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文檔簡(jiǎn)介
專題2.2動(dòng)物細(xì)胞工程單位:哈爾濱市第十一中作者:楊斐然人教(PEP)課標(biāo)版高中生物選修三動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)—基礎(chǔ)動(dòng)物細(xì)胞融合生產(chǎn)單克隆抗體核移植納歸題問(wèn)2.2.1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)為什么要進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)?材料一:在治療燒傷病人時(shí),通常是取病人的健康皮膚進(jìn)行自體移植。對(duì)于大面積燒傷的病人,自體健康皮膚非常有限,使用他人皮膚來(lái)源又不足,且會(huì)產(chǎn)生排斥反應(yīng)。怎樣才能獲得大量的自體健康皮膚呢?材料二:許多動(dòng)物細(xì)胞能分泌蛋白質(zhì),如抗體等。但是,單個(gè)細(xì)胞產(chǎn)生的蛋白質(zhì)很少,怎樣才能獲得大量的分泌蛋白呢?境情設(shè)創(chuàng)1、什么是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)?2、具體培養(yǎng)過(guò)程(1)為什么要把動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞?完成44頁(yè)兩個(gè)問(wèn)號(hào)。(2)什么叫細(xì)胞貼壁?什么叫接觸抑制?(3)什么叫原代培養(yǎng)?什么叫傳代培養(yǎng)?(4)總結(jié)出具體的培養(yǎng)過(guò)程?習(xí)學(xué)主自任務(wù):閱讀教材第44-46頁(yè)第一段時(shí)間:4分鐘問(wèn)題:
就是從動(dòng)物機(jī)體中取出相關(guān)組織,將它分散成單個(gè)細(xì)胞,然后,放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖。1、概念:一、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)納歸題問(wèn)2、培養(yǎng)過(guò)程:納歸題問(wèn)為什么要把動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞?怎樣分散成單個(gè)細(xì)胞的?完成44頁(yè)兩個(gè)問(wèn)號(hào)成塊的組織中細(xì)胞與細(xì)胞靠在一起,彼此限制了細(xì)胞的生長(zhǎng)和增殖。另外,單個(gè)細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)容易供應(yīng),其代謝廢物容易排出。所以分散成單個(gè)細(xì)胞后培養(yǎng)。
用胰蛋白酶分散細(xì)胞,說(shuō)明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是蛋白質(zhì)。胃蛋白酶作用的適宜pH約為2,當(dāng)pH大于6時(shí),胃蛋白酶就會(huì)失去活性。胰蛋白酶作用的適宜環(huán)境pH為7.2~8.4。多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2~7.4,胃蛋白酶在此環(huán)境中沒(méi)有活性,而胰蛋白酶在此環(huán)境中活性較高,因此胰蛋白酶適宜用于細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)的消化。
44頁(yè)兩個(gè)小問(wèn)題的答案
胰蛋白酶除了可以消化細(xì)胞間的蛋白外,長(zhǎng)時(shí)間的作用也會(huì)消化細(xì)胞膜蛋白,對(duì)細(xì)胞有損傷作用,因此必須控制好胰蛋白酶的消化時(shí)間。
納歸題問(wèn)3、幾個(gè)重要的概念細(xì)胞貼壁懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上(單層)。要求:培養(yǎng)瓶(皿)內(nèi)表面光滑、無(wú)毒、易于貼附。納歸題問(wèn)接觸抑制當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí),細(xì)胞會(huì)停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。納歸題問(wèn)原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)貼滿瓶壁的細(xì)胞需要重新用胰蛋白酶等處理讓細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng),這樣的培養(yǎng)過(guò)程通常被稱為傳代培養(yǎng)。(即從原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)轉(zhuǎn)接到新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)過(guò)程。)通常將動(dòng)物組織消化后的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。納歸題問(wèn)
細(xì)胞株
傳到40-50代后有部分細(xì)胞遺傳物質(zhì)發(fā)生了變化,具有癌細(xì)胞的特點(diǎn),失去接觸抑制,可能在培養(yǎng)條件下無(wú)限制的傳代下去。
從原代培養(yǎng)細(xì)胞群中篩選出進(jìn)行傳代培養(yǎng)的細(xì)胞,能傳到40-50代,其遺傳物質(zhì)沒(méi)有發(fā)生變化。
