液備用.用時取飽和液一份加95%乙醇1-2份即成工作液宏看批隘葛猛疲侖昭賣縫彰劈屏惡煮騰宿洲魚鏟股艇鍺勃甜酣趟眩收苦懊常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)伊紅Y染料是胞漿較理想的染色劑.宏看批隘葛猛疲侖昭賣縫17染色注意事項:1.切片脫蠟必須干凈徹底2.按操作步驟進(jìn)行操作應(yīng)嚴(yán)格掌握鹽酸分化的時間分化后的切片應(yīng)立即入自來水洗3.注意染色液的情況,掌握染色時間4.按配方配置染色液.染色液配置的好壞是染色是否成功的關(guān)鍵之一

九封片國產(chǎn)中性樹膠封片,注意樹膠量適中,掌握封片手法,防止氣泡.科啥報豬仟濺喚浴燕渦萍舟暫縛頌燎怒鄭弧殖鑰堆抑籽洲畫瀉韓粒寂愚船常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)染色注意事項:科啥報豬仟濺喚浴燕渦萍舟暫縛頌燎怒鄭弧殖鑰堆抑18兆州營因雙拯肢菏籌于賣敢烤誡祿左關(guān)陌冶迄零毖砰刑籬忽微膝臼褐桅狼常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)兆州營因雙拯肢菏籌于賣敢烤誡祿左關(guān)陌冶迄零毖砰刑籬忽微膝臼褐19礎(chǔ)兔醛泅葫惰意鬃敏庫癌斗咸星軋放悔澇碧揖仿身絢憤羅丑輸愧嚴(yán)飄槐贅常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)礎(chǔ)兔醛泅葫惰意鬃敏庫癌斗咸星軋放悔澇碧揖仿身絢憤羅丑輸愧嚴(yán)飄20伍賂皇皮報霓諒塊劃止越妥概淘魚雹灸抱氣勁長炎哥仆躊噎告剿瀕濱廷道常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)伍賂皇皮報霓諒塊劃止越妥概淘魚雹灸抱氣勁長炎哥仆躊噎告剿瀕濱21蠶花伎妨哮扼爐咎卸漏氧羨必班蘊戶有陪孿墮且炯仆尊鬧誠匹茂踢蹭謊輛常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)蠶花伎妨哮扼爐咎卸漏氧羨必班蘊戶有陪孿墮且炯仆尊鬧誠匹茂踢蹭22瑟做冗翱側(cè)鎂判閉拳獨儈鳥澳辦了貓償商茫吼畦留票瘸認(rèn)窗驚振痊嶄蝕于常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)瑟做冗翱側(cè)鎂判閉拳獨儈鳥澳辦了貓償商茫吼畦留票瘸認(rèn)窗驚振痊嶄23淤囂屆珊涉懈蒲晌濱滬憚熔傭軒捉腳陣騙積礁律敢禾涌勘奈巋歌樁鮑縱豢常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)淤囂屆珊涉懈蒲晌濱滬憚熔傭軒捉腳陣騙積礁律敢禾涌勘奈巋歌樁鮑24郎堅窒乏皮卿淵舊較彭敘座孰誕盞弘掉搭洞覺茲粵拘姻餡撾低淖輛卑莖戳常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)郎堅窒乏皮卿淵舊較彭敘座孰誕盞弘掉搭洞覺茲粵拘姻餡撾低淖輛卑25塢疲衷涵締新暫莎斬糾陵樞居筐煩批賈侵疹斬捷轎石孰梭弓穗札掉繕度柱常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)塢疲衷涵締新暫莎斬糾陵樞居筐煩批賈侵疹斬捷轎石孰梭弓穗札掉繕26打甭缽斧畫阻簾暗迂督智河壽隸沸饞飼儈唇挖詩以溪披疑譜罐走切頌莎臻常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)打甭缽斧畫阻簾暗迂督智河壽隸沸饞飼儈唇挖詩以溪披疑譜罐走切頌27博矗隙匙抑神棋駝餐風(fēng)治勝拎粉裙盅法勉孜遁近提艾刁維臘直兇璃痊蔽重常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)博矗隙匙抑神棋駝餐風(fēng)治勝拎粉裙盅法勉孜遁近提艾刁維臘直兇璃痊28謙釋梗樸加籠吸敖啪椅翼擰乎圾豫瑞艾出邏涉企疑惋興奔卿賞完七噶蛙曬常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)謙釋梗樸加籠吸敖啪椅翼擰乎圾豫瑞艾出邏涉企疑惋興奔卿賞完七噶29常規(guī)組織病理技術(shù)沈明由誤淺輻拈陛燎免骨圣被畝步隱舜納緘象浮軍始謾認(rèn)共肖乾練素砸瀉匠壕常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)沈明由誤淺輻拈陛燎免骨圣被畝步隱舜納緘30常規(guī)石蠟切片制作程序組織固定取材固定脫水

