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會(huì)計(jì)學(xué)1致突變?cè)囼?yàn)會(huì)計(jì)學(xué)1致突變?cè)囼?yàn)教學(xué)目的與要求2.怎樣進(jìn)行化學(xué)致突變物檢測(cè)?1.如何進(jìn)行致突變?cè)囼?yàn)的選擇?第1頁(yè)/共17頁(yè)教學(xué)目的與要求2.怎樣進(jìn)行化學(xué)致突變物檢測(cè)?1.如何進(jìn)一、遺傳學(xué)終點(diǎn)和試驗(yàn)配套遺傳學(xué)終點(diǎn)(Geneticendpoint)
試驗(yàn)觀察到的現(xiàn)象所反映的事件。第2頁(yè)/共17頁(yè)一、遺傳學(xué)終點(diǎn)和試驗(yàn)配套遺傳學(xué)終點(diǎn)(Geneticend突變發(fā)生過(guò)程中的事件及遺傳學(xué)終點(diǎn)的關(guān)系化學(xué)物接觸細(xì)胞屏障DNA損傷無(wú)誤修復(fù)未修復(fù)修復(fù)錯(cuò)誤DNA完整性改變DNA交換重排基因突變?nèi)旧w結(jié)構(gòu)異常染色體數(shù)目異常遺傳學(xué)終點(diǎn)正常細(xì)胞第3頁(yè)/共17頁(yè)突變發(fā)生過(guò)程中的事件及遺傳學(xué)終點(diǎn)的關(guān)系化學(xué)物細(xì)胞屏障DNA損1*
表示主要反映的終點(diǎn),2*
表示次要反映的終點(diǎn)常見(jiàn)致突變?cè)囼?yàn)反映的遺傳學(xué)終點(diǎn)
試驗(yàn)DNA完整性改變DNA交換或重排基因突變?nèi)旧w結(jié)構(gòu)異常染色體數(shù)目異常微核
1*2*細(xì)菌回復(fù)突變
1*
姐妹染色單體交換
2*
1*
細(xì)菌DNA修復(fù)1*
第4頁(yè)/共17頁(yè)1*表示主要反映的終點(diǎn),2*表示次要反映的終點(diǎn)常見(jiàn)致突變2.試驗(yàn)配套●細(xì)菌DNA修復(fù)試驗(yàn)(DNA完整性改變)配套原則:遺傳學(xué)終點(diǎn)齊全
配套方案:●微核試驗(yàn)(染色體結(jié)構(gòu)異常和數(shù)目異常)●姐妹染色單體交換試驗(yàn)(DNA交換或重排)●細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)(基因突變)第5頁(yè)/共17頁(yè)2.試驗(yàn)配套●細(xì)菌DNA修復(fù)試驗(yàn)(DNA完整性改變)二、重要的致突變?cè)囼?yàn)(四)細(xì)菌DNA修復(fù)試驗(yàn)(一)微核試驗(yàn)(二)姐妹染色單體交換試驗(yàn)(三)細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)第6頁(yè)/共17頁(yè)二、重要的致突變?cè)囼?yàn)(四)細(xì)菌DNA修復(fù)試驗(yàn)(一)微核試驗(yàn)((一)微核試驗(yàn)(Micronucleitest)★試驗(yàn)原理★試驗(yàn)設(shè)計(jì)
以染色體結(jié)構(gòu)異常和數(shù)目異常為遺傳學(xué)終點(diǎn),考察化學(xué)物對(duì)遺傳物質(zhì)的損傷效應(yīng)。第7頁(yè)/共17頁(yè)(一)微核試驗(yàn)(Micronucleitest)★微核試驗(yàn)原理圖第8頁(yè)/共17頁(yè)微核試驗(yàn)原理圖第8頁(yè)/共17頁(yè)小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核試驗(yàn)★
實(shí)際案例分析
利用小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核試驗(yàn)檢測(cè)大氣污染物SO2的致突變性。
★
