腫瘤免疫和檢驗(yàn)

關(guān)于腫瘤免疫和檢驗(yàn)第1頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五

腫瘤免疫和檢驗(yàn)第2頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五第一節(jié)概述

實(shí)踐表明，內(nèi)在的遺傳因素、免疫狀態(tài)和外部的誘變因子，是構(gòu)成腫瘤發(fā)生發(fā)展的基礎(chǔ)和條件。其中，機(jī)體的免疫狀態(tài)，尤其是細(xì)胞免疫功能的強(qiáng)弱，已被視為是否發(fā)生腫瘤的重要內(nèi)在因素。第3頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五最普遍的惡性腫瘤死亡原因第4頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五臨床：病史、體癥物理檢查：X光、CT、磁共振、B超

術(shù)前：穿刺、刮片、拉網(wǎng)術(shù)后：組織切片免疫：腫瘤抗原和代謝物測定分子生物：腫瘤相關(guān)基因分析腫瘤診斷輔助病理第5頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五腫瘤抗原（tumorantigen）：是指在腫瘤發(fā)生、發(fā)展過程中新出現(xiàn)的或過度表達(dá)的抗原物質(zhì)。第6頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五腫瘤的發(fā)展及診斷期第7頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五腫瘤的免疫逃避機(jī)制？腫瘤細(xì)胞缺乏有效的抗原性表位，難以觸發(fā)足夠的抗腫瘤免疫效應(yīng)腫瘤細(xì)胞的MHC分子表達(dá)發(fā)生改變，異常表達(dá)的MHC分子，有礙機(jī)體免疫細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的識(shí)別，影響抗原遞呈作用不能正常表達(dá)B7等活化免疫細(xì)胞的共刺激分子和黏附分子患者血清中存在著封閉因子。腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生的某些細(xì)胞因子對(duì)T細(xì)胞的產(chǎn)生有抑制作用腫瘤細(xì)胞表達(dá)FasL，和活化CTL的Fas結(jié)合，介導(dǎo)CTL凋亡第8頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五體液免疫效應(yīng)（熟悉）激活補(bǔ)體的溶細(xì)胞作用介導(dǎo)殺傷細(xì)胞的細(xì)胞毒作用調(diào)理吞噬作用干擾腫瘤細(xì)胞的生物學(xué)行為其他作用第二節(jié)機(jī)體的抗腫瘤免效應(yīng)機(jī)制第9頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五細(xì)胞免疫效應(yīng)T細(xì)胞生物學(xué)效應(yīng)包括T細(xì)胞的直接殺傷和對(duì)免疫系統(tǒng)其它成分的活化。（1）CD4陽性的輔助T細(xì)胞（2）CD8陽性的細(xì)胞毒T細(xì)胞第10頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五（1）CD4陽性的輔助T細(xì)胞與腫瘤免疫關(guān)系密切的是Th1細(xì)胞。Th1的激活：腫瘤抗原+抗原遞呈細(xì)胞（樹突狀細(xì)胞）+MHCII類分子Th1的效應(yīng)：通過釋放細(xì)胞因子（TNF，IFN-γ）發(fā)揮抗腫瘤作用。

第11頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五（2）CD8陽性的細(xì)胞毒T細(xì)胞是腫瘤免疫的主要途徑。通過釋放毒性物質(zhì)或促發(fā)靶細(xì)胞上的死亡受體，而直接溶解靶細(xì)胞，或通過分泌IFN-γ間接殺傷腫瘤細(xì)胞。第12頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五NK細(xì)胞

NK細(xì)胞是宿主固有免疫或一線防御機(jī)制的一部分，非MHC限制性，不需要對(duì)宿主或其免疫功能進(jìn)行調(diào)整適應(yīng)。對(duì)腫瘤細(xì)胞和病毒感染細(xì)胞比對(duì)大多數(shù)正常細(xì)胞更具有毒性作用。其作用機(jī)制類似于CTL，還可分泌大量的細(xì)胞因子以調(diào)節(jié)機(jī)體免疫反應(yīng)。

