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免疫學(xué)檢測(cè)
免疫學(xué)治療
免疫學(xué)預(yù)防
免疫學(xué)檢測(cè)
免疫學(xué)治療
免疫學(xué)預(yù)防1免疫學(xué)檢測(cè)
抗原或抗體檢測(cè)淋巴細(xì)胞測(cè)定免疫學(xué)檢測(cè)方法的應(yīng)用免疫學(xué)檢測(cè)抗原或抗體檢測(cè)2抗原或抗體檢測(cè)
原理檢測(cè)類型與方法抗原或抗體檢測(cè)原理3原理
適宜條件抗原+抗體-----可見反應(yīng)(肉眼可見)凝集、沉淀等現(xiàn)象特性:特異性:親和力:一個(gè)Fab與表位間的結(jié)合親合力:一個(gè)Ab分子與整個(gè)Ag的結(jié)合可見性:條件:適宜的PH、溫度、離子強(qiáng)度、抗原與抗體的比例原理
4
抗原抗體復(fù)合物的形成抗原多于抗體
抗原與抗體數(shù)量相當(dāng)抗原少于抗體2:11:11:2抗原抗體復(fù)合5Ag小鼠抗體(小鼠Ig):第一抗體(一抗)家兔抗體(兔抗鼠Ig):第二抗體(二抗)Ag6檢測(cè)類型與方法
凝集反應(yīng)
沉淀反應(yīng)免疫標(biāo)記技術(shù)檢測(cè)類型與方法凝集反應(yīng)7凝集反應(yīng)
定義:顆粒性抗原(RBC、細(xì)菌等)與相應(yīng)的抗體結(jié)合后形成肉眼可見的凝集現(xiàn)象。類型:直接凝集
間接凝集凝集反應(yīng)定義:顆粒性抗原(RBC、細(xì)菌等)與8直接凝集將顆粒性抗原與相應(yīng)抗體直接反應(yīng),出現(xiàn)細(xì)菌凝集或紅細(xì)胞凝集的現(xiàn)象。類型:玻片凝集試驗(yàn):ABO血型鑒定細(xì)菌鑒定(用標(biāo)準(zhǔn)的抗體測(cè)抗原)試管凝集試驗(yàn):肥達(dá)氏試驗(yàn)(用標(biāo)準(zhǔn)的抗原測(cè)抗體)直接凝集將顆粒性抗原與相應(yīng)抗體直接反應(yīng),出現(xiàn)細(xì)菌凝集或紅細(xì)胞9間接凝集
將可溶性抗原包被在載體(紅細(xì)胞或乳膠顆粒)表面,與相應(yīng)抗體反應(yīng)出現(xiàn)凝集顆粒的現(xiàn)象。載體:動(dòng)物紅細(xì)胞人O型紅細(xì)胞乳膠顆粒等間接凝集將可溶性抗原包被在載體(紅細(xì)胞或乳10類風(fēng)濕因子檢測(cè):
r球蛋白+乳膠顆粒-致敏顆粒+抗人r球蛋白抗體
(抗原)抗Rh抗體檢測(cè)(Coomb’stest)
Rh抗體(IgG)+Rh+紅細(xì)胞--抗人IgG抗體
(抗體)
間接凝集抑制試驗(yàn)
間接凝集類風(fēng)濕因子檢測(cè):間接凝集11間接凝集抑制試驗(yàn)抗原(抗體)+載體--致敏顆粒+抗體(抗原)--凝集現(xiàn)象抗原+抗體--致敏顆粒---無凝集現(xiàn)象(間接凝集抑制試驗(yàn))間接凝集抑制試驗(yàn)12免疫防治(醫(yī)學(xué)免疫學(xué))課件13沉淀反應(yīng)沉淀反應(yīng):可溶性抗原(血清蛋白、細(xì)胞裂解液、組織浸液等)與相應(yīng)抗體結(jié)合后出現(xiàn)沉淀物的反應(yīng)。瓊脂擴(kuò)散(免疫擴(kuò)散):可溶性抗原與抗體在瓊脂凝膠中擴(kuò)散并在比例合適處形成白色沉淀線。類型單向免疫擴(kuò)散
雙向免疫擴(kuò)散