試驗(yàn)方法的確立第9頁(yè)/共17頁(yè)小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核試驗(yàn)★試驗(yàn)方法的確立第9頁(yè)/共嗜多染紅細(xì)胞及其微核實(shí)例第10頁(yè)/共17頁(yè)嗜多染紅細(xì)胞及其微核實(shí)例第10頁(yè)/共17頁(yè)斷頸處死取股骨取骨髓細(xì)胞制涂片涂片固定染色鏡檢:嗜多染紅細(xì)胞,計(jì)數(shù)微核率試驗(yàn)流程圖吸入SO2染毒吸入潔凈空氣第11頁(yè)/共17頁(yè)斷頸處死取股骨取骨髓細(xì)胞制涂片涂片固定染色鏡檢:嗜多染紅細(xì)胞試驗(yàn)結(jié)果分析結(jié)論結(jié)果1染毒組微核率高于對(duì)照組:SO2具有致突變性。
結(jié)果2染毒組微核率與對(duì)照組無(wú)差別:用其他試驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證。結(jié)果2結(jié)果1第12頁(yè)/共17頁(yè)試驗(yàn)結(jié)果分析結(jié)論結(jié)果1染毒組微核率高于對(duì)照組:SO2(二)姐妹染色單體交換試驗(yàn)(Sisterchromatidexchangetest)
以DNA交換或重排為檢測(cè)終點(diǎn),考察化學(xué)物對(duì)遺傳物質(zhì)的損傷效應(yīng)。★試驗(yàn)原理★試驗(yàn)設(shè)計(jì)第13頁(yè)/共17頁(yè)(二)姐妹染色單體交換試驗(yàn)(Sisterchromati5-溴脫氧尿嘧啶(Brdu)參入DNA互補(bǔ)鏈造成的姐妹染色單體差示染色原理正常細(xì)胞污染物作用后第14頁(yè)/共17頁(yè)5-溴脫氧尿嘧啶(Brdu)參入DNA互補(bǔ)鏈造成的姐妹染色單小鼠骨髓細(xì)胞姐妹染色單體交換試驗(yàn)試驗(yàn)設(shè)計(jì)與微核試驗(yàn)類似,不同點(diǎn)主要在于:1.小鼠染毒處理后要接觸5-溴脫氧尿嘧啶(Brdu);試驗(yàn)結(jié)果中,比較染毒前后染色單體交換位點(diǎn)發(fā)生的比率來(lái)進(jìn)行致突變性的評(píng)價(jià)。第15頁(yè)/共17頁(yè)小鼠骨髓細(xì)胞姐妹染色單體交換試驗(yàn)試驗(yàn)設(shè)計(jì)與微核試驗(yàn)類似,不同●主要知識(shí)點(diǎn):
1.遺傳學(xué)終點(diǎn)及以此為基礎(chǔ)的試驗(yàn)配套;
2.致突變?cè)囼?yàn)的原理。●知識(shí)點(diǎn)的應(yīng)用:在掌握試驗(yàn)原理的基礎(chǔ)上設(shè)計(jì)試驗(yàn)進(jìn)行環(huán)境化學(xué)物致突變性的檢測(cè)。第16頁(yè)/共17頁(yè)●主要知識(shí)點(diǎn):●知識(shí)點(diǎn)的應(yīng)用:第16頁(yè)/共17頁(yè)會(huì)計(jì)學(xué)18致突變?cè)囼?yàn)會(huì)計(jì)學(xué)1致突變?cè)囼?yàn)教學(xué)目的與要求2.怎樣進(jìn)行化學(xué)致突變物檢測(cè)?1.如何進(jìn)行致突變?cè)囼?yàn)的選擇?第1頁(yè)/共17頁(yè)教學(xué)目的與要求2.怎樣進(jìn)行化學(xué)致突變物檢測(cè)?1.如何進(jìn)一、遺傳學(xué)終點(diǎn)和試驗(yàn)配套遺傳學(xué)終點(diǎn)(Geneticendpoint)
試驗(yàn)觀察到的現(xiàn)象所反映的事件。第2頁(yè)/共17頁(yè)一、遺傳學(xué)終點(diǎn)和試驗(yàn)配套遺傳學(xué)終點(diǎn)(Geneticend突變發(fā)生過(guò)程中的事件及遺傳學(xué)終點(diǎn)的關(guān)系化學(xué)物接觸細(xì)胞屏障DNA損傷無(wú)誤修復(fù)未修復(fù)修復(fù)錯(cuò)誤DNA完整性改變DNA交換重排基因突變?nèi)旧w結(jié)構(gòu)異常染色體數(shù)目異常遺傳學(xué)終點(diǎn)正常細(xì)胞第3頁(yè)/共17頁(yè)突變發(fā)生過(guò)程中的事件及遺傳學(xué)終點(diǎn)的關(guān)系化學(xué)物細(xì)胞屏障DNA損1*
表示主要反映的終點(diǎn),2*
表示次要反映的終點(diǎn)常見(jiàn)致突變?cè)囼?yàn)反映的遺傳學(xué)終點(diǎn)
試驗(yàn)DNA完整性改變DNA交換或重排基因突變?nèi)旧w結(jié)構(gòu)異常染色體數(shù)目異常微核
1*2*細(xì)菌回復(fù)突變
1*
姐妹染色單體交換
2*
1*
細(xì)菌DNA修復(fù)1*