第13頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五巨噬細(xì)胞

活化的巨噬細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞的結(jié)合可觸發(fā)細(xì)胞毒活性，細(xì)胞毒性介質(zhì)有細(xì)胞溶解蛋白酶、TNF-α及其相關(guān)因子、IFN-α和IFN-γ、IL-1，過氧化氫，NO、精氨酸酶。第14頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五樹突狀細(xì)胞

是一類專職抗原遞呈細(xì)胞，輔佐T、B細(xì)胞參與特異性殺傷腫瘤的過程。制備腫瘤特異性樹突狀細(xì)胞以進(jìn)行腫瘤的生物治療。第15頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五第三節(jié)腫瘤抗原的分類腫瘤特異性抗原腫瘤相關(guān)性抗原第16頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五一、腫瘤特異性抗原（TSA）

為腫瘤細(xì)胞所特有，只表達(dá)于腫瘤細(xì)胞，而不存在于任何處于不同發(fā)育階段的正常細(xì)胞。1.化學(xué)物質(zhì)誘發(fā)

第17頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五2.病毒誘發(fā)

無嚴(yán)格的特異性，通常由同一種病毒誘發(fā)的所有腫瘤，都具有相同的TSA。血清學(xué)試驗(yàn)和腫瘤特異性CTL的檢測，均有助于抗原的檢定。其可誘導(dǎo)機(jī)體的免疫應(yīng)答，故又被稱為腫瘤特異性移植抗原。其成分多系病毒基因的表達(dá)成分。第18頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五3.自發(fā)自發(fā)腫瘤系無明顯誘因的腫瘤，很難檢測到特異性的抗原標(biāo)志物，其原因可能有：早期腫瘤細(xì)胞及近親本子代細(xì)胞一定時(shí)間內(nèi)可以表達(dá)，但后代細(xì)胞因?yàn)槿旧w的隨機(jī)突變而失去表達(dá)?？赡艽嬖?，但單獨(dú)使用抗原抗體方法難以得到確定答案。第19頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五二、腫瘤相關(guān)抗原（TAA）

指非腫瘤細(xì)胞所特有的抗原成分，也少量存在于正常細(xì)胞，但在腫瘤發(fā)生的機(jī)體可異常表達(dá)，可分為胚胎性抗原和分化抗原兩種類型。

胚胎抗原分化抗原第20頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五第四節(jié)常見腫瘤的免疫診斷及應(yīng)用原則第21頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五腫瘤標(biāo)志物及其特點(diǎn)

是顯示腫瘤存在的生物化學(xué)指示物，其特點(diǎn)與腫瘤相伴產(chǎn)生抗原或激素或酶蛋白存在于血液、體液及組織中可定量或定性檢測到可以作為辨認(rèn)和追蹤腫瘤存在和發(fā)展的標(biāo)志第22頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五腫瘤標(biāo)志物研究歷史1845Bence-Jones本周蛋白1930ZondekHCG1959Markert同工酶1963AbelevAFP1965Gold&FreemanCEA1969Hubner&Todaro癌基因1975Kohler&Milstein單克隆抗體1978Herberman提出腫瘤標(biāo)志物概念1979英國第7屆腫瘤發(fā)生生物學(xué)和醫(yī)學(xué)會(huì)議

腫瘤標(biāo)志物被確認(rèn)并應(yīng)用臨床1980KoprowskiCA19-91981BastetalCA1251981ColcheretalCA72-41984KufeetalCA15-3…...第23頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五已建立的腫瘤標(biāo)志物第24頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五常用腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測的臨床應(yīng)用

腫瘤首選標(biāo)志物補(bǔ)充標(biāo)志物肺癌NSE、CYFRA21-1CEA、TPA、SCC、ACTH、降鈣素肝癌AFPAFU、γGT、CEA、ALP乳腺癌CA15-3、CA549CEA、hCG、降鈣素、鐵蛋白胃癌CA72-4CEA、CA19-9、CA50前列腺癌PSAf-PSA、c-PSA、PAP結(jié)腸直腸癌CEACA19-9、CA50胰腺癌CA19-9CA50、CEA、CA125卵巢癌CA125CEA、hCG、CA72-4睪丸腫瘤AFP、hCG宮頸癌SCCCEA、CA125、TPA膀胱癌無TPA、CEA骨髓瘤β2-M、本周蛋白

