【臨床微生物實(shí)驗(yàn)】葡萄球菌屬課件

1第八章病原性球菌檢驗(yàn)

廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微生物檢驗(yàn)教研室學(xué)習(xí)1第八章病原性球菌檢驗(yàn)

廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微生物檢驗(yàn)教研室2?球菌（coccus）：

指?jìng)€(gè)體形狀呈球形或橢圓形的一大類(lèi)細(xì)菌，臨床上通常引起機(jī)體化膿性炎癥，故又稱(chēng)化膿性球菌（pyogeniccoccus）

2?球菌（coccus）：3通過(guò)本節(jié)的學(xué)習(xí)，希望大家能掌握臨床常見(jiàn)化膿性球菌種類(lèi)？金葡菌的主要鑒定要點(diǎn)有哪些？金葡菌的主要致病物質(zhì)和所致的疾病是什么？何為SPA?葡萄球菌的形態(tài)染色和培養(yǎng)特性主要有哪些？CNS致病條件和所致疾病主要包括哪些？什么是MRSA?3通過(guò)本節(jié)的學(xué)習(xí)，希望大家能掌握臨床常見(jiàn)化膿性球菌種類(lèi)？金葡4葡萄球菌屬(Staphylococcus)鏈球菌屬(Streptococcus)腸球菌屬(Enterococcus)奈瑟菌屬(Neisseria)革蘭陽(yáng)性球菌革蘭陰性球菌常見(jiàn)球菌莫拉菌屬(Moraxcella)4葡萄球菌屬鏈球菌屬腸球菌屬奈瑟菌屬革蘭陽(yáng)性球菌革蘭陰性球菌5第一節(jié)葡萄球菌屬

（Staphylococcus）5第一節(jié)葡萄球菌屬

（Staphylococcus）6葡萄球菌屬是一大類(lèi)鏡下多呈葡萄串樣成堆不規(guī)則排列的革蘭染色陽(yáng)性細(xì)菌6葡萄球菌屬是一大類(lèi)鏡下多呈葡萄串樣成堆不規(guī)則排列的革蘭染色7一、分類(lèi)：有39個(gè)種21個(gè)亞種引起人類(lèi)疾病的主要有：金黃色葡萄球菌（S.aureus)

表皮葡萄球菌(S.epidermidis)

頭狀葡萄球菌(S.capitis)

人葡萄球菌(S.hominis)根據(jù)是否產(chǎn)生血漿凝固酶分為：

凝固酶陽(yáng)性葡萄球菌(coagulasepositivestaphylococcus)

凝固酶陰性葡萄球菌(coagulasenegative

staphylococcus,CNS)7一、分類(lèi)：有39個(gè)種21個(gè)亞種8

二、臨床意義金黃色葡萄球菌（S.aureus）致病力強(qiáng)致病物質(zhì)：各種侵襲性酶類(lèi)

血漿凝固酶、耐熱核酸酶、脂酶等多種毒素葡萄球菌溶素、殺白細(xì)胞毒素、腸毒素、毒素休克綜合征毒素、表皮剝脫性毒素8二、臨床意義金黃色葡萄球菌（S.a9金葡萄常引起：各種化膿性感染（局部和全身感染）食物中毒（腸毒素）皮膚燙傷綜合征（表皮剝脫性毒素）毒性休克綜合征（毒素休克綜合征毒素）

9金葡萄常引起：101011多為人體的正常菌群，條件致病，引起醫(yī)院感染的主要病原菌凝固酶陰性葡萄球菌(coagulasenegativestaphylococcus,CNS)常見(jiàn)種類(lèi)：表皮、腐生、人、頭狀、溶血葡萄球菌等30余種11多為人體的正常菌群，條件致病，凝固酶陰性葡萄球菌(coa12CNS多引起醫(yī)院感染：泌尿系感染細(xì)菌性心內(nèi)膜炎敗血癥術(shù)后及植入醫(yī)用器械引起的感染

