新型感染標(biāo)志物降鈣素原(PCT)的臨床應(yīng)用

內(nèi)容提要：用途：根據(jù)世界衛(wèi)生組織數(shù)據(jù)顯示，感染是造成人類死亡的最重要因素，約占死亡的25%，其中呼吸道感染是導(dǎo)致患者死亡最主要的感染性疾病，如何早期診斷感染，鑒別感染，鑒別病原體類型，評估感染程度并有效指導(dǎo)抗菌藥物的使用成為感染臨床診療所面臨的重要挑戰(zhàn)。第一頁，共二十五頁。依靠血常規(guī)，胸部影像等檢查可能漏診疑似病例，無法快速鑒別致病菌，因此各臨床科室需要理想的微生物標(biāo)志物以實現(xiàn)感染早期診斷，準(zhǔn)確評估感染程度，指導(dǎo)抗菌藥物的使用，從而提高治療成功率，降低死亡率。第二頁，共二十五頁。降鈣素原(PCT)是降鈣素(Calcltonin，CT)的前體，主要在甲狀腺濾泡旁細(xì)胞內(nèi)合成，是由116個氨基酸組成的糖蛋白，分子量大約13KD。它可以在酶的作用下逐步裂解成57個氨基酸的氨基PCT，32個氨基酸的CT和21個氨基酸的降鈣蛋白。降鈣素原檢測是一種評價細(xì)菌感染的最新替代指標(biāo)，是用于細(xì)菌感染/膿毒癥鑒別診斷、嚴(yán)重程度判斷、治療監(jiān)測、預(yù)后評估及抗生素管理使用的具有創(chuàng)新意義的診斷指標(biāo)。第三頁，共二十五頁。意義：1、細(xì)菌感染/膿毒癥的鑒別診斷

當(dāng)有細(xì)菌、真菌重癥感染時，如膿毒癥、全身性炎癥反應(yīng)綜合征（SIRS）時，血液中的PCT濃度在2-6小時內(nèi)迅速升高，而自身免疫、過敏和病毒感染等其他非細(xì)菌性感染時，PCT水平輕度升高或是不升高。第四頁，共二十五頁。2、細(xì)菌感染/膿毒癥的嚴(yán)重程度判斷在感染疾病嚴(yán)重程度的發(fā)展過程中，PCT隨著嚴(yán)重程度的不同（局部感染、膿毒癥、嚴(yán)重膿毒癥、膿毒性休克），呈現(xiàn)由低到高的濃度變化，對于感染程度及器官機(jī)能障礙的嚴(yán)重性進(jìn)行準(zhǔn)確的判斷。第五頁，共二十五頁。3、細(xì)菌感染/膿毒癥的預(yù)后評估及治療監(jiān)測無論是對膿毒癥的診斷、預(yù)后及治療監(jiān)測PCT都體現(xiàn)出最優(yōu)異的性能。連續(xù)的監(jiān)測PCT血中濃度可以更好的評估患者的預(yù)后，持續(xù)升高的PCT水平，提示比較差的預(yù)后，PCT呈快速下降趨勢，預(yù)示著成功的治療效果。第六頁，共二十五頁。4、指導(dǎo)抗生素的使用在重癥監(jiān)護(hù)室（ICU）治療中縮短抗生素療程可能會造成具有多重抗藥性細(xì)菌的出現(xiàn)，建立一個有效的基于生物標(biāo)記物降鈣素原的運(yùn)算法則以降低抗生素用量。通過測定患者體內(nèi)的降鈣素原的含量來指導(dǎo)抗生素的使用，與對照組相比：降鈣素原組抗生素的使用明顯下降、治療天數(shù)縮短、抗生素的成本降低但是達(dá)到了相近的治療效果。第七頁，共二十五頁?？萍荚恚荷限D(zhuǎn)發(fā)光免疫層析技術(shù)（UPT-LF）是近十年來產(chǎn)生的一種新型免疫檢測技術(shù)。其以具有獨特光學(xué)特性的上轉(zhuǎn)發(fā)光顆粒（UPT）作為示蹤物與免疫層析技術(shù)相結(jié)合，采用上轉(zhuǎn)發(fā)光免疫分析儀（亦稱UPT生物傳感器）對檢測結(jié)果進(jìn)行自動判讀。第八頁，共二十五頁。該技術(shù)所具有的3個核心技術(shù)元素使其具有較為完善的技術(shù)性能：（1）免疫層析作為檢測平臺：免疫層析是最為經(jīng)典也是目前最為成熟的現(xiàn)場快速檢測技術(shù)，以其作為生物檢測平臺使得UPT-LF簡便、快速；第九頁，共二十五頁。（2）UCP顆粒進(jìn)行特異示蹤：UCP顆粒自然界中獨一無二的上轉(zhuǎn)發(fā)光特性（以紅外光區(qū)>780nm激發(fā)，而發(fā)射可見光475nm-670nm，即能量上轉(zhuǎn)），以及UCP顆粒通過化學(xué)共價鍵與生物活性分子結(jié)合的交聯(lián)方式，無論從光學(xué)方面的“零本底”級高光學(xué)信噪比，還是生物學(xué)方面面對復(fù)雜樣品的高耐受性，都對其在UPT-LF的特異性、敏感性予以了保證；第十頁，共二十五頁。（3）精密儀器實現(xiàn)數(shù)據(jù)分析：以微型、集成、高精光學(xué)電子器件作為基礎(chǔ)，采用精密儀器對UPT-LF信號進(jìn)行自動采集與分析，同時兼顧了UPT-LF檢測的便攜化與精確定量能力；第十一頁，共二十五頁。主要技術(shù)指標(biāo)：1．線性范圍:0.01ng/ml～50ng/ml2．相關(guān)系數(shù)：≥0.99003．分析靈敏度：≤0.01ng/ml4.準(zhǔn)確性：回收率在85%-115%范圍內(nèi)第十二頁，共二十五頁。5．特異性：其它物質(zhì)的交叉反應(yīng)數(shù)據(jù)如下：交叉原濃度測定濃度HSA2×108ng/ml≤0.25ng/ml膽紅素2000ng/ml≤0.25ng/ml第十三頁，共二十五頁。6．檢測一致性：批內(nèi)變異系數(shù)≤15.0%，批間變異系數(shù)≤15.0%。第十四頁，共二十五頁。實際使用效果：我院自2014年3月開展PCT檢測以來，已經(jīng)開展了2000人份的檢測，標(biāo)本遍及內(nèi)外各科。實際使用當(dāng)中，發(fā)現(xiàn)其在以下各科優(yōu)勢尤為明顯：第十五頁，共二十五頁。