免疫電泳沉淀反應(yīng)沉淀反應(yīng):14單向免疫擴(kuò)散抗體加入瓊脂凝膠中,制成瓊脂板,打孔后加入抗原,抗原在擴(kuò)散過程中與抗體相遇,形成沉淀環(huán)的試驗(yàn)。用途:檢測(cè)血清免疫球蛋白和補(bǔ)體的含量(IgG、IgM、IgA、C3)火箭電泳:?jiǎn)螖U(kuò)+電泳單向免疫擴(kuò)散抗體加入瓊脂凝膠中,制成瓊脂板,打孔后加入抗原15免疫防治(醫(yī)學(xué)免疫學(xué))課件16免疫防治(醫(yī)學(xué)免疫學(xué))課件17雙向免疫擴(kuò)散分別將抗原與抗體加入瓊脂凝膠的小孔中,兩者自由擴(kuò)散并相遇,在比例合適處形成沉淀線的試驗(yàn)用途:用于抗原或抗體的定性分析血清AFP定性分析對(duì)流免疫電泳:雙擴(kuò)+電泳抗原-陰極、抗體-陽極雙向免疫擴(kuò)散分別將抗原與抗體加入瓊脂凝膠的小孔中,18免疫防治(醫(yī)學(xué)免疫學(xué))課件19免疫防治(醫(yī)學(xué)免疫學(xué))課件20免疫電泳免疫電泳21免疫標(biāo)記技術(shù)用熒光素、酶或放射性同位素等標(biāo)記物,標(biāo)記抗體或抗原,進(jìn)行的抗原抗體反應(yīng)優(yōu)點(diǎn):敏感、快速、可定性或定量,甚至定位。類型:免疫熒光法(immunofluorescence)酶免疫測(cè)定(enzymeimmunoassay,EIA)放射免疫測(cè)定法(radioimmunoassay,RIA)
免疫標(biāo)記技術(shù)用熒光素、酶或放射性同位素等標(biāo)記物,標(biāo)記抗體或抗22免疫熒光法用熒光素標(biāo)記抗體,再與待檢標(biāo)本中的抗原反應(yīng),借助熒光顯微鏡觀察,對(duì)標(biāo)本中的抗原鑒定或定位常用的熒光素:異硫氰酸熒光素(FITC)--黃綠色藻紅蛋白--紅色用途:病原微生物(細(xì)菌、病毒、螺旋體等)抗原抗體的檢測(cè)類型:直接熒光法間接熒光法免疫熒光法用熒光素標(biāo)記抗體,再與待檢標(biāo)本中的抗原反應(yīng),23直接熒光法熒光素直接標(biāo)記抗體,進(jìn)行檢測(cè)優(yōu)點(diǎn):特異性強(qiáng)缺點(diǎn):必須制備每一種抗原的熒光素抗體直接熒光法熒光素直接標(biāo)記抗體,進(jìn)行檢測(cè)24間接熒光法熒光素標(biāo)記二抗,當(dāng)一抗與標(biāo)本中的抗原結(jié)合后,再用標(biāo)記二抗進(jìn)行檢測(cè)優(yōu)點(diǎn):敏感性高只需制備一種標(biāo)記二抗,可用于多種抗原的檢測(cè)缺點(diǎn):特異性較直接熒光法低間接熒光法熒光素標(biāo)記二抗,當(dāng)一抗與標(biāo)本中的抗原結(jié)合后,再用標(biāo)25免疫防治(醫(yī)學(xué)免疫學(xué))課件26酶免疫測(cè)定用酶標(biāo)記的抗體進(jìn)行的抗原抗體反應(yīng),通過酶作用于底物后顯色來判斷結(jié)果。常用的酶:辣根過氧化物酶(HRP)堿性磷酸酶(AP)類型:酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)--檢測(cè)可溶性抗原、抗體酶免疫組化法--檢測(cè)組織中細(xì)胞表面的抗原
酶免疫測(cè)定用酶標(biāo)記的抗體進(jìn)行的抗原抗體反應(yīng),通過酶作用于底物27酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)
(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)ELISA:將已知抗原或抗體吸附在固相載體表面,再用酶標(biāo)抗體進(jìn)行檢測(cè)的抗原抗體反應(yīng)。特點(diǎn):敏感性高(ng-pg),操作簡(jiǎn)便用途:檢測(cè)病原體的抗原,抗體定量分析微量蛋白成分,細(xì)胞因子等類型:雙抗體夾心法:Ab+Ag+Ab*間接法:Ag+Ab+Ab*酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)