第4頁(yè)/共17頁(yè)1*表示主要反映的終點(diǎn),2*表示次要反映的終點(diǎn)常見(jiàn)致突變2.試驗(yàn)配套●細(xì)菌DNA修復(fù)試驗(yàn)(DNA完整性改變)配套原則:遺傳學(xué)終點(diǎn)齊全
配套方案:●微核試驗(yàn)(染色體結(jié)構(gòu)異常和數(shù)目異常)●姐妹染色單體交換試驗(yàn)(DNA交換或重排)●細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)(基因突變)第5頁(yè)/共17頁(yè)2.試驗(yàn)配套●細(xì)菌DNA修復(fù)試驗(yàn)(DNA完整性改變)二、重要的致突變?cè)囼?yàn)(四)細(xì)菌DNA修復(fù)試驗(yàn)(一)微核試驗(yàn)(二)姐妹染色單體交換試驗(yàn)(三)細(xì)菌回復(fù)突變?cè)囼?yàn)第6頁(yè)/共17頁(yè)二、重要的致突變?cè)囼?yàn)(四)細(xì)菌DNA修復(fù)試驗(yàn)(一)微核試驗(yàn)((一)微核試驗(yàn)(Micronucleitest)★試驗(yàn)原理★試驗(yàn)設(shè)計(jì)
以染色體結(jié)構(gòu)異常和數(shù)目異常為遺傳學(xué)終點(diǎn),考察化學(xué)物對(duì)遺傳物質(zhì)的損傷效應(yīng)。第7頁(yè)/共17頁(yè)(一)微核試驗(yàn)(Micronucleitest)★微核試驗(yàn)原理圖第8頁(yè)/共17頁(yè)微核試驗(yàn)原理圖第8頁(yè)/共17頁(yè)小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核試驗(yàn)★
實(shí)際案例分析
利用小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核試驗(yàn)檢測(cè)大氣污染物SO2的致突變性。
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試驗(yàn)方法的確立第9頁(yè)/共17頁(yè)小鼠骨髓嗜多染紅細(xì)胞微核試驗(yàn)★試驗(yàn)方法的確立第9頁(yè)/共嗜多染紅細(xì)胞及其微核實(shí)例第10頁(yè)/共17頁(yè)嗜多染紅細(xì)胞及其微核實(shí)例第10頁(yè)/共17頁(yè)斷頸處死取股骨取骨髓細(xì)胞制涂片涂片固定染色鏡檢:嗜多染紅細(xì)胞,計(jì)數(shù)微核率試驗(yàn)流程圖吸入SO2染毒吸入潔凈空氣第11頁(yè)/共17頁(yè)斷頸處死取股骨取骨髓細(xì)胞制涂片涂片固定染色鏡檢:嗜多染紅細(xì)胞試驗(yàn)結(jié)果分析結(jié)論結(jié)果1染毒組微核率高于對(duì)照組:SO2具有致突變性。
結(jié)果2染毒組微核率與對(duì)照組無(wú)差別:用其他試驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證。結(jié)果2結(jié)果1第12頁(yè)/共17頁(yè)試驗(yàn)結(jié)果分析結(jié)論結(jié)果1染毒組微核率高于對(duì)照組:SO2(二)姐妹染色單體交換試驗(yàn)(Sisterchromatidexchangetest)
以DNA交換或重排為檢測(cè)終點(diǎn),考察化學(xué)物對(duì)遺傳物質(zhì)的損傷效應(yīng)?!镌囼?yàn)原理★試驗(yàn)設(shè)計(jì)第13頁(yè)/共17頁(yè)(二)姐妹染色單體交換試驗(yàn)(Sisterchromati5-溴脫氧尿嘧啶(Brdu)參入DNA互補(bǔ)鏈造成的姐妹染色單體差示染色原理正常細(xì)胞污染物作用后第14頁(yè)/共17頁(yè)5-溴脫氧尿嘧啶(Brdu)參入DNA互補(bǔ)鏈造成的姐妹染色單小鼠骨髓細(xì)胞姐妹染色單體交換試驗(yàn)試驗(yàn)設(shè)計(jì)與微核試驗(yàn)類似,不同點(diǎn)主要在于:1.小鼠染毒處理后要接觸5-溴脫氧尿嘧啶(Brdu);試驗(yàn)結(jié)果中,比較染毒前后染色單體交換位點(diǎn)發(fā)生的比率來(lái)進(jìn)
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