甘草酸銨標(biāo)準(zhǔn)文本（食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)）

PAGEPAGE8食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品添加劑甘草酸銨范圍本標(biāo)準(zhǔn)適用于原料為甘草（豆科植物甘草GlycyrrhizauralensisFisch.、脹果甘草GlycyrrhizainflataBat.及光果甘草GlycyrrhizaglabraL.），經(jīng)水浸提、硫酸（或鹽酸）酸化沉淀、乙醇浸提、氨化、結(jié)晶等工藝制得的食品添加劑甘草酸銨?；瘜W(xué)名稱、結(jié)構(gòu)式、分子式、相對分子質(zhì)量化學(xué)名稱甘草酸銨結(jié)構(gòu)式分子式C42H61O16NH4相對分子質(zhì)量 839.96（按2007年國際相對原子質(zhì)量）技術(shù)要求感官要求：應(yīng)符合表1的規(guī)定。感官要求項目要求檢驗方法色澤白色、黃白色或淺黃色取適量試樣置于清潔、干燥的白瓷盤中，在自然光線下，觀察其色澤和狀態(tài)狀態(tài)粉末狀細(xì)小顆粒理化指標(biāo)：應(yīng)符合表2的規(guī)定。理化指標(biāo)項目指標(biāo)檢驗方法甘草酸銨含量（以18β-甘草酸銨計，以干基計），w/%65.0附錄A中A.4干燥減量，w/%7.0附錄A中A.3比旋光度/[（°）·mL·dm-1·g-1]+45～+53附錄A中A.5灰分，w/%0.5附錄A中A.6鉛（Pb）/（mg/kg）2GB5009.12總砷（以As計）/（mg/kg）2GB/T5009.11甘草酸銨甘草酸銨甘草酸銨甘草酸銨

附錄A檢驗方法一般規(guī)定本標(biāo)準(zhǔn)所用試劑和水，在沒有注明其他要求時，均指分析純試劑和GB/T6682-2008規(guī)定的三級水。實驗中所用溶液在未注明用何種溶劑配制時，均指水溶液。鑒別試驗方法提要銨鹽遇強堿后產(chǎn)生氨，利用氨的揮發(fā)性和堿性能使試管上方濕潤的pH試紙顯堿性顏色的特性，鑒別銨鹽的存在。試劑和材料氫氧化鈉溶液：40g/L。pH試紙。鑒別方法取約0.2g甘草酸銨試樣于10mL試管中，加入約1mL氫氧化鈉溶液（A.2.2.1），振搖，迅速將已用水濕潤的pH試紙放入試管口，產(chǎn)生并揮發(fā)出的氨能使?jié)駶櫟膒H試紙顯堿性顏色。注：如加熱溶液，顯色反應(yīng)更加明顯。干燥減量的測定儀器和設(shè)備天平：感量0.1mg。真空干燥箱。稱量瓶。干燥器。操作步驟將稱量瓶放入真空干燥箱內(nèi)，78℃±0.5℃，20mmHg條件下干燥30min，取出后放入干燥器內(nèi)，冷至室溫，稱重。稱取1g試樣，精確至0.0001g，蓋好瓶塞，稱重。輕輕地水平橫向搖動稱量瓶，盡可能均勻分布試樣層，厚度不超過5mm。將鋪好試樣的稱量瓶放入真空干燥箱內(nèi)，打開瓶塞，在78℃±0.5℃，20mmHg條件下，減壓干燥6h，取出放入干燥器內(nèi)，蓋好瓶塞，冷至室溫，稱重。結(jié)果計算干燥減量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)w1按公式（A.1）計算：……（A.1）式中：m1——減壓干燥前試樣加稱量瓶的質(zhì)量，單位為克（g）m2——減壓干燥后試樣加稱量瓶的質(zhì)量，單位為克（g）；m——試樣質(zhì)量的數(shù)值，單位為克（g）。實驗結(jié)果以平行測XX果的算術(shù)平均值為準(zhǔn)（保留一位小數(shù)）。在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測XX果的絕對差值不大于1.0％。甘草酸銨含量測定方法提要試樣經(jīng)乙腈-水溶液溶解，過濾，用液相色譜儀（紫外檢測器）測定，外標(biāo)法定量。計算結(jié)果時，試樣質(zhì)量為試樣稱量重量減去試樣中水分質(zhì)量，結(jié)果為以干基（C42H65NO16）計的甘草酸銨百分含量。試劑和材料乙腈：色譜級。冰乙酸：優(yōu)級純。0.45μm濾膜（有機相）。甘草酸銨標(biāo)準(zhǔn)品：純度90%（或有HPLC標(biāo)識）。注1：本方法使用的甘草酸銨標(biāo)準(zhǔn)品為18β-甘草酸銨單一組分的標(biāo)準(zhǔn)品。注2：非水滴定法（NT）或其他非HPLC含量測定方法標(biāo)識的標(biāo)準(zhǔn)品，其含量值不能直接用于液相色譜法計算含量。乙腈-水溶液：乙腈和水等體積混合。 乙腈-冰乙酸-水溶液：乙腈-冰乙酸-水（38+1+61），混勻，并經(jīng)0.45μm濾膜（有機相）過濾，充分脫氣。