細胞生物學-大作業(yè)含解答植物組織培養(yǎng)和細胞培養(yǎng)比較

——2007-6-151植物組1植物組織2植物細胞3植物組織培養(yǎng)與細胞培養(yǎng)對植物組織培養(yǎng)的定植物組織培養(yǎng)指在無菌條件下，將離體的植物、組織、胚胎、原生等培養(yǎng)在人工配置的培養(yǎng)基上，給予適當?shù)呐囵B(yǎng)條件，誘發(fā)產(chǎn)生愈傷組織、潛伏芽，或者長成新的完整植株的一種實驗技術(shù)毛狀根培養(yǎng)生產(chǎn)次 位上或附近能產(chǎn)生大量副產(chǎn)物——毛狀根在生產(chǎn)次生代謝產(chǎn)物方面，毛狀根培養(yǎng)系統(tǒng)具有生長快速、不需外源植物激素、合成次生代謝產(chǎn)物能力強而且穩(wěn)定，并能向培養(yǎng)液釋放部分代謝產(chǎn)物等優(yōu)點，通過改變培養(yǎng)條件，甚至可以合成比原來植物高出數(shù)倍的活性物質(zhì)毛狀根的產(chǎn) 至是子植物而誘發(fā)植物產(chǎn)生毛狀根毛狀根是由發(fā)根農(nóng)桿菌含有的Ri質(zhì)粒引起整合到植物宿主細胞組的過程，從而引起植物形態(tài)和毛毛狀根培養(yǎng)的基本流毛狀根誘小規(guī)模培舉例：誘導短 毛狀根生產(chǎn)黃酮類物 (Erigeronbreviscapus) 短 毛狀根誘導的材植物材料利用短葶 無菌苗，取生長健壯的小植株的葉片（去主脈）分割成葉盤（大小約5mm*5m），放在不含任何激素的S培養(yǎng)基上，防止外植體脫水。菌株：發(fā)根農(nóng)桿 短 毛狀根的誘導過侵染將葉盤放入菌液中 后置于28℃ 振蕩共培養(yǎng)將外植體用滅菌吸水紙稍吸干后接種到S0培養(yǎng)基上，于暗處5℃培養(yǎng)1~2d后，用無菌水沖洗幾次后接種到選擇培養(yǎng)MS+300mg/L頭孢噻肟鈉（Cef）上。農(nóng)桿菌侵染時間和共培養(yǎng)時間對轉(zhuǎn)化率繼代培養(yǎng)：將培養(yǎng)物從一培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到新鮮的培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，被稱為繼代培養(yǎng)。繼代培養(yǎng)的目的：獲 的均一的具有分化能力的細胞材誘導出的毛狀根約2cm長時切下轉(zhuǎn)移到新鮮培養(yǎng)基上，每周繼代一次繼代過 逐步降低Cef篩選壓。毛狀根經(jīng)剪取根尖繼代培養(yǎng)7～8次（約2個月）后均已脫菌完全，轉(zhuǎn)到液體培養(yǎng)基上進行擴大培養(yǎng)。毛狀根整個生長周期約45d。在此過 ，可在不同液體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，繪制生長曲線，選擇出適合生長的培養(yǎng)基。（本實驗比較了1/2B5,1/2MS,B5,MS四種培養(yǎng)基，結(jié)論為B5培養(yǎng)基更適合毛狀根生長。）(4)(4)毛狀根轉(zhuǎn)化率的PCR檢抽提總設計引擴增對應證明已整本實驗使用的引物為Rolb和，是發(fā)根農(nóng)桿菌Ri質(zhì)粒上DNA左臂上對轉(zhuǎn)化細胞產(chǎn)生毛狀根過程起重要作用的兩 用UV法測定總黃酮含量，檢測波長為生物反應器大規(guī)模培光照問

接種問混合的

決的

剪切力問營養(yǎng)供給用生物反應器氣升式：結(jié)構(gòu)簡單，易滅菌，細胞受機械損傷低流化填充床式：適合組織培養(yǎng)，損傷低，可直接收生物反應器培養(yǎng)毛狀根霧化生物反應器培對培養(yǎng)物無損傷流化床生物各層的生長速度較一致。植物細胞培植物細胞培植物細胞培養(yǎng)的定植物細胞培養(yǎng)指在離體條件下，將游離的懸浮細胞或其他易分散的組織置于液體培養(yǎng)基中進行振蕩培養(yǎng)，得到分散或游離的懸浮細胞，通過繼代培養(yǎng)使細胞增殖，從而獲得大量細胞群體的一種技術(shù)。細胞培養(yǎng)的

植植物細胞培養(yǎng)的基本步單細胞分產(chǎn)舉例：紅豆杉細胞培養(yǎng)生產(chǎn)紫杉紅豆杉中的紫杉醇是用于 癌、 、肺癌的高效、低毒、廣譜的抗菌藥物，直接從植物中提取紫杉醇的傳統(tǒng)生產(chǎn)方法，不僅產(chǎn)量低而且會對紅豆杉野生資源造成嚴重破壞.用細胞培養(yǎng)生產(chǎn)紫杉醇的優(yōu)勢全過程有快速篩選易于高密培養(yǎng)中的注意事選擇紫杉醇含量高的醇含量，而半乳糖可促進細胞生長2,4-D選擇紫杉醇含量高的醇含量，而半乳糖可促進細胞生長2,4-D抑制次生代謝產(chǎn)物合成，促進誘導子和前體的加入可增加紫杉可使用二步培養(yǎng)技術(shù)，利用