第25頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五腫瘤標(biāo)志物的分類細(xì)胞腫瘤標(biāo)志物：位于細(xì)胞中的物質(zhì)或抗原，如激素受體、白血病表型。體液腫瘤標(biāo)志物：病理情況下，濃度增加時(shí)可在血液、尿液或其他體液中測得的物質(zhì)，如AFP、CA19-9、CEA、CA15-3等。腫瘤表型標(biāo)志物：酶、胚胎性抗原、異位性蛋白、激素等。出現(xiàn)于癌細(xì)胞轉(zhuǎn)化和臨床進(jìn)展階段。腫瘤基因標(biāo)志物：基因突變、基因表達(dá)異常等，出現(xiàn)于癌前起動(dòng)階段。第26頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五體液腫瘤標(biāo)志物的分類和命名尚未完全統(tǒng)一，一般分為：⑴胚胎抗原類：如AFP，CEA等，⑵糖鏈抗原類：如CA125，CA15-3，CA19-9等。⑶激素類：如患甲狀腺髓樣癌時(shí)降鈣素升高，患絨毛膜細(xì)胞癌時(shí)hCG明顯升高。⑷酶和同工酶類：γGT，PAP等。⑸蛋白質(zhì)類：β2微球蛋白，鐵蛋白，本周蛋白等⑹癌基因產(chǎn)物類:如ras基因蛋白，myc基因蛋白，p53抑癌基因蛋白等。第27頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五特異性好與腫瘤類型(大小/分期)有關(guān)靈敏度高，能腫瘤能早期發(fā)現(xiàn)。具有器官特異性監(jiān)測腫瘤治療效果監(jiān)測腫瘤的復(fù)發(fā)

理想的腫瘤標(biāo)志物預(yù)測腫瘤的預(yù)后第28頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五一、常見的腫瘤抗原及其意義第29頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五1.甲胎蛋白（AFP）AFP是胎兒發(fā)育早期合成的一種糖蛋白(α1球蛋白)，分子量70kD，胎兒出生后不久即逐漸消失。參考值：血清AFP<20μg/L第30頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五①原發(fā)性肝癌，77%的患者AFP>300μg/L，但有部分患者AFP始終不升高；②病毒性肝炎與肝硬化患者，血清中AFP可有不同程度的增高，但一般在300μg/L以下；③生殖系統(tǒng)腫瘤和胚胎性腫瘤，如睪丸癌、畸胎瘤等升高；④妊娠三個(gè)月后，血清AFP含量開始升高，分娩后三周恢復(fù)正常。若孕婦血清中AFP異常升高，應(yīng)考慮有胎兒神經(jīng)管缺損畸形的可能性。第31頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五2.癌胚抗原（CEA）1965年CEA發(fā)現(xiàn)于成人結(jié)腸癌組織中，分子量約為200kD，可溶性糖蛋白，主要存在于成人癌組織以及胎兒的胃腸管組織中，故名癌胚抗原，是一種廣譜腫瘤標(biāo)志物。參考值：血清CEA<5.0μg/L第32頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五①結(jié)腸癌、直腸癌、胰腺癌、肺癌、乳腺癌、胃癌，轉(zhuǎn)移性惡性腫瘤也有不同程度的陽性率；在惡性腫瘤的隨訪，病情監(jiān)測，療效評(píng)價(jià)等方面有重要價(jià)值。②腸道息肉、憩室炎、結(jié)腸炎、肝硬化、肝炎、胰腺炎和肺部疾病也可有不同程度的升高；③吸煙者中約有33%的人CEA＞5μg/L。CEA陽性見于：第33頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五3.前列腺特異性抗原(PSA)

參考值：血清t-PSA<4.0μg/L，

f-PSA<0.8μg/L，

f-PSA/t-PSA>25％PSA是一種由前列腺上皮細(xì)胞分泌的蛋白酶。在血清中PSA以兩種生化形式存在：一部分(5%～40%)是以低分子量(33kD)的游離PSA（f-PSA）形式存在；大部分(60%～90%)是以PSA和α1–抗糜蛋白酶、