儀器 高效液相色譜儀，配有紫外檢測器。天平，感量0.01mg。真空干燥箱。分析步驟標(biāo)準(zhǔn)溶液配制稱取12.5mg甘草酸銨標(biāo)準(zhǔn)品，精確至0.01mg，置于25mL容量瓶中，用乙腈-水溶液（A.4.2.5）溶解，并定容至刻度。經(jīng)0.45μm濾膜（有機相）過濾?，F(xiàn)用現(xiàn)配。試樣溶液制備稱取50.0mg甘草酸銨試樣，精確至0.01mg，置于100mL容量瓶中，用乙腈-水溶液（A.4.2.5）溶解，定容至刻度，經(jīng)0.45μm濾膜（有機相）過濾，待測。色譜條件a）色譜柱：C18柱，長150mm，內(nèi)徑4.6mm，粒徑5μm，或其他等效柱。b）流動相：乙腈-乙酸-水溶液（A.4.2.6）。c）流速：1.0mL/min。d）柱溫：室溫。 e）進樣量：10μL。測定依次注射甘草酸銨標(biāo)準(zhǔn)溶液和試樣溶液，在波長254nm處測定，外標(biāo)法定量。甘草酸銨保留時間約為7.6min。甘草酸銨高效液相色譜圖見附錄B。結(jié)果計算甘草酸銨含量（以18β-甘草酸銨計，以干基計）的質(zhì)量分?jǐn)?shù)w2按公式（A.2）計算：………（A.2）式中：V——試樣定容體積，單位為毫升（mL）； cs——甘草酸銨標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，單位為毫克每毫升（mg/mL）；A——試樣溶液色譜圖中甘草酸銨的峰面積；m3——試樣質(zhì)量的數(shù)值，單位為毫克（mg）；w1——試樣干燥減量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，％；AS——標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖中甘草酸銨的峰面積。實驗結(jié)果以平行測XX果的算術(shù)平均值為準(zhǔn)（保留一位小數(shù)）。在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測XX果的絕對差值，不大于算術(shù)平均值的5%。比旋光度的測定試劑和材料無水乙醇。40%乙醇-水溶液：取2份乙醇和3份水混合。儀器和設(shè)備旋光光度計，測量最小分度值0.05°。分析步驟試樣溶液制備：稱取1.5g（精確至0.01g）未干燥處理的試樣，溶于100mL乙醇-水溶液（A.5.1.2）中，待測。儀器條件a）測量波長：鈉光燈D線（589.3nm）。b）測量溫度：20℃±0.5℃。測定開機待儀器穩(wěn)定后，用乙醇-水溶液（A.5.1.2）作空白溶液，校正儀器零點（不能自動調(diào)零的儀器，需測定溶液空白值，減扣空白），將試液充滿潔凈、干燥的旋光管中，小心排除氣泡，將蓋旋緊后按儀器說明書操作、測定，在試樣溶液溫度20℃±0.5℃條件下，讀取旋光度值。左旋以負(fù)號“-”表示，右旋以正號“+”表示。結(jié)果計算比旋光度以表示，數(shù)值以“（°）·mL·dm-1·g-1”計，按式（A.3）計算?！ˋ.3）式中：α——試樣溶液測得的旋光度，單位為度（°）；l——旋光管長度，單位為分米（dm）；c——試液中甘草酸銨的質(zhì)量濃度，單位為克每毫升（g/mL）；100——溶解甘草酸銨試樣的乙醇-水溶液的體積，單位為毫升（mL）；m4——100mL乙醇-水溶液中含有甘草酸銨的質(zhì)量，單位為克（g）；m5——稱取甘草酸銨試樣的質(zhì)量，單位為克（g）；——試樣干燥減量的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，％。取三次平行測XX果的算術(shù)平均值為測XX果，保留至整數(shù)位?；曳值臏y定儀器和設(shè)備高溫爐。分析步驟稱取3g試樣（精確至0.0001g），置于已恒重的100mL瓷坩堝中，小火炭化至無煙。移至550℃±25℃高溫爐中灼燒，直到試樣完全灰化（約3h），干燥器中冷至室溫，稱重，重復(fù)灼燒直至恒重（前后兩次稱量之差不超過0.5mg）。結(jié)果計算灰分的以質(zhì)量分?jǐn)?shù)w3按公式（A.4）計算：…………（A.4）式中：m6——灼燒后坩堝加灰分的質(zhì)量，單位為克（g）；m7——坩堝的質(zhì)量，單位為克（g）；m8——試樣的質(zhì)量，單位為克（g）。實驗結(jié)果以平行測XX果的算術(shù)平均值為準(zhǔn)（保留兩位小數(shù)）。在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測XX果的絕對差值不大于0.1％。鉛的測定鉛含量按GB5009.