1、重癥監(jiān)護(hù)ICU術(shù)后膿毒癥感染和多器官功能衰竭仍然是現(xiàn)代重癥監(jiān)護(hù)病房中最常見的死亡原因。中小手術(shù)，血漿PCT濃度通常在正常范圍內(nèi)。大手術(shù)如大的腹部手術(shù)或胸部手術(shù)，術(shù)后1-2天內(nèi)PCT濃度有升高，常為0.5-2ng/ml，偶爾超過5ng/ml，正常情況下常以24小時的半衰期速度幾天內(nèi)降至正常水平。因此，術(shù)后因感染造成的PCT高濃度或持續(xù)高水平很容易鑒別。復(fù)合創(chuàng)傷后12-24小時，PCT中度升高，可達(dá)2ng/ml，嚴(yán)重的肺或腹部創(chuàng)傷，PCT可達(dá)5ng/ml，如沒有感染并發(fā)癥，一般以24小時的半衰期速度降至正常范圍。第十六頁，共二十五頁。2、兒科小兒高熱用臨床手段常常難以區(qū)分不同的感染源。這一問題尤其會影響到因患血液病，腫瘤疾病而給予免疫抑制療法的患者的準(zhǔn)確治療。而且許多疾病伴有繼發(fā)性免疫病理改變，如風(fēng)濕性發(fā)熱等。因此對剛出生的患兒很難將其與原發(fā)性細(xì)菌感染相區(qū)別。第十七頁，共二十五頁。PCT對于細(xì)菌和病毒感染的鑒別診斷有很高的敏感性和特異性。由于細(xì)菌感染和病毒感染治療上存在本質(zhì)性的差別，因此，PCT對具有非特異性感染癥狀的患者的治療可提供有價值的信息。第十八頁，共二十五頁。檢測腦脊液中的蛋白和細(xì)胞無助于鑒別小兒細(xì)菌性腦膜炎和病毒性腦膜炎。而且許多具有特異性的檢測指標(biāo)之間存在明顯的交叉現(xiàn)象。高濃度的PCT只出現(xiàn)于細(xì)菌性腦膜炎；而病毒性腦膜炎，PCT仍保持在正常范圍內(nèi)（腦脊液中檢測不到PCT）。PCT用于中性粒細(xì)胞減少癥的診斷每天一次按時對PCT濃度的監(jiān)測，可對治療結(jié)果作出可靠的評價。第十九頁，共二十五頁。3、新生兒科許多疾病在早產(chǎn)兒和新生兒中無特異表現(xiàn)。血液學(xué)檢查和傳統(tǒng)的實驗室指標(biāo)如CRP對新生兒膿毒癥均不能作出可靠的診斷。微生物檢查結(jié)果需要幾天的時間，而且陰性結(jié)果并不能排除臨床感染的存在以及與此相關(guān)的高死亡率。與其他炎癥診斷指標(biāo)相比，PCT新生兒出生后膿毒癥的診斷具有高度的靈敏性和特異性。PCT也可用于對治療結(jié)果的評價。第二十頁，共二十五頁。早產(chǎn)兒和新生兒PCT年齡依賴性的正常參考值。PCT是新生兒膿毒癥高度特異性的指標(biāo)。早產(chǎn)兒和新生兒膿毒癥感染，PCT可作出較傳統(tǒng)方法更早更具特異性的診斷。第二十一頁，共二十五頁。4、PCT在外科的應(yīng)用

PCT濃度不受已存在的疾病如癌癥、變態(tài)反應(yīng)或自身免疫性疾病的影響，PCT明顯優(yōu)于其它炎癥因子如CRP和細(xì)胞因子，是一種客觀且易檢測的指標(biāo)，有其獨特的診斷優(yōu)勢。術(shù)后PCT的應(yīng)用，PCT與嚴(yán)重細(xì)菌感染和膿毒癥的發(fā)生及其過程有密切的關(guān)系，能準(zhǔn)確反映引起病變（如腹膜炎）的感染源是否得到根除。每天對PCT濃度的檢測可對治療結(jié)果作出可靠的評價。

PCT可用于手術(shù)創(chuàng)傷或復(fù)合創(chuàng)傷病人的監(jiān)測。第二十二頁，共二十五頁。5、PCT的內(nèi)科應(yīng)用內(nèi)科重癥監(jiān)護(hù)醫(yī)療的中心問題常圍繞著感染的診斷及是否與感染有關(guān)的鑒別診斷而進(jìn)行。對感染嚴(yán)重程度及其治療結(jié)果的評價是制定有效治療方案的必要前提。第二十三頁，共二十五頁。PCT選擇性地對系統(tǒng)性細(xì)菌感染、真菌感染及原蟲