12CNS多引起醫(yī)院感染：131.形態(tài)與染色

球形，無(wú)鞭毛，無(wú)芽胞

葡萄串狀，革蘭染色陽(yáng)性（G＋）三、生物學(xué)特性131.形態(tài)與染色三、生物學(xué)特性2.培養(yǎng)條件

需氧或兼性厭氧

營(yíng)養(yǎng)要求不高

最適生長(zhǎng)溫度35℃

最適pH7.4

多數(shù)菌株耐鹽性強(qiáng)142.培養(yǎng)條件1415培養(yǎng)特性：易培養(yǎng)：普通平板血平板產(chǎn)色素：金黃色白色檸檬色金葡菌一般產(chǎn)生完全透明β溶血環(huán)

金葡菌菌落表葡菌落（脂溶性）15培養(yǎng)特性：易培養(yǎng)：普通平板金葡菌菌落表葡菌落（脂溶性）16金葡菌透明溶血環(huán)16金葡菌透明溶血環(huán)173.生化反應(yīng)多數(shù)菌分解葡萄糖、麥芽糖和蔗糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。金葡菌分解甘露醇、耐高鹽（10%--15%）觸酶陽(yáng)性（與鏈球菌區(qū)分標(biāo)準(zhǔn)）腐生葡萄球菌對(duì)新生霉素耐藥金葡菌在高鹽甘露醇平板菌落173.生化反應(yīng)多數(shù)菌分解葡萄糖、麥芽糖和蔗糖金葡菌在高鹽甘184.抗原構(gòu)造(1)葡萄球菌A蛋白：

存在于細(xì)胞壁的蛋白質(zhì)，完全抗原。

(2）多糖抗原：有利于細(xì)菌粘附

SPAcapsuleteichoicacidpeptidoglycan184.抗原構(gòu)造(1)葡萄球菌A蛋白：(2）多糖抗原19SPA（staphylococcalproteinA）SPAIgGFcreceptorPHAGOCYTEBACTERIUM

協(xié)同凝集試驗(yàn)（coagglutination）

SPA功能體內(nèi)作用：

SPA具有抗吞噬作用。體外作用：

SPA可與IgG的Fc段結(jié)合而不影響Fab段與相應(yīng)Ag結(jié)合。協(xié)同凝集試驗(yàn)用于多種微生物抗原檢測(cè)S.aureusAb19SPA（staphylococcalproteinA205.抵抗力?耐干燥、耐鹽，對(duì)外界因素的抵抗力強(qiáng)于其他無(wú)芽胞菌?對(duì)堿性染料（龍膽紫）敏感?易產(chǎn)生耐藥性，特別對(duì)青霉素?耐甲氧西林金黃色葡萄球菌

（MRSA）205.抵抗力?耐干燥、耐鹽，對(duì)外界因素的抵抗力強(qiáng)于其他無(wú)芽21小貓?jiān)囼?yàn)標(biāo)本膿汁，血液，剩余食物，嘔吐物等分離培養(yǎng)血漿凝固酶發(fā)酵甘露醇耐熱核酸酶直接涂片鏡檢革蘭陽(yáng)性葡萄球菌生長(zhǎng)現(xiàn)象色素，溶血……生化反應(yīng)毒素檢查藥敏實(shí)驗(yàn)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)：對(duì)食物中毒患者四、微生物學(xué)檢驗(yàn)21小貓?jiān)囼?yàn)標(biāo)本膿汁，血液，剩余食物，嘔吐物等分離培養(yǎng)血漿凝22

高鹽甘露醇

肉湯增菌

直接涂片血平板

革蘭氏染色可疑菌落藥敏試驗(yàn)

鏡檢涂片、耐熱血漿凝固生化鑒定

G+C、觸酶（+）核酸酶酶試驗(yàn)