(enzymelinkedimmuno28免疫防治(醫(yī)學(xué)免疫學(xué))課件29放射免疫測(cè)定法用放射性核素標(biāo)記抗原或抗體進(jìn)行免疫學(xué)檢測(cè)的技術(shù)常用的放射性核素:
125I123I優(yōu)點(diǎn):敏感性高(pg)用途:用于微量物質(zhì)的測(cè)定(激素、藥物等)放射免疫測(cè)定法用放射性核素標(biāo)記抗原或抗體進(jìn)行免疫學(xué)檢30淋巴細(xì)胞測(cè)定類型鑒定:免疫熒光法-表面標(biāo)志-淋巴細(xì)胞群與亞群流式細(xì)胞術(shù)-檢測(cè)免疫細(xì)胞功能測(cè)定:
T細(xì)胞功能測(cè)定
B細(xì)胞功能測(cè)定淋巴細(xì)胞測(cè)定類型鑒定:31T細(xì)胞功能測(cè)定T細(xì)胞增殖試驗(yàn):T細(xì)胞經(jīng)絲裂原刺激后,分裂增殖,檢測(cè)淋巴母細(xì)胞的數(shù)量細(xì)胞毒試驗(yàn):51Cr釋放法調(diào)亡細(xì)胞檢查法細(xì)胞因子檢測(cè):ELISA生物活性測(cè)定法PCR皮膚試驗(yàn):OT試驗(yàn)(IV型超敏反應(yīng))T細(xì)胞功能測(cè)定T細(xì)胞增殖試驗(yàn):T細(xì)胞經(jīng)絲裂原刺激后,分裂增32B細(xì)胞功能測(cè)定B細(xì)胞增殖試驗(yàn):B細(xì)胞經(jīng)絲裂原刺激后,分裂增殖,檢測(cè)抗體形成細(xì)胞的數(shù)量抗體形成細(xì)胞測(cè)定:溶血空斑試驗(yàn)B細(xì)胞功能測(cè)定B細(xì)胞增殖試驗(yàn):33免疫學(xué)檢測(cè)方法的應(yīng)用感染性疾病:診斷,免疫力的確定免疫缺陷?。涸\斷免疫學(xué)監(jiān)測(cè):判斷感染性疾病的轉(zhuǎn)歸與預(yù)后藥物治療的療效判斷免疫學(xué)檢測(cè)方法的應(yīng)用感染性疾?。涸\斷,免疫力的確定34免疫學(xué)治療
(immunotherapy)概述抗體為基礎(chǔ)的免疫治療抗原為基礎(chǔ)的免疫治療細(xì)胞因子及其拮抗劑為基礎(chǔ)的免疫治療細(xì)胞為基礎(chǔ)的免疫治療免疫增強(qiáng)劑和免疫抑制劑免疫學(xué)治療
(immunotherapy)概述35概述
免疫治療:針對(duì)機(jī)體免疫低下或亢進(jìn)的免疫狀態(tài),人為地增強(qiáng)或抑制機(jī)體的免疫功能以達(dá)到治療疾病的治療方法分類:特異性免疫治療主動(dòng)免疫治療
被動(dòng)免疫治療非特異性免疫治療細(xì)胞因子免疫制劑概述
免疫治療:針對(duì)機(jī)體免疫低下或亢進(jìn)的免疫狀態(tài),人為地增強(qiáng)36主動(dòng)免疫治療給免疫應(yīng)答健全的機(jī)體輸入具有抗原性的疫苗或免疫佐劑,以激活或增強(qiáng)機(jī)體的自身抵抗疾病的能力。瘤苗、卡介苗、短小棒狀桿菌狂犬病毒疫苗主動(dòng)免疫治療給免疫應(yīng)答健全的機(jī)體輸入具有抗原性的疫37被動(dòng)免疫治療將對(duì)疾病有免疫力的供者的免疫應(yīng)答產(chǎn)物轉(zhuǎn)移給其他個(gè)體,或自體細(xì)胞體外經(jīng)過處理后回輸?shù)拿庖咧委煼椒ā?贵w小分子免疫肽:轉(zhuǎn)移因子、胸腺肽免疫效應(yīng)細(xì)胞被動(dòng)免疫治療將對(duì)疾病有免疫力的供者的免疫應(yīng)答產(chǎn)物轉(zhuǎn)移給其他個(gè)38抗體為基礎(chǔ)的免疫治療