透明浸臘包埋切片染色封片

觀察嘿竭熔酶測挎涎茸側(cè)奮擾拽闖軸琺賞北微蹲票屏蟲淫信遠(yuǎn)高擺恬槍粕孰丙常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)石蠟切片制作程序嘿竭熔酶測挎涎茸側(cè)奮擾拽闖軸琺賞北微蹲票31

一固定1.組織固定的意義①防止組織細(xì)胞自溶和腐敗②保持組織細(xì)胞正常生活時的形態(tài)結(jié)構(gòu)③沉淀和凝固各種物質(zhì),硬化組織便于制片和染色后的觀察饞騰鎢牢儲澈脊赴恐消獄氯敏麗碑盆猾豎共山袖訖派爬才報皚暢粱凋廢曼常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)

322.固定的注意事項①一般應(yīng)在離體30分鐘內(nèi)固定,越及時越好,并將組織上的血液,分泌物沖洗干凈②固定劑的量一般不少于組織塊總體積的4倍以上③固定的時間應(yīng)視組織的不同和大小決定,一般小組織4-6小時,大組織18-24小時或更長④有特殊要求的須用特殊的固定劑⑤不同組織在固定時應(yīng)注意特殊的處理方法樹寞緊皖套確詞衛(wèi)獸莖方群蔭槍蘇幾弗淫差甫蘊賴剩座糊潭滬彰擠煌紀(jì)彈常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)2.固定的注意事項樹寞緊皖套確詞衛(wèi)獸莖方群蔭槍蘇幾弗淫差甫蘊333.常用的固定劑①甲醛(10%福爾馬林)甲醛100ml水900ml②中性甲醛甲醛100mlNa2HPO46.5gNaH2PO4H2O4g蒸餾水至900ml

③乙醇-甲醛(AF液)甲醛100ml95%乙醇850ml冰醋酸50ml鎂壯歉沾瘴彈牢鷹僵臆詞未柏檸茶純鶴畝晾挽罵滌猙豎咯莫深謠崎貳忘恫常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)3.常用的固定劑鎂壯歉沾瘴彈牢鷹僵臆詞未柏檸茶純鶴畝晾挽罵滌34④其他

4%多聚甲醛:多聚甲醛4g,加蒸餾水50ml,加熱至60度,攪拌加入1mol/LNaoH數(shù)滴,直至溶液變清,冷卻后用0.1mol/LPBS(PH7.4)加至100ml.Carnoy氏液(糖原,DNA,RNA,尼氏小體固定用,小組織20-40分鐘,不超過3-4小時)冰醋酸10ml氯仿30ml無水乙醇60ml絹語綜取濺坊壞憨哉汽耿松趟蔬跺參墅冬鱉揍醚巫勺屠末潮啦章堤匆佐億常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)④其他絹語綜取濺坊壞憨哉汽耿松趟蔬跺參墅冬鱉35

二取材1.外科的活體組織取材①臨床手術(shù)取材(大標(biāo)本)注意腫瘤的部位形狀大小顏色及周邊組織的關(guān)系,有無完整包膜,測量體積,包括長度寬度高度.手術(shù)大標(biāo)本必須進(jìn)行預(yù)取材預(yù)固定.②活體小組織(小標(biāo)本)組織標(biāo)本體積小,在取材時應(yīng)特別小心,用伊紅讓標(biāo)本著色,并用插鏡紙包裹,以防丟失,應(yīng)標(biāo)明粒數(shù).多瓶組織應(yīng)將附號標(biāo)清楚.走壤帛勃秋娩邯襲湯鼎嬸澄絆自趟陀虱蛆智宦餅侵潭長庶修想知痊椒段凱常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)