初步報(bào)告膿汁、分泌物、穿刺液、尿、痰、腦脊液血糞、嘔吐物葡萄球菌檢驗(yàn)程序22

23金黃色葡萄球菌典型菌落表皮葡萄球菌典型菌落23金黃色葡萄球菌典型菌落表皮葡萄球菌典型菌落24鑒定金黃色葡萄球菌的主要試驗(yàn)1、G+球菌、觸酶（+）2、血漿凝固酶試驗(yàn)：結(jié)合型、游離型3、甘露醇發(fā)酵（+）4、耐熱核酸酶試驗(yàn)（+）5、膠乳凝集試驗(yàn)鑒定DNA酶24鑒定金黃色葡萄球菌的主要試驗(yàn)1、G+球菌、觸酶（+）D25金葡萄DNA酶試驗(yàn)（+）25金葡萄DNA酶試驗(yàn)（+）26觸酶陽(yáng)性革蘭陽(yáng)性球菌各屬的主要鑒別點(diǎn)26觸酶陽(yáng)性革蘭陽(yáng)性球菌各屬的主要鑒別點(diǎn)27葡萄球菌屬內(nèi)各菌種鑒定方法

27葡萄球菌屬內(nèi)各菌種鑒定方法28五、葡萄球菌藥敏感試驗(yàn)藥物選擇A組（常規(guī)首選藥物）：苯唑西林、青霉素、阿齊霉素、克林霉素、復(fù)方磺胺甲噁唑、頭孢西丁B組：頭孢洛林、達(dá)托霉素、利奈唑胺、多西環(huán)素、米諾環(huán)素、四環(huán)素、萬(wàn)古霉素、利福平C組：氯霉素、環(huán)丙沙星、莫西沙星、慶大霉素U組：諾美沙星、諾氟沙星、呋喃妥因、磺胺異噁唑、甲氧芐啶28五、葡萄球菌藥敏感試驗(yàn)藥物選擇2022/11/2629何為MRS?？2022/11/2629何為MRS?？2022/11/2630MRS：即對(duì)甲氧西林或苯唑西林或頭孢西丁耐藥的葡萄球菌。包括：MRSA（methicillinresistantStaphylococcusaureus,MRSA)MRCNS(methcillinresistantcoagulase

negativestaphylococci,MRCNS)2022/11/2630MRS：即對(duì)甲氧西林或苯唑西林或頭孢2022/11/2631特點(diǎn)：MRS對(duì)所有β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗菌藥物耐藥，常表現(xiàn)為多重耐藥。2022/11/2631特點(diǎn)：MRS對(duì)所有β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗菌藥32MRS耐藥機(jī)制：

耐藥機(jī)制：細(xì)菌攜帶ＭecA基因菌細(xì)胞膜產(chǎn)生與β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素親合力低的PBP2a細(xì)菌對(duì)所有的β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素耐藥（青霉素、β-內(nèi)酰胺類(lèi)+β-內(nèi)酰胺酶復(fù)合制劑、頭孢菌素、碳青霉烯類(lèi)、單環(huán)β-內(nèi)酰氨類(lèi)抗素等）32MRS耐藥機(jī)制：

33防

注意消毒隔離注意個(gè)人衛(wèi)生

防止醫(yī)源性感染

防止耐藥性產(chǎn)生治

抗菌藥物藥敏試驗(yàn)自身菌苗療法六、防治原則33防注意注意防止防止治抗菌藥物自身菌苗3434353536Thankyou!36Thankyou!37第八章病原性球菌檢驗(yàn)

廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微生物檢驗(yàn)教研室學(xué)習(xí)1第八章病原性球菌檢驗(yàn)

廣州醫(yī)科大學(xué)臨床微生物檢驗(yàn)教研室38?球菌（coccus）：

指?jìng)€(gè)體形狀呈球形或橢圓形的一大類(lèi)細(xì)菌，臨床上通常引起機(jī)體化膿性炎癥，故又稱(chēng)化膿性球菌（pyogeniccoccus）