免疫血清單克隆抗體基因工程抗體抗體為基礎(chǔ)的免疫治療免疫血清39免疫血清免疫血清:指用抗原免疫動(dòng)物后獲得的免疫血清或者從機(jī)體組織中提取制備的免疫球蛋白。類別:抗毒素血清:白喉、破傷風(fēng)抗毒素治療、緊急預(yù)防胎盤球蛋白:預(yù)防急性傳染病,丙種球蛋白缺乏者抗菌免疫血清:防治效果不顯著抗病毒免疫血清:預(yù)防效果顯著缺點(diǎn):特異性差、易致超敏反應(yīng)免疫血清免疫血清:指用抗原免疫動(dòng)物后獲得的免疫血清或者40單克隆抗體抗細(xì)胞表面分子的單抗CD3單抗:急性移植排斥反應(yīng)CD4單抗:移植排斥反應(yīng)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化抗細(xì)胞因子單抗:IL-1單抗、TNF單抗--中和IL-1、TNF--減輕炎癥反應(yīng)抗體導(dǎo)向藥物治療單克隆抗體抗細(xì)胞表面分子的單抗41抗體導(dǎo)向藥物治療
單抗
放射性同位素化學(xué)藥物毒素(131I/125I/111I)(氨甲蝶呤MTX(植物毒素長(zhǎng)春新堿、阿霉素)細(xì)菌毒素)放射免疫治療抗體導(dǎo)向化學(xué)療法免疫毒素療法抗體導(dǎo)向藥物治療42基因工程抗體嵌合抗體人源化抗體完全人源抗體:人Ig基因轉(zhuǎn)染小鼠單鏈抗體基因工程抗體嵌合抗體43人IgV區(qū)鼠IgC區(qū)嵌合抗體鼠CDR區(qū)人Ig人源化抗體VH連接物VL
單鏈抗體人IgV區(qū)鼠IgC區(qū)嵌合抗體鼠CDR區(qū)人Ig人源化抗44抗原為基礎(chǔ)的免疫治療增強(qiáng)免疫應(yīng)答:治療感染、腫瘤誘導(dǎo)免疫耐受:治療自身免疫病超敏反應(yīng)、移植排斥反應(yīng)抗原為基礎(chǔ)的免疫治療45細(xì)胞因子及其拮抗劑為基礎(chǔ)的免疫治療補(bǔ)充和添加療法阻斷和拮抗療法基因治療細(xì)胞因子及其拮抗劑為基礎(chǔ)的免疫治療補(bǔ)充和添加療法46免疫防治(醫(yī)學(xué)免疫學(xué))課件47細(xì)胞為基礎(chǔ)的免疫治療骨髓移植:自體、異體、造血干細(xì)胞免疫效應(yīng)細(xì)胞:LAK、TILDC:腫瘤多肽、抗原多肽負(fù)載的DC腫瘤疫苗:活瘤苗、減毒活滅活瘤苗基因修飾瘤苗分子瘤苗細(xì)胞為基礎(chǔ)的免疫治療骨髓移植:自體、異體、造血干細(xì)胞48免疫學(xué)預(yù)防疫苗的基本要求人工免疫新型疫苗疫苗的應(yīng)用免疫學(xué)預(yù)防疫苗的基本要求49疫苗的基本要求安全有效實(shí)用疫苗的基本要求安全50人工免疫
人工自動(dòng)免疫(artificalactiveimmunization)人工被動(dòng)免疫(artificalpassiveimmunization)計(jì)劃免疫(planedimmunization)人工免疫人工自動(dòng)免疫51人工自動(dòng)免疫概念:給人體接種疫苗等抗原性制劑,使機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫,從而預(yù)防感染的措施。疫苗:用于人工自動(dòng)免疫的生物制品(細(xì)菌、病毒、螺旋體、類毒素等)類型:滅活疫苗(死疫苗)、減毒活疫苗、類毒素人工自動(dòng)免疫概念:給人體接種疫苗等抗原性制劑,使52類別經(jīng)典疫苗:滅活疫苗(死疫苗);減毒活疫苗類毒素新型疫苗:亞單位疫苗結(jié)合疫苗合成肽疫苗基因工程疫苗:重組抗原疫苗DNA疫苗
類別經(jīng)典疫苗:滅活疫苗(死疫苗);減毒活疫苗53免疫防治(醫(yī)學(xué)免疫學(xué))課件54人工被動(dòng)免疫