細(xì)胞系納歸題問(wèn)注意目前使用的細(xì)胞通常為10代以內(nèi),以保持細(xì)胞正常的二倍體核型。動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的組織、器官胰蛋白酶剪碎單個(gè)細(xì)胞加培養(yǎng)液細(xì)胞懸浮液10代細(xì)胞部分細(xì)胞“癌變”,無(wú)限傳代動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不能最終培養(yǎng)成動(dòng)物體50代細(xì)胞原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細(xì)胞貼壁剝離、分瓶細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程:分化程度低,增殖能力強(qiáng)去掉組織間蛋白細(xì)胞懸浮液10代細(xì)胞50代細(xì)胞無(wú)限傳代原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細(xì)胞株細(xì)胞系細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)隨細(xì)胞增多,出現(xiàn)接觸抑制部分細(xì)胞癌變,失去接觸抑制,無(wú)限傳代納歸題問(wèn)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)都需要滿足什么條件?習(xí)學(xué)主自任務(wù):閱讀教材第46頁(yè)黑體字后面時(shí)間:4分鐘問(wèn)題:4、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)條件無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境(添加一定量的抗生素,定期更換培養(yǎng)液)營(yíng)養(yǎng)(葡萄糖、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素、動(dòng)物血清、微量元素等)溫度和PH溫度36.5+0.5度,pH7.2~7.4氣體環(huán)境O2和CO2(95%空氣和5%CO2)離體培養(yǎng)的細(xì)胞對(duì)微生物和有毒物質(zhì)沒(méi)有防御能力。保證細(xì)胞順利的生長(zhǎng)增殖納歸題問(wèn)CO2培養(yǎng)箱
哺乳動(dòng)物離體細(xì)胞培養(yǎng)和體內(nèi)細(xì)胞一樣,需要在恒足溫度下才能生存,溫差變化一般不應(yīng)超過(guò)0.5度,因此培養(yǎng)箱對(duì)溫度應(yīng)具有較高靈敏度。
CO2培養(yǎng)箱的優(yōu)點(diǎn)在于能恒定地供應(yīng)一定量的CO2,一般5%即可維持培養(yǎng)液PH值穩(wěn)定。培養(yǎng)基的類型天然培養(yǎng)基:合成培養(yǎng)基:營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高,成分復(fù)雜。成分明確,便于控制試驗(yàn)條件。納歸題問(wèn)5、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用(1)生產(chǎn)蛋白生物制品:病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等;(4)用于檢測(cè)有毒物質(zhì);(2)獲得大量自身的皮膚細(xì)胞,用于植皮;(3)作為基因工程的受體細(xì)胞。(5)用于生理、病理、藥理等方面的研究,為治療和預(yù)防疾病提供理論依據(jù);納歸題問(wèn)6、植物細(xì)胞和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的比較比較項(xiàng)目植物組織培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)原理培養(yǎng)基性質(zhì)培養(yǎng)基特有成分培養(yǎng)結(jié)果培養(yǎng)目的獲得細(xì)胞或細(xì)胞分泌蛋白細(xì)胞的全能性細(xì)胞株、細(xì)胞系植物體快速繁殖、培育無(wú)病毒植株等葡萄糖、動(dòng)物血清促生長(zhǎng)因子蔗糖、植物激素液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基細(xì)胞增殖結(jié)小堂課動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)特點(diǎn)原理概念:貼壁生長(zhǎng),接觸抑制動(dòng)物組織胰蛋白酶剪碎單個(gè)細(xì)胞加培養(yǎng)液細(xì)胞懸液分瓶培養(yǎng)10代細(xì)胞50代細(xì)胞不死細(xì)胞原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)細(xì)胞株細(xì)胞系適宜條件培養(yǎng)條件無(wú)菌無(wú)毒,營(yíng)養(yǎng),溫度、PH,氣體環(huán)境過(guò)程細(xì)胞增殖1、在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中遺傳物質(zhì)發(fā)生改變的細(xì)胞是()
A.細(xì)胞系B.細(xì)胞株
C.原代細(xì)胞D.傳代細(xì)胞2、動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是()
A.動(dòng)物細(xì)胞融合B.單克隆抗體
C.胚胎移植D.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)AD習(xí)練饋反3、用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的組織和細(xì)胞大都取自胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)物的器官或組織,其主要原因是這樣的組織細(xì)胞()
A.容易產(chǎn)生各種變異B.具有更強(qiáng)的全能性
C.取材十分方便D.分裂增殖的能力強(qiáng)D習(xí)練饋反4.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與植物細(xì)胞培養(yǎng)
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