2?球菌（coccus）：39通過(guò)本節(jié)的學(xué)習(xí)，希望大家能掌握臨床常見(jiàn)化膿性球菌種類(lèi)？金葡菌的主要鑒定要點(diǎn)有哪些？金葡菌的主要致病物質(zhì)和所致的疾病是什么？何為SPA?葡萄球菌的形態(tài)染色和培養(yǎng)特性主要有哪些？CNS致病條件和所致疾病主要包括哪些？什么是MRSA?3通過(guò)本節(jié)的學(xué)習(xí)，希望大家能掌握臨床常見(jiàn)化膿性球菌種類(lèi)？金葡40葡萄球菌屬(Staphylococcus)鏈球菌屬(Streptococcus)腸球菌屬(Enterococcus)奈瑟菌屬(Neisseria)革蘭陽(yáng)性球菌革蘭陰性球菌常見(jiàn)球菌莫拉菌屬(Moraxcella)4葡萄球菌屬鏈球菌屬腸球菌屬奈瑟菌屬革蘭陽(yáng)性球菌革蘭陰性球菌41第一節(jié)葡萄球菌屬

（Staphylococcus）5第一節(jié)葡萄球菌屬

（Staphylococcus）42葡萄球菌屬是一大類(lèi)鏡下多呈葡萄串樣成堆不規(guī)則排列的革蘭染色陽(yáng)性細(xì)菌6葡萄球菌屬是一大類(lèi)鏡下多呈葡萄串樣成堆不規(guī)則排列的革蘭染色43一、分類(lèi)：有39個(gè)種21個(gè)亞種引起人類(lèi)疾病的主要有：金黃色葡萄球菌（S.aureus)

表皮葡萄球菌(S.epidermidis)

頭狀葡萄球菌(S.capitis)

人葡萄球菌(S.hominis)根據(jù)是否產(chǎn)生血漿凝固酶分為：

凝固酶陽(yáng)性葡萄球菌(coagulasepositivestaphylococcus)

凝固酶陰性葡萄球菌(coagulasenegative

staphylococcus,CNS)7一、分類(lèi)：有39個(gè)種21個(gè)亞種44

二、臨床意義金黃色葡萄球菌（S.aureus）致病力強(qiáng)致病物質(zhì)：各種侵襲性酶類(lèi)

血漿凝固酶、耐熱核酸酶、脂酶等多種毒素葡萄球菌溶素、殺白細(xì)胞毒素、腸毒素、毒素休克綜合征毒素、表皮剝脫性毒素8二、臨床意義金黃色葡萄球菌（S.a45金葡萄常引起：各種化膿性感染（局部和全身感染）食物中毒（腸毒素）皮膚燙傷綜合征（表皮剝脫性毒素）毒性休克綜合征（毒素休克綜合征毒素）

9金葡萄常引起：461047多為人體的正常菌群，條件致病，引起醫(yī)院感染的主要病原菌凝固酶陰性葡萄球菌(coagulasenegativestaphylococcus,CNS)常見(jiàn)種類(lèi)：表皮、腐生、人、頭狀、溶血葡萄球菌等30余種11多為人體的正常菌群，條件致病，凝固酶陰性葡萄球菌(coa48CNS多引起醫(yī)院感染：泌尿系感染細(xì)菌性心內(nèi)膜炎敗血癥術(shù)后及植入醫(yī)用器械引起的感染

12CNS多引起醫(yī)院感染：491.形態(tài)與染色

球形，無(wú)鞭毛，無(wú)芽胞

葡萄串狀，革蘭染色陽(yáng)性（G＋）三、生物學(xué)特性131.形態(tài)與染色三、生物學(xué)特性2.培養(yǎng)條件

需氧或兼性厭氧

營(yíng)養(yǎng)要求不高

最適生長(zhǎng)溫度35℃

最適pH7.4

多數(shù)菌株耐鹽性強(qiáng)502.培養(yǎng)條件1451培養(yǎng)特性：易培養(yǎng)：普通平板血平板產(chǎn)色素：金黃色白色檸檬色金葡菌一般產(chǎn)生完全透明β溶血環(huán)