概念:給人體注射含特異性抗體的免疫血清活細(xì)胞因子等制劑,以治療或緊急預(yù)防感染的措施。制劑:抗毒素人免疫球蛋白制劑細(xì)胞因子制劑單抗制劑人工被動(dòng)免疫
概念:給人體注射含特異性抗體的免疫血清活55免疫防治(醫(yī)學(xué)免疫學(xué))課件56計(jì)劃免疫概念:根據(jù)某些特定傳染病的疫情監(jiān)測(cè)和人群免疫狀況分析,按照規(guī)定的免疫程序有計(jì)劃地進(jìn)行人群預(yù)防接種,以提高人群免疫力,達(dá)到控制直至消滅傳染病地措施。免疫程序:兒童基礎(chǔ)免疫特殊人群免疫計(jì)劃免疫概念:根據(jù)某些特定傳染病的疫情監(jiān)測(cè)和人群免疫狀況分析57免疫防治(醫(yī)學(xué)免疫學(xué))課件58新型疫苗亞單位疫苗(subunitvaccine):提取病原體中能激發(fā)保護(hù)性免疫地有效免疫成分制作的疫苗。合成肽疫苗:根據(jù)有效免疫原的氨基酸序列,人工合成免疫原性肽作為疫苗?;蚬こ桃呙纾豪肈NA重組技術(shù)制備的,含病原體有效免疫原的疫苗。DNA疫苗:將病原體有效免疫原的基因與細(xì)菌質(zhì)粒構(gòu)建的重組體,在宿主細(xì)胞中表達(dá)保護(hù)性抗原,從而誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫的疫苗轉(zhuǎn)基因植物疫苗新型疫苗亞單位疫苗(subunitvaccine):提取59疫苗的應(yīng)用抗感染抗腫瘤計(jì)劃免疫防止免疫病理損傷疫苗的應(yīng)用抗感染60
免疫學(xué)檢測(cè)
免疫學(xué)治療
免疫學(xué)預(yù)防
免疫學(xué)檢測(cè)
免疫學(xué)治療
免疫學(xué)預(yù)防61免疫學(xué)檢測(cè)
抗原或抗體檢測(cè)淋巴細(xì)胞測(cè)定免疫學(xué)檢測(cè)方法的應(yīng)用免疫學(xué)檢測(cè)抗原或抗體檢測(cè)62抗原或抗體檢測(cè)
原理檢測(cè)類型與方法抗原或抗體檢測(cè)原理63原理
適宜條件抗原+抗體-----可見反應(yīng)(肉眼可見)凝集、沉淀等現(xiàn)象特性:特異性:親和力:一個(gè)Fab與表位間的結(jié)合親合力:一個(gè)Ab分子與整個(gè)Ag的結(jié)合可見性:條件:適宜的PH、溫度、離子強(qiáng)度、抗原與抗體的比例原理
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抗原抗體復(fù)合物的形成抗原多于抗體
抗原與抗體數(shù)量相當(dāng)抗原少于抗體2:11:11:2抗原抗體復(fù)合65Ag小鼠抗體(小鼠Ig):第一抗體(一抗)家兔抗體(兔抗鼠Ig):第二抗體(二抗)Ag66檢測(cè)類型與方法
凝集反應(yīng)
沉淀反應(yīng)免疫標(biāo)記技術(shù)檢測(cè)類型與方法凝集反應(yīng)67凝集反應(yīng)
定義:顆粒性抗原(RBC、細(xì)菌等)與相應(yīng)的抗體結(jié)合后形成肉眼可見的凝集現(xiàn)象。類型:直接凝集
間接凝集凝集反應(yīng)定義:顆粒性抗原(RBC、細(xì)菌等)與68直接凝集將顆粒性抗原與相應(yīng)抗體直接反應(yīng),出現(xiàn)細(xì)菌凝集或紅細(xì)胞凝集的現(xiàn)象。類型:玻片凝集試驗(yàn):ABO血型鑒定細(xì)菌鑒定(用標(biāo)準(zhǔn)的抗體測(cè)抗原)試管凝集試驗(yàn):肥達(dá)氏試驗(yàn)(用標(biāo)準(zhǔn)的抗原測(cè)抗體)直接凝集將顆粒性抗原與相應(yīng)抗體直接反應(yīng),出現(xiàn)細(xì)菌凝集或紅細(xì)胞69間接凝集