α2-巨球蛋白等結(jié)合的形式存在，稱復(fù)合PSA(c-PSA)?？侾SA（t-PSA）,包括血清中f-PSA和c-PSA。第34頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五4.糖類抗原12-5（CA125）是卵巢癌和子宮內(nèi)膜癌的腫瘤標(biāo)志物分子量為20萬的糖蛋白可被單克隆抗體OC125所識(shí)別在卵巢腫瘤上皮和Mullerian副腎管來源的病理和正常組織中表達(dá)，其生物學(xué)功能不明。

第35頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五正常人血清中CA125的臨界值為35U/ml

CA125的半衰期僅4.8天，在血中很快代謝，所測即時(shí)結(jié)果能反映腫瘤近期的變化狀態(tài)第36頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五CA125在卵巢癌，尤其是上皮性卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌可出現(xiàn)升高，還可在肺癌、宮頸癌等腫瘤狀態(tài)時(shí)升高。

CA125在子宮內(nèi)膜異位癥、1%的健康婦女、3%的患良性卵巢疾病婦女及其他非腫瘤患者也可見到升高。第37頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五CA125的臨床應(yīng)用卵巢癌的輔助診斷觀察病情及預(yù)測預(yù)后

--血清CA125升高（或降低）2倍的患者中大于80%的病例為病情進(jìn)展（或消退）

--CA125>35U/ml的病人中有95%在第二次手術(shù)時(shí)仍有腫瘤存在

第38頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五5.糖類抗原19-9（CA199）

CA19-9是胰腺、胃和腸癌的標(biāo)記物。正常人群血清CA19-9陽性的臨界值為

37U/ml第39頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五診斷可以作為胰腺和膽管癌較好的標(biāo)志物用于臨床，胰腺癌的陽性率可達(dá)70%~92%，膽管癌為66.7%對(duì)胃癌、肝癌和結(jié)直腸癌的陽性率分別可達(dá)25%~60%、56%~60%，18%~58%CA199的應(yīng)用第40頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五療效監(jiān)測

治療中及術(shù)后含量下降乃至正常表示治療方案正確復(fù)發(fā)跟蹤升高可作為腫瘤復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的亞臨床診斷或重要的輔助診斷指標(biāo)第41頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五6.神經(jīng)原特異性烯醇化酶（NSE）同功酶類腫瘤標(biāo)志物，正常僅存于神經(jīng)組織和紅細(xì)胞中正常人血清值為<13g/L小細(xì)胞肺癌、神經(jīng)母細(xì)胞瘤和神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤及腦損傷時(shí)升高待測標(biāo)本絕對(duì)禁止溶血，溶血可出現(xiàn)

NSE血清水平升高第42頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五跟蹤監(jiān)測癌腫病情進(jìn)展和療效判斷

--肺癌NSE高于11.8μg/L預(yù)示肺癌患者生存期較短化療24小時(shí)后NSE下降是治療效果良好的標(biāo)志神經(jīng)原特異性烯醇化酶的臨床應(yīng)用第43頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五7.人絨毛膜促性腺激素（HCG）

糖蛋白類激素，由蛋白核心與位于羧基端的以唾液酸為終止的側(cè)鏈組成兩個(gè)亞基組成:

&:與-LH,TSH和FSH相同:與-LH有交叉由合胞體滋養(yǎng)層細(xì)胞產(chǎn)生被證實(shí)是一種原始物質(zhì)

(可作為一種有用的腫瘤標(biāo)志物)第44頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五HCG的臨床應(yīng)用：HCG上升：幾乎所有絨毛膜上皮細(xì)胞癌、70%的非精原細(xì)胞性睪丸癌，胃腸道、肺、乳腺腫瘤時(shí)亦可見HCG水平與腫瘤大小、疾病預(yù)后有關(guān)腦脊液中HCG上升提示腫瘤有腦轉(zhuǎn)移可用于監(jiān)測治療第45頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五二、常見腫瘤標(biāo)志物檢測的免疫方法第46頁，共54頁，2022年，5月20日，22點(diǎn)33分，星期五

待測物質(zhì)濃度與檢測手段

臨床化學(xué)分析10-1210-910-610-310-0pg/mLng/mLmg/mLmg/mLg/L免疫分析TherapeuticDrugsThyroidHormone