金葡菌菌落表葡菌落（脂溶性）15培養(yǎng)特性：易培養(yǎng)：普通平板金葡菌菌落表葡菌落（脂溶性）52金葡菌透明溶血環(huán)16金葡菌透明溶血環(huán)533.生化反應(yīng)多數(shù)菌分解葡萄糖、麥芽糖和蔗糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。金葡菌分解甘露醇、耐高鹽（10%--15%）觸酶陽(yáng)性（與鏈球菌區(qū)分標(biāo)準(zhǔn)）腐生葡萄球菌對(duì)新生霉素耐藥金葡菌在高鹽甘露醇平板菌落173.生化反應(yīng)多數(shù)菌分解葡萄糖、麥芽糖和蔗糖金葡菌在高鹽甘544.抗原構(gòu)造(1)葡萄球菌A蛋白：

存在于細(xì)胞壁的蛋白質(zhì)，完全抗原。

(2）多糖抗原：有利于細(xì)菌粘附

SPAcapsuleteichoicacidpeptidoglycan184.抗原構(gòu)造(1)葡萄球菌A蛋白：(2）多糖抗原55SPA（staphylococcalproteinA）SPAIgGFcreceptorPHAGOCYTEBACTERIUM

協(xié)同凝集試驗(yàn)（coagglutination）

SPA功能體內(nèi)作用：

SPA具有抗吞噬作用。體外作用：

SPA可與IgG的Fc段結(jié)合而不影響Fab段與相應(yīng)Ag結(jié)合。協(xié)同凝集試驗(yàn)用于多種微生物抗原檢測(cè)S.aureusAb19SPA（staphylococcalproteinA565.抵抗力?耐干燥、耐鹽，對(duì)外界因素的抵抗力強(qiáng)于其他無(wú)芽胞菌?對(duì)堿性染料（龍膽紫）敏感?易產(chǎn)生耐藥性，特別對(duì)青霉素?耐甲氧西林金黃色葡萄球菌

（MRSA）205.抵抗力?耐干燥、耐鹽，對(duì)外界因素的抵抗力強(qiáng)于其他無(wú)芽57小貓?jiān)囼?yàn)標(biāo)本膿汁，血液，剩余食物，嘔吐物等分離培養(yǎng)血漿凝固酶發(fā)酵甘露醇耐熱核酸酶直接涂片鏡檢革蘭陽(yáng)性葡萄球菌生長(zhǎng)現(xiàn)象色素，溶血……生化反應(yīng)毒素檢查藥敏實(shí)驗(yàn)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)：對(duì)食物中毒患者四、微生物學(xué)檢驗(yàn)21小貓?jiān)囼?yàn)標(biāo)本膿汁，血液，剩余食物，嘔吐物等分離培養(yǎng)血漿凝58

高鹽甘露醇

肉湯增菌

直接涂片血平板

革蘭氏染色可疑菌落藥敏試驗(yàn)

鏡檢涂片、耐熱血漿凝固生化鑒定

G+C、觸酶（+）核酸酶酶試驗(yàn)

初步報(bào)告膿汁、分泌物、穿刺液、尿、痰、腦脊液血糞、嘔吐物葡萄球菌檢驗(yàn)程序22

59金黃色葡萄球菌典型菌落表皮葡萄球菌典型菌落23金黃色葡萄球菌典型菌落表皮葡萄球菌典型菌落60鑒定金黃色葡萄球菌的主要試驗(yàn)1、G+球菌、觸酶（+）2、血漿凝固酶試驗(yàn)：結(jié)合型、游離型3、甘露醇發(fā)酵（+）4、耐熱核酸酶試驗(yàn)（+）5、膠乳凝集試驗(yàn)鑒定DNA酶24鑒定金黃色葡萄球菌的主要試驗(yàn)1、G+球菌、觸酶（+）D61金葡萄DNA酶試驗(yàn)（+）25金葡萄DNA酶試驗(yàn)（+）62觸酶陽(yáng)性革蘭陽(yáng)性球菌各屬的主要鑒別點(diǎn)26觸酶陽(yáng)性革蘭陽(yáng)性球菌各屬的主要鑒別點(diǎn)63葡萄球菌屬內(nèi)各菌種鑒定方法

27葡萄球菌屬內(nèi)各菌種鑒定方法64五、葡萄球菌藥敏感試驗(yàn)藥物選擇A組（常規(guī)首選藥物