將可溶性抗原包被在載體(紅細(xì)胞或乳膠顆粒)表面,與相應(yīng)抗體反應(yīng)出現(xiàn)凝集顆粒的現(xiàn)象。載體:動(dòng)物紅細(xì)胞人O型紅細(xì)胞乳膠顆粒等間接凝集將可溶性抗原包被在載體(紅細(xì)胞或乳70類風(fēng)濕因子檢測(cè):
r球蛋白+乳膠顆粒-致敏顆粒+抗人r球蛋白抗體
(抗原)抗Rh抗體檢測(cè)(Coomb’stest)
Rh抗體(IgG)+Rh+紅細(xì)胞--抗人IgG抗體
(抗體)
間接凝集抑制試驗(yàn)
間接凝集類風(fēng)濕因子檢測(cè):間接凝集71間接凝集抑制試驗(yàn)抗原(抗體)+載體--致敏顆粒+抗體(抗原)--凝集現(xiàn)象抗原+抗體--致敏顆粒---無凝集現(xiàn)象(間接凝集抑制試驗(yàn))間接凝集抑制試驗(yàn)72免疫防治(醫(yī)學(xué)免疫學(xué))課件73沉淀反應(yīng)沉淀反應(yīng):可溶性抗原(血清蛋白、細(xì)胞裂解液、組織浸液等)與相應(yīng)抗體結(jié)合后出現(xiàn)沉淀物的反應(yīng)。瓊脂擴(kuò)散(免疫擴(kuò)散):可溶性抗原與抗體在瓊脂凝膠中擴(kuò)散并在比例合適處形成白色沉淀線。類型單向免疫擴(kuò)散
雙向免疫擴(kuò)散
免疫電泳沉淀反應(yīng)沉淀反應(yīng):74單向免疫擴(kuò)散抗體加入瓊脂凝膠中,制成瓊脂板,打孔后加入抗原,抗原在擴(kuò)散過程中與抗體相遇,形成沉淀環(huán)的試驗(yàn)。用途:檢測(cè)血清免疫球蛋白和補(bǔ)體的含量(IgG、IgM、IgA、C3)火箭電泳:?jiǎn)螖U(kuò)+電泳單向免疫擴(kuò)散抗體加入瓊脂凝膠中,制成瓊脂板,打孔后加入抗原75免疫防治(醫(yī)學(xué)免疫學(xué))課件76免疫防治(醫(yī)學(xué)免疫學(xué))課件77雙向免疫擴(kuò)散分別將抗原與抗體加入瓊脂凝膠的小孔中,兩者自由擴(kuò)散并相遇,在比例合適處形成沉淀線的試驗(yàn)用途:用于抗原或抗體的定性分析血清AFP定性分析對(duì)流免疫電泳:雙擴(kuò)+電泳抗原-陰極、抗體-陽極雙向免疫擴(kuò)散分別將抗原與抗體加入瓊脂凝膠的小孔中,78免疫防治(醫(yī)學(xué)免疫學(xué))課件79免疫防治(醫(yī)學(xué)免疫學(xué))課件80免疫電泳免疫電泳81免疫標(biāo)記技術(shù)用熒光素、酶或放射性同位素等標(biāo)記物,標(biāo)記抗體或抗原,進(jìn)行的抗原抗體反應(yīng)優(yōu)點(diǎn):敏感、快速、可定性或定量,甚至定位。類型:免疫熒光法(immunofluorescence)酶免疫測(cè)定(enzymeimmunoassay,EIA)放射免疫測(cè)定法(radioimmunoassay,RIA)
免疫標(biāo)記技術(shù)用熒光素、酶或放射性同位素等標(biāo)記物,標(biāo)記抗體或抗82免疫熒光法用熒光素標(biāo)記抗體,再與待檢標(biāo)本中的抗原反應(yīng),借助熒光顯微鏡觀察,對(duì)標(biāo)本中的抗原鑒定或定位常用的熒光素:異硫氰酸熒光素(FITC)--黃綠色藻紅蛋白--紅色用途:病原微生物(細(xì)菌、病毒、螺旋體等)抗原抗體的檢測(cè)類型:直接熒光法間接熒光法免疫熒光法用熒光素標(biāo)記抗體,再與待檢標(biāo)本中的抗原反應(yīng),83直接熒光法熒光素直接標(biāo)記抗體,進(jìn)行檢測(cè)優(yōu)點(diǎn):特異性強(qiáng)缺點(diǎn):必須制備每一種抗原的熒光素抗體直接熒光法熒光素直接標(biāo)記抗體,進(jìn)行檢測(cè)84間接熒