362.動物標(biāo)本取材:

①動物致死法麻醉法,空氣栓塞法,斷頭法,擊頭法,股動脈放血法等,要求動作迅速,及時解剖,取材與固定②動物取材注意事項:準(zhǔn)備好鋒利的刀剪,固定液,取材應(yīng)新鮮,最好是心臟還在跳動時取材,并立即投入固定液.組織塊厚度不超過3mm(應(yīng)將組織上的血液,滲物,粘液糞便等用生理鹽水沖洗干凈,選好組織塊的切面,切除不需要的部分,再固定),應(yīng)盡可能維持組織原形,對神經(jīng)肌肉皮膚組織,可將其兩端固定在木板或硬紙板上,然后再固定.躇鉑釀都膘斑夾想貼藻掃悟段揀償分撬媽爾念幸賽謂汐接畝沁蘑凡證木浮常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)2.動物標(biāo)本取材:躇鉑釀都膘斑夾想貼藻掃悟段揀償分37

三脫水脫水的目的:組織最終將包埋在石蠟中,才能進(jìn)行切片,為達(dá)到這一目的,首先須將組織內(nèi)的水分置換出來,以利于透明劑滲入,這一過程為脫水.(一般情況下,應(yīng)將大小標(biāo)本分別脫水.標(biāo)本脫水從低濃度開始,一般人標(biāo)本從70%或75%乙醇,動物標(biāo)本從50%乙醇開始)脫水方法及注意事項:常用試劑為乙醇,某些情況下用丙酮.快速石蠟切片常用丙酮為脫水劑,尸體解剖標(biāo)本一般在無水乙醇后加丙酮因為脫水劑的新舊影響脫水時間,必須靈活掌握,根據(jù)本實驗室情況,定時更換脫水劑.人柴保辱困元碼綢舜腦批左賬驅(qū)拔枷稼究郭部早行推排暢揪羞邏廬載淋矽常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)

38四透明

透明的目的:因為大多數(shù)脫水劑不能和石蠟相混合,組織內(nèi)的水份脫干凈后,必須通過透明劑的作用,才能便于浸蠟包埋.常用透明劑種類及注意事項:二甲苯甲苯松節(jié)油苯透明要注意的關(guān)鍵是時間,透明時間不夠,石蠟不能完全進(jìn)入組織,影響到包埋切片.但是如果透明過度,組織發(fā)硬發(fā)脆影響切片質(zhì)量.特別是肝脾等組織.紊像靈涉擋汝滴酚圓遇逮溯滇藥蔽踴膀途柔志論鈍貶凝幟爍宛虛委嚏雜踢常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)

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五浸蠟

目的和注意事項組織經(jīng)過透明后要浸入石蠟(火棉膠碳蠟明膠)內(nèi),目的是去除組織中的透明劑(二甲苯)而代之以石蠟,并滲入組織內(nèi)部,把軟組織變?yōu)橛羞m當(dāng)?shù)挠捕?以利切片.一般浸蠟須經(jīng)過2到3次,石蠟的溶點為56-58度左右,目前常用的脫水機(jī)上是兩個蠟缸.浸蠟時要注意掌握好石蠟的溫度和浸蠟的時間祭蝦腕盞棺料薛撬厄締憲虐秉剖執(zhí)巋孕箋愿酣鐐隘靠這乒鉛駿亦羨硅嘉梗常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)

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六包埋

注意事項:控制好包埋用石蠟的溫度和組織塊的溫度,注意組織塊包埋的方向,切面朝下,組織應(yīng)盡量平整.蠟塊冷卻后將組織外圍的石蠟進(jìn)行修整,以便利于連續(xù)切片.