光法熒光素標(biāo)記二抗,當(dāng)一抗與標(biāo)本中的抗原結(jié)合后,再用標(biāo)記二抗進(jìn)行檢測(cè)優(yōu)點(diǎn):敏感性高只需制備一種標(biāo)記二抗,可用于多種抗原的檢測(cè)缺點(diǎn):特異性較直接熒光法低間接熒光法熒光素標(biāo)記二抗,當(dāng)一抗與標(biāo)本中的抗原結(jié)合后,再用標(biāo)85免疫防治(醫(yī)學(xué)免疫學(xué))課件86酶免疫測(cè)定用酶標(biāo)記的抗體進(jìn)行的抗原抗體反應(yīng),通過酶作用于底物后顯色來判斷結(jié)果。常用的酶:辣根過氧化物酶(HRP)堿性磷酸酶(AP)類型:酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)--檢測(cè)可溶性抗原、抗體酶免疫組化法--檢測(cè)組織中細(xì)胞表面的抗原
酶免疫測(cè)定用酶標(biāo)記的抗體進(jìn)行的抗原抗體反應(yīng),通過酶作用于底物87酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)
(enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA)ELISA:將已知抗原或抗體吸附在固相載體表面,再用酶標(biāo)抗體進(jìn)行檢測(cè)的抗原抗體反應(yīng)。特點(diǎn):敏感性高(ng-pg),操作簡(jiǎn)便用途:檢測(cè)病原體的抗原,抗體定量分析微量蛋白成分,細(xì)胞因子等類型:雙抗體夾心法:Ab+Ag+Ab*間接法:Ag+Ab+Ab*酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)
(enzymelinkedimmuno88免疫防治(醫(yī)學(xué)免疫學(xué))課件89放射免疫測(cè)定法用放射性核素標(biāo)記抗原或抗體進(jìn)行免疫學(xué)檢測(cè)的技術(shù)常用的放射性核素:
125I123I優(yōu)點(diǎn):敏感性高(pg)用途:用于微量物質(zhì)的測(cè)定(激素、藥物等)放射免疫測(cè)定法用放射性核素標(biāo)記抗原或抗體進(jìn)行免疫學(xué)檢90淋巴細(xì)胞測(cè)定類型鑒定:免疫熒光法-表面標(biāo)志-淋巴細(xì)胞群與亞群流式細(xì)胞術(shù)-檢測(cè)免疫細(xì)胞功能測(cè)定:
T細(xì)胞功能測(cè)定
B細(xì)胞功能測(cè)定淋巴細(xì)胞測(cè)定類型鑒定:91T細(xì)胞功能測(cè)定T細(xì)胞增殖試驗(yàn):T細(xì)胞經(jīng)絲裂原刺激后,分裂增殖,檢測(cè)淋巴母細(xì)胞的數(shù)量細(xì)胞毒試驗(yàn):51Cr釋放法調(diào)亡細(xì)胞檢查法細(xì)胞因子檢測(cè):ELISA生物活性測(cè)定法PCR皮膚試驗(yàn):OT試驗(yàn)(IV型超敏反應(yīng))T細(xì)胞功能測(cè)定T細(xì)胞增殖試驗(yàn):T細(xì)胞經(jīng)絲裂原刺激后,分裂增92B細(xì)胞功能測(cè)定B細(xì)胞增殖試驗(yàn):B細(xì)胞經(jīng)絲裂原刺激后,分裂增殖,檢測(cè)抗體形成細(xì)胞的數(shù)量抗體形成細(xì)胞測(cè)定:溶血空斑試驗(yàn)B細(xì)胞功能測(cè)定B細(xì)胞增殖試驗(yàn):93免疫學(xué)檢測(cè)方法的應(yīng)用感染性疾?。涸\斷,免疫力的確定免疫缺陷?。涸\斷免疫學(xué)監(jiān)測(cè):判斷感染性疾病的轉(zhuǎn)歸與預(yù)后藥物治療的療效判斷免疫學(xué)檢測(cè)方法的應(yīng)用感染性疾?。涸\斷,免疫力的確定94免疫學(xué)治療