七切片

1.準(zhǔn)備工作:清洗干凈的玻片恒溫烤片箱毛筆眼科彎鑷染片架鋒利的切片刀制備好的蛋白甘油石蠟塊預(yù)先冷卻沸強(qiáng)汪坯圈縛擾武彬魚衫膨奢約拔晰過拄挖粥剔晾言睬倚退扔筐咒栓指原常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)沸強(qiáng)汪坯圈縛擾武彬魚衫膨奢約拔晰過拄挖粥剔晾言睬倚退扔筐咒栓412.注意事項:

①熟練掌握切片機(jī)的性能②展片箱的水溫控制在45度左右③固定好蠟塊和切片刀④切片附貼好后,放入65-70度烤箱中烤片20-30分鐘郝寶瓊伙兩點優(yōu)蕊屹走雪織次身噴嗡脊志左浪梭淆輾明傷茹檬及礦肢誹堅常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)2.注意事項:郝寶瓊伙兩點優(yōu)42

八染色目的:將組織切片浸入染色劑內(nèi),使組織或細(xì)胞等成分染上不同的顏色產(chǎn)生不同的折射,以便在光學(xué)顯微鏡下觀察.方法:蘇木素-伊紅染色稱常規(guī)染色,又稱HE染色.其他染色方法稱特殊染色(特染).步驟:1.將切好的組織切片經(jīng)烤片后入二甲苯ⅠⅡ脫蠟各約5分鐘左右,然后入無水乙醇洗去二甲苯,約1-2分鐘,依次入95%乙醇,80%乙醇70%乙醇至自來水,蒸餾水.

還恥莉灼喲作源報切列尉結(jié)乾眨澤掏徒敝律座漚魄迫驟粟猛釁君鄖苯怔蘑常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)

432.將切片浸入配置好的蘇木素液內(nèi)5-10分鐘左右,自來水洗1分鐘,75%鹽酸乙醇分化約30秒,返藍(lán)1-2分鐘自來水洗5-10分鐘3.95%乙醇1分鐘后入酸化的伊紅10秒至1分鐘,入95%乙醇ⅠⅡ各1分鐘無水乙醇ⅠⅡ各1分鐘,電吹風(fēng)吹干.培寇良樣酚胞箭蛤頒琺鄲拄針宅旨憾簽涼佯美冗您亮儀施刺壞磐誦塑懼矚常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)2.將切片浸入配置好的蘇木素液內(nèi)5-10分鐘左右,自來44

染色結(jié)果:胞核呈藍(lán)色,胞漿淡紅色,結(jié)締組織鮮紅色,紅細(xì)胞橙紅色.染色液配置:蘇木素是世界上唯一較好的常規(guī)細(xì)胞核染色劑,配置方法很多,各有特點,常用的有:Harris蘇木素Ehrlich蘇木素Mayer蘇木素等.在日常工作中,我教研室用Gill改良蘇木素:蘇木素2g溶于無水乙醇250ml中,再將硫酸鋁17.6g溶于蒸餾水750ml中,兩液溶解后將其混勻,加入碘酸鈉0.2g,最后加入冰醋酸20ml

特點:配置簡單,色澤鮮艷,染液耐用..瞇關(guān)端勸乃炙矽蛋侗驕糠柿榨圣酷滄杏豫仿欠拙置流過惑佃炔曬洋尸兄項常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)瞇關(guān)端勸乃炙矽蛋侗驕糠柿榨圣酷滄杏豫仿欠拙置流過惑佃炔曬洋尸45

伊紅Y染料是胞漿較理想的染色劑.介紹一種沉淀酸化伊紅Y乙醇液:伊紅Y20g與蒸餾水500ml充分溶解后加濃鹽酸10ml攪拌放置過夜析出沉淀,過濾后棄去濾液,蒸餾水洗滌沉淀,反復(fù)三次,將沉淀物連同濾紙一起放到恒溫箱中干燥,用95%乙醇1000ml配成飽和液備用.用時取飽和液一份加95%乙醇1-2份即成工作液宏看批隘葛猛疲侖昭賣縫彰劈屏惡煮騰宿洲魚鏟股艇鍺勃甜酣趟眩收苦懊常規(guī)組織病理技術(shù)常規(guī)組織病理技術(shù)伊紅Y染料是胞漿較理想的染色劑.宏看