(immunotherapy)概述抗體為基礎(chǔ)的免疫治療抗原為基礎(chǔ)的免疫治療細(xì)胞因子及其拮抗劑為基礎(chǔ)的免疫治療細(xì)胞為基礎(chǔ)的免疫治療免疫增強(qiáng)劑和免疫抑制劑免疫學(xué)治療
(immunotherapy)概述95概述
免疫治療:針對(duì)機(jī)體免疫低下或亢進(jìn)的免疫狀態(tài),人為地增強(qiáng)或抑制機(jī)體的免疫功能以達(dá)到治療疾病的治療方法分類:特異性免疫治療主動(dòng)免疫治療
被動(dòng)免疫治療非特異性免疫治療細(xì)胞因子免疫制劑概述
免疫治療:針對(duì)機(jī)體免疫低下或亢進(jìn)的免疫狀態(tài),人為地增強(qiáng)96主動(dòng)免疫治療給免疫應(yīng)答健全的機(jī)體輸入具有抗原性的疫苗或免疫佐劑,以激活或增強(qiáng)機(jī)體的自身抵抗疾病的能力。瘤苗、卡介苗、短小棒狀桿菌狂犬病毒疫苗主動(dòng)免疫治療給免疫應(yīng)答健全的機(jī)體輸入具有抗原性的疫97被動(dòng)免疫治療將對(duì)疾病有免疫力的供者的免疫應(yīng)答產(chǎn)物轉(zhuǎn)移給其他個(gè)體,或自體細(xì)胞體外經(jīng)過處理后回輸?shù)拿庖咧委煼椒???贵w小分子免疫肽:轉(zhuǎn)移因子、胸腺肽免疫效應(yīng)細(xì)胞被動(dòng)免疫治療將對(duì)疾病有免疫力的供者的免疫應(yīng)答產(chǎn)物轉(zhuǎn)移給其他個(gè)98抗體為基礎(chǔ)的免疫治療
免疫血清單克隆抗體基因工程抗體抗體為基礎(chǔ)的免疫治療免疫血清99免疫血清免疫血清:指用抗原免疫動(dòng)物后獲得的免疫血清或者從機(jī)體組織中提取制備的免疫球蛋白。類別:抗毒素血清:白喉、破傷風(fēng)抗毒素治療、緊急預(yù)防胎盤球蛋白:預(yù)防急性傳染病,丙種球蛋白缺乏者抗菌免疫血清:防治效果不顯著抗病毒免疫血清:預(yù)防效果顯著缺點(diǎn):特異性差、易致超敏反應(yīng)免疫血清免疫血清:指用抗原免疫動(dòng)物后獲得的免疫血清或者100單克隆抗體抗細(xì)胞表面分子的單抗CD3單抗:急性移植排斥反應(yīng)CD4單抗:移植排斥反應(yīng)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化抗細(xì)胞因子單抗:IL-1單抗、TNF單抗--中和IL-1、TNF--減輕炎癥反應(yīng)抗體導(dǎo)向藥物治療單克隆抗體抗細(xì)胞表面分子的單抗101抗體導(dǎo)向藥物治療
單抗
放射性同位素化學(xué)藥物毒素(131I/125I/111I)(氨甲蝶呤MTX(植物毒素長(zhǎng)春新堿、阿霉素)細(xì)菌毒素)放射免疫治療抗體導(dǎo)向化學(xué)療法免疫毒素療法抗體導(dǎo)向藥物治療102基因工程抗體嵌合抗體人源化抗體完全人源抗體:人Ig基因轉(zhuǎn)染小鼠單鏈抗體基因工程抗體嵌合抗體103人IgV區(qū)鼠IgC區(qū)嵌合抗體鼠CDR區(qū)人Ig人源化抗體VH連接物VL
單鏈抗體人IgV區(qū)鼠IgC區(qū)嵌合抗體鼠CDR區(qū)人Ig人源化抗104抗原為基礎(chǔ)的免疫治療增強(qiáng)免疫應(yīng)答:治療感染、腫瘤誘導(dǎo)免疫耐受:治療自身免疫病超敏反應(yīng)、移植排斥反應(yīng)抗原為基礎(chǔ)的免疫治療105細(xì)胞因子及其拮抗劑為基礎(chǔ)的免疫治
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